En todas las técnicas para colorear esporos se utilizan procedimientos drásticos.

Describiremos las técnicas de Dorner y de Moeller.

Para la coloración de esporos según Dorner, se sensibiliza y colorea al esporo con
fucsina fenicada en caliente y luego se extiende sobre nigrosina. La nigrosina extraerá el
colorante de todas las estructuras celulares excepto de los esporos y por consiguiente, se
verán los esporos rojos, el resto de la bacteria incolora y el fondo oscuro. La técnica de
Moeller utiliza ácido crómico y fucsina fenicada en caliente para sensibilizar y colorear al
esporo. La decoloración se realiza con ácido-alcohol y se contracolorea con azul de
metileno. Se observan los esporos rojos y el resto de la bacteria azul.

Si bien es cierto que con otras coloraciones los esporos se verán incoloros, en
algunos casos las bacterias pueden
presentar zonas sin colorear que no
corresponden a esporos y debe confirmarse
su presencia mediante una coloración
específica.
Otro aspecto que debe tenerse en
cuenta al observar esporos es su posición:
terminal, subterminal o central, y si deforman
o no a la bacteria ya que serán características
que ayudarán en la clasificación.

Técnica.

a) Método de Dorner.
1- Preparar una suspensión del cultivo a
analizar en 1 ml de agua destilada.
2- Añadir 1 ml de fucsina fenicada (solución acuosa de fucsina 1 % y fenol 5 %) y colocar
la mezcla en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos.
3- Tomar una ansada del material y colocar en un portaobjetos. Añadir una ansada de una
solución acuosa, saturada, fresca y filtrada de nigrosina (10 %). Mezclar bien y extender
en forma de óvalo.
4- Dejar secar y observar con objetivo de inmersión.

Grocott
Para la tinción de hongos (candida, aspergillus…).

Mucicarmin de Mayer
Las mucinas o mucoproteínas son proteínas con H.C. en una
proporción superior al 4 %. La técnica del mucicarmín de Mayer
sirve para identificar globalmente las mucinas, pero no reconoce su
naturaleza bioquímica.