Planta Piloto de Fermentaciones

Departamento de Biotecnología

Ingeniería Enzimática
Inhibición enzimática

Sergio Huerta Ochoa

UAM-Iztapalapa
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Departamento de Biotecnología

Este tipo de inhibición se

produce a niveles elevados
de sustrato en el que el
sustrato se enlaza a un
segundo sitio no-activo de
la enzima
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Inhibición por substrato
(Consideración de equilibrio rápido)
KS k cat
1. Reacciones involucradas E+S ES E+P
+
S
KI
ES2
2. Balance de masa [E ] t = [E ] + [ES ]+[ΕS2]
3. Velocidad limitante v = k cat [ES ]
v = k cat [ES ]
4. Dividir por [E]t [E ] t [E ] + [ES ] + [ES2]

KS =
[E ][S ] , KI =
[ES ][S ]
5. Expresiones de equilibrio [ES ] [ ES2 ]
k cat
[S] [E ]
v = KS
6. Sustituir en términos de [E] [E ] t [E ] + [S ] [E ] + [S ]2 [E ]
KS K S KI

v =
[S ]
+ [S ] + [S ]2
7. Donde Vmax = kcat [E]t
V max KS
KI
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Vmax [S ]
v=
[S ]
1 KM 1
= +
1
+
1
[S ]
v Vmax [S ] Vmax Vmax K I
2
K M + [S ] +
Ki
Inhibición por substrato 0.25

25.0000 0.2

20.0000 0.15
V nmol/l*min

1/v
15.0000
0.1
10.0000
0.05
5.0000
[S]max
0.0000 0
0.00E+00 2.00E+06 4.00E+06 6.00E+06 0.00E+00 5.00E-06 1.00E-05 1.50E-05
[S] nM 1/[S]

1/V
1 KM 1 1
= +
v Vmax [S ] Vmax
KM/Vmax
KI se calcula de: 1/Vmax

[S ]max = K M Ki
-1/KM 1/[S]
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Inhibición enzimática

Los inhibidores de enzimas son importantes por varias

razones

1) Pueden ser usados para obtener información acerca de la forma del sitio
activo de la enzima y los residuos de amino ácidos en el sitio activo
2) Pueden ser usados para obtener información acerca del mecanismo químico
3) Pueden ser usados para obtener información acerca de la regulación o control
de una vía metabólica
4) Pueden ser muy importantes en el diseño de medicamentos
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Sistemas de inhibición simple

• Inhibición competitiva

• inhibición no competitiva

• Inhibición acompetitiva
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Modelo de inhibición competitiva

I P
S
KS
kp
E ES E

KS kp
Ki
E+S ES E+P
+
Consideración de equilibrio rápido
I
v
=
[S ]
Ki
EI V max 
1 +
KS 
[I]
 + [S ]
EI
 K i 
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Inhibición competitiva
1/v0 Incremento de
[I]

1/Vmax KM aumenta
Vmax no cambia

-1/KM
1/[S]
Pend.

-KI [I]
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Modelo de inhibición no competitiva
S
KS
E ES E+P

I
Ki Ki

KS
EI ESI

KS
Consideración de equilibrio rápido
E + S ES E+P
+ v
=
[S ]
+ V max K S + [S ]
I I
Ki KS Ki

1 +
[I ] 
 K i 
EI + S ESI
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Inhibición no competitiva
1/v0
Incremento de
[I]

KM no cambia
Vmax disminuye
1/Vmax

-1/KM Inter. 1/[S]

-KI [I]
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Modelo de inhibición acompetitiva
E + S ES
kcat
E+P
KS

+ I Ki

ESI
KS
kcat
E+S ES E+P
Consideración de equilibrio rápido
Ki v
=
[S ]
+ [S ]
Vmax Km
ESI 
1 +
[I ]  1 + [I ] 
  
 K i   K i 
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Inhibición acompetitiva
Incremento de
[I]
1/v0

KM disminuye
Vmax disminuye

1/Vmax

-1/KM 1/[S]
Inter.

-KI [I]
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Modelo de inhibición mixta
S
KS kcat
E ES E+P

I
Ki K i*

EI ESI Consideración de equilibrio rápido

Vmax
[S ]
KS
kcat  [I ] 
1 + * 
E + S ES E+P  KI 
v=
+ + 
1 +
[I ] 
I I  K I 
KS + [S ]
Ki K i*  [I ] 
1 + * 
EI ESI  KI 
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Inhibición mixta
1/v0
Incremento de
[I]

KM aumenta
Vmax disminuye
1/Vmax

-1/KM Inter. 1/[S]

-KI [I]