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Metodología
Equipos Materiales Reactivos
Microscopio Frasco gotero Azul de metileno
Lanceta
Porta y cubreobjetos
Papel milimetrado
Bajalenguas
Cebolla
Muestra de sangre
Alcohol
Resultados
Todas las muestras fueron centradas y observadas en un principio con el objetivo de 4X
con el cual se enfocó en el punto central de la muestra y se tomaron las coordenadas de
cada una de ellas, al cambiarse el aumento del objetivo las coordenadas no fueron
alteradas, por lo tanto, son las mismas en los diferentes aumentos. Luego de tomar las
fotos de las distintas muestras en los diferentes objetivos , se hizo uso de la herramienta
informática tpsDig2 para tomar las medidas de las células.
Figura 1. Muestras observadas en el microscopio botico compuesto con el objetivo de 4X
Medidas (µm)
Aumentos Catafila de cebolla Mucosa bucal Sangre
Medidas
Catafila de cebolla Mucosa bucal Sangre
Largo Ancho Largo Ancho Largo Ancho
(271,01 ± 34,77)µm (65,37 ± 4,15)µm (22,16 ± 3,27)µm (20,59 ± 3,74)µm (8,53 ± 0,73)µm (8,95 ± 0,87)µm
Figura8. Promedio de longitud y ancho de cada uno de los tipos de célula estudiadas
Cálculos:
Catafila de cebolla
Área: (271,01 m)(65,37 m) 17.715,92 m2
65,37 m
2
2
Mucosa bucal
20,59 m
2
332,96 m
2
Área:
2
4 20,59 m
3
80.194,55 m
3
Volumen:
3 2
Células sanguíneas
8,95 m
2
20, 02 m
2
Área:
2
4 8,95 m
3
375,37 m
3
Volumen:
3 2
Análisis y discusión
El uso del microscopio es fundamental en la biología celular, permite observar estructuras
que el ojo humano no puede distinguir a simple vista, por ejemplo, las células son
estructuras que en su mayoría son imperceptibles ante el ojo humano, para observarlas se
requiere del uso del microscopio, en este caso el microscopio óptico compuesto. Una de
las principales diferencias que se pueden observar cuando se alterna entre los diferentes
objetivos, es el hecho de que las células se vean de mayor o menor tamaño, pero este
aumento en el tamaño de las células es solo aparente, esto se puede evidenciar en la Figura
6. En donde se observa varias medidas tomadas en distintos aumentos del microscopio, en
donde la variación entre las medidas es considerable pero no tan lejanas. Estas medidas
pueden tomarse de una forma más directa pero menos exacta sabiendo el diámetro del
campo visual de cada uno de los objetivos. Estas medidas también pueden ser utilizadas
para determinar de manera indirecta el área y volumen de una célula asociándola a una
figura geométrica similar a su morfología, por ejemplo, se podrían asociar a las células de
la catafila de cebolla con un cilindro o rectángulo, y a las células de la mucosa bucal y
sanguíneas con una esfera o circulo, de esta manera se procedió en los cálculos expuestos
en los resultados. En base a estos cálculos se observa que las células de cebolla son mucho
más grandes que las células del epitelio bucal y las de la sangre respectivamente, siendo
las células de cebolla las más grandes y las células sanguíneas las más pequeñas, esto se
puede deber a la presencia de una vacuola en las células vegetales, que ayuda a mantener
la turgencia entre el citosol y la pared celular
Bibliografía:
http://www.tiposdemicroscopio.com/
Anexos:
1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio simple y uno compuesto?
2. ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio en la biología celular?
3. ¿Porque es necesario utilizar aceite de inmersión al utilizar el objetivo del mismo nombre?
4. ¿Qué significa resolución, poder de resolución y amplificación, así mismo de que factores
depende cada uno de ellos?
5. Realiza una tabla comparativa de todos los microscopios incluyendo: fuente de
iluminación, condensador, longitud de onda, tipo de tinción, resolución, amplificación, tipo
de lentes, etc.
Solución:
1. Un microscopio compuesto se denomina compuesto porque compone la luz haciendo
que atraviese dos o más lentes para que aumenten la imagen. Encontramos una lente cerca
del objeto a observar conocida como lente objetivo, que amplía naturalmente la imagen del
objeto haciendo que la luz utilizada para observarlo atraviese un cristal curvo. En otra lente
llamada lente ocular es donde ocurre el verdadero aumento con un microscopio compuesto.
La lente ocular aumentará la imagen ya ampliada por la lente objetivo, haciendo que se vea
aún más grande. En cambio, se describe al microscopio simple como todo objeto que
aumenta el tamaño de una imagen mediante una sola lente. El microscopio más simple que
se haya podido inventar fue la lupa.
2. La importancia del microscopio reside en que nos permite ver a las células y a ciertas
estructuras intracelulares. También podemos hacer cortes histológicos de tejidos animales
o vegetales para ver su disposición en detalle, caracterizar la epidermis de un animal o de
una hoja, y visualizar un sinnúmero de estructuras más. Se podría decir que el microscopio
es uno de los elementos más importantes en los laboratorios dedicados a la investigación
biológica, pues el hecho de haber superado la limitante de la resolución del ojo humano le
ha abierto al hombre de ciencia un mundo hasta entonces ignorado, o cuanto mucho,
apenas imaginado.
3. En microscopía óptica, la inmersión (generalmente en aceite, aunque también se puede
efectuar en agua o con medios sólidos) es una técnica utilizada para aumentar el poder de
resolución de un microscopio. Esto se consigue mediante la inmersión en un aceite
transparente de alto índice refractivo tanto de la lente del objetivo como del espécimen a
observar, aumentando así la apertura numérica de la lente del objetivo. A diferencia del
aire, el aceite de inmersión tiene un índice de refracción similar al del vidrio del cubre
objetos. Al colocar aceite de inmersión entre el lente frontal del objetivo (diseñado para
usarse con aceite de inmersión) y el cubre objetos, el rango angular de los rayos difractados
capturados por los lentes se incrementan y, en efecto, incrementa la A. N. del objetivo.
4.
Resolucion Poder de resolucion Aumento
El poder de resolución es la
capacidad de todo sistema
óptico de percibir detalles. A El grado en el cual el espécimen es
menor límite de resolución, agrandado en el microscopio. Por
Es la capacidad que tiene un
mayor poder de resolución. ejemplo, un objetivo 40X y un ocular
sistema óptico de aislar dos
Por eso, el microscopio al 10x (sin módulos intermedios)
puntos que se encuentran
tener menor límite de brindan un aumento total de 400X. El
muy próximos entre sí, de
resolución tiene mayor poder aumento final del espécimen bajo el
manera que se puedan ver
de resolución que el ojo microscopio está determinado tanto
individualizados uno del otro.
humano, es decir, percibe por el poder de aumento del objetivo
La riqueza de detalles que
más detalles. El poder de como el aumento del ocular (y
5.
microscopio optico compuesto
Fuente de iluminación. lámpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en versiones más modernas con leds.
está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano
condensador.
de la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del objetivo.
longitud de onda. es aproximadamente la mitad de la longitud de onda de la luz azul.
tipo de tinción.
resolucion. 100nm
amplificación.
tipo de lentes
Los condensadores que se emplean en microscopía de campo oscuro son de dos tipos: del tipo
condensador.
paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo cardioide, con dos superficies espejadas.
longitud de onda. la mitad de la longitud de onda de la luz azul
tipo de tinción.
microscopio confocal
utiliza iluminacion puntuaal y un pinhole en un plano optico
conjugado en frente del detector para eliminar la informacion que
fuente de iluminacion
esta fuera del plano focal. Solo la luz que esta dentro de este plano
puede ser detectada.
esta fprmado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concretar
condensador los rayos luminosos sobre el plano de la preparacion, formando un
cono de luz con el mismo angulo que el del campo del objetivo.
longitud de onda
tipo de tincion
resolucion es posible alcanzar resoluciones de 0,14um en horizontal y 0,23um en vertical
amplificacion
tipo de lentes
microscopio confocal laser de barrido
la iluminación se produce por lámparas de mercurio. No usa filtros y se observa en placas fotográficas. La
Fuente de iluminación.
variedad de fluorescencia, si usa filtros, y la observación es directa.
está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la
condensador.
preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del objetivo.
longitud de onda. utilza un laser y no posee una longitud de onda determinado.
tipo de tinción.
microscopio electronico
Fuente de usa electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos
iluminación. diminutos.
condensador.
longitud de
utiliza la longitud de onda de los electrones
onda.
tipo de tinción.
resolucion. entre 3 y 20 nm
amplificación. pueden ampliar los objetos 200.000 veces o más.
tipo de lentes lentes electromagnéticas.
Microscopio de sonda de barrido
Fuente de
utiliza una sonda que recorre la superficie del objeto a estudiar.
iluminación.
condensador.
longitud de
utiliza la longitud de onda de los electrones.
onda.
tipo de tinción.
condensador.
longitud de
utiliza la longitud de onda de los electrones.
onda.
tipo de tinción.