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PRÁCTICA DE LABORATORIO NO.

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IDENTIFICACIÓN Y PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS
I Introducción

Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas lineales de


aminoácidos. Desempeñan un papel fundamental en los seres vivos y las
biomoléculas más versátiles y diversas.

Las funciones de las proteínas son las siguientes:


• Estructural
• Regulación ( a nivel hormonal)
• Transporte ( a nivel de membranas celulares)
• Defensiva ( anticuerpos)
• Enzimática
• Contráctil

La genética determina en gran medida que proteínas tiene una célula, un tejido
o un organismo. Encontramos proteínas en muchos nutrientes, por ejemplo en la
leche, que además de contener agua, iones, calcio y minerales incluye la
proteína caseína, la cual se identificará en este laboratorio.

En cuanto a las propiedades de las proteínas resalta su capacidad electrolítica,


amortiguadora y especificidad, entre otras.
II Objetivos:
Que el estudiante al finalizar esta práctica sea capaz de:

• Identificar proteínas en los alimentos de su diario vivir en las distintas formas.

III Materiales y reactivos


• Papel filtro
• Leche (no descremada) • Embudos
• Gelatina sin sabor** • Tubos de ensayo
• Incaparina • Gradilla
• Gelatinas de sabores** • Pinzas para tubos
•Quesos diversos (blancos) • Termómetro
(fresco, de • Beakers de 100, 150, 250 y 500 ml
capas, descremado, • Agitadores de vidrio
queso crema)** • Peachímetro
•Pañuelo blanco** • Probetas de 5, 10 y 25 ml
• Reactivo de Biuret
• Solución de albúmina**
• Ácido nítrico
• Ácido acético
• Hidróxido de sodio
• Agua
• Estufa
IV Procedimiento

PRIMERA PARTE:
Identificación de proteínas

No. 1 Preparación de solución patrón de albúmina de huevo


1. Separe la clara del huevo
2. Tome sólo la clara y mida la cantidad en mililitros
3. Tome al menos 10 ml (puede necesitar más de un huevo)
4. Disuelva la clara en 50 ml de agua, con la ayuda de un agitador
mezcle bien
5. En un tubo de ensayo coloque una muestra de 3-5 ml de la solución
6. Agregue 5-7 gotas del reactivo de Biuret (especifico para
detección de proteínas)
7. Observe una coloración violeta pálido, lo cual evidencia la presencia
de proteínas.

No. 2 Identificación de proteínas en muestras comerciales

1. En varios tubos de ensayo, coloque muestras de leche, gelatina sin


sabor, suero de queso, incaparina y gelatina con sabor, proceda a la
identificación con el reactivo de Biuret, como se indica anteriormente
con la albúmina.
2. La gelatina comercial debe de prepararse y diluirse antes, según
indicaciones de la caja.
3. Anote los cambios de cada tubo. Con la muestra de leche, suero
de queso e incaparina, añada igual cantidad de agua, a veces el
color de la misma enmascara la coloración positiva con el reactivo de
Biuret.

SEGUNDA PARTE:
Aislamiento de la caseína de la leche y precipitación de proteínas

1. En un beaker de 150 ml vierta 100 ml de leche líquida, (no use


descremada)
2. Caliente lentamente hasta llegar a 40 ° C
3. Tome el pH de esta muestra, pues ese dato será útil para acidificar
la leche
4. Incorpore ácido acético al 10% gota a gota con agitación
constante hasta alcanzar un pH=5
5. Deje enfriar la suspensión a temperatura ambiente y permita que
repose durante 5 minutos
6. Filtre la suspensión a través del pañuelo. El precipitado conforma la
caseína (proteína de la leche) disuelva en poca agua destilada y
verifique su presencia a través de la prueba con Biuret

TERCERA PARTE:
Desnaturalización de proteínas

1. Tome diversas muestras gelatinas preparadas, quesos, leche, y la


incaparina observe despacio su apariencia
2. Someta las muestras a diversos factores externos:
2.1 Agitación mecánica enérgica
2.2 Calor y temperatura alta
2.3 Añada ácido o base fuerte
3. Observe cambios y anote, si su apariencia no es la original, la
proteína sufrió el proceso llamado: Desnaturalización

Cuestionario

1. Proteínas, características, clasificación, propiedades químicas y


físicas.
2. Desnaturalización y factores que ayudan a su desnaturalización.

3. Investigue la fórmula del reactivo de Biuret


4. Investigue la reacción: Biuret-proteína
5. Describa las propiedades de la caseína y mencionen todas las
fuentes en donde se encuentra
6. Elabore una dieta proteínica, puede seleccionar cualquier tiempo
de comida. Para ello debe consultar valores energéticos de cada
nutriente en la tabla de alimentos y calorías de INCAP También puede
utilizar otras fuentes o libros que contengan información sobre el tema.
REFERENCIAS
• Audersick, T. ; Audersick G. (2012) Biología. La Vida en la Tierra con
Fisiología, 9a edición, Pearson Educación de México.
• Universidad de San Carlos de Guatemala, Facultad de Ciencias
Químicas y Farmacia. Escuela de Química Biológica, Departamento
de Bioquímica. Manual de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica II.
• Wolfe, D. Química Orgánica y Biológica.- Prácticas de Laboratorio

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