DETERMINACION DE ALCOHOL METILICO EN MUESTRAS BIOLOGICAS

DETERMINACION DE ALCOHOL METILICO EN MUESTRAS BIOLOGICAS.

SOLANO DEINIR

OLIVO MILEDIS

PULIDO NATALY

VILLALBA KAREN

PROFESOR: OSCAR CABARCAS M. SC

UNIVERSIDAD DEL ATLANTICO

FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA
TOXICOLOGIA

BARRAQUILLA

MARZO DE 2018

Toxicología Universidad del Atlántico [2018] | 1

 DETERMINACION DE ALCOHOL METILICO EN MUESTRAS BIOLOGICAS
1. INTRODUCCIÓN
El metanol es un líquido incoloro y volátil a
temperatura ambiente. Por sí mismo es
inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos. Su
uso es muy habitual en la industria, laboratorios y
en el propio hogar con alcohol de quemar o
formando parte de productos comerciales.
Además, existe un uso fraudulento de esta
sustancia como sustituto del etanol en bebidas
alcohólicas fabricadas clandestinamente.
El metanol es biotransformado en el hígado1-
2
(Ver Figura 1), oxidándose merced de la alcohol
deshidrogenasa dando formaldehído, el cual es
rápidamente convertido, por la aldehído
deshidrogenasa, en ácido fórmico. Éste último,
mediante una oxidación dependiente del folato, se
convertirá en anhídrido carbónico y agua. La
administración de folatos durante el tratamiento
ejerce una acción protectora, estimulando la
transformación del ácido fórmico en C023.
Aunque la bibliografía describe que al igual que
el etilenglicol no es tóxico por sí mismo4, no es
Toxicología
infrecuente que los pacientes intoxicados
presenten cierto grado de embriaguez antes de que
haya ninguna otra manifestación clínica atribuible
a la formación de metabolitos tóxicos, y sin haber
existido consumo simultáneo de alcohol. Es pues
razonable pensar que el metanol produce
toxicidad en el sistema nervioso central (SNC)
por sí mismo, al igual que ocurre con el etanol.5
El dato característico de la intoxicación por
metanol es la acidosis metabólica con anión gap
>16 mmol/L, por lo que debe sospecharse en
todas las situaciones en que, de forma
inexplicable, exista acidosis metabólica con
aumento del anión gap. La propia acidosis puede
ser causa de, a través del ácido oxálico, depresión
miocárdica y necrosis tubular aguda. El alcohol
aldehído, y los ácidos glicólico y glioxílico
contribuyen tanto a la depresión del Sistema
Nervioso Central como a la toxicidad renal, con
hemorragias focales, necrosis cortical, dilatación
de túbulos proximales y formación de cristales de
oxalato cálcico6-8. El inicio de la sintomatología
es extremadamente variable y depende de la dosis
de metanol, de la velocidad de incorporación y de
la vía de entrada, pudiendo empezar entre los 30
minutos y las 72 horas, aunque lo habitual suele
ser que aparezcan en las primeras 12-24 horas que
es el tiempo necesario para la biotransformación
del metanol.9 Los síntomas y signos de la
intoxicación pueden tener diferentes
repercusiones y agruparse en:
a) Sistema Nervioso Central: en la intoxicación
leve o moderada se produce cefalea, mareo,
letargia, ataxia o un estado similar a la
intoxicación etílica. En casos graves pueden
aparecer convulsiones, coma y edema cerebral.
La neurotoxicidad selectiva es el resultado de la
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hipoxia que produce el ácido fórmico tras la 3. MATERIALES Y REACTIVOS

inhibición de la citocromo oxidasa.10,11.  Solución de permanganato de potasio
0.2N
b) Afectación ocular: se presenta pérdida súbita
 Sulfito o bisulfito de sodio anhidro
de la agudeza visual y edema de papila con
 Ácido cromotrópico
ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico.
 Ácido sulfúrico concentrado
Pueden aparecer nistagmus y alteraciones de los
reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse  Orina (muestra)
pérdida de visión, midriasis con pérdida del  Etanol (absoluto)
reflejo fotomotor y edema de papila.10-12.  Metanol (absoluto)
 Agua destilada
c) Gastrointestinales: el metanol es ligeramente  Acido pícrico
irritante, lo que condiciona náuseas, vómitos y  Fenilhidracina clorhidrato al 1%.
dolor abdominal; si el cuadro avanza se pueden  Ferricianuro de potasio (1-10)
desarrollar datos clínicos y enzimáticos de
 Resorcinol (1-200)
pancreatitis aguda.13
 Cloruro férrico al 10%

2. RESUMEN
Esta práctica consistió en la determinación de
Alcohol Metílico mediante una muestra biológica
de orina. Durante el proceso de llevo a cabo una
destilación simple para la recolección de 15mL
del destilado, a la muestra se le agrego Solución
saturada de ácido Pícrico (C6H3N3O7), 20 ml de
agua y finalmente se le añadieron 2 ml de agua al
destilado para evitar pérdidas por volatilización
PALABRAS CLAVE: alcohol metílico, solución,
destilación
ABSTRACT
This practice consisted in the determination of
Methyl Alcohol by means of a biological sample
of urine. During the process of carrying out a
simple distillation for the collection of 15mL of
the distillate, to the sample was added saturated
solution of Pícrico acid (C6H3N3O7), 20 mL of
water and finally 2 mL of water was added to the
distillate to avoid losses due to volatilization
KEY WORDS: methyl alcohol, solution,
distillation
4. METODOLOGÍA
Como se mencionó anteriormente la
determinación de alcohol metílico se realizó
mediante una destilación a la muestra de orina.
Una vez colada la muestra en el balón de
destilación se le añadieron 20 mL de agua, 20 mL
de ácido pícrico y perlas de vidrio.
OXIDACION DEL DESTILADO
Al destilado se le añadió 1mL de Ácido Sulfúrico
(H2SO4) al 25% y 4mL de Permanganato de
Potasio (KMNO4) 0.2N, se agito y se dejó reposar
por 10 minutos, finamente de filtro y se decoloro
con una solución de bisulfito de sodio (NaHSO₃).
CH3OH+MnO4+2H ⇾ HCOH+MnO2+2H2O
Posteriormente se realizaron tres pruebas que
permiten confirmar la presencia de aldehído.
REACCION CON ACIDO CROMOTROPICO

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A un tubo de ensayo con 3 mL del filtrado se le La estructura propuesta de la reacción 2 (ver

añadió un poco de ácido cromo trópico, se agito y figura 3) involucra dos pasos con el ácido
luego se le agregaron lentamente por las paredes sulfúrico como agente oxidante, Aquí se unen dos
del tuvo, adicionalmente 4 mL de ácido sulfúrico moléculas de la sal sódica del Ácido 4,5 –
concentrado. dihidroxinaftaleno- 2,7- disulfónico con una
molécula de Formaldehido, formando el
CONFIRMACIÓN complejo15 responsable de la coloración.
En un tubo de ensayo con 2mL de filtrado se le
añadió unas gotas de solución de resorcinol y
cuidadosamente se procedió a agregar por las
paredes del tubo 4mL de H2SO4 concentrado
dejando reposar por unos tres minutos, dando
como resultado una coloración rosa en la interfase
el cual indica la presencia de formaldehido

REACCION DE SCHRYVER

Se depositó en un tubo de ensayo 2mL del filtrado

al cual se le añadió 2mL de fenilhidracina
clorhidrato al 1%, posteriormente se adiciono 1ml
de una solución recién prepara de ferricianuro de
potasio más unas gotas de HCl. Dando como
resultado la presencia de formaldehido con una
coloración rojo cereza

5. RESULTADOS

REACCIÓN CON ÁCIDO CROMOTROPICO

Se han propuesto dos estructuras para la Figura 4. reacción con ácido cromotropico. En esta prueba
reacción entre el formaldehido y el ácido los resultados obtenidos fueron positivos ya que resultó lo
cromotropico. esperado o sea el anillo de color púrpura lo que indica
La estructura propuesta de la reacción 1 (ver presencia de formaldehido en la muestra.
figura 2) muestra la unión de dos moléculas de
ácido cromotropico con una molécula de CONFIRMACIÓN
formaldehido dando como resultado
dibenzoxanthylium monocatiónico(sin
coloracion).14

Figura 5. Prueba de confirmación

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En esta Prueba de igual forma al anterior procedimiento

obtuvimos un resultado positivo a la presencia de
formaldehido en la muestra ya su pudimos observar la
presencia de un anillo color Rosa.

REACCION DE SCHRYVER

El grupo carbonilo del aldehído reacciona con la

fenilhidracina clorhidrato en medio acido,
formando fenilhidrazona (ver figura 6), con
mecanismo de acción similar a la de formación de
Figura 7. Prueba de SCHRYVER
iminas.
En esta prueba obtuvimos un resultado negativo ya que no
apareció en nuestra muestra el anillo de color rojo cereza lo
que nos indica la presencia de formaldehido.

6. DISCUSION

Los efectos irritantes del formaldehído son quizá

los más conocidos. Una exposición prolongada a
formaldehído puede derivar en efectos alérgicos,
ya sea de la piel (eccema, urticaria) o de las vías
respiratorias (rinitis, asma). Además de estos
efectos, en los últimos años se han realizado
numerosos estudios acerca de los posibles efectos
cancerígenos del formaldehído.

Existen numerosos métodos para la

determinación de formaldehido debido a su alta
reactividad. Estos métodos son 4 grupos:
Volumétricos, gravimétricos, colorimétricos e
instrumentales. Los métodos que se utilizaron en
esta práctica fueron colorimétricos, los cuales son
más adecuados para concentraciones bajas de
formaldehido, estos tipos de determinación
colorean la muestra cuando existen reacciones
positivas para aldehído. El primer método fue la
reacción con ácido cromotropico en el cual el
formaldehido reacciona con el ácido
cromotropico en medio sulfúrico dando un color
violeta, el segundo método fue el de
confirmación, en el que el destilado luego de la
adición del resorcinol y el ácido sulfúrico

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concentrado evidentemente se tornó a un color 7. Jacobsen D, McMartin KE. Methanol and

amarillo con la aparición de un anillo violeta y por ethylene-glycol poisonings: Mechanism of
último el método de reacción con el reactivo toxicity, clinical course, diagnosis and treatment.
deschryver. En esta práctica las dos primeras Med Toxicol Adverse Drug Exp 1986; 1: 309-34.
8. Kraut JA, Madias NE: Serum anion gap: Its uses
pruebas realizadas arrojaron resultados positivos
and limitations in clinical medicine. Clin J Am
para formaldehido, sin embargo, la prueba de
Soc Nephrol 2007; 2: 162-74.
schryver no arrojo resultado positivo. 9. Hovda KE, Mundal H, Urdal P, McMartin K,
7. CONCLUSIONES Jacobsen D. Slow formate elimination in severe
methanol poisoning: A fatal case report. Clin
 Las pruebas colorimetricas realizadas en Toxicol 42007; 5: 516-21.
la practica sonnde utilidad para el 10. Hantson P, Duprez P, Mahieu P. Neurotoxicity to
reconocimiento de sustancias organicas
como el metanol, en caso de sospecha de the basal ganglia shown by magnetic resonance
intoxicacion con esta sutancia. imaging (MRI) following poisoning with
 Se puede concluir que la rpincipal causa methanol and other substances. Clin Toxicol
de intoxicacion por metanol se debe a la 1997; 35: 151-61.
ingesta de bebidas adulteradas.
11. Fontenot AP, Pelak VS. Development of
REFERENCIAS neurologic symptoms in a 26 year old woman
following recovery from methanol intoxication.
1. Marruecos-Sant L. Tratamiento de las
Chest 2002; 122: 1436-9.
intoxicaciones por metanol y etilenglicol. Med
12. Hsu HH, Chen CY, Chen FH, Lee CC, Chou TY,
Intensiva 2002; 26: 248-250.
Zimmerman RA. Optic atrophy and cerebral
2. Principios de Urgencias, Emergencias y Cuidados
infarcts caused by methanol intoxication: MRI.
Críticos. Sociedad Andaluza de Medicina
Neuroradiology 1997; 39: 192-4.
Intensiva y Unidades Coronarias (SAMIUC). Ed.
13. Burkhart K. Methanol and ethylene glycol
Alhulia, 1999.
toxicity. Clin Toxicol 1997; 35: 149-50.
3. Lauwerys R. Intoxicación por alcoholes En:
14. Fagnani, E.; Melios, C.B.; Pezza, L.; Pezza, H.R..
Toxicología Industrial y Enfermedades
Chormotropic acid- 54 formaldehyde reaction in
Profesionales. Editorial Masson. Barcelona 1994.
strongly acidic media. The role of dissolved
p. 301-306.
oxygen and replacement of concentrated sulphuric
4. Roldán J., Frauca C., Dueñas A.. Intoxicación por
acid. Instituto de Química – UNESP; Araraquara,
alcoholes. Anales Sis San Navarra 2003;26( Suppl
SP, Brazil; 2003.
1 ):129-139
15. Gigante, A.C.; Gotardo, M.A.; Tognolli, J.O.;
5. Becker C. Antidotes for methanol and etylene
Pezza, L.; Pezza, H.R.. Spectrophotometric
glycol poisoning-A real challenge! J Toxicol Clin
determination of formaldehyde with chromotropic
Toxicol 1997;35:147-8.
acid in phosphoric acid medium assisted by
6. Hovda KE, Hunderi OH, Rudberg N, Froyshov S,
microwave oven. Instituto de Química – UNESP;
Jacobsen D. Anion and osmolal gaps in the
Araraquara, SP, Brazil; 2003
diagnosis of methanol poisoning: clinical study in
28 patients. Intensive Care Med 2004 30: 1842-
1846.

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