Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use.

Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.

ACTUALIZACIÓN

Linfocitos T
D. Díaz Martína, A. Prieto Martína, M. Úbeda Canteraa y M. Álvarez-Mon Sotob
a
Laboratorio de Enfermedades del Sistema Inmune y Oncología. Unidad I+D Asociada al Consejo Superior
de Investigaciones Científicas. Departamento de Medicina. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares. Madrid. España.
b
Servicio de Enfermedades del Sistema Inmune y Oncología. Hospital Universitario Príncipe de Asturias.
Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares. Madrid. España.

Palabras Clave: Resumen

- Linfocitos T Los linfocitos T son un brazo esencial en la respuesta inmune adaptativa o antígeno-específica. En
- Receptor de linfocitos T (TRC) este artículo explicaremos el concepto, función y características principales de los linfocitos T,
- Correceptores y y examinaremos la base genética y molecular de su receptor de superficie para el antígeno, el
coestimuladores TCR. Analizaremos en detalle el proceso de reordenamiento genético que permite la generación de
- Restricción del la gran diversidad de receptores para el antígeno observada en los linfocitos T, así como su estruc-
reconocimiento antigénico tura y generación en órganos linfoides primarios. Finalmente, dedicaremos atención a la señaliza-
- Linfocitos T a, b y g, d ción y transducción a través del complejo TCR necesaria para la activación y diferenciación de las
- Linfocito T novato, memoria y células de esta subpoblación.
efector

Keywords: Abstract
- T lymphocytes
T lymphocytes
- T cell receptor (TCR)
- Coreceptors and co- T lymphocytes are an essential arm in the adaptive or antigen-specific immune system. In this
stimulators chapter, we will explain the concept, function and principal characteristics of the T lymphocytes.
- Restricted antigen We will also study the genetic and molecular base of their surface antigen receptor, the T-cell
recognition receptor (TCR). We will study in-depth the genetic reorganization that allows the generation of the
- a, b y g, d T lymphocytes large diversity of T cell antigen receptors and their structure and generation in primary lymphoid
organs. Finally, we will dedicate attention to the signal transduction through the TCR complex
- Naive, memory and effector T
necessary for the activation and differentiation of the cells of this subpopulation.
lymphocytes

Introducción a diferencia de los linfocitos B, los linfocitos T necesitan que

Los linfocitos responsables de la respuesta inmune adaptati-
va o antígeno específica son los linfocitos T y B. Ambos tipos
celulares poseen en su membrana receptores capaces de re-
conocer el antígeno específicamente. El receptor para el an-
tígeno de las células B es el BCR (B-cell receptor) y será am-
pliamente descrito en la revisión de este número de células B.
Los linfocitos T provienen de precursores que se originan en
la médula ósea y de allí migran al timo donde maduran. Los
linfocitos T presentan un receptor de membrana homólogo
a las inmunoglobulinas (Ig) conocido como TCR (T-cell re-
ceptor). Mediante este receptor, los linfocitos T son capaces
de identificar el antígeno de forma específica. Sin embargo,
el antígeno sea procesado en péptidos cortos (8-30 aminoá-
cidos) y presentados en moléculas del sistema principal de
histocompatibidad (MHC o HLA) descritas profundamente
en este mismo número. A este fenómeno se le conoce como
restricción del reconocimiento antigénico. Existen dos tipos de
moléculas de histocompatibidad clásicas denominadas molé-
culas MHC de clase I (MHC-I) y moléculas MHC de clase
II (MHC-II) que presentan a los linfocitos T péptidos de
origen citosólico y extracelular, respectivamente.
Los linfocitos T expresan una gran diversidad de recep-
tores para antígeno capaces de reconocer una amplia varie-
dad de sustancias extrañas. Esta diversidad se genera durante
el desarrollo de los linfocitos T maduros a partir de células

Medicine. 2013;11(28):1699-709 1699

Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
ENFERMEDADES DEL SISTEMA INMUNE (I)
precursoras que no expresan receptores para el antígeno. El
proceso por el cual los progenitores del linfocito en el timo
se diferencian en linfocitos maduros que pueblan los tejidos
linfáticos periféricos se llama desarrollo del linfocito o madura-
ción del linfocito. El conjunto de receptores para el antígeno
–y, por tanto, especificidades– expresados por los linfocitos T
que se producen durante su maduración se denomina reperto-
rio inmunitario. La maduración se inicia por señales proce-
dentes de receptores de la superficie celular que tienen dos
funciones principales: promueven la proliferación de los pro-
genitores e inducen la expresión de factores de transcripción
que actúan juntos para iniciar el reordenamiento de genes especí-
ficos del receptor para el antígeno. Este reordenamiento de los
genes es el acontecimiento clave en el desarrollo del linfoci-
to T, y es el responsable de la generación de un repertorio
tremendamente diverso. En cualquier sujeto, puede haber
107 o más clones diferentes de linfocitos T, cada uno con un
receptor único. La capacidad de cada sujeto de generar esta
gran diversidad en el repertorio de linfocitos ha evoluciona-
do de forma que no exige el mismo número elevado de genes
diferentes del receptor para el antígeno; de otra forma, una
gran proporción del genoma estaría dedicada a codificar el
vasto número de moléculas de Ig y TCR. Los genes funcio-
nales del receptor para el antígeno se producen en los linfo-
citos inmaduros en el timo por un proceso de reordenamien-
to génico, que está diseñado para generar un gran número de
exones que codifiquen la región variable usando la recombi-
nación de segmentos génicos que representan una fracción
relativamente pequeña del genoma. Estos reordenamientos
somáticos de segmentos génicos variables (recombinación
VDJ y VJ) están espacio-temporalmente controlados y gra-
cias a ellos los linfocitos ofrecen una protección con especi-
ficidad exquisita, sensibilidad y memoria a largo plazo.
Existen dos tipos fundamentales de linfocitos T: los citotóxi-
cos (Tc), que presentan en su membrana plasmática la molé-
cula correceptora CD8, y los cooperadores (Th [T helper]) que
expresan la molécula correceptora CD4. Los linfocitos Tc
detectan los péptidos presentados por moléculas de clase I.
Su función efectora principal es lisar las células que presen-
tan péptidos extraños; por ejemplo, péptidos de un virus
presentados en MHC-I por una célula infectada. Los linfo-
citos Th reconocen péptidos presentados en moléculas de
clase II. Su función es orquestar las respuestas inmunes y
ayudar o estimular que otras células del sistema inmune
como linfocitos Tc, linfocitos B y fagocitos funcionen correc-
tamente.
Como hemos visto, la molécula o receptor de membrana
que define a los linfocitos T es el TCR. El TCR consta de dos
cadenas que forman el sitio de unión al antígeno. Hay dos ti-
pos de linfocitos T si atendemos a la pareja de cadenas que
forman su TCR: los linfocitos Tαβ y los linfocitos Tγδ. Los
primeros son los mayoritarios en sangre periférica, los más
estudiados y a los que nos dedicaremos en la mayor parte del
artículo. Los linfocitos Tγδ son minoritarios en sangre peri-
férica en seres humanos y se encuentran localizados mayori-
tariamente en el tejido epitelial, sobre todo en el epitelio
intestinal. Los linfocitos Tγδ tienen un repertorio de reco-
nocimiento muy restringido y participan en una respuesta
casi innata eliminando células infectadas y tumorales.
1700 Medicine. 2013;11(28):1699-709
Los linfocitos Tαβ y los linfocitos Tγδ comparten un
grupo de proteínas que se asocian al TCR y se denominan
CD3, formando parte del complejo TCR/CD3. Por ello, el
marcador CD3 identifica por definición a todos los linfocitos T.
Sólo las cadenas variables del complejo TCR/CD3 (TCRα,
TCRβ, TCRγ y TCRδ) se dedican al reconocimiento de
péptidos antigénicos y son diferentes en cada clon de linfo-
citos. Las cadenas restantes son invariables, y su función es la
transducción de señales. Estas cadenas tienen grandes domi-
nios intracitoplásmicos con secuencias conservadas denomi-
nadas ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activation motif).
Para la correcta activación del linfocito T, además del com-
plejo TCR/CD3, es necesario otro conjunto de moléculas
denominadas accesorias. Estas señales accesorias son distintas a
las que genera el complejo TCR/CD3, pero no son menos
importantes, ya que modifican profundamente el comporta-
miento del linfocito T que las recibe. Las moléculas acceso-
rias de la superfamilia de las inmunoglobulinas (CD4, CD8,
CD2, CD28) son especialmente señalizadoras y están asocia-
das con quinasas intracitoplásmicas. Cabe destacar que CD4
y CD8 están asociados con una tirosinquinasa de proteínas
(PTK [protein-tyrosine kinase]) denominada Lck o p56lck. Las
moléculas accesorias de la superfamilia de las integrinas
CD11aCD18 (LFA-1) y CD49dCD29 (VLA-1) son adhesi-
vas, aunque también activan PTK citoplásmicas. Las molé-
culas accesorias de la superfamilia de las mucinas (CD43,
CD45) constituyen un grupo heterogéneo. CD43 es más
adhesiva y transmite señales inhibitorias, mientras que CD45
es señalizadora. Por último, CD5, de la superfamilia de los
receptores scavenger es adhesiva, aunque con cierta actividad
quinasa.
El conjunto o pool de linfocitos T con TCRαβ maduros no-
vatos es el resultado de la liberación lenta de células jóvenes
desde el timo, que se produce principalmente en la juventud,
pero continúa en la edad adulta. Los linfocitos Tc y Th ma-
duros en el entorno extratímico son células de vida larga que
pueden permanecer en esta fase durante varias semanas o
meses. Después de su activación por el antígeno, los linfoci-
tos sufren cambios secuenciales en su fenotipo y capacidad
funcional. Un linfocito maduro pequeño presenta un fenoti-
po novato caracterizado por la expresión de niveles bajos de
CD44 (CD44lo) y altos niveles de receptores para su direc-
cionamiento al ganglio linfático, CD62L y CCR7. Estas cé-
lulas sobreviven por contactos del TCR con ligandos de pép-
tidos propios/MHC (pMHC) más la exposición a IL-7.
Cuando el linfocito novato reacciona o reconoce el antígeno
para el que es específico, una pequeña proporción de las célu-
las respondedoras sobrevive para formar células T memoria
específicas de antígeno. Estas células son típicamente CD44hi, y
algunas de ellas CD62LhiCCR7hi que se denominan células T
memoria central (TCM, central memory T cells) y otras
CD62LloCCR7lo denominadas células T memoria efectora
(TEM, effector memory T cells). Las características que distin-
guen a los linfocitos vírgenes, efectores y memoria reflejan
diferentes programas de expresión génica que están regula-
dos por factores de transcripción y por cambios epigenéticos
estables como la metilación del ADN y la restructuración de
la cromatina. Los fenotipos de los diferentes tipos funciona-
les de los linfocitos Th efectores, llamados Th1, Th2 y Th17,
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
dependen de los factores de transcripción T-bet, GATA-3 y
RORγT, respectivamente; así como de cambios epigenéticos
en loci de genes de citoquinas. Esta diversidad funcional en-
contrada en los linfocitos Th efectores será descrita en pro-
fundidad en otra actualización de esta Unidad Temática de
Medicine.
Definición, clasificación y función
Molecularmente, los linfocitos T se definen como células que
tienen reordenados los genes del TCR. Es un grupo hetero-
géneo de células que comparten una característica biológica
esencial, la expresión en membrana plasmática del TCR. Las
principales funciones de los linfocitos T son erradicar las infeccio-
nes producidas por microbios intracelulares y activar otras células
como macrófagos y linfocitos B. Son importantes porque reco-
nocen con sus TCR antígenos provenientes del espacio in-
tracelular.
La función de las células T depende de su capacidad para
reconocer células infectadas por agentes patógenos o que
han internalizado agentes patógenos o sus productos. Las
células T llevan a cabo dicha función reconociendo fragmen-
tos peptídicos de proteínas en forma de complejos de pépti-
do y moléculas MHC (pMHC) en la superficie de esas célu-
las. La generación de péptidos a partir de un antígeno
intacto conlleva la modificación de la proteína nativa y se
denomina procesamiento del antígeno, mientras que el acto de
desplegar el péptido en la superficie celular en moléculas
MHC se denomina presentación del antígeno.
Desde 1980, estuvo claro que las dos principales subpo-
blaciones de células T, linfocitos Tc y linfocitos Th podían
distinguirse por su expresión superficial de CD8 y CD4, res-
pectivamente1. Usando clones de células T y estudios de blo-
queo con anticuerpos monoclonales, se demostró que el re-
conocimiento de células T restringido por moléculas de
MHC de clase II está mediado por las células T CD4+, mien-
tras que el reconocimiento de células T restringido por mo-
léculas de MHC de clase I está mediado por las células T
CD8+.
Los agentes infecciosos pueden replicarse en dos com-
partimentos intracelulares distintos. Los virus y ciertas bac-
terias se replican en el citosol o en el compartimento nuclear
contiguo, mientras que muchas bacterias patogénicas y algu-
nos parásitos eucariotas se replican en los endosomas y liso-
somas que forman parte del sistema vesicular. El sistema
inmunitario dispone de diferentes estrategias para eliminar
las infecciones en estos lugares. Las células infectadas por
virus o bacterias que viven en el citosol o incluso células
tumorales que presentan antígenos modificados son elimi-
nadas por los linfocitos Tc. Por otro lado, los agentes pató-
genos y sus productos en los compartimentos vesiculares de
las células son detectados por los linfocitos Th. Los linfoci-
tos Th están especializados en activar otras células como
linfocitos B o macrófagos que eliminarán el agente infeccio-
so. Por todo esto, para producir una respuesta apropiada a
cada microorganismo, las células T tienen que ser capaces de
detectar la presencia de agentes patógenos intracelulares y
de distinguir el material extraño procedente de los compar-
LINFOCITOS T
timentos citosólico y vesicular. Esto se consigue mediante el
uso de las diferentes clases de moléculas de histocompatibi-
lidad. Las moléculas de MHC de clase I presentan péptidos
originados en el citosol que son reconocidos por los linfoci-
tos Tc. Las moléculas de MHC de clase II presentan pép-
tidos originados en el sistema vesicular que son reconocidos
por los linfocitos Th.
Características genéticas.
Reordenamientos de los genes del
receptor para el antígeno. Mecanismos
de generación de diversidad
Los genes que codifican receptores diversos para el antígeno
de los linfocitos B y T se generan en linfocitos individuales
por el reordenamiento de diferentes segmentos génicos de la
región variable (V) con segmentos génicos de diversidad (D)
y de unión (J [joining]). Un nuevo exón reordenado para cada
gen del receptor para el antígeno se genera fusionando un
segmento génico V específico distante situado en dirección 5’
con un segmento situado en dirección 3’ en el mismo cromo-
soma. Este proceso especializado de reordenamiento génico
sitio-específico se llama recombinación V(D)J.
Las organizaciones en líneas germinales de los loci géni-
cos de las lg y el TCR son, en esencia, similares, y se carac-
terizan por una segregación espacial de múltiples secuencias
que codifican dominios variables y constantes de proteínas
del receptor; secuencias distintas de la región variable se
unen a secuencias de la región constante en diferentes linfo-
citos T.
Los genes que codifican las cadenas α, β y γ del TCR se
sitúan en tres loci separados situados en tres cromosomas di-
ferentes, mientras que el locus de la cadena δ está contenido
dentro del locus α del TCR (fig. 1). Cada locus del TCR en
línea germinal comprende segmentos génicos V y J, y el úl-
timo está justo en sentido 5’ a los exones de la región cons-
tante (C) en cada locus. Además, los loci β y δ del TCR tam-
bién tienen segmentos D, como el locus de la cadena pesada
de Ig. En el extremo 5’ de cada locus del TCR hay un grupo de
varios segmentos génicos V, dispuestos de una forma muy
parecida a los segmentos génicos V de Ig. En sentido 5’ de
cada gen V del TCR hay un exón que codifica un péptido
líder, y en sentido 5’ a cada exón líder hay un promotor para
cada gen V.
En cada locus del TCR, similar a los loci de Ig, los genes
de la región C se localizan adyacentes en la dirección 3’ a los
segmentos J (fig. 1). Hay dos genes C en cada locus β del
TCR (Cβ) y γ del TCR (Cγ), y sólo un gen C en el locus hu-
mano α del TCR (Cα) y δ del TCR (Cδ). Cada gen de la re-
gión C del TCR está compuesto de cuatro exones que codi-
fican el dominio similar a Ig de la región C extracelular, una
región bisagra corta, el segmento transmembrana y la cola
citoplásmica. Los loci de la cadena β del TCR y δ del TCR se
parecen al locus de la cadena pesada de Ig, y contienen seg-
mentos D entre genes V y segmentos J. Cada gen C del TCR
humano tiene su propio grupo 5’ asociado de segmentos J.
En las cadenas α o γ del TCR (que son análogas a las cadenas
Medicine. 2013;11(28):1699-709 1701
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.

ENFERMEDADES DEL SISTEMA INMUNE (I)

Locus de la cadena β del TCR humano

5’ Vβ1 Vβn Dβ1 Jβ1.1 Jβ1.n Cβ1 Dβ2 Jβ2.1 Jβ2.n Cβ2 3’
n = 75 n=6 n=6

Locus de la cadena α del TCR humano

5’ Vα1 Vαn Jα1 Jαn Cβ1 3’

n = 75 n = 70

Locus de la cadena δ del TCR humano

5’ Vδ1 Vδ2 Vδ3 Dβ1 Dβ2 Dβ3 Jδ1 Jδ2 Jδ3 Cδ Vδ4 3’

Locus de la cadena γ del TCR humano

5’ Vγ1 Vγn Jγ1.1 Jγ1.2 Jγ1.3 Cγ1 Jγ2.1 Jγ2.2 Cγ2 3’

n=8

Fig. 1. Organización de los genes del TCR (T-cell receptor) humano en línea germinal. Se muestran los loci de las cadenas �, �, � y � del TCR humano. Los exones e
intrones no están a escala; los pseudogenes no se representan. Cada gen C se muestra en un solo recuadro, pero está compuesto de varios exones. Los segmentos
génicos se indican de la siguiente manera: C (constante), D (diversidad), J (unión) y V (variable).

ligeras de Ig), el dominio V está codificado por los exones V
y J; y en las proteínas β y δ del TCR, el dominio V está co-
dificado por los segmentos génicos V, D y J (fig. 1).
El proceso de recombinación V(D)J en cualquier locus del
TCR implica la selección de un gen V, un segmento J y un
segmento D (cuando está presente) en cada linfocito, y el
reordenamiento de estos segmentos génicos para formar un
sólo exón V(D)J que codificará la región variable de un recep-
tor para el antígeno. En los loci de las cadenas α y γ del TCR,
que carecen de segmentos D, un sólo reordenamiento de un
gen V seleccionado de forma aleatoria con un segmento J
seleccionado también aleatoriamente. Los loci β y δ del TCR
contienen segmentos D, y en estos loci deben iniciarse por
separado dos reordenamientos distintos, primero uniendo un
segmento D a uno J y después un segmento V al segmento
DJ fusionado. Las regiones C se disponen en sentido 3’ al
exón V(D)J reordenado separado por el intrón J-C en línea
germinal. Este exón reordenado se transcribe para formar un
transcripto de ARN primario (nuclear). La unión posterior
del ARN acerca el exón líder, el exón V(D)J y los exones de
la región C, lo que forma un ARNm que puede traducirse en
los ribosomas unidos a la membrana para producir una de las
cadenas del receptor para el antígeno. El uso de diferentes
combinaciones de segmentos génicos V, D y J, y la adición y
eliminación de nucleótidos en las uniones contribuyen a la
tremenda diversidad de receptores para el antígeno, como
expondremos con más detalle más adelante.
Los factores críticos específicos del linfocito que median
la recombinación V(D)J reconocen ciertas secuencias del
ADN, llamadas secuencias señal de la recombinación (RSS
[recombination signal sequences]), localizadas en sentido 3’ a
cada segmento génico V, en sentido 5’ a cada segmento J y
flanqueando a cada segmento D por ambos lados. Las RSS
consisten en secuencias muy conservadas de siete nucleóti-
dos, llamadas heptámero, habitualmente CACAGTG, locali-
zadas en la secuencia codificadora, seguidas de un espaciador
de exactamente 12 o 23 nucleótidos no conservados, al que
sigue una secuencia rica en AT muy conservada de nueve
nucleótidos, llamada nonámero. El espaciador de 12 y 23 nu-
cleótidos corresponde aproximadamente a uno o dos giros
de la hélice de ADN, respectivamente, y probablemente lle-
van dos heptámeros distintos a posiciones que son simultá-
neamente accesibles a las enzimas que catalizan el proceso de
recombinación.
El proceso de recombinación V(D)J puede dividirse en cua-
tro fases diferentes que fluyen de forma secuencial y que
enumeramos a continuación.
Sinapsis
Porciones del cromosoma sobre las cuales se localiza el
gen del receptor para el antígeno se hacen accesibles a la
maquinaria de recombinación. Dos segmentos codificado-
res seleccionados y sus RSS adyacentes se acercan gracias
a la formación de un asa cromosómica, y se mantienen en
esta posición para su posterior escisión, procesamiento y
unión.

1702 Medicine. 2013;11(28):1699-709

Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
Escisión
Se generan roturas enzimáticas en la doble cadena en las
uniones entre la RSS y la secuencia codificadora, gracias a
una maquinaria específica del linfocito. Dos proteínas codi-
ficadas por genes específicos de los linfocitos, llamadas gen
activador de la recombinación 1 (Rag-1) y gen activador de
la recombinación 2 (Rag-2), forman un complejo tetraméri-
co que interviene en la recombinación V(D)J. Al complejo
Rag-l/Rag-2 también se le conoce como V(D)J-recombinasa.
Abertura de la horquilla y procesamiento
del extremo
Los extremos codificadores rotos se modifican por la adición
o eliminación de bases, y así se genera una mayor diversidad.
Tras la formación de roturas en la doble cadena, hay que
resolver las horquillas (abiertas) en las uniones codificadoras,
y pueden añadirse o eliminarse bases de los extremos codifi-
cadores para asegurar incluso una mayor diversificación. Ar-
temisa es una endonucleasa que abre las horquillas en los
extremos codificadores. Una enzima específica de los linfoci-
tos, llamada desoxinucleotidil terminal-transferasa (TdT)
añade bases a los extremos rotos del ADN, generando más
diversidad a la unión.
Unión
Los extremos codificadores rotos, así como los extremos se-
ñal, se acercan y unen mediante un proceso de reparación de
roturas de la doble cadena que se encuentra en todas las cé-
lulas y que se llama unión de extremos no homóloga. Varios
factores ubicuos participan en la unión de extremos no ho-
móloga. Ku70 y Ku80 son proteínas de unión a los extremos
del ADN que se adhieren a las roturas y reclutan la subuni-
dad catalítica de la proteinquinasa dependiente del ADN
(ADN-PK), una enzima reparadora del ADN bicatenario.
Esta enzima falta en ratones portadores de la mutación de la
inmunodeficiencia combinada grave (scid).
La enorme diversidad del repertorio de linfocitos T se
crea no sólo mediante combinaciones aleatorias de segmen-
tos génicos en línea germinal que se juntan, sino también
mediante la adición o eliminación aleatoria de secuencias en
las uniones entre los segmentos que se han unido. Varios me-
canismos génicos contribuyen a esta diversidad, y la impor-
tancia relativa de cada mecanismo varía entre los diferentes
locus de los receptores para el antígeno.
Diversidad combinatoria
El reordenamiento V(D)J acerca múltiples segmentos géni-
cos en línea germinal que pueden combinarse de forma alea-
toria, y diferentes combinaciones producen diferentes recep-
tores para el antígeno. El máximo número posible de
combinaciones de estos segmentos génicos es el producto del
número de segmentos génicos V, J y (si está presente) D en
LINFOCITOS T
cada locus del receptor para el antígeno. Después de la sínte-
sis de las proteínas del receptor para el antígeno, la diversi-
dad combinatoria aumenta aún más por la yuxtaposición de
dos regiones V diferentes generadas de forma aleatoria. Por
tanto, la diversidad combinatoria total es, en teoría, el pro-
ducto de la diversidad combinatoria de cada una de las dos
cadenas asociadas.
Diversidad en la unión
La mayor contribución a la diversidad de receptores para el
antígeno la realiza la eliminación o adición de nucleótidos en
las uniones de los segmentos V J D, D y J, o V y J en el mo-
mento en que estos segmentos se unen. Una forma en que
esto ocurre es cuando las endonucleasas eliminan nucleótidos
de las secuencias en línea germinal en los extremos de los seg-
mentos génicos que se recombinan. Además, pueden añadirse
en las uniones secuencias nuevas de nucleótidos, no presentes
en la línea germinal. Las longitudes cortas de nucleótidos aña-
didos al extenderse la cadena más corta tras la rotura se llaman
nucleótidos P. Otro mecanismo de diversidad en la unión es la
adición aleatoria de hasta 20 nucleótidos no codificados, lla-
mados nucleótidos N. La diversificación de la región N es más
frecuente en las cadenas β y γ del TCR. Esta adición de nue-
vos nucleótidos está mediada por la enzima TdT.
La diversidad de los receptores de los linfocitos T está
concentrada en la tercera región hipervariable. Como hemos
visto, el ligando del TCR es un péptido unido a una molécu-
la de histocompatibilidad, siendo la zona del TCR que más
varía la que contacta con el péptido presentado. De hecho,
las terceras regiones determinantes de complementariedad
(CDR3) de las cadenas α y β del TCR, a las que contribuyen
los segmentos génicos D y J, forman el centro del sitio de
unión al antígeno en los receptores T, mientras que la peri-
feria del sitio consiste en las regiones CDR1 y CDR2, menos
variables y que contactan con la molécula de MHC. El re-
pertorio de TCR es tremendamente diverso, con una estima-
ción aproximada de 1015-1016 secuencias potenciales distin-
tas2. Sin embargo, el número real de receptores para el
antígeno en los linfocitos T en cada sujeto es del orden de
107. Esto puede reflejar el hecho de que la mayoría de los
receptores generados aleatoriamente no pasan los procesos
de selección tímica. Curiosamente, cuando se analizó el re-
pertorio del TCRβ en células T memoria, se observó que
sólo era entre 5 y 10 veces menos diverso que el de células T
novatas. Esta observación es algo sorprendente, dado que
sólo una pequeña fracción de células T ha sido activada y
convertida en células memoria, llevando consecuentemente a
un repertorio menos diverso. Además, un número elevado de
secuencias del TCRβ en el compartimento memoria están
en minoría, sugiriendo que el repertorio memoria contiene
clones sin expandir3.
Generación y desarrollo de linfocitos T
El desarrollo de células T en el timo implica múltiples even-
tos de diferenciación y proliferación, durante los cuales los
Medicine. 2013;11(28):1699-709 1703
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
ENFERMEDADES DEL SISTEMA INMUNE (I)
precursores hematopoyéticos dan lugar a linfocitos T madu-
ros que responden a la estimulación por el antígeno, y se
diferencian de los linfocitos T efectores. A diferencia de otras
células inmunitarias, el desarrollo de células T en el timo es
un proceso que puede dividirse en tres grandes pasos. El pri-
mero abarca desde la colonización tímica hasta el compromi-
so de la célula T, a partir de aquí se inicia el segundo paso que
conduce a la divergencia de los linajes αβ y γδ. El tercer paso
consiste en la culminación de la diferenciación de las células
de linaje αβ y γδ y cómo adquieren propiedades inmunoló-
gicas y en algunos casos funciones efectoras4.
Los linfocitos T se originan a partir de precursores que
surgen en el hígado fetal y en la médula ósea del adulto y
siembran el timo. Estos precursores se denominan progeni-
tores tímicos tempranos (ETP [early thymic progenitors]) y son
células no comprometidas que conservan algo de potencial
mieloide pero poco o ningún potencial de linaje B, aunque el
entorno intratímico normalmente frena su diferenciación
mieloide5. Son progenitores multipotenciales que entran al
timo desde el torrente sanguíneo a través del endotelio de
una vénula poscapilar en la región corticomedular del timo.
La colonización tímica implica el receptor de quimioquina
CCR9, probablemente de forma redundante con CCR7 y
PSGL1, un ligando para P-selectina expresada en el epitelio
del timo. La pérdida de multipotencialidad que define el
compromiso T es un proceso gradual.
Los linfocitos T en desarrollo en el timo se llaman timo-
citos. El ambiente tímico proporciona estímulos necesarios
para la proliferación y maduración de los timocitos. Durante
la maduración del linfocito T, hay un orden preciso en el que
se reordenan los genes del TCR y se expresan el TCR y los
correceptores CD4 y CD8. Dicha maduración o diferencia-
ción comienza en la corteza y termina en la médula del timo.
Los timocitos corticales más inmaduros, que acaban de llegar
desde la médula ósea, presentan los genes del TCR en con-
figuración de línea germinal y no expresan el TCR, el CD3,
las cadenas ζ, el CD4 ni el CD8; estas células se llaman timo-
citos dobles negativos. Los timocitos en este estadio de ma-
duración se consideran en el estadio de prolinfocito T. La
mayoría (más del 90%) de los timocitos con doble negativi-
dad que sobreviven a los procesos tímicos de selección darán
lugar finalmente a linfocitos T CD4+ y CD8+ restringidos
por el MHC clásico y que expresan el TCRαβ, el resto de
estos timocitos dará lugar a linfocitos Tγδ.
Inicialmente, se intenta reordenar la cadena β del TCR.
Si se produce una reordenación productiva del gen de la ca-
dena β en el prolinfocito T, esta se expresa en la superficie
celular asociada a una proteína invariante llamada pre-Tα al
CD3 y las proteínas ζ, para formar el receptor del prelinfo-
cito T (pre-TCR). El pre-TCR media la selección de los
prelinfocitos T en desarrollo que reordenan de forma pro-
ductiva la cadena β del TCR. Las señales del pre-TCR me-
dian la supervivencia de los prelinfocitos T y contribuyen a
la mayor expansión proliferativa del linfocito T durante el
desarrollo. Las señales del pre-TCR también inician la re-
combinación en el locus de la cadena α del TCR, y dirigen la
transición desde el estadio de doble negatividad al de doble
positividad del timocito en desarrollo. Estas señales también
inhiben el reordenamiento del otro locus de la cadena β del
1704 Medicine. 2013;11(28):1699-709
TCR, que da lugar a la exclusión alélica de la cadena β. El
reordenamiento de los genes de la cadena α del TCR y la
expresión de los heterodímeros αβ del TCR se producen en
la población con doble positividad CD4+CD8+, poco después
de que las células atraviesen el punto de control del pre-
TCR. Al contrario que el locus de la cadena β del TCR, don-
de la producción de la proteína y la formación del pre-TCR
suprimen otro reordenamiento, hay poca o ninguna exclu-
sión alélica en el locus de la cadena α. Por tanto, los reorde-
namientos productivos α del TCR pueden producirse en los
dos cromosomas y, si esto sucede, el linfocito T expresará dos
cadenas α. De hecho, hasta el 30% de los linfocitos T madu-
ros periféricos expresan dos TCR diferentes, con distintas
cadenas α, pero con la misma cadena β. Es posible que solo
una de las dos cadenas α participe en la formación del TCR
funcional específico frente a un antígeno. La expresión del
gen α del TCR en el estadio de doble positividad lleva a la
formación del TCR αβ completo, que se expresa en la su-
perficie celular asociado a las proteínas CD3 y ζ. Los linfo-
citos con doble positividad que superan con éxito los proce-
sos de selección continúan madurando hasta convertirse en
linfocitos T CD4+ o CD8+, que se llaman timocitos simples
positivos.
Tres eventos clave marcan la progresión del desarrollo de
estos timocitos dobles positivos: a) selección positiva, el rescate
de muerte celular programada de timocitos dobles positivos
cuyo TCRαβ interactúa productivamente con complejos
propios péptido-MHC (pMHC) expresadas por el epitelio
tímico (o con otros MHC o moléculas tipo MHC)6; b) selec-
ción negativa, la eliminación de células autorreactivas que se
unen con fuerza a complejos propios pMHC y c) adquisición
de competencia funcional, especialmente marcada por terminar
expresando CD4 o CD8 (diferenciación de linaje) y defi-
niendo su especificidad de MHC. La necesidad de selección
positiva es una consecuencia directa de la naturaleza aleato-
ria del reordenamiento del TCR y de la alta diversidad de
alelos del MHC. Como resultado, la mayoría de los timoci-
tos dobles positivos en un individuo dado fallan en interac-
tuar con el complejo pMHC y mueren por “abandono” (ne-
glected) en unos pocos días7.
La avidez de las células T por péptidos propios unidos a
MHC, que sustenta la selección positiva, es un correlato de
su reactividad contra péptidos extraños unidos a MHC. Por
lo tanto, los mecanismos han evolucionado para prevenir el
desarrollo de células T con reactividad abierta contra pépti-
dos propios unidos a MHC, o para redirigir estas células ha-
cia inmunosupresión. Los timocitos que expresan receptores
con gran avidez por pMHC sufren muerte celular programa-
da inducida por TCR (selección negativa), un proceso esen-
cial para la tolerancia central8. Esto implica la exposición de
los timocitos a antígenos específicos de tejido ectópicamente
expresados por células epiteliales medulares de manera de-
pendiente del factor de transcripción Aire9. Además, hay evi-
dencia de que las células T reguladoras Treg que expresan
Foxp3, otra faceta esencial de la tolerancia central, muestran
receptores con mayor avidez para lo propio que las células
convencionales restringidas por MHC de clase II10. Los ti-
mocitos también experimentan una diferenciación funcional
hacia células T maduras. Un aspecto clave de este proceso es
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
la diferenciación hacia el linaje CD4 o CD8. Esto incluye la
terminación de la expresión del correceptor y de la iniciación
de programas de expresión génica característicos de linfocito
cooperador (CD4) o células citotóxicas (CD8), dos eventos
que durante mucho tiempo han sido reconocidos como aco-
plados11. Dos factores de transcripción, Thpok y Runx3,
expresados específicamente en timocitos CD4 y CD8 en
diferenciación, respectivamente, son importantes para este
proceso12.
Mientras que la gran mayoría de los linfocitos T αβ están
restringidos por moléculas MHC-I o MHC-II, pequeñas
subpoblaciones se seleccionan en otros MHC o moléculas
tipo MHC. La más abundante de estas subpoblaciones son
las células natural killer (NK) T invariantes (iNK T) que re-
conocen lípidos unidos a moléculas CD1d13. Estas células
expresan TCR con una cadena TCRα casi invariable asocia-
da a un pequeño grupo de cadenas TCRβ. Como todas las
células T αβ, las células NK T se generan en el timo a partir
de timocitos dobles positivos14. Sin embargo, aunque se se-
leccionan por CD1d (tipo MHC-I), no expresan CD8 y re-
tienen a menudo la expresión CD4 (aunque eventualmente
perderán la expresión de CD4 para convertirse en doble ne-
gativas).
Fundamentalmente, se generan dos linajes distintos de
células T en el timo y están definidos únicamente por su
expresión de un TCR αβ o un TCR γδ. Estos linajes separa-
dos de células T surgen inicialmente de un precursor común
que son los timocitos dobles negativos. En estos timocitos
dobles negativos, en principio es posible el reordenamiento
de los loci β, γ o δ del TCR. Si una célula tiene éxito en el
reordenamiento productivo de los loci γ del TCR, así como
del locus δ del TCR antes de que haga un reordenamiento
productivo del locus β del TCR, es seleccionada en la línea
del linfocito Tγδ. Esto ocurre en alrededor del 10% de los
linfocitos T con doble negatividad en desarrollo. Alrededor
del 90% de las veces, se realiza en primer lugar un reordena-
miento génico productivo del locus β del TCR15.
Estructura y propiedades del complejo
TCR/CD3
Como hemos visto, la molécula de membrana característica
de los linfocitos T maduros es su receptor para el antígeno o
TCR. El TCR consta de varias cadenas, pero cada linfocito T
sólo expresa pares concretos de ellas: TCRαβ o TCRδγ. Por
ello, podemos definir dos subpoblaciones de linfocitos T
atendiendo al TCR: linfocitos Tαβ y linfocitos Tδγ. Ambos
tipos de linfocitos comparten un grupo de proteínas denomi-
nadas CD3 que forma parte del complejo TCR/CD3. Por
ello, podemos utilizar el marcador CD3 para identificar in-
equívocamente a los linfocitos T.
El TCR es un complejo multimérico transmembrana
compuesto por un heterodímero clonotípico que reconoce el
antígeno, unido entre sí por un puente disulfuro y asociado
no covalentemente con las subunidades del CD3 transducto-
ras de señal CD3εγ, CD3εδ y CD3ζζ con una estequiome-
tría 1:1:1:116 (fig. 2). La señalización del TCR vía dímeros
CD3 evoca el compromiso del linaje de células y la selección
LINFOCITOS T
TCR
α β
CD3 CD3
Vα Vβ
ε δ Cα Cβ ε γ
S S
S
ITAM
ζ ζ
Fig. 2. Estructura del complejo TCR/CD3. El complejo TCR/CD3 de los linfoci-
tos T�� es un complejo multimérico transmembrana compuesto por un hete-
rodímero clonotípico que reconoce el antígeno, unido por un puente disulfu-
ro, asociado no covalentemente con las subunidades del CD3 transductoras
de señal CD3��, CD3�� y CD3�� con una estequiometria 1:1:1:1. Esta asocia-
ción está mediada por aminoácidos con carga en las regiones transmembrana.
La región de unión al antígeno está formada por V� y V�.
del repertorio durante el desarrollo, mantiene el pool de cé-
lulas T periféricas, y diferencia células T novatas en efectoras
o memoria tras estimulación inmune.
Cada cadena α y β del TCR consta de un dominio varia-
ble (V) N terminal similar a una Ig, un dominio constante (C)
similar a la Ig, una región transmembrana hidrófoba y una
región citoplásmica corta. De este modo, la porción extrace-
lular del heterodímero αβ del TCR tiene una estructura si-
milar al fragmento de unión al antígeno (Fab) de una molé-
cula de Ig, que se compone de las regiones V y C de una
cadena ligera y de la región V y C de una cadena pesada. Las
regiones V de las cadenas α y β del TCR contienen secuen-
cias cortas de aminoácidos donde se concentra la variabilidad
entre diferentes TCR, y estas forman las regiones hipervaria-
bles o CDR. Tres CDR en la cadena α y tres regiones simi-
lares en la cadena β forman juntas la parte del TCR que re-
conoce específicamente los complejos péptido-MHC. Las
regiones C de las cadenas α y β continúan en regiones bisa-
gra cortas que contienen cisteínas que contribuyen a la unión
mediante un enlace disulfuro de las dos cadenas. A la bisagra
le siguen porciones transmembrana hidrófobas, que tienen
como característica inusual la presencia de aminoácidos con
carga positiva. Estos aminoácidos interactúan con aminoáci-
dos con carga negativa presentes en las porciones transmem-
brana del CD3. Las cadenas α y β del TCR tienen colas
citoplásmicas carboxilo terminal de 5 a 12 aminoácidos de
longitud. Al igual que la Ig de membrana de los linfocitos B,
estas regiones citoplásmicas son demasiado pequeñas para
transmitir señales, de modo que moléculas específicas asocia-
das físicamente al TCR sirven para transmitir señales de este
complejo receptor para el antígeno.
Cada una de las subunidades invariantes CD3 transduc-
toras de la señal (CD3ε, CD3γ, y CD3δ) están formadas por
un dominio extracelular tipo Ig, seguido de una región corta
Medicine. 2013;11(28):1699-709 1705
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.

ENFERMEDADES DEL SISTEMA INMUNE (I)

denominada péptido conector (CP [connecting peptide]), una

la proteína CD4 se unen al dominio β2 no polimórfico de la
hélice transmembrana (TM), y una cola citoplasmática (fig. 2).
molécula de clase II del MHC.
Los dominios citoplásmicos de las proteínas CD3 γ, δ y ε
El correceptor transmembrana CD8 es codificado por
tienen de 44 a 81 aminoácidos de longitud y cada uno de
dos genes diferentes: CD8α y CD8β. Cada uno consta de un
estos dominios contiene un motivo ITAM (immunoreceptor
sólo dominio tipo Ig, seguido por una región larga de 30 a 50
tyrosine-based activation motif). La cadena ζ tiene una región
residuos con múltiples aductos O-glucosilados, una hélice
extracelular corta de 9 aminoácidos, una región transmem-
TM, y una cola citoplasmática corta. El CD8α pero no el
brana con un ácido aspártico con carga negativa (como las
CD8β se une a p56lck, esencial para la señalización de célu-
cadenas del CD3) y una región citoplásmica larga (113 ami-
las T. Mientras que los homodímeros CD8αα y los heterodí-
noácidos) que contiene tres ITAM. Normalmente se expresa
meros CD8αβ se encuentran en la superficie de los linfoci-
como un homodímero. Además, también se asocia a recepto-
tos, no existen homodímeros CD8ββ. El heterodímero
res transmisores de señales situados en linfocitos diferentes
CD8αβ es la isoforma dominante expresada en Tc20. La iso-
a los linfocitos T, como el receptor para el Fcγ de los linfo-
forma CD8αα se expresa en los linfocitos Tγδ, algunas célu-
citos NK. La interacción entre TCRαβ y su ligando pMHC
las NK y una subpoblación de linfocitos intraepiteliales21. Al
inicia una cascada de señalización a través de ITAM en la
contrario que el CD8, el CD4 consta de cuatro dominios en
cola citoplásmica de las subunidades CD3 asociadas15.
tándem tipo Ig, con una región corta y una hélice TM, y su
La unión del TCR a ligandos MHC-péptido agrupa los
cola citoplasmática también se une p56lck 22.
correceptores junto con el receptor para el antígeno y fosfo-
La función principal del correceptor en respuestas adap-
rila las tirosinas de las ITAM. La fosforilación de las tirosi-
tativas mediadas por células T no es facilitar la adhesión y/o
nas de las ITAM inicia la transducción de señales y la activa-
unión per se, sino más bien localizar p56lck en el área de inte-
ción de tirosinquinasas situadas en sentido distal que, a su
racción TCR-pMHC, de forma que los ITAM expuestos en
vez, fosforilan tirosinas en otras proteínas adaptadoras. Los
colas del CD3 puedan ser fosforilados en los residuos de ti-
pasos posteriores en la transducción de señales los genera el
rosina, permitiendo el reclutamiento de ZAP-70, como vere-
reclutamiento específico de enzimas clave que inician dife-
mos más adelante, y el resto de la cascada de señalización23.
rentes vías de transmisión de señales en sentido distal como
La hipótesis de las dos señales para la activación del lin-
veremos más adelante. Pero ¿cómo se inicia esta cascada de
focito T expone que para la activación completa del linfoci-
transducción tras el reconocimiento? Parece que las ITAM
to T es necesaria tanto la señal del receptor para el antígeno
en el complejo TCR están “plegadas” y ocultas antes de que
(primera señal) como las señales coestimuladoras (segunda
el TCR reconozca al antígeno. El reconocimiento de com-
señal) proporcionadas por las células presentadoras de antí-
plejos MHC-péptido puede inducir un cambio tridimensio-
geno (APC). Las señales coestimuladoras derivan de recep-
nal en el TCR, lo que deja disponibles las tirosinas de las
tores que reconocen ligandos inducidos en las APC por los
ITAM asociadas a las cadenas CD3 o ζ para que las quinasas
microbios y cooperan con las señales del TCR para aumentar
de la familia Src las fosforilen. Sin embargo, estudios recien-
las señales y activar a los linfocitos T. Las señales del TCR
tes demuestran que el complejo TCR/CD3 funciona como
ayudadas por correceptores impulsan la respuesta del linfo-
un mecanotransductor o mecanosensor que convierte ener-
cito T frente a estructuras extrañas. En jerga inmunológica,
gía mecánica en señales bioquímicas tras la unión de pMHC
esta respuesta del TCR al MHC y al péptido situados en una
específicos17. Esto se basa en la rigidez de los heterodímeros
APC se denomina señal 1. Los linfocitos T están completa-
CD3 que están asociados con un heterodímero TCRαβ cuya
mente activados sólo cuando se reconoce a un péptido extra-
propia estructura rígida es reforzada por el bucle de FG del
ño en el contexto de la activación del sistema inmunitario
dominio constante de la cadena β18. Por lo tanto, no sorpren-
innato por un microorganismo patógeno o alguna otra causa
de que las estructuras del TCRαβ unido y sin unir a pMHC
de inflamación. Los ligandos coestimuladores representan
no muestren grandes cambios conformacionales.
señales de peligro (o señal 2) inducidas en las APC por los
microbios. La “extrañeza” debe combinarse con el “peligro”
Correceptores, coestimuladores para una activación óptima del linfocito T.
La molécula CD28 en los linfocitos T es el principal re-
e inhibidores ceptor coestimulador para el envío de segundas señales para
la activación del linfocito T. El CD28 reconoce una pareja de
Ya en 1980, quedó claro que las dos principales subpoblacio-
proteínas llamadas B7-1 (CD80) y B7-2 (CD86), que se ex-
nes de células T, linfocitos Tc y linfocitos Th podían distin-
presan en células dendríticas, macrófagos y linfocitos B acti-
guirse por su expresión superficial de CD8 y CD4, respecti-
vados. El CD28 es un homodímero unido por enlaces disul-
vamente. Dado que el CD4 y el CD8 presentan estructuras
furo y cada subunidad tiene un sólo dominio extracelular de
invariables, se especuló que interactuaban con regiones con-
Ig. Se expresa en más del 90% de los linfocitos Th y en el
servadas de moléculas de MHC y actuaban como correcep-
50% de los linfocitos Tc en seres humanos. La cola citoplás-
tores19. De hecho, el CD4 y el CD8 se unen a regiones no
mica del CD28 comprende una estructura tirosínica que des-
polimórficas de las moléculas del MHC y facilitan la produc-
pués de la fosforilación puede reclutar la subunidad regula-
ción de señales por el complejo TCR durante la activación
dora de la fosfatidilinositol-3 quinasa (PI3-quinasa) y además
del linfocito T. Concretamente, el dominio de Ig del CD8 se
dos estructuras ricas en prolina que unen Itk y Lck. Otro
une al dominio α3 no polimórfico de las moléculas de la cla-
miembro activador importante de la familia CD28 es un re-
se I del MHC y los dos dominios de tipo Ig N-terminales de

1706 Medicine. 2013;11(28):1699-709

Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
ceptor llamado ICOS (inducible coestimulator), que desem-
peña una función importante en el desarrollo del linfocito T
cooperador folicular, que se estudia en otra revisión de esta
misma Unidad Temática.
Aunque la familia de receptores de coestimuladores me-
jor estudiada y más destacada en los linfocitos T es la CD28,
otras proteínas también contribuyen a la activación y dife-
renciación óptimas del linfocito T. Una familia importante
de proteínas que interviene en la activación de los linfoci-
tos T y de los linfocitos NK es un grupo de proteínas con
estructuras relacionadas con el receptor CD2. El CD2 es una
glucoproteína presente en más del 90% de los linfocitos T
maduros. La molécula contiene dos dominios de Ig extrace-
lulares, una región hidrófoba transmembrana y una cola
citoplásmica larga (116 aminoácidos). El principal ligando
del CD2 en los seres humanos es una molécula llamada an-
tígeno 3 asociado a la función del leucocito (LFA-3 [leukocite
function-associated antigen 3] o CD58), miembro también de
la familia CD2. El CD2 funciona como una molécula de ad-
hesión intercelular, y como un transductor de señal. Un
subgrupo diferente de la familia CD2 se conoce como fami-
lia SLAM (signaling lymphocytic activation molecule). SLAM es
una proteína integral de membrana que contiene dos domi-
nios extracelulares de Ig y una cola citoplásmica relativamen-
te larga. La cola citoplásmica contiene una estructura tirosí-
nica específica, conocida como estructura tirosínica de
cambio del receptor inmunitario (ITSM [immunoreceptor
tyrosine-based switch motif]) que es distinta de las estructuras
ITAM e ITIM.
El ligando para el CD40 (CD40L) es una proteína de
membrana de la superfamilia del TNF que se expresa sobre
todo en los linfocitos T activados, y el CD40 es un miembro
de superfamilia del receptor para el TNF expresado en lin-
focitos B, macrófagos y células dendríticas. La interacción
del CD40L en los linfocitos T con el CD40 de las APC au-
menta las respuestas de los linfocitos T al activar las APC.
Los linfocitos T cooperadores activados expresan el CD40L,
que se une al CD40 en la APC y la activa para hacerla más
potente, al aumentar su expresión de moléculas B7 y la secre-
ción de citoquinas como la IL-12, que promueven la diferen-
ciación del linfocito T. La interacción CD40-CD40L es tam-
bién necesaria para producir el cambio de isotipo en los
linfocitos B (ver revisión de células B).
El resultado final de la activación del linfocito T es un
balance entre señales activadoras e inhibidoras. Los recepto-
res inhibidores de la familia del CD28 son el CTLA-4 (cyto-
toxic T-lymphocyte antigen 4 o CD152) y el PD-1 (programmed
death 1). CD28 y CTLA-4 reconocen los mismos ligandos,
pero presentan efectos funcionales opuestos. El CD28 tiene
entre 20 y 50 veces menos afinidad por B7 que el CTLA-4 y,
por ello, puede unirse a él cuando sus concentraciones son
relativamente altas. Según este modelo, la intensidad de la
expresión de B7 en las APC influye en la unión relativa al
CD28 o CTLA-4, y esto determina, a su vez, que se inicien
o finalicen respuestas. PD-1 es un miembro de la superfami-
lia del CD28 que ofrece señales negativas al interaccionar
con sus dos ligandos, PD-L1 y PD-L2. PD-1 y sus ligandos
se expresan ampliamente y tienen una gran gama de papeles
inmunorreguladores en la activación de células T y en la to-
LINFOCITOS T
lerancia, comparado con otros miembros de CD28. La inte-
racción de PD-1-PD-L regula la inducción y el manteni-
miento de la tolerancia periférica, y protege los tejidos del
ataque autoinmune. PD-1 y sus ligandos también participan
en atenuar la inmunidad infecciosa e inmunidad tumoral24.
Señalización y transducción a través
del complejo TCR
Como hemos visto, el complejo TCR/CD3 consta de dos
cadenas, TCRα y TCRβ, que forman heterodímeros que
proporcionan el sitio de reconocimiento del antígeno, así
como cadenas accesorias (CD3) y correceptores (CD4 y
CD8) necesarios para la transducción de la señal. A los pocos
segundos de la unión del TCR a su ligando, se fosforilan mu-
chas tirosinas dentro de las ITAM de las cadenas CD3 y ζ.
Además del Lck asociado al correceptor, otra quinasa de la
familia Src que se encuentra asociada físicamente al comple-
jo TCR es Fyn, asociada al CD3, que puede desempeñar una
función análoga a Lck (fig. 3). Las ITAM con las tirosinas
fosforiladas en la cadena ζ se convierten en lugares de aco-
plamiento para la tirosinquinasa de la familia Syk llamada
ZAP-70 (Zeta-chain-associated protein kinase 70). La ZAP-70
contiene dos dominios SH2 que pueden unirse a las fosfoti-
rosinas de los ITAM. Cada ITAM tiene dos tirosinas y ambas
deben estar fosforiladas para proporcionar un lugar de aco-
plamiento para una molécula de ZAP-70. La ZAP-70 unida
se convierte en un sustrato para la Lck adyacente, que fosfo-
rila tirosinas específicas de ZAP-70. Como resultado de ello,
la ZAP-70 adquiere su propia actividad tirosinquinasa y es
capaz, entonces, de fosforilar otras moléculas citoplásmicas
(adaptadores) transmisoras de señales como LAT. Estos
adaptadores se convierten en lugares de acoplamiento para
enzimas celulares como la PLCγ1 (Phospholipase C gamma 1)
y factores de intercambio que activan Ras y otras pequeñas
proteínas G que activarán quinasas MAP (mitogen-activated
proteins).
Las proteínas G participan en diversas respuestas de ac-
tivación en diferentes tipos celulares. Dos miembros impor-
tantes de esta familia que se activan en sentido 3’ del TCR
son Ras y Rac (fig. 3). La vía Ras se activa en los linfocitos T
después de que el TCR se una a su antígeno, lo que lleva a la
activación de la quinasa activada por el receptor extracelular
(ERK [receptor-activated kinase]), un miembro destacado de la
familia de las quinasas MAP, y finalmente a la activación de
factores de transcripción en sentido 3’. El mecanismo de ac-
tivación de Ras en los linfocitos T afecta a las proteínas adap-
tadoras LAT y Grb-2. En paralelo con la activación de Ras,
los adaptadores fosforilados por las quinasas asociadas a
TCR también reclutan y activan una proteína de intercam-
bio de GTP/GDP llamada Vav, que actúa sobre otra pequeña
proteína ligadora del nucleótido guanina llamada Rac. El
Rac-GTP que se genera inicia una cascada paralela a la de la
quinasa MAP, que da lugar a la activación de una quinasa
MAP distinta llamada quinasa de la porción amino terminal
de c-Jun (JNK [c-Jun N-terminal kinase]). La JNK activada
fosforila entonces c-Jun, el segundo componente del factor
de transcripción de AP-1. Un tercer miembro de la familia
Medicine. 2013;11(28):1699-709 1707
Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.

ENFERMEDADES DEL SISTEMA INMUNE (I)

CD4
MHC-II

CD3
TCR Espacio extracelular
LAT

ITAM
Lck ZAP-70 Grb2
P Citoplasma
P P P SOS
P P
P P
PLCγ1

PIP2 Ras-GTP Rac-GTP

DAG PIP3

↑ Ca2+ ERK JNK

PKC

Calcineurina

Fos
NKκB activo NFAT activo p-Jun
Núcleo
AP-1activa
Gen de la IL-2

Fig. 3. Transducción de la señal a través del complejo TCR/CD3. Tras el reconocimiento del antígeno por el TCR, se produce una fosforilación temprana de las tirosinas
de los ITAM que se convierten en lugares de acoplamiento de tirosinquinasas como ZAP-70. ZAP-70 adquiere su propia actividad tirosinquinasa y acaba activando la
PLC�1 (phospholipase C gamma 1) y factores de intercambio que activan Ras y otras pequeñas proteínas G que activarán quinasas MAP (mitogen-activated proteins)
que terminarán activando tres factores de transcripción: el factor nuclear de los linfocitos T activados (NFAT [nuclear factor of activated T cells]), AP-1 (activator
protein 1) y NF-�B (nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells). Estos factores de transcripción se unen a regiones reguladoras de numerosos
genes en los linfocitos T y, con ello, aumenta su transcripción. Las líneas azules representan la dirección de la fosforilación.

de la MAP quinasa es p38 que también es activado por
Rac-GTP. La inhibición de esta ruta es mediada por fosfata-
sas con especificidad dual tirosina/treonina.
La segunda ruta de transducción tras el reconocimiento
antigénico es la de la PLCγ1. Como hemos visto anterior-
mente, ZAP-70 e Itk fosforilan PLCγ1. La PLCγ1 fosfori-
lada cataliza la hidrólisis de un fosfolípido de la membrana
plasmática denominado PIP2 (Phosphatidylinositol 4,5-bis-
phosphate) que genera dos productos, IP3 (inositol 1, 4,
5-trisphosphate) y diacilglicerol (DAG) unido a la membra-
na (fig. 3). IP3 y DAG activan dos vías de transmisión de
señales. El IP3 produce un incremento rápido del calcio li-
bre citosólico que depende de la liberación inicial del calcio
retenido en el retículo endoplásmico y de la posterior entra-
da de calcio del exterior mediante canales iónicos de la
membrana plasmática (CRAC [calcium release-activated chan-
nel]). El calcio libre citosólico se une a la calmodulina for-
mando complejos calcio-calmodulina que activan varias en-
zimas como la calcineurina, que a su vez activará factores de
transcripción. El fármaco inmunodepresor ciclosporina se
une a una proteína citosólica denominada ciclofilina y el
complejo que forman se une a la calcineurina y la inhiben.
DAG, el segundo producto de la escisión del PIP2, es un
lípido unido a la membrana que activa la enzima proteína
quinasa C (PKC [protein kinase C]). La combinación del au-
mento del calcio citosólico libre y el DAG activa ciertas iso-
formas de PKC asociadas a la membrana. La PKC fosforila
numerosas proteínas situadas en sentido 3’ y participa en la
activación y translocación al núcleo del factor de transcrip-
ción factor nuclear κB (NF-κB).
Las enzimas generadas por las señales a través del TCR
activan factores de transcripción que se unen a regiones re-
guladoras de numerosos genes en los linfocitos T y, con ello,
aumenta su transcripción. Concretamente, se activan tres
factores de transcripción: el factor nuclear de los linfocitos T
activados (NFAT [nuclear factor of activated T cells]), AP-1 (ac-
tivator protein 1) y NF-κB (fig. 3).
El NFAT es un factor de transcripción necesario para la
expresión de IL-2, IL-4, TNF y otros genes de citoquinas. El
NFAT está presente en una forma inactiva. La calcineurina
desfosforila el NFAT citoplásmico, con lo que descubre una
señal de localización nuclear que permite al NFAT pasar al

1708 Medicine. 2013;11(28):1699-709

Document downloaded from http://www.elsevier.es, day 04/03/2018. This copy is for personal use. Any transmission of this document by any media or format is strictly prohibited.
núcleo. Una vez en el núcleo, el NFAT se une a las regiones
reguladoras de la IL-2, la IL-4 y otros genes de citoquinas,
habitualmente asociados a otros factores de transcripción,
como AP-1.
La AP-1 es, en realidad, el nombre de una familia de fac-
tores ligadores de ADN compuestos de dímeros de dos pro-
teínas que se unen entre sí a través de una estructura com-
partida llamada cremallera de leucina. El factor AP-1 mejor
caracterizado se compone de las proteínas Fos y Jun. Las
señales inducidas por el TCR llevan a la aparición de la AP-1
activa en el núcleo. La activación de la AP-1 implica habi-
tualmente la síntesis de la proteína Fos y la fosforilación de
la proteína Jun prexistente. La AP-1 parece asociarse física-
mente a otros factores de transcripción en el núcleo, incluido
el NFAT. De este modo, la activación de AP-1 representa un
punto de convergencia de varias vías de transmisión de seña-
les iniciadas por el TCR.
El NF-κB es un factor de transcripción que se activa en
respuesta a señales del TCR y es esencial para la síntesis de
citoquinas. En los linfocitos T en reposo, el NF-κB está pre-
sente en el citoplasma formando un complejo con otras pro-
teínas llamadas inhibidores de κB (IκB), lo que hace inacce-
sible la señal de localización nuclear del NF-κB, e impide así
la entrada de este factor en el núcleo. Las señales del TCR
llevan a la fosforilación de la serina del IκB, y después a su
ubiquitinación y degradación en el proteosoma. Una vez li-
berado de IκB, el NF-κB es capaz de migrar al núcleo y unir-
se a los promotores de genes diana y regularlos.
La modulación e inhibición de las señales a través del
TCR se realizan por tirosina fosfatasas. Dos tirosina fosfata-
sas que ejercen una función inhibidora importante en los
linfocitos y otras células hematopoyéticas son SHP-1 y
SHP-2 (fosfatasas que contienen el dominio SH2 1 y 2). Es-
tas fosfatasas inhiben la transducción de señales al eliminar
fosfatos de tirosinas en moléculas transmisoras de señales
clave y antagonizar así la función de las tirosinquinasas. Otra
fosfatasa inhibidora que no actúa sobre fosfoproteínas, sino
que es específica de un fosfolípido con inositol, se llama
SHIP (SH2 domain-containing inositol phosphatase). La SHIP
elimina un grupo fosfato del PIP3 y así antagoniza la señal
de la quinasa PI3.
Conflicto de intereses
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.
LINFOCITOS T
Bibliografía
• Importante •• Muy importante
✔ Metaanálisis ✔ Artículo de revisión
✔ Ensayo clínico controlado ✔ Guía de práctica clínica
✔ Epidemiología
1. Meuer SC, Schlossman SF, Reinherz EL. Clonal analysis of human cyto-
toxic T lymphocytes: T4+and T8+ effector T cells recognize products of
different major histocompatibility complex regions. Proc Nat Acad Sci
USA. 1982;79:4395-9.
✔ ••
2. Davis MM, Bjorkman PJ. T-cell antigen receptor genes and
T-cell recognition. Nature. 1988;334:395-402.
•
3. Klarenbeek PL, Tak PP, van Schaik BD, Zwinderman AH, Jakobs
ME, Zhang Z, et al. Human T-cell memory consists mainly of unex-
panded clones. Immunol Lett. 2010;133:42-8.
✔ ••
4. Carpenter AC, Bosselut R. Decision checkpoints in the thymus.
Nat Immunol. 2010;11(8):666-73.
5. Wada H, Masuda K, Satoh R, Kakugawa K, Ikawa T, Katsura Y, et al. Adult
T-cell progenitors retain myeloid potential. Nature. 2008;452:768-72.
✔ ••
6. Starr TK, Jameson SC, Hogquist KA. Positive and negative se-
lection of T cells. Annu Rev Immunol. 2003;21:139-76.
7. Feng D, Bond CJ, Ely LK, Maynard J, García KC. Structural evidence for
a germline-encoded T cell receptor-major histocompatibility complex
interaction ‘codon’. Nat Immunol. 2007;8:975-83.
✔8. von Boehmer H, Melchers F. Checkpoints in lymphocyte development
and autoimmune disease. Nat Immunol. 2010;11:14-20.
✔9. Mathis D, Benoist C. Aire. Annu Rev Immunol. 2009;27:287-312.
10. • Josefowicz SZ, Rudensky A. Control of regulatory T cell lineage
commitment and maintenance. Immunity. 2009;30:616-25.
11. Corbella P, Moskophidis D, Spanopoulou E, Mamalaki C, Tolaini M, Ita-
no A, et al. Functional commitment to helper T cell lineage precedes
positive selection and is independent of T cell receptor MHC specificity.
Immunity. 1994;1:269-76.
12. Taniuchi I, Osato M, Egawa T, Sunshine MJ, Bae SC, Komori T, et al.
Differential requirements for Runx proteins in CD4 repression and epige-
netic silencing during T lymphocyte development. Cell. 2002;111:621-33.
13. Benlagha K, Weiss A, Beavis A, Teyton L, Bendelac A. In vivo identifica-
tion of glycolipid antigen-specific T cells using fluorescent CD1d tetra-
mers. J Exp Med. 2000;191:1895-903.
14. Egawa T, Eberl G, Taniuchi I, Benlagha K, Geissmann F, Hennighausen
L, et al. Genetic evidence supporting selection of the Valpha14i NKT cell
lineage from double-positive thymocyte precursors. Immunity. 2005;
22:705-16.
15. Reth M. Antigen receptor tail clue. Nature. 1989;338:383-4.
✔
16. Kim ST, Shin Y, Brazin K, Mallis RJ, Sun ZY, Wagner G, et al. TCR
mechanobiology: torques and tunable structures linked to early T cell
signaling. Front Immunol. 2012;3:76.
✔•
17. Jia-huai Wang, Ellis L. Reinherz. The structural basis of αβ T-linea-
ge immune recognition: TCR docking topologies, mechanotransduc-
tion, and co-receptor function. Immunol Rev. 2012;250(1):102-19.
18. Wang JH, Lim K, Smolyar A, Teng M, Liu J, Tse AG, et al. Atomic struc-
ture of an alphabeta T cell receptor (TCR) heterodimer in complex with
an anti-TCR fab fragment derived from a mitogenic antibody. EMBO J.
1998;17:10-26.
✔••
19. Reinherz EL, Meuer SC, Schlossman SF. The delineation of an-
tigen receptors on human T lymphocytes. Immunol Today. 1983;
4:5-8.
20. Moebius U, Kober G, Griscelli AL, Hercend T, Meuer SC. Expression of
different CD8 isoforms on distinct human lymphocyte subpopulations.
Eur J Immunol. 1991;21:1793-800.
✔
21. Poussier P, Julius M. Thymus independent T cell development and selec-
tion in the intestinal epithelium. Annu Rev Immunol. 1994;12:521-53.
22. Kim PW, Sun ZY, Blacklow SC, Wagner G, Eck MJ. A zinc clasp struc-
ture tethers Lck to T cell coreceptors CD4 and CD8. Science.
2003;301:1725-8.
23. Weiss A. T cell antigen receptor signal transduction: a tale of tails and
cytoplasmic protein-tyrosine kinases. Cell. 1993;73:209-12.
24. Jin HT, Ahmed R, Okazaki T. Role of PD-1 in regulating T-cell immunity.
Curr Top Microbiol Immunol. 2011;350:17-37.
Medicine. 2013;11(28):1699-709 1709