Resultados

Después de realizado cada tratamiento a la papa, la sangre y el MnO2 con diferentes

condiciones de temperatura (baja, ambiente, alta) y cuantificar con un termómetro la
liberación​ ​de​ ​calor​ ​de​ ​una​ ​reacción,​ ​se​ ​obtuvieron​ ​los​ ​resultados​ ​plasmados.

Tabla​ ​1.​​ ​Cuadro​ ​de​ ​tratamientos​ ​aplicados​ ​a​ ​los​ ​diferentes​ ​tipos​ ​de​ ​muestra​ ​vegetal​ ​y​ ​animal
T1 A​ ​temperatura​ ​ambiente

T2 A​ ​alta​ ​temperatura

T3 A​ ​baja​ ​temperatura

T4 Cuantificación​ ​de​ ​temperatura​ ​con​ ​cianuro​ ​(Inhibidor)

Tabla 2. Cuadro de resultados de los tratamientos (T1, T2 y T3) aplicados a los diferentes
tipos​ ​de​ ​muestras​ ​vegetales​ ​y​ ​animales
Tratamiento Descripción Observación

T1​ ​(papa​ ​+​ ​H2O2) Se observa una coloración

blancuzca y en el fondo del
tubo de ensayo se evidencia
una solución clara. El
burbujeo fue inmediato y
denso, sin embargo un poco
lento.

T1​ ​(Sangre​ ​+​ ​H2O2) El burbujeo fue rápido y

continuó saliendo después de
unos minutos. No fue un
burbujeo denso y la solución
clara en la parte baja del
tubo fue de menor cantidad
que en el tratamiento T1
(papa​ ​+​ ​H2O2)
T1​ ​(MnO2​ ​+​ ​H2O2) Es una reacción exotérmica,
al principio el burbujeo fue
rápido pero no continuó con
la misma velocidad después
de unos minutos más tarde.
Cuando se evidencio que la
reacción terminó, el
contenido de solución era
considerablemente​ ​menor

T2​ ​(papa​ ​+​ ​H2O2) No se presentó burbujeo ni

turbidez, por lo tanto,
aparentemente no hubo
reacción

T2​ ​(Sangre​ ​+​ ​H2O2) No presenta turbidez ni

burbujeo, por lo tanto,
aparentemente no hubo
reacción

T2​ ​(MnO2​ ​+​ ​H2O2) El burbujeo fue rápido al

principio, sin embargo, su
burbujeo fue menor al T1
(MnO2) y se acabó
rápidamente junto con la
turbidez
 T3​ ​(papa​ ​+​ ​H2O2) El burbujeo fue menor y
denso, presentó la misma
coloración blanca que las
reacciones de T1 (papa +
H2O2), pero con menor
velocidad de reacción.
Después de un tiempo, el
burbujeo continuó hasta
alcanzar más de la mitad
superior​ ​del​ ​tubo

T3​ ​(Sangre​ ​+​ ​H2O2) La reacción fue lenta a

comparación de la ocurrida
en el tratamiento T1 (Sangre
+ H2O2). Sin embargo, el
burbujeo después de unos
minutos llegó hasta la parte
superior del tubo. La parte
baja​ ​del​ ​tubo​ ​es​ ​clara.

T3​ ​(MnO2​ ​+​ ​H2O2) Presentó el mismo

comportamiento que el
tratamiento T1 (MnO2 +
H2O2), sin embargo, el
burbujeo no continuó
después de unos minutos
como​ ​en​ ​el​ ​T1​ ​mencionado.

​​
Tabla 3. Cuadro del tratamiento T4. Cómo varía la temperatura en la reacción enzimática de
las​ ​diferentes​ ​muestras​ ​vegetales​ ​y​ ​animales​ ​con​ ​un​ ​inhibidor​ ​(cianuro-​ ​NaCN).

Tiempo​ ​(Minutos) Temperatura​ ​(°C)/tratamiento

Tratamientos Papa​ ​+​ ​Cianuro​ ​+ Sangre​ ​+​ ​Cianuro MnO2​ ​+​ ​Cianuro​ ​+
H2O2 +​ ​H2O2 H2O2

0 29 27 30

0.30 29 28.1 37.9

0.60 30 28.1 38.0

1.30 30.5 28.6 37.5

2.00 31.0 29.0 36.9

2.30 32.0 29.3 36.8

Figura 1. Curva de reacción enzimática de la papa. Se gráfica el tratamiento T4, con respecto
a​ ​las​ ​variables​ ​tiempo​ ​y​ ​temperatura.
Figura 2. Curva de reacción enzimática de la sangre. Se gráfica el tratamiento T4, con
respecto​ ​a​ ​las​ ​variables​ ​tiempo​ ​y​ ​temperatura.

Figura 3. Curva de reacción enzimática del MnO2. Se gráfica el tratamiento T4, con respecto
a​ ​las​ ​variables​ ​tiempo​ ​y​ ​temperatura.

ANALISIS

La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa, EC 1.11.1.6) es

una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida
en el organismo humano, aunque su actividad varía en dependencia del tejido; ésta resulta
más elevada en el hígado y los riñones, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y
prácticamente nula en el tejido nervioso. A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los
peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol.2 Esta enzima es una
metaloproteína tetramérica, cuyo peso molecular se encuentra en el rango de 210-280 kD.
Consta de 4 subunidades idénticas que se mantienen unidas por interacciones no covalentes.
Cada subunidad contiene un grupo prostético de protoporfirina IX y el contenido
protohémico y el de hierro representan un 1,1 % y 0,09 % respectivamente del peso
molecular total de la enzima (​3​). Cambios en la temperatura y otras condiciones ambientales
pueden alterar la estructura tridimensional de una proteína. Si una enzima cambia su
estructura,​ ​el​ ​trabajo​ ​de​ ​actividad​ ​catalítica​ ​se​ ​puede​ ​prolongar​ ​(10).

La catalasa en los organismos actúa sobre la regulación de las altas concentraciones de

peróxido de hidrógeno (​11​). Por lo tanto, es importante su estudio. La acción de la catalasa es
por vía de la reacción directa del ión Fe(III) con el oxígeno, para liberar el peróxido y formar
agua y oxígeno molecular. El cianuro y la elevada constante de formación de complejos de
hierro trivalente y divalente con aniones cianuro es debida al fuerte enlace sinérgico
originado por la suma de dos efectos: Donación de e-, por parte del ligando en enlace s,
retrodonación de e- por parte del metal en enlace p (7). Por lo tanto, el cianuro es un inhibidor
irreversible generando cambios conformacionales específicos en el sitio activo de un limitado
número de enzimas sobre las que actúa. A continuación se presenta la reacción general del
proceso​ ​enzimático.

Análisis​ ​de​ ​las​ ​gráficas

Para comprender mejor la inhibición, hay que saber que la reacción de la catalasa sobre el
peróxido de hidrógeno es una reacción que libera calor (10). En la gráfica de la reacción
enzimática de la papa, se presentan dos valles de poco aumento de temperatura, entre los
segundos 0-0.4 y 0.5-2.0 aproximadamente. Por lo tanto, se infiere que en esos segundos no
existió o tal vez hubo una baja tasa de reacción de la catalasa sobre el sustrato (H2O2).
Comparando con las otras dos gráficas, la papa tiene poco contenido de la enzima catalasa, lo
que​ ​hace​ ​que​ ​la​ ​inhibición​ ​se​ ​exprese​ ​más​ ​rápido​ ​que​ ​en​ ​las​ ​otras​ ​muestras​ ​(​2​).
En la gráfica 2, inicialmente la reacción fue rápida, hubo un valle de aumento de temperatura
entre los segundos 0.3-0.5 y del segundo 0.5 en adelante la reacción siguió aumentando la
temperatura rápidamente. La sangre tiene más contenido de catalasa que la papa. Finalmente,
en la gráfica 3 se observa una inhibición total de la actividad enzimática, solo entre los
segundos 0 y 0.5 se observa un aumento de temperatura. El MnO2 es un catalizador
inorgánico, es decir, no proteico como la catalasa. A diferencia de la catalasa, fue inhibido
totalmente​ ​y​ ​la​ ​temperatura​ ​fue​ ​levemente​ ​en​ ​decadencia​ ​(6).

Acción​ ​de​ ​la​ ​temperatura​ ​en​ ​las​ ​diferentes​ ​reacciones​ ​enzimáticas.

Para el experimento del efecto de la temperatura sobre la acción de la amilasa de la papa, se

mide la actividad enzimática a diferentes temperaturas, en las cuales se mostraron reacciones
diferentes. Las temperaturas 90ºC - 100ºC, que corresponden al tratamiento Nº2 y 5ºC, que
corresponden al tratamiento Nº3, en estos dos tratamientos se manejan temperaturas extremas
en las cuales las enzimas, y en particular las amilasas disminuyen su acción y se inhiben
totalmente, debido a la desnaturalización de la molécula proteica, de la cual están
conformadas las enzimas. Cabe resaltar que el tratamiento Nº1 consta de una temperatura
relativamente ambiental y corporal donde las enzimas presentan su mejor funcionamiento, es
decir, se encuentran en un rango óptimo de temperaturas. A su vez, se observa un burbujeo en
los diferentes tratamientos, estas burbujas son básicamente oxígeno que se desprende de la
reacción entre las moléculas de peróxido de hidrógeno y la enzima, que la degrada en agua y
oxígeno molecular que se libera en forma de gas. la magnitud de cada burbujeo dependerá
entonces​ ​de​ ​la​ ​velocidad​ ​de​ ​cada​ ​reacción.
CUESTIONARIO

1. Cual​ ​es​ ​la​ ​temperatura​ ​óptima​ ​para​ ​la​ ​enzima;​ ​porque?

La temperatura óptima para la mayoría de las enzimas está en el rango entre los 35 y 40ºC,
estas​ ​comienzan​ ​a​ ​desnaturalizarse​ ​por​ ​encima​ ​de​ ​los​ ​40ºC.​ ​(5)
2. Porque​ ​la​ ​enzima​ ​quedó​ ​desactivada​ ​con​ ​el​ ​agua​ ​en​ ​ebullición?
Al aumentar la temperatura a 90° C, los choques entre las moléculas se van a acrecentar de tal
forma que la enzima se va a desnaturalizar. Es por ello que se presume que no se observaron
cambios​ ​en​ ​el​ ​tubo.​ ​(9)
3. A​ ​qué​ ​se​ ​debe​ ​la​ ​baja​ ​actividad​ ​enzimática​ ​en​ ​la​ ​temperatura​ ​baja​ ​(Hielo)?
Al disminuir demasiado la temperatura, los choques entre las moléculas disminuyen también,
por lo que la actividad enzimática baja hasta el punto en el que no se puede ver en el
experimento​.​ ​(9)

4. Que​ ​es​ ​la​ ​solución​ ​patrón?

la solución patrón es una disolución de una sustancia utilizada como referencia para valorar o
estandarizar otra disolución. ​tienen un lugar muy importante en los métodos de análisis por
titulación. existen dos tipos de soluciones patrón: ​Un patrón primario es un compuesto de
alta pureza que sirve de referencia en todos los métodos volumétricos y gravimétricos. La
exactitud de un método depende de las propiedades de este compuesto. (8) ​un ​patrón
secundario es llamado también disolución valorante o estándar secundario. Su nombre se
debe a que en la mayoría de los casos se necesita del ​patrón primario para conocer su
concentración​ ​exacta.​ ​(4​)

5. Qué​ ​otros​ ​factores​ ​del​ ​medio​ ​pueden​ ​afectar​ ​la​ ​reacción​ ​enzimática?
EFECTO DEL pH​: el pH es otro factor que influye en la actividad enzimática, debido a que
el pH influye en la ionización de los grupos funcionales de los aminoácidos que forman la
proteína enzimática. Cada enzima realiza su acción dentro de un determinado intervalo de
pH, dentro de este intervalo habrá un pH óptimo donde la actividad enzimática será máxima.
Por debajo del pH mínimo o por encima del pH máximo el enzima se inactiva ya que se
desnaturaliza.​ ​En​ ​la​ ​mayoría​ ​de​ ​las​ ​enzimas​ ​el​ ​pH​ ​óptimo​ ​está​ ​próximo​ ​a​ ​la​ ​neutralidad​ ​(9)
CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO: ​al aumentar la concentración de sustrato, la
actividad enzimática aumenta, hasta alcanzar la velocidad máxima, punto donde la enzima se
satura,​ ​debido​ ​a​ ​que​ ​las​ ​enzimas​ ​tienen​ ​todos​ ​sus​ ​sitios​ ​activos​ ​ocupados​ ​(1​ ​)
MECANISMOS REGULADORES​: la actividad de las enzimas está regulada por múltiples
mecanismos, que pueden tener un efecto positivo o negativo, según las necesidades celulares:
Clivaje proteolítico, alosterismo, modulación covalente, regulación de la expresión (síntesis)
de​ ​la​ ​enzima​ ​a​ ​nivel​ ​de​ ​la​ ​transcripción​ ​y​ ​degradación​ ​de​ ​la​ ​propia​ ​enzima.(5)

REFERENCIAS
1. Blog de Bilogia; Factores que afectan la actividad enzimática; Tomado de
https://www.blogdebiologia.com/factores-que-afectan-la-actividad-enzimatica.htm el
30​ ​de​ ​septiembre​ ​de​ ​2017
2. Currea, Camilo A.; Martinez, Sergio A. (2011) La enzima catalasa y su acción en
tejidos animales y vegetales. [En línea] Tomado de <https://es.scribd.com> el 30 de
septiembre​ ​de​ ​2017
3. Hadju J, Wyss SR, Aebi H. ​Properties of human erythrocyte catalases after
crosslinking with bifunctional reagents: symmetry of the quaternary structur​e. Eur J
Biochem​ ​1977;​ ​80:199-207
4. Hernandez Erika;8 de junio de 2011; ANALISIS VOLUMETRICO; Tomado de
http://quimicaanaliticabioanalisis.blogspot.com.co/2011/06/analisis-volumetrico.html
el​ ​30​ ​de​ ​septiembre​ ​de​ ​2017
5. J.Peche; Venezuela; Factores que afectan la actividad de las enzimas; PDF; Tomado
de
http://www.academia.edu/15310442/Factores_que_afectan_la_actividad_de_las_enzi
mas​​ ​ ​el​ ​30​ ​de​ ​septiembre​ ​de​ ​2017
6. Luz Maria; 16 de Julio de 2014; CATALIZADORES; Puebla sigue; Quimica;
Tomado de ​http://preparatoriaabiertapuebla.com/catalizadores/ el 30 de septiembre
de​ ​2017
7. Morgado enrique; Catalasa; PDF; Tomado de
http://www.academia.edu/17011508/Catalasa​​ ​ ​el​ ​30​ ​de​ ​septiembre​ ​de​ ​2017
8. Neetescuela; CINE, EDUCACIÓN, ESCUELA, QUÍMICA; Soluciones patrón;
Tomado​ ​de​ ​https://neetescuela.org/soluciones-patron/​​ ​ ​el​ ​30​ ​de​ ​septiembre​ ​de​ ​2017
9. Ruiz Yohandry; Informe de actividad ;DOCX; Tomado de enzimatica
http://www.academia.edu/9180412/Informe_de_actividad_enzimatica el 30 de
septiembre​ ​de​ ​2017

10. Science Project: Catalase Enzyme Activity; Tomado de

https://www.education.com/science-fair/article/catalase-enzyme-activity/ el 30 de
septiembre​ ​de​ ​2017

11. Yano, S., & Yano, N. (2002). Regulation of catalase enzyme activity by cell signaling
molecules.​ ​Molecular​ ​and​ ​Cellular​ ​Biochemistry,​ ​240(1-2),​ ​119-13O