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Empresa norteameri-
cana con acreditación ISO 9001: 2000 .
El mismo fabricante de los kits VERATOX histamina y REVEAL histami-
na.
AHORA no necesita ser un experto en Laboratorio para detectar en forma muy rápida y segura Histamina en pescado y conservas.
VENTAJAS.
Combina lo mejor de la tecnología de los métodos producidos por Neogen Corp, para dar lugar a un método de 3 pasos que da
resultados 5 minutos después de obtener el extracto. Es el método mas rápido presente en el mercado.
METODO DE TRABAJO
PREPARACION DE LA MUESTRA.
Peces histamínicos grandes: La sección anterior y baja del lomo es la mas representativa ( FDA . Fish and Fishery Products Hazards and
Controls Guidance. Fourth Edition – April 2011)
Atún enlatado (Conserva de pescado). AOAC937.07b: Coloque todo el contenido de la lata, tanto la carne como el líquido, en la mezcla-
dora. Mezcle hasta que adquiera una consistencia homogénea. Almacene las muestras a una temperatura de 2 a 8 °C hasta su rápido
análisis.
Nota: La norma FDA anterior indicaba tomar 3 pedazos de tejido como representativo de 1 pez
Peces histaminicos AOAC 937.07ª: Limpie y eviscere tres pescados. Haga tres cortes transversales de 2,5 cm (1 pulgada) de grosor: uno
detrás de las aletas pectorales, otro a la mitad del orificio de respiración y el tercero detrás del orificio de respiración. Retire los huesos de
las rebanadas, mezcle o muela o corte muy finamente las muestras combinadas hasta que sean homogéneas. Almacene las muestras a
una temperatura de 2 a 8 °C hasta su rápido análisis.
** Siempre consulte con el Inspector Sanipez que visite su planta en cuanto a la toma de muestra y el equipamiento necesario para
procesarla
METODO DE TRABAJO
1.- OBTENCION DEL EXTRACTO FILTRADO
En un frasco plástico con tapa, adicione 10 gramos de muestra representativa previamente homogenizada. Agregue 190 ml de agua
destilada.
A. Si está evaluando 1 o pocas muestras agite manualmente el o los frascos con la mezcla en forma continua durante 2 minutos
o más. Esperar 1-2 minutos a que aparezca sobrenadante. Filtrar solo el sobrenadante.
B. Si está evaluando muchas muestras a la vez, use este método , el cual le permite trabajar muchos frascos en forma manual:
Ponga el timer o cronometro a 5 minutos. Agitar vigorosamente por 20 segundos el primer frasco. Al termino agite vigorosa-
mente por 20 segundos el segundo frasco y asi sucesivamente. . Si le queda tiempo espere a que se complete los 5 minutos.
Comenzar a agitar nuevamente cada uno de los frascos por 20 segundos. Esperar a que se completen los 5 minutos. Comenzar
a agitar nuevamente cada uno de los frascos por 20 segundos. Esperar hasta que observe que se ha producido sobrenadante .
Filtrar solo el sobrenadante.
C. Si usa licuadora o un equipo
profesional de agitación de frascos.
El tiempo total de agitación es 1
minuto. Esperar a que aparezca so-
brenadante. Filtrar solo el sobrena-
dante
Como filtrar? Coloque la jeringa con
filtro encima de un tubo , saque el
embolo de la jeringa y agregue solo
el sobrenadante dentro de la jeringa con filtro (si no sabe cómo fabricarlas…. consulte con nosotros). Ponga el embolo y presione para
que pase algo de extracto filtrado hacia el tubo.
En el kit de extracción se incluye frascos plásticos con tapa, jeringas con filtro y tubos con tapa para recibir extracto filtrado. Los
materiales se pueden lavar y reusar. También puede filtrar usando embudo y papel de filtración rápida.
Nota: Agua es agua destilada o Agua San luis sin gas o similar. No usar agua de caño o agua desionizada o agua destilada para batería.
Si usa el agua incorrecta tendrá resultados anormalmente altos.
Nivel de histamina a detectar Dilución de la muestra filtrada en el frasco pre-llenado con los 7 ml de diluente de
muestra.
100 ppm Colocar 50 ul de sobrenadante el frasco etiqueta azul . Tape y agite hasta mezclar.
50 ppm Colocar 100 µl de sobrenadante en el frasco etiqueta azul. Tape y agite hasta mezclar.
25 ppm Colocar 200 µl de sobrenadante en el frasco etiqueta azul. Tape y agite hasta mezclar
16 ppm Colocar 300 µl de sobrenadante en el frasco etiqueta azul. Tape y agite hasta mezclar.
3.– LA PRUEBA EN SI
Usando 1 punta de pipeta nueva por cada muestra transfiera 200 ul (son 2 pipeteadas con la pipeta de 100 ul)
del frasco etiqueta azul donde mezclo el sobrenadante filtrado con el buffer , hacia la copa para extracto de
muestra que viene en el kit
Coloque la unidad de detección en su correspondiente copa. Observe que la tira de detección tiene un extre-
mo con la imagen de 2 flechas lo que indica que esa sección se sumerge.
La tira (unidad de detección ) debe permanecer exactamente 5 minutos dentro de la copa.
(En ese lapso de tiempo, notara que la tira comienza a absorber el líquido y casi hacia el final del tiempo
observara la aparición de la ó las línea de color)
En este caso como la intensidad de color es igual o más Si corrió la prueba a 25 ppm, entonces el
intensa a la línea Control, el resultado es que la muestra resultado es que la muestra evaluada es
mayor a 25 ppm de histamina.
está por debajo de ….
NO HAGA LECTURAS DESPUES DE LOS 6 MINUTOS, PORQUE OBTENDRA RESULTADOS ERRADOS POR
SOBREDESARROLLO DE LA PRUEBA.
INMEDIATAMENTE DESPUES DE QUE UD OBTUVO SU RESULTADO, COLOQUE LA TIRA DENTRO DE PAPEL TOALLA O PAPEL ABSORVEN-
TE DOBLADO VARIAS VECES Y PRESIONE HASTA ELIMINAR TODO RESTO DE LIQUIDOS QUE QUEDE DENTRO DE LA TIRA . CAMBIE EL
PAPEL Y REPITA EL PASO ANTERIOR HASTA ASEGURARSE DE QUE LA TIRA ESTE REALMENTE SECA A FIN DE QUE LOS COLORES OB-
TENIDOS PERSISTAN POR ALGUNOS MESES