EFEITO DO ÁCIDO JASMÔNICO NA ATIVIDADE DE
LIPOXIGENASES DE PLANTAS DE SOJA [Glycine max (L.) Merrill]
MARIA GORETI DE ALMEIDA OLIVEIRA2
RESUMO – Lipoxigenases (LOX) de plantas são associ-
adas a importantes processos fisiológicos, tais como:
crescimento e desenvolvimento, senescência, biossínte-
se de moléculas regulatórias, resposta a ferimentos e da-
nos causados por insetos-praga e patógenos. Essas iso-
enzimas são encontradas em diferentes tecidos da planta
com diferentes níveis de expressão. Considerando a e-
xistência de múltiplas formas de lipoxigenases em dife-
rentes órgãos da planta de soja, com este trabalho avali-
ou-se a capacidade dessa planta em responder ao trata-
mento com ácido jasmônico (JA) pela “Via das Lipoxige-
nases”, tendo sido realizada a caracterização bioquímica
e cinética do “pool” de lipoxigenases. O ácido jasmônico
é um composto derivado da via das lipoxigenases e pos-
sui atividade de fitohormônio, sendo reconhecido como
molécula sinalizadora sintetizada por plantas em respos-
ta a ferimentos, herbívoros e ataque de patógenos. Utili-
TERMOS PARA INDEXAÇÃO: Lipoxigenases foliares, ácido jasmônico, soja, Glycine max.
EFFECT OF JASMONIC ACID ON LYPOXYGENASES
ACTIVITY OF SOYBEAN PLANT [Glycine max (L.) Merrill]
ABSTRACT – Lipoxygenases (LOX) of plants are
associated to physiological process such as: growth and
development, senescence, biosynthesis of regulatory
molecules and response to injury and damage caused by
insect-pests and pathogens. These isoenzymes have
been found in different plant tissues with different
1. Estudante de Mestrado, DBB/BIOAGRO-UFV, MG.
2. DS, Professor Adjunto IV, DBB/BIOAGRO-UFV, MG.
3. MS, DBB/BIOAGRO-UFV, MG.
4. MS, Técnico de Nível Superior, BIOAGRO-UFV, MG.
5. Ph.D., Estudante de Pós-Doutorado, DBB/BIOAGRO-UFV, MG.
GIORDANI DE OLIVEIRA1
CHRISTIANO VIEIRA PIRES 1
ROSA BÁRBARA BATISTA3
NEWTON DENIZ PIOVESAN 4
MARIA REGINA ARAÚJO GOMES 5
EVERALDO GONÇALVES BARROS 6
MAURÍLIO ALVES MORREIA7
zaram-se dois genótipos de soja para a realização das
análises: uma variedade que possui as três lipoxigenases
de semente (IAC-100) e uma linhagem desprovida das
três lipoxigenases de semente (IAC-100 TN). As plantas
foram tratadas com JA em solução 0,01% (v/v) de Triton
X-100 em água, no início do estádio V2 de crescimento,
até atingirem o estádio V3. Pelos resultados do estudo
bioquímico e cinético, revelaram-se dois picos acentua-
dos de atividade de LOX a pH 4,5 e 6,5, com temperatura
ótima de atividade a 25ºC. Pelos dados de cinética enzi-
mática, constatou-se aumento de atividade de lipoxige-
nases quando tratada com ácido jasmônico nos dois ge-
nótipos analisados, sugerindo uma resposta da planta
ao tratamento utilizado. Verificou-se, assim, que a remo-
ção de LOX de sementes não interferiu na expressão de
LOX de folhas que atuam no mecanismo de defesa da
planta de soja.
expression levels. Considering the existence of multiple
forms of lipoxygenases in different organs of soybean
plant, this work evaluated the capacity of this plant to
respond to jasmonic acid (JA) treatment by
lipoxygenases pathway. The kinetic and biochemical
characterization of the “pool” of lipoxygenases were
1144
6. Ph.D., Professor Titular, DBG/BIOAGRO-UFV, MG.
7. Ph.D., Professor Titular, DBB/BIOAGRO-UFV, MG.
determined. The jasmonic acid is a compound derived
from lipoxy genases pathway and has phytohormone
activity being recognized as signaling molecules
synthesized by plants in response to injury, herbivores
and attack by pathogens. Two cultivars of soybean were
used in the analyses: one known to have three seed
lipoxygenases (IAC-100) and the other devoid of these
three seed lipoxygenases (IAC-100 TN). The plants were
treated with jasmonic acid in aqueous solution of Triton
X-100 0.01% (v/v) at the beginning of the development
stage V2, up to the stage V3. The results of the
INDEX TERMS: Leaf lipoxygenases, jasmonic acid, soybean, Glycine max.
INTRODUÇÃO
Lipoxigenases são isoenzimas (E.C. 1.13.11.12)
que catalisam a dioxigenação de ácidos graxos poliinstu-
rados contendo o sistema cis,cis -1,4-pentadieno para
formação dos respectivos derivados hidroperóxidos, o-
riginando moléculas reativas, com atividades fisiológicas
pronunciadas. Duas principais vias para o metabolismo
de hidroperóxidos produzidos por essas isoenzimas,
chamadas de “Via das Lipoxigenases”, vêm sendo pro-
postas para plantas superiores (Vick & Zimmerman,
1976; Grimes et al., 1992; Farmer & Ryan, 1992), nas quais
apenas alguns intermediários foram identificados até o
momento.
Os hidroperóxidos formados são posteriormente
metabolizados em plantas por diferentes enzimas, inclu-
indo hidroperóxido liase, dehidrase e peroxigenase. Hi-
droperóxido liase produz aldeídos voláteis e oxiácidos
que, juntamente com seus metabólitos, são comp onen-
tes das características sabor e odor de frutos e folhas.
Tem sido proposto que os aldeídos fo rmados pela ação
da lipoxigenase inibem o crescimento de fungos, insetos
e protozoários e ainda poderiam estar agindo como um
sinal químico na atração do inimigo natural do herbívoro
para a planta danificada. Outra rota de ação das lipoxi-
genases é a formação de ácidos graxos cíclicos deriva-
dos do ácido 13-hidroperóxilinolênico, que são precurso-
res da síntese de ácido jasmônico. O ácido jasmônico,
um composto derivado da “Via das Lipoxigenases”, tem
atividade de fitohormônio e é reconhecido como molécu-
la sinalizadora sintetizada por plantas em resposta a fe-
rimentos, herbívoros e ataque de patógenos (Creelman
et al., 1992; Farmer & Ryan, 1992; Mueller, 1997). Dentre
os vários efeitos fisiológicos descritos para o ácido jas-
mônico e seu metil éster em plantas de soja [Glycine max
Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002
biochemical and kinetic studies showed two pronounced
peaks of lipoxygenase activity at pH 4.5 and pH 6.5, with
temperature optimum at 25oC. The enzymatic kinetic data
showed an increase on lipoxygenases activity when
treated with jasmonic acid for the two cultivars analysed,
sugges ting a response of the plant to the treatment
used. It was verified that the removal of LOX from the
seeds did not interfere in the expression of LOX in the
leaves, which act in the defense mechanism of soybean
plants.
(L.) Merrill], podem ser citados: a regulação da expressão
de genes que codificam proteínas de reserva vegetativa
(Anderson et al., 1989), a transdução de sinais relacio-
nados a estresses, a indução gênica de inibidores de
proteases (Franceschi & Grimes, 1991) e o aumento dos
níveis dos transcritos e da atividade de lipoxigenase em
plântulas e em folhas de soja (Grimes et al., 1992; Sara-
vitz & Siedow, 1996).
A traumatina, conhecida como hormônio do feri-
mento, e o ácido traumático são também produzidos pela
"Via das Lipoxigenases" e podem estar envolvidos no
processo de sinalização celular em resposta a ferimentos
em plantas.
As lipoxigenases são amplamente distribuídas na
natureza, sendo encontradas em plantas, animais superi-
ores, fungos e leveduras. Apesar de as lipoxigenases s e-
rem encontradas em muitos tecidos, os níveis de expres-
são variam bastante. Em soja, sua atividade também va-
ria de acordo com o estádio de desenvolvimento da
planta.
Sekiya et al. (1983), estudando atividade de lipo-
xigenase de folhas de 28 espécies de plantas, demonstra-
ram que a soja está entre as que apresentam maiores va-
lores de atividade. Grayburn et al. (1991) observaram a
presença de pelo menos três isoenzimas de lipoxigena-
ses em folhas, que são diferentes das encontradas em
sementes, e pelo menos uma é diferente das encontradas
em hipocótilos/radículas de plantas de soja.
Hildebrand et al. (1988) e Zhuang et al. (1992), e-
xaminando a expressão dessas is oenzimas de soja em di-
ferentes estádios de desenvolvimento, verificaram que
as maiores atividades ocorrem, em geral, nas folhas mais
jovens. Saravitz & Siedow (1995) constataram que a
concentração das isoenzimas lipoxigenases decresce a-
centuadamente com a idade das folhas, mas que as for-

mas mais acídicas são mais abundantes em folhas com
idade intermediária. Após ferimentos, as mesmas isoen-
zimas acídicas apresentaram um considerado aumento
de atividade, quando comparadas com plantas normais.
As lipoxigenases de semente de soja afetam as
propriedades e qualidades de produtos alimentícios de-
rivados, particularmente pela sua participação na forma-
ção dos compostos responsáveis pelos sabores indese-
jáveis, chamado de “beany flavor”, característicos des-
ses produtos. O “beany flavor” origina-se da associação
de compostos carbonílicos de cadeia curta com a fração
protéica. Esses compostos orgânicos são produtos fi-
nais de uma série de reações, que se inicia com a hidro-
peroxidação de ácidos graxos poliinsaturados, catalisada
por lipoxigenase.
Considerando a existência de múltiplas formas de
lipoxigenases em diferentes órgãos da planta de soja,
torna-se cada vez mais importante a caracterização bio-
química e cinética das isoenzimas de lipoxigenase, em
especial daquelas presentes nas folhas e, conseqüente-
mente, o conhecimento das suas funções bioquímico-
genéticas e fisiológicas relacionadas às funções de defe-
sa das plantas a danos causados por pragas e patóge-
nos e na regulação do metabolismo vegetal pela "Via das
Lipoxigenases".
Objetivos
Caracterizar bioquimicamente e cineticamente o
“pool” de lipoxigenases foliares de plantas de soja sub-
metidas ao tratamento com ácido jasmônico em genóti-
pos normais, ou seja, contendo as três lipoxigenases na
semente (IAC-100), e em outro com ausência completa
de lipoxigenases em suas sementes (IAC-100 TN).
MATERIAL E MÉTODOS
Material Genético
Foram utilizadas plantas de soja da variedade
IAC-100 e do genótipo com ausência de LOX nas se-
mentes (IAC-100 TN). As sementes de IAC-100 foram
fornecidas pelo Departamento de Fitotecnia da Univer-
sidade Federal de Viçosa. O genótipo IAC-100 TN, de-
senvolvido pelo Programa de Melhoramento da Quali-
dade da Soja do BIOAGRO/UFV, é uma linhagem avan-
çada obtida a partir da variedade IAC-100, que se encon-
tra no quinto ciclo de retrocruzamentos. Selecionaram-se
plantas mais semelhantes a IAC-100, com base em suas
características morfológicas. A alta similaridade genética
entre IAC-100 e IAC-100 TN tem sido confirmada por
Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002
1145
meio de análises de DNA, utilizando-se marcadores mo-
leculares do tipo RAPD “Random Amplified Polymo r-
phic DNA”, e também por meio de características feno-
típicas. As plantas foram transferidas para vasos com
capacidade para 4,0 kg de solo e cultivadas em condi-
ções de casa-de-vegetação.
Tratamento com Ácido Jasmônico
Plantas de soja no estádio V3 de desenvolvimen-
to foram submetidas ao tratamento com a solução 0,01%
(v/v) de Triton X-100 em água e ao tratamento com a so-
lução 0,01% (v/v) de Triton X-100 em água contendo
200µL de ácido jasmônico no primeiro trifolíolo. As plan-
tas-controle foram pulverizadas com solução de Triton
X-100 em água. Foram utilizadas na avaliação das ativi-
dades de lipoxigenases e determinação dos parâmetros
cinéticos a primeira folha trifoliolar, para verificar a res-
posta local, e a segunda folha trifoliolar, para verificar a
resposta sistêmica.
Obtenção de Extratos Foliares
O preparo do extrato foliar foi realizado a 4oC, de
acordo com o método de Ohta et al. (1986). E a determi-
nação de proteínas nos extratos foliares foi realizada uti-
lizando-se o método do ácido bicinconínico (Smith et al.
1985).
Determinação da Atividade de Lipoxigenase e
dos Parâmetros Cinéticos
A atividade de lipoxigenases dos extratos foliares
foi determinada utilizando-se ácido linoléico como subs-
trato, segundo o método de Axelrod et al., (1981).
A atividade de lipoxigenases foi determinada em
tampão fosfato de sódio pH 6,0 a 25 oC, utilizando-se á-
cido linoléico como substrato, nas concentrações: 10, 20,
40, 80, 160, 320, 640 e 1280 µM. Os parâmetros cinéticos,
no estado estacionário, foram obtidos por meio da re-
gressão não-linear, utilizando-se o programa de comp u-
tação Enzifitter (Leatherbarrow, 1987).
Efeito da Temperatura
O efeito da temperatura sobre a concentração de
hidroperóxidos formados pela ação da lipoxigenase foi
determinado a 234 nm, pelo método descrito por Axe lrod
et al. (1981) a 20, 25, 35, 40, 45 e 50ºC. A reação foi feita
utilizando-se tampão fosfato 50 mM pH 6,5; ácido lino-
léico como substrato e extrato foliar de soja.
Efeito do pH
1146

O efeito do pH sobre a atividade de lipoxigenases lharam com lipoxigenases foliares de soja, no estádio V4
foi determinado a 234 nm, pelo método descrito por Axe l- de desenvolvimento, dos genótipos IAC-100, IAC-100
rod et al., (1981), em vários valores de pH. Os sistemas- TN e Cristalina, e também aos resultados obtidos por Vi-
tampão utilizados foram os seguintes: ácido cítri- eira et al. (2001), para lipoxigenases foliares de soja, no
co/Na 2HPO4 pH 2,0-2,5, ácido cítrico/citrato de sódio pH estádio V3 de desenvolvimento dos genótipos IAC-100
3,0-3,5, acetato de sódio pH 4,0-4,5; citrato de sódio pH e IAC-100 TN submetidos a ferimento mecânico.
5,0-5,5; fosfato de sódio pH 6,0-6,5-7,0; Tris -HCl pH 7,5- Christopher et al. (1972), utilizando-se ácido lino-
8,0-8,5 e borato de sódio pH 9,0-9,5-10,0. léico como substrato de lipoxigenases de sementes de
soja, demonstraram que a LOX 1 tem atividade máxima
RESULTADOS E DISCUSSÃO em pH 9,5, a LOX 2 em pH 6,5, e a LOX 3 possui máxima
atividade numa ampla faixa de pH, ou seja, de 5,0 a 9,0.
Efeito da Temperatura sobre a Velocidade de
Efeito do pH de vários Sistemas-Tampão sobre a
Formação de Hidroperóxidos do Ácido Linoléico
Atividade de Formação de Hidroperóxidos do Á-
Na Figura 1 são apresentados os perfis de tempe- cido Linoléico
ratura versus a atividade específica de lipoxigenases s o-
Na Figura 2 é apresentado o perfil de pH versus a
bre o ácido linoléico, a pH 6,5, para os genótipos IAC-
atividade de lipoxigenases sobre a formação de hidrope-
100 e IAC-100 TN coletados 24 horas após tratamento
róxidos do ácido linoléico, da segunda folha trifoliolar no
com ácido jasmônico. Os perfis para os demais tempos
estádio V3 de desenvolvimento, de plantas tratadas com
de análise se apresentaram semelhantes aos de 24 horas,
ácido jasmônico e plantas-controle coletadas 48 horas
para os dois genótipos e seus respectivos controles
após a última pulverização.
(dados não-mostrados).
Obtiveram-se dois picos de pH ótimo para as li-
O valor mais acentuado de atividade foi a 25 0C,
poxigenases foliares de plantas de soja, tanto para a va-
para ambos os genótipos e seus respectivos controles.
riedade IAC-100 quanto para a linhagem IAC-100 TN
Observa-se que os valores de atividade de lipoxigenases
submetidas ao tratamento: um pico em pH 4,5 e outro em
apresentaram-se maiores nos tratamentos do que nos
pH 6,5, com o controle apresentando esses mesmos pi-
respectivos controles, em ambos os genótipos analis a-
cos de p H.
dos, a diferentes valores de temperatura. Com esses re-
Na variedade IAC-100, o perfil apresentado no
sultados, sugere-se resposta das plantas de soja ao tra-
gráfico evidencia que a atividade nas folhas submetidas
tamento com ácido jasmônico, através da via das lipoxi-
ao tratamento com JA é maior em quase toda a faixa de
genases.
pH analisado. Já para a linhagem IAC-100 TN, a ativida-
Observa-se ainda que o genótipo IAC-100 TN a-
de foi igual em quase toda a faixa de pH analisado.
presentou maiores valores de atividade do que o genóti-
Os valores de pH ótimo para a formação de hi-
po IAC-100. Por meio desses dados, verifica-se diferença
droperóxidos de ácido linoléico, catalisada pelas lipoxi-
entre o “pool” de lipoxigenases dos dois genótipos ana-
genases de folhas de soja da variedade IAC-100 e da li-
lisados. Possivelmente esse resultado esteja relacionado
nhagem IAC-100 TN submetidas ao tratamento com JA,
ao fato de essas enzimas encontrarem-se organizadas em
estão dentro da faixa de pH ótimo verificada para as lipo-
uma grande família mu ltigênica, que pode resultar em di-
xigenases de outras fontes: Lipoxigenases das varieda-
ferentes tecidos, na presença de um complexo de isoen-
des IAC-100 e Cristalina, pH ótimo 6,0, linhagem Triplo
zimas lipoxigenases que diferem quanto à especifici-
Nulo, pH ótimo 7,0 (Lanna et al., 1996), lipoxigenases de
dade pelo substrato, parâmetros físico-químicos e ciné-
tubérculos de batata, pH ótimo 5,5-6,0 (Galliard & Phil-
ticos. Estima-se que o genoma de soja contém de 10 a 12
lps, 1971), lipoxigenases de semente de girassol, pH óti-
genes que expressam lipoxigenases (Koetje & Grimes,
mo 6,2 (Leoni et al., 1985) e lipoxigenases de pimentão,
1992).
pH ótimo 6,5 (Minguez-Mosqueira et al., 1993).
Os dados deste trabalho são semelhantes aos re-
sultados obtidos por Lanna et al. (1996), quando
trabalharam com lipoxigenases foliares de soja, no

60

50
Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002
40
-1
V, nM.s

30
 1147

 Ä
(  ) representa a atividade de lipoxigenase das plantas IAC-100 TN tratadas com ácido jasmônico
  ) representa a atividade de lipoxigenase das plantas IAC-100 TN controle
(
 O
(  ) representa a atividade de lipoxigenase das plantas IAC-100 tratadas com ácido jasmônico
  ) representa a atividade de lipoxigenase das plantas IAC-100 controle
(

FIGURA 1 – Efeito da temperatura sobre a atividade de lipoxigenases de folhas de soja, 24 horas após tratamento
com ácido jasmônico.

Estudo Cinético das Lipoxigenases de Folhas de
Soja da Variedade IAC-100 e da Linhagem IAC-
100 TN Submetidas ao Tratamento com Ácido
Jasmônico
Na Figura 3 verifica-se o gráfico de Michaelis -
Menten da atividade de lipoxigenase sobre o ácido lino-
léico, a pH 6,5, da variedade IAC-100 (folíolos da segun-
da folha trifoliolar, estádio V3 de desenvolvimento), em
resposta ao tratamento com a solução 0,01% (v/v) de
Triton X-100 em água e em resposta ao tratamento com
ácido jasmônico.
A atividade de lipoxigenases da linhagem IAC-
100 TN também segue a cinética de Michaelis -Menten
(dados não mostrados). As lipoxigenases foliares dos
dois genótipos seguem cinética de Michaelis -Menten,
demonstrando curva hiperbólica de velocidade versus
concentração de substrato, nas concentrações de subs-
trato analisadas nos exp erimentos, para todos os tempos
estudados.
Determinação dos Parâmetros Cinéticos
No quadro 1 são apresentados os valores de KM
appe Vmax app, das isoenzimas de lipoxigenases foliares
presentes na resposta ao tratamento com ácido jasmôni-
co em folhas de plantas de soja da variedade IAC-100 e
da linhagem IAC-100 TN, em pH 6,5.
Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002
Os valores de KM app oscilaram para ambos os ge-
nótipos com o tempo de tratamento. Com esses resulta-
dos, infere-se que ocorreu uma resposta da planta atra-
vés da “Via das Lipoxigenases”, durante a pulverização.
Na variedade IAC-100, no primeiro trifolíolo, por-
tanto, na resposta local, os valores de KM app aumentaram
após 6 e 12 horas, diminuíram após 24 horas, voltando a
aumentar 48 e 96 horas da última pulverização com a so-
lução 0,01% (v/v) de Triton X-100 em água. Com o trata-
mento contendo ácido jasmônico, os valores de KM app
aumentaram até 48 horas, e após 96 horas, diminuíram.
Entretanto, observam-se menores valores de KM app no
tratamento com ácido jasmônico, o que mostra eficiência
catalítica da enzima. No estádio V3 de desenvolvimento
da variedade IAC-100, o valor de KM app apresenta au-
mento linear até 6 horas após a última pulverização com
a solução de Triton. Com o tratamento com ácido jasmô-
nico, os valores de KM app aumentaram após 6, 12, e 24
horas, diminuíram após 48 horas, voltando a aumentar 96
horas após a última pulverização. Nesses resultados,
observam-se menores valores de KM app no segundo trifo-
líolo, segundo uma resposta sistêmica da planta ao tra-
tamento.
Já na linhagem IAC-100 TN, os valor de KM app
aumentam após 6, 12, 24, 48 horas e diminuíram 96 horas
após a pulverização com a solução 0,01% (v/v) de Triton
X-100 em água, tanto no primeiro trifolíolo quanto no
segundo. Com o tratamento contendo ácido jasmônico,
1148

os valores de KM app aumentaram após 6 e 12 horas, dimi-
nuíram após 24 horas, voltando a aumentar 48 e 96 horas
após o tratamento, tanto para o primeiro trifolíolo quanto
para o segundo trifolíolo. Os valores de. KM app na linha-
gem IAC-100 TN, de uma maneira geral, foram ligeira-
mente maiores que os da variedade IAC-100, sugerindo
eficiência catalítica um pouco menor na linhagem IAC-
100 TN.
Os parâmetros de cinética enzimática mostram
que ocorreu uma resposta da planta de soja ao tratamen-
to com ácido jasmônico.
É possível que a remoção genética das lipoxige-
nases das sementes de soja esteja influenciando na ati-
vidade das lipoxigenases de folhas, pois a resposta ao
tratamento para ambos os genótipos analisados foi dife-
rente. Contudo, essa hipótese deverá ser mais bem estu-
dada, utilizando-se plantas de genótipos resistentes e
susceptíveis, expondo-as ao mesmo tipo de tratamento.
Além disso, as lipoxigenases foliares envolvidas no sis-
tema de defesa da planta não foram purificadas. A elimi-
nação genética das lipoxigenases das sementes não
causou a eliminação total das lipoxigenases de folhas,
mas provocou alterações.

60
A
50

40
-1
V, nM.s

30

20

10

60
B
50

40
V, nM.s-1

30

20

10

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

pH

 O
(  ) representa atividade de lipoxigenase das plantas tratadas com ácido jasmônico
  ) representa atividade de lipoxigenase das plantas controle
(

FIGURA 2 – Efeito do pH sobre a atividade de lipoxigenases de folhas de soja da variedade IAC-100 (A) e da linha-
gem IAC-100 TN (B), 48 horas após tratamento com ácido jasmônico.

Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002

 1149

.
140.00

120.00

100.00

80.00
V, nM.s-1

60.00

40.00

20.00

0.00
0.00 200.00 400.00 600.00 800.00 1000.00 1200.00 1400.00
[S], ì M

FIGURA 3 – Gráfico de Michaelis -Menten para a formação de hidroperóxido do ácido linoléico catalisada pelas lipo-
xigenases de folhas de plantas de soja do genótipo IAC-100, folíolos da segunda folha trifoliolar no estádio V3 de
desenvolvimento, coletadas 48 horas após a última pulverização.

QUADRO 1 – Paramêtros cinéticos, KM aparente (KM app) e velocidade máxima aparente (VMáx.app), das lipoxigenases em
pH 6,5, obtidos por meio de regressão não-linear utilizando o programa de computação Enzifitt (Leatherbarrow, 1987).

Variedade IAC- Variedade IAC- Linhagem IAC- Linhagem IAC-

100 100 100 TN 100 TN
1 o Trifolíolo 2 o Trifolíolo 1 o Trifolíolo 2 o Trifolíolo
Tempo KM app VMáx.app KM app VMáx.app KM app VMáx.app KM app VMáx.app
(horas)
µ M)
(µ (nM.S ) -1
µ M)
(µ (nM.S ) -1
µ M)
(µ (nM.S ) -1
µ M)
(µ (nM.S -1)
59.109(c ) 141.925(c) 52.666(c) 220.681(c) 74.00(c) 144.776(c) 63.246(c) 166.474(c)

Solução 1% (v/v) de Triton em água Solução 1% (v/v) de Triton em água

06 100.56 206.41 51.56 204.48 77.70 168.77 75.93 196.93
12 101.05 206.95 55.83 201.92 97.02 161.77 89.14 156.31
24 46.23 168.12 76.42 254.81 99.85 156.17 98.23 159.91
48 94.38 220.88 86.31 207.76 89.81 175.54 101.35 172.57
96 131.39 175.03 140.28 199.74 73.69 158.29 61.68 186.44
Solução 1% (v/v) de Triton X-100 em água, con- Solução 1% (v/v) de Triton X-100 em água, con-
tendo JÁ tendo JÁ
06 72.90 151.45 56.02 258.29 82.81 189.91 86.81 151.11
12 98.21 144.63 76.43 188.19 83.47 166.33 104.17 100.46
24 97.62 169.17 75.80 215.18 67.01 212.62 49.94 238.43
48 65.78 206.63 52.92 206.09 75.87 204.14 74.42 216.58
96 58.90 190.80 63.30 185.47 81.44 132.95 104.81 115.75

Ciênc. agrotec., Lavras. V.26, n.6, p.1143-1151, nov./dez., 2002

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AGRADECIMENTOS
À FAPEMIG, pelo apoio financeiro.
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