Informe No. 1 de Laboratorio de Bioquímica, Día 26 del Mes 02 de Año 2018.

Universidad de la Amazonia 1

Identificación de Monosacáridos y
Disacáridos
Identification of Monosaccharides and Disaccharides

Autor 1: Jhoam S. Correa Restrepo, Autor 2: Eduar E. Moreno Londoño

Programa de Química, Universidad de la Amazonia, Florencia, Caquetá, Colombia
Dirigido a: Química M.Sc. Alejandra Marina Duarte Puentes
Correo-e: al.duarte@udla.edu.co

Resumen— Se analizaron diferentes soluciones que contenían
mono, disacáridos y soluciones desconocidas en su momento, con
ayuda de las reacciones propias de los carbohidratos se
determinó para la mayoría de los casos la composición
cualitativa de las sustancias, generando la mayor confianza el
ensayo de Molisch que logro diferenciar entre carbohidrato y la
proteína. Se recomienda hacer uso de soluciones patrón en
prácticas posteriores de este tipo para la generar la certeza de
que no hay incongruencias. una mejor secuencia para el
reconocimiento y diferenciación de carbohidratos de manera
esquemática.
también impiden que la proteína se utilice como fuente de
energía y permiten el metabolismo de las grasas.
Los carbohidratos son macronutrientes, lo que significa que
son una de las tres formas principales en que el cuerpo obtiene
energía o calorías, hay tres macronutrientes: carbohidratos,
proteínas y grasas. Los macronutrientes son esenciales para el
correcto funcionamiento del cuerpo, y el cuerpo requiere
grandes cantidades de ellos.

Palabras clave— Carbohidratos, Disacárido, Monosacárido. Es importante determinar el tipo y la concentración de

carbohidratos en los alimentos por varias razones:

I. OBJETIVO a) Estándares de identidad: los alimentos deben tener

Determinar la composición cualitativa en mono y disacáridos
de una muestra desconocida mediante el empleo de las
reacciones propias de los carbohidratos.
II. INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son uno de los componentes más
importantes en muchos alimentos y son una de las más
importantes clases de moléculas constituyentes de los
organismos, son los compuestos orgánicos más abundantes de
la biosfera y a su vez los más diversos. Pueden estar presentes
como moléculas aisladas o pueden estar asociados físicamente
o unidos químicamente a otras moléculas, las moléculas
individuales se pueden clasificar según el número de
monómeros que contienen como monosacáridos,
oligosacáridos o polisacáridos
Son complejos terciarios en los cuales el hidrógeno y el
oxígeno están en igual proporción que el agua. Los
carbohidratos proporcionan combustible para el sistema
nervioso central y energía para los músculos que trabajan,
composiciones que se ajusten a las regulaciones
gubernamentales.
b) Etiquetado nutricional: para informar a los
consumidores sobre el contenido nutricional de los
alimentos.
c) Detección de adulteración: cada tipo de alimento
tiene una "huella dactilar" de carbohidratos.
d) Calidad de los alimentos: las propiedades
fisicoquímicas de los alimentos tales como dulzura,
apariencia, estabilidad y textura dependen del tipo y
concentración de carbohidratos presentes.
e) Económico: la industria no quiere regalar
ingredientes caros.
f) Procesamiento de alimentos: la eficiencia de muchas
operaciones de procesamiento de alimentos depende
del tipo y concentración de carbohidratos que están
presentes.

Fecha de Recepción: (Letra Times New Roman de 8 puntos)

Fecha de Aceptación: Dejar en blanco
2 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira.
Los carbohidratos se clasifican en monosacáridos (Aldosas y
Cetosas), Oligosacáridos (Disacáridos y Trisacáridos a
Decasacáridos) y Polisacáridos, véase la figura 1.
Fig. 1. Clasificación de carbohidratos.
La sacarosa o conocido como nombre común azúcar es un
disacárido formado por la unión de la fructosa y la glucosa.
Figura 2.
Fig. 2. Estructura de la Sacarosa.
III. MARCO TEORICO
Los carbohidratos son derivados aldehídicos o cetónicos de
alcoholes polioxidrilados y por lo tanto tienen las propiedades
características de esos grupos como son la formación de oxina
e hidrazonas. Existen diferentes tipos de reacciones químicas
que sirven para determinar cualitativamente la presencia de
carbohidratos (monosacáridos, disacáridos y polisacáridos).
REACCIONES DE REDUCCIÓN
Reacción de Benedict: Es de los reactivos más utilizados
para la detección de carbohidratos reductores, está compuesto
por sulfato cúprico, citrato y carbonato de sodio, que le
confieren a la solución un pH alcalino y evitan que los iones
cúpricos se reduzcan espontáneamente en presencia del
oxígeno ambiental, por lo tanto aquellas sustancias que posean
poder reductor darán positivo con este reactivo. La reacción
que se presenta es la siguiente:
Fig. 3. Reacción de Benedict: se aprecia que los iones
cúpricos son reducidos a óxido cuproso que es una sustancia
insoluble de color rojo ladrillo
Reacción de Barfoed: Usada para diferenciar los
monosacáridos de los disacáridos, el acetato cúprico en medio
ácido oxida las sustancias reductoras más potentes (los
monosacáridos), pero aquellas que poseen un débil poder
reductor como los disacáridos no lograrán reducir al cobre. Al
tener la solución un pH ácido resulta necesario controlar
rigurosamente el tiempo de la reacción, ya que si éste se
prolongará se produciría la hidrólisis ácida en el disacárido y
se falsearían los resultados.
Fig. 4. Reacción de Barfoed
REACCIONES FURFURÁLICAS
Los ácidos fuertes tienen la propiedad de deshidratar las
moléculas de los monosacáridos, obteniendo un aldehído
cíclico denominado furfural, siendo capaz de condensarse con
algunos compuestos aromáticos y producir complejos
coloreados.
Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira. 3

Fig. 5. La reacción de deshidratación se muestra a

continuación de monosacáridos.

Reacción de Molisch: Usa el ácido sulfúrico como agente

deshidratante y el α–naftol como agente condensante que
posibilita la aparición del color. El color que se observa es
violeta y darán la prueba los monosacáridos con suficientes
átomos de carbono para formar el furfural, así como los
Fig. 7. Reacción de Seliwanoff.
polisacáridos que son hidrolizados por el ácido sulfúrico.
Reacción de Bial: Usa el ácido clorhídrico como agente
deshidratante en presencia de cloruro férrico, en estas
condiciones se deshidratan primero las pentosas y luego las
hexosas, por lo tanto es una prueba de identificación de las
pentosas. El agente condensante es el orcinol, el complejo
formado es de color verde y la reacción se presenta a
continuación:

Fig. 6. Reacción de Molisch.

Fig.8. Reacción de Bial.
Reacción de Seliwanoff: El ácido deshidratante es el ácido
clorhídrico, el mejor agente deshidratante de las cetosas que IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
de las aldosas. Controlando rigurosamente el tiempo del
furfural, se obtendrán de los monosacáridos que presenten Para las reacciones de reducción se procedió de la siguiente
grupos carbonilos secundarios en su estructura. El agente manera.
condensante empleado es el resorcinol.

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1. Las notas de pie de página deberán estar en la página donde se citan. Letra Times New Roman de 8 puntos
4 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira.

Reacción de Benedict 1
Lactosa --- --- --- --- --- ---
Se marcó y preparo siete tubos de ensayo mezclando los mL
volúmenes de cada solución de acuerdo a la tabla 1, se Solución 1
--- --- --- --- --- ---
sometieron los tubos de ensayo durante 5 minutos a un baño desconocida mL
Reactivo de 2 2 2 2 2 2 2
maría y luego se procedió a ver y registrar los resultados. Barfoed mL mL mL mL mL mL mL

Tabla 1 Volúmenes de cada solución para reacción de

Benedict
Tubo Reacción de Molisch
Reactivos Se marcó y preparo siete tubos de ensayo mezclando los
1 2 3 4 5 6 7 volúmenes de cada solución de acuerdo a la tabla 2, se
1
agregaron todos los reactivos excepto el ácido sulfúrico, una
Agua destilada --- --- --- --- --- --- vez se vertieron todos los reactivos en el tubo de ensayo, se
mL
1 procedió a agitarlo y añadió el ácido sulfúrico lentamente por
Glucosa --- --- --- --- --- --- las paredes del tubo y no se volvió a agitar. Se procedió a ver
mL
1 y registrar los resultados.
Fructosa --- --- --- --- --- ---
mL
1 Tabla 3 Volúmenes de cada solución para reacción de Molisch
Sacarosa --- --- --- --- --- ---
mL
1 Tubo
Maltosa --- --- --- --- --- --- Reactivos
mL
1 2 3 4 5 6 7
1
Lactosa --- --- --- --- --- ---
mL 1
Solución Agua destilada --- --- --- --- --- ---
--- --- --- --- --- --- 1 mL mL
desconocida Glucosa --- 2 mL --- --- --- --- ---
Reactivo de 2 2 2 2 2 2
2 mL Sacarosa --- --- 2 mL --- --- --- ---
Benedict mL mL mL mL mL mL
Ribosa --- --- --- 2 mL --- --- ---
Reacción de Barfoed Almidón --- --- --- --- 2 mL --- ---
Se marcó y preparo siete tubos de ensayo mezclando los Albúmina de
--- --- --- --- --- 2 mL ---
volúmenes de cada solución de acuerdo a la tabla 2, se huevo
sometieron los tubos de ensayo durante 5 minutos a un baño Solución
--- --- --- --- --- --- 2 mL
desconocida
maría y luego se procedió a ver y registrar los resultados.
Reactivo de 2 2 2 2 2 2
---
Molisch gotas gotas gotas gotas gotas gotas
Tabla 2 Volúmenes de cada solución para reacción Ácido Sulfúrico
2
2 mL 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL
de Barfoed mL

Tubo Reacción de Seliwanoff

Reactivos Se marcó y preparo siete tubos de ensayo mezclando los
1 2 3 4 5 6 7 volúmenes de cada solución de acuerdo a la tabla 2, se
1 sometieron los tubos de ensayo durante 10 minutos a un baño
Agua destilada --- --- --- --- --- --- maría, luego se retiraron los tubos y se enfriaron bajo un flujo
mL
1 de agua corriente y luego se procedió a ver y registrar los
Glucosa --- --- --- --- --- --- resultados.
mL
1
Fructosa --- --- --- --- --- ---
mL Tabla 4 Volúmenes de cada solución para reacción
1 de Seliwanoff
Sacarosa --- --- --- --- --- ---
mL
1
Maltosa --- --- --- --- --- ---
mL
 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira. 5

Tubo
Reactivos
1 2 3 4 5 6

Agua destilada 1 mL --- --- --- --- ---

Glucosa --- 1 mL --- --- --- ---
Fructosa --- --- 1 mL --- --- ---
Galactosa --- --- --- 1 mL --- ---
Sacarosa --- --- --- --- 1 mL ---
Solución desconocida --- --- --- --- --- 1 mL
Reactivo de Seliwanoff 5mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL

Reacción de Bial
Se marcó y preparo cuatro tubos de ensayo mezclando los
volúmenes de cada solución de acuerdo a la tabla 5, se
sometieron los tubos de ensayo durante 15 minutos a un baño
maría y luego se procedió a ver y registrar los resultados.

Tabla 5 Volúmenes de cada solución para reacción de

Seliwanoff Fig. 9. Resultados de la reacción de Benedict.

Tubo
Tabla 7 Reacción de Barfoed
Reactivos
1 2 3 4 5

Agua destilada 1 mL --- --- --- ---

Glucosa --- 1 mL --- --- ---
Ribosa --- --- 1 mL --- ---
Arabinosa --- --- --- 1 mL ---
Solución desconocida --- --- --- --- ---
Reactivo de Bial 1mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

V. DATOS OBTENIDOS

Tabla 6 Reacción de Benedict

Tubo
Color
Reactivos
1 2 3 4 5 6 7 observado

1 Azul
Agua destilada --- --- --- --- --- ---
mL transparente
1
Glucosa --- --- --- --- --- --- Azul claro
mL
1 Azul
Fructosa --- --- --- --- --- ---
mL verdoso
1
Sacarosa --- --- --- --- --- --- Azul fuerte
mL
1
Maltosa --- --- --- --- --- --- Azul fuerte
mL
1
Lactosa --- --- --- --- --- --- Azul fuerte
mL
Solución 1
--- --- --- --- --- --- Azul fuerte
desconocida mL
Reactivo de 2 2 2 2 2 2 2 Fig. 10. Resultados Reacción de Barfoed.
Benedict mL mL mL mL mL mL mL

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1. Las notas de pie de página deberán estar en la página donde se citan. Letra Times New Roman de 8 puntos
6 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira.

Tabla 8 Reacción de Molisch Tabla 9 Reacción de Seliwanoff

Tubo
Tubo Color
Reactivos
Reactivo Color 1 2 3 4 5 6 Observado
s 1 2 3 4 5 6 7 observado 1
Agua destilada --- --- --- --- --- Incoloro
mL
1 1
Agua Glucosa --- --- --- --- --- Naranja
m --- --- --- --- --- --- Translucido mL
destilada
L 1
2 Fructosa --- --- --- --- --- Rojo ladrillo
Glucosa --- --- --- --- --- --- Café mL
mL 1
2 Galactosa --- --- --- --- --- Naranja
Sacarosa --- --- --- --- --- --- Café oscuro mL
mL 1
2 Sacarosa --- --- --- --- --- Rojo ladrillo
Ribosa --- --- --- --- --- --- Café oscuro mL
mL Solución 1
2 Blanco --- --- --- --- --- Semi oscuro
Almidón --- --- --- --- --- --- desconocida mL
mL amarilloso Reactivo de 5 5 5 5 5
Albúmin 5mL
2 Seliwanoff mL mL mL mL mL
a de --- --- --- --- --- --- Violeta
mL
huevo
Solución
2 Translucido/
descono --- --- --- --- --- ---
mL café-violeta
cida
Reactivo 2 2 2 2 2 2
de --- got got got got got got
Molisch as as as as as as
Ácido 2
2 2 2 2 2 2
Sulfúric m
mL mL mL mL mL mL
o L

Fig. 12. Resultados de la Reacción de Seliwanoff

Tabla 10 Reacción de Bial

Fig. 11. Resultados de la reacción de Molisch

 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira. 7

Tubo Para la reacción de Molisch todas las soluciones se

Color tornaron de un color semejante al violeta, pero con
Reactivos
1 2 3 4 5 Observado variaciones de tonalidad, salvo por las soluciones
etiquetadas con el numero 1 y 5, debido a que la solución
Agua destilada 1 mL --- --- --- --- Translucido
1 corresponde a agua destilada (blanco) y el 5 a albumina
de huevo, la cual es una proteína soluble en agua y no un
Glucosa --- 1 mL --- --- --- Verde tenue carbohidrato. La solución problema (Fructosa) dio
Ribosa --- --- 1 mL --- --- Verde tenue positiva por contener un carbohidrato.
Arabinosa --- --- --- 1 mL --- Incoloro En el ensayo de Seliwanoff el tubo 1 no presento cambio
Verde de color por ser el blanco, el tubo 2 y 4 dieron positivo
Solución desconocida --- --- --- --- ---
amarilloso para cetosas, los tubos 3 y 5 un color rojo indicando la
Reactivo de Bial 1mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL presencia de una cetohexosa (Fructosa) y sacarosa la cual
es un disacárido que contiene un monosacárido de
glucosa y fructosa, la cual es una cetohexosa. La solución
problema contenía lactosa y ribosa, las cuales no poseen
cetohexosas o aldohexosas en su estructura de disacárido.
Para finalizar en el ensayo de Bial se descartaron los
tubos 1 y 4 por su coloración, pero los tubos 2 y 3
presentaron un muy tenue color verde, no es congruente
con la glucosa y positivo en la solución desconocida que
contenía fructosa y lactosa, la cual está conformada por
una unidad de glucosa y una unidad de galactosa, la cual
es una pentosa.

VII. CONCLUSIONES

Una secuencia que permitiría hacer el reconocimiento y

diferenciación de carbohidratos de una manera esquemática
seria la siguiente: ensayo de Molisch, ensayo de Benedict,
ensayo de Barfoed, ensayo de Seliwanoff y ensayo de Bial.

Fig. 13. Resultados de la Reacción de Bial. Con el ensayo de Molisch fue el único con el que logro
identificar correctamente todas las soluciones, indicando las
que contenían carbohidratos y descartando a las demás
VI. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN sustancias.

En la reacción de Benedict todas las sustancias
presentaron coloración azul, indicando la ausencia de
carbohidratos reductores, dando un resultado no esperado,
debido a que la glucosa, fructosa, maltosa, lactosa y
solución problema (glucosa) son carbohidratos
reductores. En cambio, el resultado para la sacarosa si es
un resultado esperado por que no contiene ningún átomo
de carbono anomérico libre, debido a que los carbonos
anoméricos de sus dos unidades de monosacáridos
constituyentes se hallan unidos entre sí, covalentemente
mediante un enlace O-glucosídico.
En la reacción de Barfoed todas las soluciones dieron
resultado negativo a monosacáridos, inclusive a la
solución que contenía glucosa, fructosa. En cambio, para
la sacarosa, maltosa y lactosa dio un resultado congruente
por ser disacáridos, incluyendo a la solución problema
que contenía maltosa y albumina de huevo, al ser proteína
la albumina no interfería con la identificación.
La mayoría de las pruebas presentaron datos incongruentes a
lo esperado, se recomienda hacer uso de soluciones patrón en
practicas posteriores de este tipo para la generar la certeza de
que no hay incongruencias.
VIII. REFERENCIAS
[1]. Jorge. ¿Qué son los carbohidratos?. 23 de febrero del
2018. <https://www.livescience.com/51976-
carbohydrates.html>.
[2]. Miyares.M. CUADERNO DE TRABAJOS
PRACTICOS DE BIOQUIMICA I. Fundación
Universitaria de Boyacá, Centro de Investigaciones
para el desarrollo, CIPADE. 2000.
[3]. CAREY F. QUIMICA ORGÁNICA. Tercera
Edición. Mc Graw Hill. Madrid –España. 1999.

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8 Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira.
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