PREINFORME

CARBOHIDRATOS.

Fenilhidra Seliwan Bial

Molish Fehling
zina off
vel</Pptad N
Glucosa P P P
o>
Vel>/Pptad P
Sacarosa P P P(h)
o<
Pptado y P
Fructuos
P vel N P
a
intermedios
Lactosa P p N P
Galactos N
P P P
a

P = positiva Pptado = precipitado

N = Negativa vel = velocidad

(h) = al hidrolizar >/< = mayor/menor

1. REACCIÓN CON LA FENILHIDRAZINA

Glucosa------mayor precipitado, menor velocidad (precipitado

amarilloso).
Fructosa-------término medio (precipitado amarilloso).
Sacarosa------menor precipitado, mayor velocidad (precipitado
amarilloso).

Aquí un ejemplo de la reacción:

Esta prueba nos permite reconocer las estructuras de los
carbohidratos mediante la reacción con la fenilhidrazina la cual
produce la formación de osazonas al reaccionar con los carbonos 1 y
2 de los α-hidroxialdehídos y las α-hidroxicetona, ya que los tiempos
de formación de estas osazonas, así también sus puntos de fusión y la
forma que toman sus cristales (cristalización) son diferentes
dependiendo del azúcar del cual provengan.

2. PODER REDUCTOR (PRUEBA DE FEHLING)

Glucosa= naranja intenso
lactosa y fructosa = naranja pardo
sacarosa= color verdoso pálido, casi imperceptible

El azúcar más reductor es la glucosa y el menor la sacarosa, la cual

realmente no es azúcar reductora, lo cual indica que tal vez pudo
ocurrir un error, entre ellos el más probable es que hubiera trazas
de un azúcar reductor en la solución de la sacarosa (un tubo de
ensayo mal lavado).

El ensayo con el licor de Fehling se funda en el poder reductor del

grupo carbonilo de un aldehído. Éste se oxida a ácido y reduce la sal
de cobre (II) en medio alcalino a óxido de cobre (I), que forma un
precipitado de color rojo. Si un azúcar reduce el licor de Fehling a
óxido de cobre (I) rojo, se dice que es un azúcar reductor.
Al reaccionar con monosacáridos, se torna verdoso; si lo hace con
disacáridos, toma el color del ladrillo.

Para ilustrar las reacciones me valgo del siguiente hecho:

“Las aldosas reciben el nombre genérico de "azúcares reductores",

reducen oxidantes suaves como los reactivos de Tollens (espejo de
plata), Fehling y Benedic (precipitado. Rojizo de Cu2O). Todo esto se
debe a la presencia de la estructura abierta en el equilibrio de la
ciclación. Un monosacárido con el C1 oxidado a carboxilo, recibe el
nombre de ácido Aldónico.”

O H
CO2K O CO2K
C OH
(CHOH)n + 2 H C O C H C OH
Cu + 2 H2O + + CuO2
H C O (CHOH)n H C OH
CH2OH
CO2Na CH2OH CO2Na
Complejo tártaro-cúprico ácido
R. de Fehling aldónico o
glicónico

Con la glucosa tenemos:

Como también: “Los tres reactivos, Tollens, Fehling y Bénedic, son
básicos, por lo que las cetosas (α-hidroxicetonas) también los
reducen, pues en medio alcalino, estas presentan un equilibrio de
isomerización entre la cetosa y la aldosa con un Enodiol
intermediario.”

enodiol

H H O H O
H C C
- H+
H C OH C O H H C OH + HO C H
- +
OH
C O C O H + H R R
H2O
R R

+
Del H2O Ag (NH3)2 -OH

O- O
C
0
CHOH + Ag
R
*ejemplo con Tollens, que para el caso de Fehling tendría el mismo resultado.

Con la fructosa Esto se puede representar:

 CH2OH CO2- CO2-
C O H C OH HO C H
HO C H + HO C H HO C H 0
Ag (NH3)2
+ + Ag
H C OH H C OH H C OH
-OH
;
H C OH H C OH H C OH
CH2OH CH2OH CH2OH
D- fructosa Aniones de ácidos aldónicos

*ejemplo ilustrativo, ya que para el caso aunque la imagen sea de una reacción de
fructosa con el reactivo de Tollens el resultado final (ácido Aldónico) es el mismo.

La lactosa es un disacárido reductor, se diferencia de la sacarosa

debido a su estructura ya que para que un azúcar sea reductor debe
tener el carbono anomérico desbloqueado. El asunto es que los
monosacáridos que forman la Sacarosa (Glucosa + Fructosa) se
hallan unidos por sus carbonos primarios, con lo cual se ve bloqueado
el carbono anoméricos. Entonces si el carbono anoméricos está
bloqueado, la estructura en forma de anillo no podrá 'abrirse' e
interconvertirse para poder reaccionar con otro compuesto. Por eso la
sacarosa no es reductor.

no reacciona

En cambio la Lactosa (Glucosa + Galactosa) tiene el carbono

anoméricos desbloqueado, por ello puede reaccionar.

reacciona
3. MOLISH
NOTA: En esta reacción no nos fue posible conseguir el resultado por
que probablemente el reactivo Molish fue mal preparado, aunque
investigamos como sería el resultado y encontramos lo siguiente:

Carbohidrato Reacción de Molish

Fructosa Anillo violeta
Glucosa Anillo violeta
Sacarosa Anillo violeta
Galactosa Anillo violeta
También
encontramos esto lo cual nos pareció bastante ilustrativo en la cual se
explica el proceso que no pudimos observar:

“La sacarosa fue la del anillo más débil; los demás dieron un color
intenso en el fondo del tubo

Observamos que la reacción tomo una coloración violeta rojizo

demostrando que es positivo para monosacáridos adema se nota que
la reacción fue exotérmica pues libero calor después de reaccionar.

Al haberse depositado en el fondo del recipiente el ácido sulfúrico

este actúa sobre la glucosa arrancándole una molécula de agua y
volviendo la molécula de glucosa un derivado del furfural en este
caso el hidroximetilenfurufural.

Luego de esa reacción se mezcla con el alfa-naftol en presencia de

ácido sulfúrico atacando la zona del doble enlace del grupo carbonilo
uniéndose en un compuesto mixto pues presenta sustituyentes ácidos
y fenólicos que toma una coloración rojiza violeta en un anillo del
tubo de ensayo.”

En conclusión, TODOS DARIAN POSITIVO. Y es una prueba útil para

saber si una sustancia es o no carbohidrato.
Reacción general hexosas:

Reacción general pentosas:

4. HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA

1. Tomar 3ml de solución de sacarosa y añadir 10 gotas de HCl al

10%.
2. Calentar en baño de maría unos 15 minutos.
3. Dejar enfriar.
4. Neutralizar añadiendo NaOH.
5. Realizar la prueba de Fehling como se indica en el experimento
2.
6. Observar y anotar los resultados.

La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos

libres por lo que carece de poder reductor y la reacción con el licor de
Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en el
experimento 2. Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la
sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se
descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa,
que sí son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrólisis
se realiza con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo,
aparecerá un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrólisis
no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece
una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis
parcial de la sacarosa.
En nuestro caso la hidrólisis no se presento, o mejor, hubo una
hidrólisis parcial, ya que se noto un muy pálido color verdoso (como
el obtenido en la del poder reductor), pero no era muy perceptible, así
que se podría decir que la hidrólisis fue muy escasa o parcial; ya sea
porque no se calentó suficiente tiempo (hicimos los 15 minuto, pero
tal vez debimos dejarlo un poco mas) o necesitábamos usar mas base
para neutralizar la solución y favorecer la reacción.

5. PRUEBA DE BIAL
La prueba de Bial con orcinol en HCl, da una coloración verde-azulada
o simplemente azulada con pentosas. Las hexosas generalmente
producen un color rojizo, pardo o simplemente no presentan
coloración. Sirve para distinguir pentosas en la molécula.

Prueba de Bial reacción de identificación de pentosas

Carbohidrato Reacción de Bial

Xilosa Verde azulado
lactosa Negativo
Ribosa Verde azulado
6. ENSAYO DE SELIWANOFF

El resorcinol condensa con los furfurales derivados de cetosas

originando un color
Rosado- rojizo en aldosas y rojo intenso en cetosas, (en la sacarosa
obtuvimos un color naranja esto se debe a la mezcla de aldosa y
pentosa en la molécula del disacárido). Este fenómeno es
desencadenado porque las cetosas se deshidratan a mayor velocidad
que las aldosas.

Prueba de Seliwanoff:
Carbohidratos Coloración Positivo Negativo
Fructosa Transparente X

Sacarosa Naranja X

Glucosa Rojizo X

Prueba de Seliwanoff reacción de identificación de

cetohexosas

CONCLUSIONES

Al realizar la prueba con el reactivo de Molish, observamos que todos

los reactivos que se encuentran dentro de los tubos de ensayo
reaccionan. Por lo tanto, podemos concluir que el reactivo de Molish
sirve para identificar cualquier carbohidrato, y sirve como primera
prueba para reconocer carbohidratos.

El reactivo de Fehling es una disolución que se utiliza como reactivo

para la determinación de azúcares reductores, las cuales tienen el
carbono anomérico desbloqueado. A nivel clínico sirve para demostrar
la presencia de glucosa en la orina.
La sacarosa no es azúcar reductor debido a que su enlace de unión
entre las moléculas de glucosa y fructosa tiene el carbono anomérico
bloqueado. Pero al hidrolizarla con ácido esta se descompone en sus
monosacáridos esenciales los cuales si son reductores dando positiva
en la prueba de oxidación. A nivel metabólico esta hidrólisis la hacen
las enzimas y no se produce en el estomago, y si se presenta es en
muy baja concentración debido a que para la hidrólisis por el ácido
clorhídrico del estomago se necesitaría aumentar la temperatura lo
cual no es factible o biológicamente apto; estas enzimas son
sensibles al pH por eso solo se presentan en medio neutro o poco
básico, como en la boca e intestino, conociendo el hecho que las
enzimas disminuyen la energía de activación de la reacción, que en
español significa que evita el aumento de temperatura.

Los carbohidratos son la principal fuente de energía del organismo

por ser los que más rápidos se absorben por su rápida
metabolización (desdoblamiento de disacáridos, y polisacáridos por
enzimas especificas para cada tipo de azúcar, sacarasa para
sacarosa, lactasa para lactosa) y son indispensables para el
funcionamiento de los sistemas, principalmente el nervioso muscular
y sanguíneo.

La prueba con la fenilhidrazina nos permite reconocer las estructuras

de los carbohidratos mediante la formación de osazonas al
reaccionar con las α-hidroxialdehídos y las α-hidroxicetona, las cuales
difieren en el tiempo de formación, la cantidad de precipitado, puntos
de fusión y cristalización.

La prueba de Bial nos sirve para distinguir si una sustancia posee

pentosas, siendo el resultado positivo una coloración azulada o azul-
verdosa.

La prueba de Seliwanoff nos sirve para distinguir si una sustancia

posee hexosas, siendo el resultado positivo una coloración rosada-
rojiza, rojo intenso o naranja.

BIBLIOGRAFIA

Brown William H. Introducción a la química orgánica. Edición 2002.

Editorial C.E.C.S.A. 2002

Murray, R. Et al (1997): BIOQUIMICA DE HARPER; Editorial El Manual

Moderno. México.

Castro et al (1996): Actualizaciones en Biología. Eudeba. Buenos

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Restrepo Merino, Fabio; Restrepo Merino, Jairo. Hola, química
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Medellín: Susaeta, c1989 (540 R436 V.2

Muñoz E (1988): Propiedades químicas de los azúcares. En Lozano

JA, Tudela J (eds): Prácticas de bioquímica. Experimentación y
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