Carbohydrate Polymers 181 (2018) 752-759

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Polímeros de carbohidratos

revista Página de inicio: www.elsevier.com/locate/carbpol

Caracterización, propiedad antimicrobiana y antioxidante de exopolisacáridos

mediada por nanopartículas de plata sintetizadas por
Streptomyces violaceus Mm72

Palaniappan Sivasankar un , • , Palaniappan Seedevi un , Subramaniam Poongodi segundo ,

Murugesan Sivakumar un , Tamilselvi Murugan do , loganathan Sivakumar un , Kannan Sivakumar segundo ,
Thangavel Balasubramanian segundo
un Departamento de Ciencias Ambientales, Universidad de Periyar, Periyar Palkalai Nagar, Salem, 636 011, Tamil Nadu, India
segundo Centro de Estudios Avanzados en Biología Marina, Facultad de Ciencias del Mar, Universidad Annamalai, Parangipettai, 608 502, Tamil Nadu, India
do Departamento de Zoología de la Universidad Estatal de Arte, Coimbatore, 641 018, Tamil Nadu, India

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO ABSTRACTO

palabras clave: Verde la síntesis de nanopartículas de plata (SNP) ha ganado considerable atención en nano-biotecnología y la nanomedicina debido a su potencia y
Exopolisacáridos respeto del medio ambiente. En esto, tenemos en cuenta el exopolisacárido y su síntesis mediada de SNPs y sus actividades biológicas.
nanopartículas de plata Exopolisacárido de la Streptomyces violaceus compuesto de carbohidratos totales (61,4%), ceniza (16,1%), contenido de humedad (1,8%) y con RMN fi
Actividad biológica marina
rma su composición estructural. SNPs sintetizado por el exopolisacárido, con fi rmó mediante UV - vis análisis espectral y caracterizado por TEM y XRD
actinobacterias
análisis. Además, el SNP evaluado por su actividad antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus y Bacillus
subtilis se emplea un disco di ff método usion. El SNPs ha demostrado actividad antibacteriana prometedor se evaluaron para MIC. Además, los SNPs
se ensayaron para determinar las actividades antioxidantes y se encontró que tienen actividad antioxidante prometedor en los estándares. Los
resultados anteriores demuestran que SNPs pueden ser considerados como un fármaco antibacteriano y antioxidante potente en el futuro.

1. Introducción Furuike, y Tamura, 2010 ).

Los polisacáridos de origen marino son los componentes más importantes de microorganismos
marinos, algas y crustáceos ( Raveendran, Poulose, Yoshida, Maekawa, y Kumar, 2013 ). Ha habido
un gran interés en las aplicaciones de la ingeniería biomédica y la nanobiotecnología ( Raveendran,
Yoshida, Maekawa, y Kumar, 2013 ). Las características deseables de los polisacáridos de origen
marino y formas principalmente hidrófilas que son estables, no tóxico, seguro, son fácilmente
biodegradables y fácilmente reproducible ( Lee, Park, y Robinson, 2000 ). polisacáridos marinos,
especialmente exopolisacáridos microbianos (EPS) son bio-polímeros altamente complejos que
contienen proteínas, lípidos y ácidos nucleicos junto con polisacáridos ( Laurienzo de 2010 ). Hoy en
día, polisacárido mediada por la síntesis de nanopartículas ha ganado importancia ya que son
altamente biodegradable, biocompatible, más baratos de producir y no tóxico ( Raveendran, Poulose
et al., 2013 ). Las nanopartículas a base de polisacáridos se utilizan rutinariamente en la ingeniería de
tejidos, tratamiento del cáncer, la administración de fármacos como un portador de fármacos,
vendaje de heridas, tratamiento de aguas residuales, etc. ( Jayakumar, Chennazhi, Nair,
En este contexto, actinobacteria marinos merecen una mención especial, ya que sin problemas
producen novela biológicamente metabolitos activos, tales como inmunosupresor, anti-Proli fi c,
antioxidante y anti-VIH sustancias ( Chater, 1993 ) Que se utilizan comercialmente para diversos
tratamientos ( Manivasagan, Venkatesan, Sivakumar, y Kim, 2014 ). Entre ellos, Streptomyces contribuye>
50-60% de los antibióticos comercializados ( Manivasagan et al., 2014 ). Por lo tanto, la utilización de
actinobacterias marinas han ido ganando en el nano-biotecnología en los últimos tiempos, y las
nanopartículas sintetizadas actinobacterial son ecológicos, más baratos de producir y se puede
utilizar para la producción de diversos biomaterial nano ( Manivasagan, Venkatesan, Senthilkumar,
Sivakumar, y Kim, 2013 ). Mantener importancia de actinobacterias marino y sus metabolitos
biológicamente activos en la mente, en el presente estudio, a la síntesis de nanopartículas de plata
por exopolisacáridos de Streptomyces violaceus
y evaluar sus actividades antibacterianas y antioxidantes.

• Autor correspondiente.

Dirección de correo electrónico: sivasankar.ps@gmail.com (P. Sivasankar).

https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2017.11.082
Recibido el 10 de septiembre de 2017. Recibida en forma 29 de de octubre de 2017 revisado; Aceptado 22 de de noviembre de 2017

Disponible en línea el 23 de noviembre de 2017

0144-8617 / © 2017 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.

P. Sivasankar et al.
2. Materiales y métodos
2.1. El aislamiento y la identi fi cación de cepa
los Streptomyces violaceus Mm72 se aisló del sedimento marino costero de Tuticorin, costa
sudeste de la India. El aislamiento se realizó en placas de agar marino ZoBell (10% NaCl). La cepa
se identi-
fi ed basado en características morfológicas y bioquímicas de acuerdo con el Bergey ' s Manual de
bacteriología determinativa y identi molecular fi cación por Manivasagan et al. (2013) .
2.2. Producción de EPS
la producción de EPS se llevó a cabo según el método de
Manivasagan et al. (2013) . La cepa se inoculó en el medio de producción g / L (10 g de glucosa, 5 g
de triptona, 5 g de extracto de levadura, 3 g de NaCl, 3 g K 2 HPO 4, 1 g KH 2 correos 4, 0,5 g MgSO 4, 0,5 g
CaCO 3, pH 7,0) y se incubaron durante una semana a 37 ° C en un agitador rotatorio a 200 rpm.
Después de la incubación, el caldo de cultivo se centrifugó a 10.000 rpm durante 10 min y se recogió
el sobrenadante.
2.3. La extracción de EPS
La extracción EPS fue hecho seguido por el método de Sun et al. (2016) . El sobrenadante se
dializó contra agua destilada y se recogió el sobrenadante se precipitó mediante la adición de
acetona enfriada en hielo en incubación durante la noche a 20 ° C. El precipitado se centrifugó a
5000 rpm durante 15 minutos y obtener los EPS. Los EPS se disolvió adicionalmente en agua
destilada y la adición de etanol para la precipitación de nuevo centrifugación a mismo y fi finalmente se
lava con acetona a EPS obtenidos para el estudio adicional.
2.4. Caracterización química de EPS
2.4.1. Determinación de hidratos de carbono totales
El contenido total de hidratos de carbono se estimó colorimétricamente por el método
fenol-ácido sulfúrico utilizando d-glucosa como estándar ( Dubois, Gil, Hamilton, Rebers y Smith 1956 ).
2.4.2. Determinación del contenido de cenizas y humedad
El contenido de cenizas y humedad de exopolisacárido era cuanti fi ed gravimétricamente según
el método de Seedevi, Moovendhan, Vairamani y Shanmugam (2016) . 0,5 g de los polisacáridos
secos tomadas en un crisol de porcelana se quemó a 600 ° C durante 8 h en un mu ffl e horno. El
peso del residuo, lo que representó el contenido de cenizas y los resultados se da como un
porcentaje. El contenido de humedad de exopolisacárido se determinó a través de la micro-horno. 0,5
mg de muestra se secó a 130 ° C durante 2 h y los resultados se dan como un porcentaje.
2.4.3. 1 análisis H RMN
1 espectro de H RMN para los EPS de Streptomyces violaceus Mm72 se realizó siguiendo el
método de Seedevi, Moovendhan, Vairamani y Shanmugam (2017) . Se disolvieron aproximadamente
30 mg de muestra en 0,5 ml de D 2 O (99,9%) en un tubo de RMN (5 mm de diámetro). los 1 H
espectros de RMN se tomaron a 27 ° C y el desplazamiento químico se expresa en partes por millón
(ppm).
2.5. Síntesis de nanopartículas de plata
0,5 g de EPS se disolvió en 25 ml de agua destilada y lentamente
añadido en AgNO acuosa 3 mM 3 solución con agitación suave. La solución se almacenó en un lugar
oscuro en un agitador rotatorio (120 rpm) durante 1 h. Durante la reacción, la solución incolora
transparente se volvió a marrón oscuro que indicó la formación de SNPs.
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2.5.1. Conformación de nanopartículas de plata a través de análisis espectral UV-
La absorbancia de los iones de plata reducidas se midió periódicamente a intervalos de 15 min y
se observaron en UV - vis espectrofotómetro (Evolución 201, Thermo Fisher Scientific fi c, Waltham,
MA, EE.UU.) para supervisar la velocidad de reacción ( El-Ra fi E, El-Ra fi e, y Zahran, 2013 ).
2.5.2. Puri fi cación de nanopartículas de plata
Las nanopartículas de plata fueron sintetizados puri fi ed por diálisis y se liofiliza ( Manivasagan,
Kang, Kim, y Kim, 2015 ).
2.5.3. Caracterización de nanopartículas de plata
El SNPs se analizó para Microscopía Electrónica de Transmisión (TEM) de formación de
imágenes utilizando JEOL-3010 (Voltaje - 300 kV). El SNPs fue descubierto en rejillas de cobre con
cinta de carbono seguido de deshidratación a temperatura ambiente. Además, SNPs se analizó en el
análisis de rayos X de dispersión de energía (EDX) para con fi rm la presencia de las nanopartículas
de plata en la muestra. El SNPs se analizó en XRD usando 30 - 80 thetas di ff intensidades raction en el
ángulo de 2 theta ( Pourali y Yahyaei, 2016 ).
2.6. Actividad antibacterial
2.6.1. disco di ff ensayo de derrame
El SNPs se evaluó para la actividad antibacteriana mediante el uso de disco di ff método de
derrame Nakkala, Mata, Gupta y Sadras (2014) . Cuatro patógenos bacterianos a saber. Escherichia
coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis fueron adquiridos por el
Departamento de Microbiología, Hospital Rajah Muthiah Medical College (RMMCH), Universidad
Annamalai y se utiliza para el estudio. El caldo de cultivo 24 h de estos patógenos se extendió
sembraron en agar nutritivo y 100 μ g / ml de SNPs impregnado fi discos de papel de filtro (5 mm) se
colocaron y se incubaron durante 24 h a 28 ° C. Los discos de tetraciclina estándar se utilizaron
como control positivo. La actividad antibacteriana de los SNPs se determinó midiendo la zona de
inhibición.
2.6.2. Determinación de la concentración inhibitoria mínima (MIC)
Los SNP se determinó la MIC siguiendo el método de microdilución estándar de acuerdo con las
normas de laboratorio Directrices del Instituto Clínica y (CLSI) ( Clinical and Laboratory Standards
Institute, 2014 ). Una solución madre de 1 mg / ml se preparó y se diluyó en serie para obtener
diversas concentraciones entre 5 μ gramo - 100 μ g / ml.
Se tomaron 0,5 ml de cada una de las diluciones que contienen 2,0 ml de caldo nutritivo en tubo de
ensayo y para cada uno de los cuales se inocularon 0,5 ml de cultivo bacteriano de edad. Los tubos
de ensayo que contienen caldo solo se utilizó como control. Todos los tubos y el control de ensayo se
incubaron durante 24 horas a 28 ° C. Después de la incubación, el crecimiento bacteriano se registra
midiendo la densidad óptica a 600 nm utilizando UV - vis espectrofotómetro (Evolución 201, Thermo
Fisher Scientific fi c, Waltham, MA, EE.UU.).
2.6.3. evaluación de la viabilidad bacteriana
La viabilidad de las células bacterianas se evaluó siguiendo el método de
Verma, Hasan y Banik (2016) . Los patógenos bacterianos ( E. coli, P. aeruginosa, S. aureus y B.
subtilis) se inocularon en caldo nutriente y se incubaron a 28 ° C durante la noche. A continuación, las
cepas bacterianas se cultivaron de nuevo sub en caldo nutritivo fresco durante aproximadamente 4 h.
Las células bacterianas se recogieron por centrifugación y se suspendieron en solución salina
(isotónica) para llevar la concentración de células a 10 7 CFU / ml. Entonces se añadieron los SNPs a la
suspensión celular bacteriana en sus niveles de MIC equivalentes. Después de eso, se empleó el
método de recuento de colonias para evaluar la viabilidad celular mediante la propagación del chapado
la muestra diluida (100 μ l) en placas de agar nutriente y se incubaron a 28 ° C durante 24 h. Una placa
de control se mantuvo desprovisto de SNPs. Las placas de muestra se compararon con las placas de
control contando las colonias para determinar el porcentaje de viabilidad de las células bacterianas.
P. Sivasankar et al.
2.7. Actividad antioxidante
2.7.1. actividad de eliminación de radicales libres DPPH
actividad de eliminación de radicales libres DPPH de los SNPs se determinó por el método de Khan
et al. (2016) . A 0,5 ml DPPH solución (1 mM) se preparó y se añadió con di ff concentraciones Erent
de SNPs (10, 20, 30, 40 y 50 μ g / ml) y se incubaron bajo condiciones de oscuridad durante 30 min.
Después de la incubación, la absorbancia de la muestra se midió a 517 nm utilizando UV - vis
espectrofotómetro (Evolución 201, Thermo Fisher Scientific fi c, Waltham, MA, EE.UU.) y el metanol se
utilizan como blanco. Un control (DPPH) se mantuvo desprovisto de SNPs y Vitamina-C se utilizó
como estándar para la actividad de eliminación de radicales DPPH. El porcentaje de inhibición se
calculó usando la fórmula,% de inhibición = A blanco - UN muestra/ UN blanco × 100
2.7.2. la actividad antioxidante total
La actividad total antioxidante de los SNPs se determinó por el método de Shanmugasundaram,
Radhakrishnan, gopikrishnan, Pazhanimurugan y Balagurunathan (2013) . Los SNPs sintetizados se
prepararon a di ff concentraciones Erent (10, 20, 30, 40 y 50 μ g / ml) y se añadió 0,1 ml de la
suspensión de SNP para el fosfato de sodio (mM) de solución 28 que contiene 600 mM de ácido
sulfúrico y molibdato de amonio 4 mM a igual concentración (relación 1: 1): 1. Las muestras se
incubaron a continuación durante 90 min a 95 ° C en baño de agua. Después de la incubación, la
solución se enfrió y se absorbe a 695 nm utilizando UV - vis espectrofotómetro (Evolución 201,
Thermo Fisher Scientific fi c, Waltham, MA, EE.UU.). El metanol se utiliza como blanco y se usó ácido
ascórbico como estándar. La actividad antioxidante total se expresó mediante la comparación de los
valores con ácido ascórbico.
2.7.3. H 2 O 2 actividad de barrido
H 2 O 2 actividad de barrido de los SNPs se determinó por el modi fi método ed de Poongodi,
Karuppiah, Sivakumar, y Kannan (2014) . H 2 O 2 se preparó en la conc. de 40 mM en fosfato de bu ff er
con el pH 7,4. SNPs en di ff concentraciones Erent (10, 20, 30, 40 y 50 μ se añadieron g / ml) a 0,6 ml
de H 2 O 2 solución y se incubaron a temperatura ambiente durante 10 min. Después de la incubación,
la absorbancia se registró a 230 nm utilizando UV - vis. bu fosfato ff er falta de H 2 O 2 se utilizó como
ácido ascórbico en blanco y se utilizó como estándar. El h 2 O 2 actividad de eliminación se calculó
utilizando la siguiente fórmula,% de inhibición = A blanco - UN muestra/ UN blanco × 100
2.7.4. actividad captadora de óxido nítrico
actividad captadora de óxido nítrico de los SNPs se estimó mediante la modi fi método ed de Poongodi,
3.3. 1 análisis espectral H RMN
Karuppiah, Sivakumar, y Kannan (2014) . y se añadió con di 3 ml de solución de nitroprusiato de
sodio 10 mM ff concentraciones Erent (10, 20, 30, 40 y 50 μ g / ml) de SNPs y se incubaron a 25 ° C
durante 2,5 h. Después de la incubación, se añadió 1 ml de solución de ácido sulfanílico (ácido
sulfanílico 0,33%, y 20% de ácido acético glacial) a la 0,5 ml de mezcla de reacción y se dejó reposar
durante 5 min. Después de 5 min, se añadió 1 ml de indicador de n-1-naftilo (0,1%) a esta mezcla y
se incubaron a 25 ° C durante 30 minutos para desarrollar el cromóforo rosa. Después de la
incubación, la absorbancia se registró a 540 nm utilizando UV - vis. bu fosfato ff er se utilizó como
blanco y se usó ácido ascórbico como estándar. La actividad de eliminación de óxido nítrico se
calculó utilizando la siguiente fórmula,% de inhibición = A blanco - UN muestra/ UN blanco × 100
2.7.5. ensayo de poder reductor férrico
Los SNPs sintetizados se prepararon a di ff concentraciones Erent (10,
20, 30, 40 y 50 μ g / ml) y se añadieron 0,5 ml de la suspensión de SNP con 2,5 ml de 0,2 M de
fosfato bu ff er que contiene 2,5 ml de potasio
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ferricianuro (1%) y se incubaron durante 20 min a 50 ° C. Después de la incubación, se añadieron
ácido tricloroacético (solución al 10% de 2,5 ml) y cloruro férrico (solución 0,01% de 0,5 ml) y se
mezclaron bien. Después de 10 min, la formación de hierro ferricianuro se midió a 700 nm utilizando
UV - vis espectrofotómetro mediante la observación de la formación de color azul (Perl ' S Color de
Prusia). bu fosfato ff er se mantuvo como en blanco y el ácido ascórbico se usó como estándar ( Poongodi,
Karuppiah, Sivakumar, y Kannan, 2014 ).
2.7.6. análisis estadístico
Todos los datos experimentales se sometieron a un análisis de varianza (ANOVA). Dunnett ' s
también se utilizó la comparación múltiple (GraphPad prisma versión 5.0, GraphPad Software,
EE.UU.) para determinar el di ff rencia entre medios en el nivel de 0,05.
3. Resultados y discusión
3.1. El aislamiento y la identi fi cación de los EPS cepa productora de
La mancha Mm72 identificó tentativamente fi ed como Streptomyces violáceo y se utiliza para la
producción de EPS optimizado según ha informado nuestro estudio anterior ( Manivasagan et al., 2013 ).
Este estudio evidente que, la S. violáceo
Mm72 tenía un gran potencial en la producción de EPS y por lo tanto pueden albergar un gran
potencial de aplicaciones industriales. Basado en el estudio previo de nuestro laboratorio, hemos
seleccionado las EPS que producen actinobacterium marina Streptomyces violáceo Mm72 como un
nuevo candidato para la síntesis de los SNP.
3.2. Rendimiento y composición bioquímica de EPS
El rendimiento de la EPS a partir de Streptomyces violaceus encontrado que 2,75 g / l en peso
seco. En el presente estudio, el rendimiento fue superior en comparación con el estudio previo de los
EPS de miurensis Halolactibacillus era 2,5 g / l ( Arun et al., 2017 ). Además, el rendimiento de EPS a
partir de
turkmenica Haloterrigena mostró 2,68 g / l ( Squillaci et al., 2016 ). El contenido total de hidratos de
carbono de la EPS a partir de S. violaceus fue 61,4%. Del mismo modo, el contenido total de
carbohidratos de la EPS a partir de H. miurensis
grabada 56,9% ( Arun et al., 2017 ). Mata et al. (2008) informaron el contenido de carbohidratos de los
EPS de las bacterias halófilas fontislapidosi Idiomarina F32, I. ramblicoda R22 y Alteromonas
hispanica fueron
50,85%, 56,50% y 76,50%, respectivamente. El contenido de ceniza de los EPS de tres bacterias
anteriormente fueron 18%, 19,50% y 15,50%, respectivamente. En el presente estudio, la ceniza y la
humedad de la EPS a partir de S. violaceus mostró 16,1 y 1,8%, respectivamente. En el presente
estudio, el contenido de cenizas y la humedad fue mayor cuando se compara con la de EPS a partir
de H. miurensis fueron 12,1% y 1,5% ( Arun et al., 2017 ).
los 1 análisis espectral H RMN de los EPS de S. violaceus se muestra en Figura 1 . La señal en
4.598 - 4.601 ppm indicó la α- RE-
unidades de galactopiranosa y la señal en 3.389 - 4.303 ppm representado los componentes de
cadena principal de azúcar tales como residuos de glucosa y galactosa. La señal en 1.803 - 2.089
indicaron residuo ramnosa en el exopolisacárido. Este análisis de RMN es coherente con la literatura
donde estudio sobre análisis estructural de succinoglicano producido por R. meliloti 1021 también se
informó ( Chouly, Colquhoun, Jodelet, York, y Walker, 1995 ). Además, el exopolisacárido di compone ff
Erent cadena principal de azúcar de residuos de glucosa y galactosa.
3.4. biosíntesis de nanopartículas de plata y caracterización
Las nanopartículas de plata se formaron después de añadir el puri fi ed EPS producido por S.
violaceus Mm72 a la solución acuosa de nitrato de plata. En la reacción, la mezcla incolora se volvió
de color marrón amarillento a marrón oscuro debido a las excitaciones de vibración de plasmón de
superficie. Los cambios de color secuenciales en la solución acuosa de nitrato de plata indicaron la
plata
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indica las posiciones de los picos dependientes del tamaño. El patrón de anillo área seleccionada da
a conocer la cara cúbica centrada, monocristalina, y nanopartículas esféricas ( Fig. 3 re).

3.5. Actividad antibacterial

El SNPs mostró un amplio espectro de actividad antibacteriana contra cuatro patógenos

bacterianos clínicos en 100 μ g / ml de concentración se muestra en la Fig. 4 . Se observó que la
actividad antibacteriana superior contra E. coli
y P. aeruginosa fueron de 16 mm de la zona de inhibición a 100 μ g / ml de concentración; mientras
que el B. subtilis y S. aureus bacterias mostró 10 y 4 mm de la zona de inhibición a la misma
concentración, Gram-negativas E. coli y P. aeruginosa mostraron mayor susceptibilidad de las
bacterias Gram-positivas B. subtilis y S. aureus. Del mismo modo, se ha informado de los SNPs de
polisacáridos mediada ( Park, Hong, Weyers, Kim, y Linhardt, 2011 ; Sathiyanarayanan, Seghal Kiran,
y Selvin, 2013 ). Esto podría ser debido a que la capa de peptidoglicano presente en las bacterias
Gram-negativas es más débil que la de las bacterias Gram-positivas ( Chaloupka, Malam, y Seifalian
de 2010 ). Presente fi hallazgos se correlacionan con los de estudios anteriores ( Hungund,
Dhulappanavar, y Ayachit, 2015 ; Verma, Hasan, y Banik, 2016 ).

3.6. Concentración mínima inhibitoria

El SNPs mostró los valores de MIC de 6,15 y 11,6 μ g / ml contra MI.

coli y P. aeruginosa; mientras que el S. aureus y B. subtilis detenido en

Figura 1. 1 Los espectros de H RMN de la S. violaceus exopolisacáridos Mm72. 14,6 y 12,5 μ g / ml respectivamente ( tabla 1 ). Los resultados de CIM también revelaron que las
bacterias Gram-negativas son muy sensibles a SNPs ya que están teniendo la pared celular más
delgado que las bacterias Gram-positivas. En el presente estudio, la concentración de MIC de
la formación de nanopartículas. El espectro UV de los SNPs se registraron a intervalos de 15 min
polisacárido mediada SNPs fue mayor en comparación con el estudio anterior del polisacárido
hasta 60 min. la UV - vis absorción espectral demostró la formación de nanopartículas de plata, que
mediada SNPs informó nanopartículas de plata biogénicas ( Khan et al., 2016 ). En adición, Seedevi et
mostró la emisión espectral a 420 nm ( Figura 2 ). Similar, Manivasagan et al. (2015) informaron la
al. (2016) informado de la MIC de polisacárido sulfatado de la gladius S. lessoniana reveló que S.
banda de absorción espectral de UV a 420 nm de las nanopartículas de plata sintetizados por
paratyphi fue detenido en la baja concentración de 40 μ g / ml; mientras que otros S. typhi, V.
exopolisacárido de Streptomyces sp.
cholerae, K. oxytoca, P. mirabilis y V. parahaemolyticus grabado 80, 80, 80, 80 y 100 μ g / ml
respectivamente.
Los resultados de la TEM, EDX, y XRD se muestran en la Fig. 3 . TEM
puesto de manifiesto que los EPS sintetizados nanopartículas de plata mediadas se va de 10 a 60
nm con 30 nm como tamaño medio de partícula ( Fig. 3 un). Otros estudios de caracterización TEM en
nanopartículas de plata también revelaron la forma esférica de las nanopartículas de plata, que van
3.7. evaluación de la viabilidad bacteriana
desde 10 nm a 100 nm de tamaño ( Mata, Reddy Nakkala, y Rani Sadras, 2015 ). Tamaño de los
SNPs obtenidos en el TEM se correlacionó con los resultados obtenidos por UV - vis. EDX datos
El SNPs mostró la actividad viabilidad celular bacteriana contra E. coli,
revelaron señal fuerte en la región de nanopartículas de plata, que con fi rms la formación de plata
P. aeruginosa, S. aureus y B. subtilis en di ff Erent intervalo de tiempo. Además, los SNPs mostraron
elemental por la reducción de los iones de plata ( Fig. 3 segundo). gráfica XRD mostró cuatro picos
una reducción de la viabilidad celular en un intervalo de dos horas. Los SNPs tratados E. coli células
fuertes de plata (111 a 41.02, 200 a 53,5, 220 en 62,5 y 311 a 78,5) en el espectro de valores de 2
mostraron 22, 44, 77 y 93% para 2, 4, 6 y 8 horas a 6,15 μ g / ml de concentración. En SNPs tratada P.
theta, que van de 30 a 80 ( Fig. 3 c) que
aeruginosa células grabado 24, 45, 78 y 95% para 2, 4, 6 y 8 horas a 11,6 μ g / ml de concentración.
Los SNPs tratados S. aureus células mostraron 20, 41, 71 y 91%

Figura 2. UV - vis espectros de la S. violaceus SNPs mediadas Mm72

exopolisacárido en di ff intervalos de tiempo Erent.

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P. Sivasankar et al. Carbohydrate Polymers 181 (2018) 752-759

Fig. 3. A) Imagen TEM (50 nm) de la de la S. violaceus Mm72 exopolisacárido mediada SNPs. B) espectro EDX de los SNPs. patrón C) XRD de los SNPs que muestran facetas cristalinas de la plata. D) di ff patrón raction de los SNPs en el área
seleccionada.

Fig. 4. La actividad antibacteriana de la S. violaceus

Mm72 exopolisacárido mediada SNPs contra patógenos bacterianos.

para 2, 4, 6 y 8 horas a 14,6 μ g / ml de concentración; mientras que el B. subtilis Actinobacteria mediada por nanopartículas posee actividades biológicas superiores tales como los

células muestran 26, 47, 80 y 92% para 2, 4, 6 y 8 horas a 12,5 μ g / ml de concentración. Los antimicrobianos, anticancerígenos, contra la malaria y actividades antioxidantes. Tales nanopartículas de

resultados de la prueba de viabilidad celular indicado que los SNPs tienen una acción rápida contra amplio espectro pueden ser utilizados en la fi campo de la biotecnología para tratar y curar diversas

los patógenos bacterianos y la susceptibilidad de las bacterias Gram-negativas ( E. coli y P. enfermedades humanas.

aeruginosa) era relativamente superior a la de las bacterias Gram-positivas ( Fig. 5 ).

Manivasagan, Venkatesan, Sivakumar, y Kim (2016) afirmó el

756
P. Sivasankar et al.
tabla 1
concentración inhibitoria mínima de SNPs contra los patógenos de ensayo.
patógenos de prueba SNPs (valor MIC μ g
/ ml)
E. coli 6.15
P. aeruginosa 11.6
S. aureus 14.6
B. subtilis 12.5
3.8. Actividad antioxidante
3.8.1. la actividad de eliminación de radicales DPPH
Los SNPs mostraron la actividad de eliminación de radicales DPPH de 89,5% a 50 μ g / ml de
concentración ( Fig. 6 a), que fue comparado como el estándar de vitamina-C de barrido e ff ect era
49,6%. El presente estudio, la actividad de eliminación de radicales DPPH fue mayor cuando se
compara el estudio previo de las nanopartículas de plata a partir de marschalliana Artemisia fue del
61% a 450 μ g / ml de concentración ( Salehi et al., 2016 ). Del mismo modo, se informó de las
nanopartículas de plata, níquel, selenio y platino para mejorar la DPPH radical de barrido e ff ect ( WatanabeMahendran, Thamaraiselvi y Ranjitha Kumari (2016) prestar apoyo que los actinobacterial
et al., 2009; Saikia et al., 2010 ). Reddy, Vali, Rani, y Rani (2014) y Phull et al. (2016) que informó del
radical DPPH de barrido electrónico ff ect aumentaría en las nanopartículas de plata sintetizados
biológicamente, tener varias actividades biológicas.
3.8.2. la actividad antioxidante total
El SNPs mostró la mayor actividad antioxidante total de 0,730 a 50 μ g / ml de concentración y
en comparación con el estándar de ácido ascórbico ( Fig. 6 segundo). En el presente estudio, la
actividad antioxidante total de SNPs fue mayor cuando se compara con las fracciones de palmata
Palmaria ( Yuan, hueso, y Carrington, 2005 ). Sin embargo, el presente estudio, las actividades
antioxidantes totales de SNPs fueron mayores que la de los anteriores nanopartículas de plata
estudio sintetizados a partir de herbstii Iresine ( Dipankar y Murugan, 2012 ). Del mismo modo, la
actividad antioxidante total de polycystum sargassum extraer y sus AGNPS mostraron 54,3 ± 0,25% y
59,2 ± 0,54% a 500 μ g / ml de concentración ( Palanisamy et al., 2017 ). Además, el polisacárido
sulfatado de oxyspermum Monostroma
registraron la actividad antioxidante total en el intervalo de 33,2 - 66,29% a 50 - 250 μ g / ml de
concentración ( Seedevi et al., 2015 ).
3.8.3. H 2 O 2 actividad de barrido
H 2 O 2 actividad de eliminación de SNPs se evaluó a di ff concentraciones Erent (10, 20, 30, 40 y
50 μ g / ml) y ácido ascórbico como estándar ( Fig. 6 do). Entre los di ff concentraciones Erent de SNPs,
50 μ g / ml mostraron una mayor actividad de 72,5%, que era signi fi cativamente más alta que la del
ácido L-ascórbico estándar cuya dirección de barrido ff ect solamente era
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56,4%. AGNPS y el ácido ascórbico mostraron actividad de barrido de 74% 84% y, respectivamente,
en 100 μ g / ml ( Kumar, Bano, Mohan Singh, y Hasan, 2016 ). En presencia de H 2 O 2, los AGNPS
dispersas pueden inducir especies de oxígeno reactivas como los radicales hidroxilo. H 2 O 2 dentro de
una celda a una dosis pequeña puede acelerar la disolución de AGNPS y producir mucho más fuerte
estrés oxidativo ( Él, Garg, y Waite, 2012 ). AGNPS pueden proporcionar mayores cuentas de H 2 O 2 e
inducir más signi fi peralte Florida ammasome la formación, ya que pueden causar fugas más sustancial
de las catepsinas de lisosomas con discapacidad y correo ffl ux de iones K + puede contribuir a la
producción de superóxido y peróxido de hidrógeno en las membranas de las mitocondrias ( Rees,
Palmer, y Moncada, 1989 ).
3.8.4. actividad captadora de óxido nítrico
El óxido nítrico en el sistema humano (inmunológico, nervioso y cardiovascular) actúa molécula
de supervisión como bio- ( Recoger, 2012 ). En el presente estudio, SNPs (50 μ g / ml) tenía una
actividad del óxido nítrico de eliminación de 60,1% ( Fig. 6 d), que es signi fi cativamente más alta que
la del ácido L-ascórbico estándar (41,2%). SNPs disminuyó la cantidad de nitrito generado a partir de
la descomposición de nitroprusiato de sodio in vitro ( Sowani et al., 2016 ). Igualmente, Sundararajan,
nanopartículas de plata y oro sintetizados están teniendo mayor inhibición sobre los radicales de
óxido nítrico. Estas fi hallazgos sobre el poder de eliminación de óxido nítrico de los SNPs les harían
útiles para el tratamiento de las enfermedades, tales
como neurodegenerativa enfermedades, cáncer y el SIDA
( Shanmugasundaram et al., 2013 ). Esto puede lograrse mediante la preparación de medicamentos
nanoformulated que podría contrarrestar la formación de óxido nítrico y salvar el cuerpo de la
enfermedad causada por el óxido nítrico ( Sriranjani et al., 2016 ).
3.8.5. poder reductor férrico
Férrico poder reductor de los SNPs se estimó mediante la reducción de Fe / ferricianuro y se
observó la inhibición a 0.390 AU en 50 μ g / ml ( Fig. 6 mi). La capacidad de reducción de los SNPs y el
ácido ascórbico estándar (10, 20, 30, 40 y 50 μ g / ml). Férrico reducción de la potencia de SNPs fue
mayor que la de la ya se ha informado de nanopartículas de plata sintetizado a partir de la hoja de phlomidis
Clerodendrum como 1.63 UA en 1000 μ g / ml de concentración ( Sriranjani et al., 2016 ). Similar, Lateef
et al. (2016) informaron que las nanopartículas de plata sintetizados exhiben de
14.44 - 83,94% de ion férrico reducción de la actividad en mayor concentración.
Srinithya et al. (2016) se describe la férrico reducción de la potencia de AGNPS fue 1,83 AU a 1000 μ g
/ ml de concentración. Comparativamente, el presente estudio SNPs fue mayor férrico reducción de la
capacidad de energía a una concentración inferior.
Fig. 5. resultados de la evaluación de viabilidad bacteriana de la S.
violaceus Mm72 exopolisacárido mediada SNPs contra patógenos
bacterianos.
P. Sivasankar et al.
Fig. 6. A) ensayo de DPPH, B) la actividad antioxidante total, C) H 2 O 2 actividad de barrido, D) la actividad del óxido nítrico de barrido, E) férrico reducción de ensayo de poder de S. violaceus Mm72 exopolisacárido mediada SNPs con sus
respectivas normas. Los datos representan la media ± SD de las tres réplicas (n = 3).
4. Conclusiones
Polisacárido síntesis mediada de SNPs es un costo-e ff método reflexivo, respetuoso del medio
ambiente y simple. En el presente estudio, mostramos que los EPS producidos por una
actinobacterium marina Streptomyces violaceus Mm72 demostró ser un candidato prometedor para la
síntesis de los SNPs. El e ff ORT para la síntesis SNP es puramente un enfoque más verde y los
SNPs se caracterizaron utilizando espectrofotómetro de UV, TEM, EDX y DRX. SNPs mostró un
buen potencial bioactivo según lo revelado por las actividades antimicrobianas y antioxidantes. Los
resultados sugieren que los SNPs exopolisacáridos facilitado podrían aplicarse para desarrollar
nuevos nanomateriales se pueden utilizar en el futuro la aplicación biomédica y biotecnológica.
Estafa Florida icto de interés
Todos los autores declaran que no hay aire Florida icto de intereses.
Reconocimiento
Los autores (PS PDF / 2016/003905 y PS PDF / 2017/002512) están agradecidos a la National
Esquema beca posdoctoral (N-PDF), Departamento de Consejo de Investigación de Ingeniería
(DST-SERB) Ciencia y Tecnología, la Ciencia y la y la Departamento de Biotecnología (DBT),
Gobierno de la India (Expediente N ° BT / PR5426 / AAQ / 3/599/2012) para proporcionar fi asistencia
financiera. PS gracias Prof. L. Kannan, ex vicerrector de la Universidad Thiruvalluvar, Vellore para ir
críticamente el manuscrito y o ff Ering valiosa sugerencia y comentarios.
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