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RESULTADOS:

Tabla 1: Datos obtenidos de la fermentación de Saccharomyces cerevisiae, sin


aireación en el reactor 1 (Rushton). Se presentan los resultados obtenidos de la
biomasa, y obtención de etanol.

Equipo 3
Reactor 1 sin aireación
Peso del picnómetro solo= 25.2578 g
Picnómetro con agua= 50.144475 g
volumen del picnómetro= 25 mL

peso del peso del


peso del papel filtro picnómetro con
muestra Tiempo de papel filtro con biomasa, 25 ml de
filtrada Fermentación (h) pH Temperatura seco (g) seco (g) destilado (g)
1 0 4.8 34.4°C 0.072 0.084 50.12045
2 0.5 4.33 29.5°C 0.0734 0.097 50.12545
3 1 3.89 32.0°C 0.0724 0.0908 50.1263
4 2 2.92 29.5°C 0.0729 0.0913 50.1298
5 19 1.725 30.6°C 0.073 0.1152 50.13
6 24 1.63 32.4°C 0.0736 0.1148 50.138315

Tabla 2. Datos obtenidos de la fermentación de Saccharomyces cerevisiae, sin


aireación en el reactor 1 (Rushton). Se presentan los resultados obtenidos de la
biomasa, y obtención de etanol. En esta prueba, no se pudo destilar las muestras
3,4,5 y 6 por lo que se utilizaron los datos del equipo 3 para completar la tabla.

Equipo 1
Reactor 1 sin aireación
Peso del picnómetro solo= 20.6300 g
Picnómetro con agua= 45.8625 g
volumen del picnómetro= 25 mL

muestra Tiempo de pH Temperatura peso peso del peso del


filtrada Fermentación del papel filtro picnómetro
(h) papel con con 25 ml de
filtro biomasa, destilado (g)
seco (g) seco (g)
1 0 5.21 30.4 0.072 0.0873 45.7936
2 0.5 5.03 29.5 0.072 0.0876 45.3727
3 1 4.65 32 0.0725 0.0917 50.1298
4 2 4 29.5 0.0729 0.0903 50.1263
5 19 2.87 30.6 0.0727 0.1152 50.12545
6 24 2.79 32.4 0.073 0.1074 50.12045

DETERMINACIÓN DE BIOMASA.
Tabla 3. Muestra la obtención del peso seco de biomasa y su respectiva
concentración durante la fermentación alcohólica. Estos datos son tomados de la
tabla 1 correspondiente al equipo 3.
Biomasa Equipo 3
muestra peso del peso del Biomasa Biomasa
filtrada papel filtro papel filtro (g) (g/L)
seco (g) con biomasa,
seco (g)

1 0.072 0.084 0.012 0.34285714


2 0.0734 0.097 0.0236 0.67428571
3 0.0724 0.0908 0.0184 0.52571429
4 0.0729 0.0913 0.0184 0.52571429
5 0.073 0.1152 0.0422 1.20571429
6 0.0736 0.1148 0.0412 1.17714286

Para calcular la biomasa, tomamos como ejemplo la muestra 1:


1. Se obtuvo el peso seco de la biomasa, restando el peso del papel filtro seco, al
peso del papel filtro con biomasa seco.
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑠𝑒𝑐𝑜 𝑑𝑒 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 = 0.084 − 0.072 = 0.012𝑔
2. Ya que obtenemos la biomasa, relacionamos ese peso con el volumen filtrado
(0.035 L) para obtener la concentración.
0.012𝑔
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 = = 0.3428 𝑔/𝐿
0.035𝐿
Tabla 4. Muestra la obtención del peso seco de la biomasa y su respectiva concentración
durante la fermentación. Estos datos son tomados de la tabla 2 correspondiente al equipo
1.

Biomasa Equipo 1
muestra peso del peso del Biomasa Biomasa
filtrada papel filtro papel filtro (g) (g/L)
seco (g) con biomasa,
seco (g)

1 0.072 0.0873 0.012 0.34285714


2 0.072 0.0876 0.0156 0.44571429
3 0.0725 0.0917 0.0192 0.54857143
4 0.0729 0.0903 0.0174 0.49714286
5 0.0727 0.1152 0.0425 1.21428571
6 0.073 0.1074 0.0344 0.98285714

Gráfica 1. Cinética del crecimiento celular de Saccharomyces cerevisiae en el reactor


1, sin aireación a diferentes tiempos.

Crecimiento Celular
1.4

1.2

1
Biomasa (g/L)

0.8

0.6 Equipo 3

0.4 Equipo 1

0.2

0
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)

Gráfica 2. Expresa el pH obtenido de las diferentes muestras a lo largo de la


fermentación. Se puede notar que la diferencia de pH al t= 0 es muy similar, pero al
final la brecha entre un pH y otro varia por un punto. Cabe mencionar que a pesar
de tener diferentes valores la forma de estas curvas son similares.
CINETICA DE pH

pH
6
5
4
pH

3
Equipo 3
2
1 Equipo 1
0
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)
Gráfica 3. Expresa el pH obtenido de las diferentes muestras a lo largo de la
fermentación, incluyendo su desviación estándar.

pH con desviacion estándar.


6

4
pH

3
Equipo 3
2 Equipo 1

0
-5 0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)

DETERMINACION DE AZUCAR.
Tabla 5. Datos obtenidos de densidad óptica, y la ecuación que representa a la
curva patrón de DNS. También se indica la concentración de azucares reductores
calculada a partir de la ecuación.

La curva de calibración es: Y = 0.0058X - 0.0202


R^2 = 0.9945
Cultivo sin aireación
Tiempo de Concentración
muestra DO Concentración (g/L)
Fermentación FD DO1 DO2
filtrada Promedio (mg/L)
(h)
1 0 400 0.346 0.352 0.349 25462.06897 25.46206897
2 0.5 400 0.325 0.331 0.328 24013.7931 24.0137931
3 1 400 0.295 0.281 0.288 21255.17241 21.25517241
4 2 400 0.263 0.254 0.2585 19220.68966 19.22068966
5 19 400 0.21 0.202 0.206 15600 15.6
6 24 400 0.168 0.173 0.1705 13151.72414 13.15172414
Para calcular la concentración de azúcares se realizaron los siguientes cálculos
(tomaremos de ejemplo la muestra 1):
1. Usamos la ecuación de la curva patrón para azúcares reductores por el
método de DNS (Y = 0.0058X - 0.0202), para obtener la concentración de
azúcar en mg/L. De donde Y es la absorbancia y X es la concentración de
biomasa en mg/L. el resultado se debe multiplicar por el factor de dilución.
0.349 + 0.0202 𝑚𝑔
𝑋= ∗ 400 = 25462.06
0.0058 𝐿
2. Posteriormente hacemos las conversiones correspondientes para obtener la
concentración en g/L.
1𝑔
25462.06 𝑚𝑔/𝐿 ∗ ( ) = 25.46 𝑔/𝐿
1000 𝑚𝑔
Gráfica 4. Concentración de azúcares durante la fermentación, se nota que
dicha concentración disminuye debido a la levadura.

Consumo de Azúcar.
30

25
Concentracion (g/L)

20

15
Azúcares
10

0
0 5 10 15 20 25
Tiempo (h)

DETERMINACION DE ALCOHOL
Tabla 6. Calculo de la concentración de alcohol en el reactor 1 sin aireación a
T=30°C. Resultados del equipo 3.
Equipo 3
Peso del picnómetro solo= 25.2578 g
Picnómetro con agua= 50.144475 g
volumen del picnómetro= 25 mL
peso del
picnómetro Peso de
Tiempo de
muestra con 25 ml la Gravedad % de Alcohol Alcohol Alcohol
Fermentación
filtrada de muestra especifica alcohol (mL) (g) (g/L)
(h)
destilado (g)
(g)
1 0 50.15045 24.89265 1.00024009 0 0 0 0
2 0.5 50.18545 24.92765 1.00164646 0 0 0 0
3 1 50.223 24.9652 1.0031553 0 0 0 0
4 2 50.1298 24.872 0.99941033 0.04 0.01 0.00789 0.3156
5 19 50.20385 24.94605 1.00238581 0 0 0 0
6 24 50.18315 24.92535 1.00155404 0 0 0 0

Tabla 7. Calculo de la concentración de alcohol en el reactor 1 sin aireación a


T=30°C. Resultados del equipo 1 y 3 debido a que la experimentación del equipo 1
no concluyó.

Equipo 1
Peso del picnómetro solo= 20.6300 g
Picnómetro con agua= 45.8625 g
volumen del picnómetro= 25 mL
peso del
picnómetro Peso de
Tiempo de
muestra con 25 ml la Gravedad % de Alcohol Alcohol Alcohol
Fermentación
filtrada de muestra especifica alcohol (mL) (g) (g/L)
(h)
destilado (g)
(g)
1 0 45.7936 25.1636 0.99726939 1.88 0.47 0.37083 14.8332

2 0.5 45.3727 24.7427 0.98058853 10 2.5 1.9725 78.9


3 1 50.223 24.9652 1.0031553 0 0 0 0
4 2 50.1298 24.872 0.99941033 0.04 0.01 0.00789 0.3156
5 19 50.20385 24.94605 1.00238581 0 0 0 0
6 24 50.18315 24.92535 1.00155404 0 0 0 0

Como los resultados de este equipo fueron mejores explicaremos el cálculo de la


concentración de alcohol con base a la primera muestra de la tabla 7.
1. Obtener el peso de la muestra:
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = (45.7936 𝑔 − 20.63 𝑔) = 25.1636 𝑔
2. Calcular la gravedad especifica:
(20.63 𝑔 + 25.1636𝑔) − 20.63𝑔
𝐺𝐸 = = 0.99726939 g
45.8625 𝑔 − 20.63𝑔

3. Calcular el volumen de alcohol, usando las tablas de la AOAC.

(25 𝑚𝑙) ∗ (1.88%)


𝐴𝑙𝑐𝑜ℎ𝑜𝑙 (𝑚𝑙) = = 0.47 𝑚𝐿
100%
4. Usando la densidad del alcohol (0.789 g/mL) se obtienen los gramos de
alcohol:
0.789 𝑔
𝐴𝑙𝑐𝑜ℎ𝑜𝑙 (𝑔) = ∗ 0.47 𝑚𝑙 = 0.37083 𝑔
𝑚𝐿
5. Determinar la concentración de alcohol:
𝑔 0.37083 𝑔 1000𝑚𝐿 𝑔
𝐴𝑙𝑐𝑜ℎ𝑜𝑙 ( ) = ∗ = 14.8332
𝐿 25 𝑚𝑙 𝐿 𝐿

Grafica 5. Muestra gráficamente la producción de alcohol durante toda la


fermentación. Como se ve aquí y en la tabla 6, nuestra medición del destilado fue
incorrecta, ya que, haciendo los cálculos correspondientes, la producción de alcohol
en la mayoría de nuestras muestras es cero.

Producción de alcohol

0.35

0.3

0.25
Alcohol (g/L)

0.2
Equipo 3
0.15

0.1

0.05

0
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)
Grafica 6. Muestra la obtención de alcohol a lo largo de la fermentación, en el reactor
1 a T= 30°C. Como se mencionó con anterioridad, estos datos no fueron
completados, así que tomamos datos del equipo 3, y como ya se aclaró, el equipo
3 erro en sus cálculos, por lo que estos datos también tienen errores.

Producción de alcohol
90
80
70
60
Alcohol (g/L)

50
40
Equipo 1
30
20
10
0
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (h)

RENDIMIENTO TEORICO MAXIMO PARA ETANOL.


Teóricamente y usando la estequiometria de la reacción, podemos determinar
cuánto alcohol obtendremos, suponiendo rendimientos máximos.

Tabla 8. Muestra la concentración máxima teórica de etanol.


Glucosa Etanol

PM (g/mol) 72 24
Concentración 30 15.33
(g/L)
Para calcular la concentración de etanol, se tiene que 1 mol de glucosa produce 2
moles de etanol, como sabemos que la concentración de la glucosa fue de 30 g/L
eso equivale a 0.1666 mol/L, lo duplicamos para obtener los moles de etanol y lo
multiplicamos por su PM para obtener la concentración en g/L.

Tabla 9. Variables de respuesta de la fermentación alcohólica sin y con aireación.

qP(h^-
Fermentación Equipo E(%) Y(x/s) Y(P/S) µ(h^-1) qs (h^-1)
1)

1 0.05833577 -0.88039869 0.0525314 0.90050074 0


Sin aireación
3 56.1609195 0.06986726 0 0.04882762 0.69886269 0

Con aireación

1. Para calcular la eficiencia del consumo de glucosa (E%), se usaron los datos
de la tabla 5 (la concentración de glucosa al final de la fermentación).

2. Para la determinación de Y(x/s) se usó la formula siguiente:


𝑔 𝑑𝑒 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎/𝐿
Y (x /s) =
𝑔 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑎/𝐿
3. Para la determinación de Y(p/s) se usó la formula siguiente:
𝑔 𝑑𝑒 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑖𝑑𝑜/𝐿
Y (P /S) =
𝑔 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑎/𝐿
4. Para determinar la tasa especifica de crecimiento celular, se tomó en
cuenta que: Con base en los fundamentos teóricos de cinética microbiana,
en una gráfica semilogarítmica de ln (X) vs. tiempo, y reordenando la
ecuación
ln X = μt + ln X0
Obtenemos una ecuación que corresponde a una línea recta (Y = mX + b),
donde μ es la pendiente.
5. Para determinar el valor de qs se usó la formula siguiente:
𝜇
𝑞𝑠 =
𝑌𝑥/𝑠
6. Para determinar el valor de qP se usó la formula siguiente:
𝜇
𝑞𝑝 =
𝑌𝑝/𝑠

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