Reacciones enzimáticas de óxido-reducción

Introducción: Determinación de la actividad del sistema de

Los átomos de carbono pueden existir en cinco citocromos y citocromo oxidasa
estados de oxidación, dependiendo de los
elementos con los que comparten electrones y las Tubo Coloración
transiciones en estos estados son de importancia No. 1
crucial en el metabolismo. En muchas oxidaciones 1 Vino
2 Transparente
biológicas un compuesto pierde dos electrones y
3 Rojo
dos iones hidrógeno; estas reacciones
4 Carne
generalmente se denominan deshidrogenasas.
5 Azul
Las grandes cantidades de energía que liberan las 6 Rosa
reacciones biológicas redox constituyen dla 7 Carne
principal fuente de energía disponible para el 8 Transparente
trabajo de la célula.

Objetivo:

-Determinar la actividad de algunas enzimas que

participan en reacciones de óxido-reducción y
discutir la importancia de los cofactores y el efecto
de algunos inhibidores

Resultados:

Determinación de la actividad de la deshidrogenasa

láctica

No. 1 2 3 4 5 Discusión:
de
tubo Determinación de la actividad de la deshidrogenasa
Color Incoloro Inco- Inco- Azul Azul láctica
ación loro loro
Se elaboró un extracto a partir de músculo
esquelético de patas de rata para obtener la enzima
lactato deshidrogenasa, que es una enzima que
tiene actividad principalmente en la fermentación
láctica, proceso por el cual el piruvato se reduce a
lactato por medio de esta enzima. (Ver reacción). La
reacción tiene como fin principal regenerar al NAD,
que es un intermediario sumamente importante en
los procesos metabólicos ya que actúa como
aceptor de electrones. El músculo se hirvió puesto
que la enzima se encuentra en la parte interior y al
estar en contacto con altas temperaturas, se rompe
el tejido exterior del músculo.
una disolución incolora, aumiendo que había
residuos de lactato en el exctracto.
- Para el tubo 4 se esperaba una tonalidad azul, la
cual sí se produjo, este resultado se debe a que no
se agregó la enzima extraída, por lo que no hay
forma de producirse la reacción.

-En el tubo 5 podría haber una ambigüedad de

resultados ya que al no agregarse KCN, la reacción
podía ir en ambos sentidos, el resultado final fue
una coloración azul, ya que como se mencionó
Reacción entre piruvato y lactato
anteriormente el KCN funge como acoplante de la
reacción.
Al obtener la enzima se prepararon distintas
disoluciones esperando obtener resultados Finalmente, como es de saberse, esta reacción
característicos por la presencia de algunos ocurre en la matriz mitocondrial, por lo que ocurre
compuestos en cada muestra, inicialmente todos en ausencia de oxígeno, motivo por el cual se
los tubos tenían una coloración azul por acción del agregó aceite vegetal a las disoluciones, este
reactivo azul de metileno, al incubar las soluciones compuesto tiene la función de evitar una oxidación
resultaron cambios en las disoluciones, en el tubo 1 de las soluciones por medio del aire, al agitar los
se esperaba ver una solución incolora, lo cual tubos se perdió el tapón de aceite y se regeneraron
procedió tal como se imaginaba, puesto que en el parcialmente los colores obtenidos en un principio.
tubo había lactato, NAD+, LDH, Azul de metileno y (Ver imagen 1)
KCN, la coloración neutra es la evidencia que se
llevó a cabo una reacción redox en la cual el lactato
se oxida a piruvato por medio de la enzima
obtenida, el KCN, funge como un acoplante
produciendo que la reacción ocurra de lactato a
piruvato y se obtenga NADH + H+, el cual reduce al
azul de metileno y se pierde la tonalidad azul
presentada anteriormente.

-En el tubo 2 se esperaba teóricamente una

coloración azul, puesto que no se agregó NAD+, el
resultado fue contrario ya que se formo una
Imagen 1.Coloración obtenida al agitar las muestras
disolución incolora poniendo en manifiesto que
probablemente existían residuos de NAD+ en el
Determinación de la actividad del sistema de
extracto obtenido.
citocromos y citocromo oxidasa
-En el tubo 3 se esperaba de igual forma una
coloración azul, ya que no se adicionó lactato,
sustrato principal de la reacción, pero el resultado
fue contrario a lo previsto teóricamente, se formó
Conclusiones:

Bibliografía: Nelson. D. L., Cox. M. M. Lehninger

principios de bioquímica 5ta edición (2009).