RELATÓRIO

ANÁLISE INSTRUMENTAL
2017
Espectrofotometria - Determinação de Fe em amostra de complexo vitamínico
(Espectrofotometria na região do visível)

Leonardo G. Shimura, Mateus V. Mori, Thiago A. C. de Souza, William H. Endo.

Introdução: A espectrofotometria é uma técnica baseada na medida da absorção e transmissão de luz

por uma solução. Esta técnica é uma das mais utilizadas em determinações analíticas, como identificação
dos constituintes de fármacos.[1] A medida de absorbância ou transmitância é feita utilizando um
aparelho denominado espectrofotômetro. A relação linear entre absorbância e concentração do analito
é dada pela Lei de Lambert-Beer descrita pela equação: 𝐴 = 𝜀 ∙ 𝑎 ∙ 𝐶 em que A é a absorbância, 𝜀 é a
absortividade molar, 𝑎 é a espessura da cubeta (amostra) que a luz atravessa e 𝐶 é a concentração da
solução.[2] Objetivo: Propõe-se a determinação da concentração de Fe2+ em uma amostra de complexo
vitamínico, utilizando espectrofotometria e uma solução de 1,10-fenantrolina como agente
complexante. Quer-se também verificar a validade da lei de Lambert-Beer. Metodologia: Pesou-se
2 comprimidos de complexo e macerou-se os mesmos, misturando-os com os dos demais grupos a fim
de se preparar 1000 mL de solução contendo 5,0 mg/L de Fe2+ e 5,0 mg/L de H2SO4. Preparou-se, então,
8 soluções padrões e 1 solução contendo a amostra utilizando balões volumétricos de 50 mL, em que
adicionou-se solução padrão de íon ferroso. Completou-se o balão com a adição sequencial de
hidroxilamina, solução-tampão de acetato de sódio, 1,10–fenantrolina e água destilada de acordo com o
proposto no roteiro. Mediu-se a absorbância do balão 5 para diferentes comprimentos de onda para se
obter o espectro de absorção no intervalo de 430-540 nm. A curva analítica de calibração foi obtida a
partir da medida da absorbância de cada amostra no comprimento de onda de máxima absorção
coletado do espectro anterior (neste experimento, 515 nm). Resultados e discussão: A massa média
dos comprimidos foi de 0,2432 g e para o preparo da solução foi de 0,0305 g. Utilizando a amostra 5 em
diferentes comprimentos de onda obteve-se a maior absorbância para 515 nm. A concentração das
amostras de 2 a 9 puderam ser obtidas a partir de um fator de diluição aplicado na concentração da
amostra padrão, pela associação da quantidade de composto utilizado e a massa molar do mesmo. A
equação linear resultante da relação de absorbância em função da concentração de cada amostra foi:
𝑦 = 1 × 107 𝑥 com 𝑅 2 = 0,9987 e, com isso, determinou-se 𝜀 = 1 × 107 𝑚𝐿 𝑚𝑜𝑙 −1 𝑐𝑚−1 , que se
aproxima do valor da literatura de 𝜀 = 1 × 104 𝐿 𝑚𝑜𝑙 −1 𝑐𝑚−1. Com o valor da absorbância da amostra
9 (𝐴 ≈ 0,170), calculou-se, para esta, uma concentração média de 𝐶 = 4,68 𝑚𝑔/𝐿 , que é um valor
próximo aos 5,0 mg/L propostos. Conclusão: O sistema Fe2+ e 1,10-fenantrolina pode ser descrito pela
Lei de Lambert-Beer de acordo com a curva analítica construída para um comprimento de onda máximo
de 515nm e, a partir destea, determinou-se o coeficiente de absortividade molar e a concentração da
amostra analisada. A concentração média de Fe2+/comprimido calculada foi 4,68 mg/L, que se aproxima
do valor objetivado de 5,0 mg/L (erro de 6,4%). Comparando com o obtido por outros grupos tem-se
valores relativamente próximos.

Palavras-chave: espectrofotometria, complexo vitamínico, Lambert-Beer.

Referências:
[1] Espectrofotometria – Princípios e Aplicações. Disponível em:
<http://www.kasvi.com.br/espectrofotometria-principios-aplicacoes/ > Acesso em 14 de Março de
2017.
[2] Espectrofotometria – Componentes do espectrofotômetro. Disponível em:
<http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/componentes.html > Acesso em 14 de Março de 2017.
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ANEXO
Tabela 1. Massas pesadas por cada grupo e massa média dos comprimidos.

Grupos m1 m2 mmédia
1 0,2400 0,2409 0,2405
2 0,2403 0,2437 0,2420
3 0,2402 0,2446 0,2424
4 0,2405 0,2432 0,2419
5 0,2434 0,2433 0,2434
6 0,2424 0,2413 0,2419
7 0,2427 0,2480 0,2454
8 0,2378 0,2576 0,2477
9 0,2430 0,2442 0,2436
média total 0,2432

Tabela 2. Absorbância apresentada pela amostra 5 em diferentes comprimentos de onda.

λ (nm) A
430 0,204
450 0,246
470 0,297
490 0,320
495 0,324
500 0,330
505 0,337
510 0,338
515 0,339
520 0,324
525 0,296
530 0,260
535 0,217
540 0,173
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Figura 1. Espectro de absorção apresentado pela amostra 5 em diferentes comprimentos de onda.

Cálculo da concentração de Fe2+ na solução padrão principal:

0,07 𝑔 𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑓𝑒𝑟𝑟𝑜𝑠𝑜 1 𝑚𝑜𝑙 𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑓𝑒𝑟𝑟𝑜𝑠𝑜 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒 2+ 1𝐿

𝑪𝑭𝒆𝟐+ =( ).( ).( ).( )
1𝐿 392 𝑔 𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑓𝑒𝑟𝑟𝑜𝑠𝑜 1 𝑚𝑜𝑙 𝑠𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑓𝑒𝑟𝑟𝑜𝑠𝑜 1000 𝑚𝐿
𝑪 = 𝟏, 𝟕𝟖𝟓 𝒙 𝟏𝟎−𝟕 𝒎𝒐𝒍 𝑭𝒆𝟐+ /𝒎𝑳

Tabela 3. Determinação das concentrações das amostras de 2 a 8 a partir da diluição do padrão principal.

Balão Padrão utilizado (mL) V final (mL) C (mol/mL)

2 1,0 50 3,57x10-9
3 2,5 50 8,93x10-9
4 5,0 50 1,79x10-8
5 9,0 50 3,21x10-8
6 12,5 50 4,46x10-8
7 19,0 50 6,78x10-8
8 25,0 50 8,93x10-8
9 - 50 -
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Tabela 4. Absorbância medida para cada amostra no comprimento de onda escolhido (515 nm).

Padrão A C (mol/mL)
2 0,021 3,57x10-9
3 0,080 8,93x10-9
4 0,185 1,79x10-8
5 0,337 3,21x10-8
6 0,473 4,46x10-8
7 0,742 6,78x10-8
8 0,972 8,93x10-8
9 0,174 -

Curva Analítica
1.200

1.000

0.800

0.600
A

y = 1.107 x
R² = 0.9987
0.400

0.200

0.000
0.000E+00 2.000E-08 4.000E-08 6.000E-08 8.000E-08 1.000E-07
Conc. (mol/mL)

Figura 2. Diagrama linearizado obtido da absorbância em função da concentração das soluções.

Tabela 5. Concentração obtida para amostra 9 a partir da absorbância apresentada pela análise (comparação de resuultados em 3
grupos diferentes).

Amostra 9 A C (mol/mL) C' (mol/mL) C (mg/mL)

1 0,174 1,74x10-8 8,70x10-8 4,86x10-3
2 0,164 1,64x10-8 8,20x10-8 4,58x10-3
3 0,165 1,65x10-8 8,25x10-8 4,61x10-3
Média 0,168 1,68x10-8 8,38x10-8 4,68x10-3
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Respostas às perguntas propostas:

1. A reação que ocorre entre o ferro e a fenantrolina pode ser esquematizada, de forma
simplificada, da seguinte maneira:
Fe2+ + 3 o-phenH+ ⇋ [Fe(o-phen)3]2+ + 3 H+
2. Um espectro de absorção de um dado composto consiste na representação gráfica de um
conjunto de leituras de absorbância ao longo de uma faixa de comprimentos de onda
eletromagnética. Como a interação da luz com a matéria depende da estrutura química dos
compostos, o espectro de absorção pode ser utilizado como um meio de identificação de
substâncias. Assim, como utilidade prática, tem-se a espectrofotometria, uma técnica para a
determinação analítica aplicável, por exemplo, na determinação de constituintes de fármacos
ou detecção do crescimento de bactérias.
3. O Fe (II) é complexado pela 1,10-fenantrolina numa faixa de pH entre 2,0 a 9,0,
aproximadamente. Caso o pH estivesse fora desta faixa, a complexação não ocorreria devido
a formação de novas espécies. Em pH maior que 9,0, Fe (III) seria formado devido a oxidação
do Fe (II) e em pH menor que 2,0, íons fenantrolina seriam formados por meio da interação
entre íons hidrônio com os nitrogênios da 1,10-fenantrolina.
4. O acetato de sódio foi utilizado como o agente tamponante responsável por manter o pH da
solução numa faixa onde a complexação fosse estável. Os prótons liberados durante a redução
do Fe (III) pela hidroxilamina reagiram com o acetato, formando ácido acético e, assim,
estabelecendo um equilíbrio químico.