Piruvato Deshidrogenasa.

Este complejo enzimático requiere la acción conjunta de tres enzimas y 5 coenzimas. Permite el aprovechamiento del
piruvato obtenido de la glucólisis y provee de Acetil-CoA + CO2 + NADH+H+.
La Acetil-CoA será aprovechada en el ciclo de Krebs, el CO2 puede servir para formar bicarbonato y el NAD reducido irá
inmediatemente a producir H2O + ATP en la cadena respiratoria.
PIRUVATO DESHIDROGENASA
La Piruvato deshidrogenasa (PDH) es un complejo multienzimático mitocondrial de muy elevado peso molecular que
cataliza la unión del CoA al piruvato que se descarboxila rindiendo en el proceso NADH. Estructuralmente el complejo
multienzimático, además de otras proteínas, está formado por 3 enzimas catalizando cada una de estas uno de los pasos
de la reacción completa. La estequiometría total de la reacción es:

Los enzimas y las reacciones catalizadas son los siguientes:

 Piruvato descarboxilasa E1 (EC 1.2.4.1): esta formada por 2 subunidades (en verde) y 2 (en azul).
Cataliza la descarboxilación del piruvato y su unión a la lipoamida de la siguente enzima, la dihidrolipoil
transacetilasa E2, con unión del piruvato de manera transitoria al coenzima tiamina pirofosfato de E1 .

E1 (4 subunidades -en verde- y 4 subunidades - en azul) unido al dominio de unión de E2 (en rojo) .

Dihidrolipoil transacetilasa E2 (EC 2.3.1.12): Transfiere el grupo acetil que se encuentra unido a la lipoamida
(dominio lipoil de E2 ) al coenzima A para dar el acetil-CoA producto de la reacción y la lipoamida en su forma
reducida.

 Dihidrolipoil deshidrogenasa E3 (EC 1.8.1.4): Esta enzima recupera la forma oxidada de la lipoamida
rindiendo un NADH (en amarillo), para ello requier de la intervención de FAD como coenzima (en rojo).

El ciclo de Krebs (conocido también como ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo del ácido cítrico) es un ciclo
metabólico de importancia fundamental en todas las células que utilizan oxígeno durante el proceso de respiración
celular. En estos organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas metabólicas
responsables de la degradación y desasimilación de los carbohidratos, las grasas y las proteínas en anhídrido carbónico
yagua, con la formación de energía química.

El ciclo de Krebs es una ruta metabólica anfibólica, ya que participa tanto en procesos catabólicos como anabólicos. Este
ciclo proporciona muchos precursores para la producción de algunos aminoácidos, como por ejemplo el cetoglutarato y el
oxalacetato, así como otras moléculas fundamentales para la célula.

El ciclo toma su nombre en honor del científico anglo-alemán Hans Adolf Krebs, que propuso en 1937 los elementos
clave de la ruta metabólica. Por este descubrimiento recibió en 1953 el Premio Nobel de Medicina.
Esta ruta metabólica es la tercera etapa de la respiración celular, el proceso de producción de energía en las células.
Forma parte de la respiración aerobia, es decir, se realiza en presencia de oxígeno y se desarrolla entre los procesos
de glicolisis y cadena respiratoria. Su fin es la obtención de NADH, una molécula con poder reductor, que se utiliza para
la producción de ATP mediante la cadena respiratoria.

La Transformación del Piruvato en Acetil-CoA mediante Descarboxilación Oxidativa.

La descarboxilación oxidativa del piruvato es un paso anterior al propio ciclo de Krebs. Durante la glicolisis en el
citoplasma se produce el piruvato, que pasa por una etapa de transición para convertirse en acetil-CoA para que pueda
entrar en el ciclo de Krebs.

El piruvato pasa del citoplasma en las mitocondrias donde el complejo enzimático piruvato-deshidrogenasa lo convierte
en acetil-CoA. Esto ocurre mediante la eliminación de una molécula de CO 2 (descarboxilación) y la unión del resto
acílico obtenido a la coenzima A por oxidación.

El esquema siguiente visualiza este proceso:

Descarboxilación oxidativa del piruvato.

La transformación del piruvato en acetil-CoA es de gran importancia ya que une la glicolisis y el ciclo de Krebs. Hay que
mencionar que los acetil-CoA que participan en él, no proceden solamente de la glicólisis, sino también de la oxidación
de los ácidos grasos y del catabolismo de los aminoácidos. Resulta que el ciclo del ácido cítrico une todas las rutas
catabólicas de las sustancias que aportan energía para nuestro cuerpo.

El Ciclo de Krebs: Resumen.

En general, el ciclo consiste en la formación de citrato, una molécula de 6 átomos de carbono, mediante la reacción del
acetil-CoA (2 carbonos) con oxalacetato (4 carbonos). A continuación, el citrato sufre algunas transformaciones químicas
hasta llegar a formar otra vez oxalacetato (4 carbonos). La reducción del número de átomos de carbono a lo largo del
ciclo ocurre porque el compuesto pierde dos grupos carboxílicos como CO 2, respectivamente en el paso 4 y 5. Todos los
pasos son catalizados por enzimas.
Entradas y Salidas.
En total, en el ciclo de Krebs entran 1 molécula de acetil-CoA y 3 moléculas de H2O. Después de su transcurso
obtenemos:

 1 molécula de Coenzima A
 3 NADH/H+ a partir NAD+
 1 molécula de GTP (guanosina trofosfato) a partir de GDP + Pi
 1 molécula de Coenzima Q reducida (ubiquinol)
Los NADH/H+ y el ubiquinol tienen un papel importante en la cadena respiratoria para la producción de ATP, producto
final de la respiración celular.

Las reacciones en concreto.

En el esquema de abajo, por medio de los colores es fácil observar cuántos átomos de carbono contiene el producto de
cada paso. Las moléculas de color naranja contienen 6 carbonos, la verde (alfa-cetoglutarato) 5 carbonos y las moléculas
azules 4. El acetil-CoA (rosa) tiene 2 átomos de carbono.

El Ciclo de Krebs.

Las enzimas que juegan un papel en el ciclo de Krebs y las reacciones que catalizan son las siguientes:

1 - La citrato sintetasa facilita la unión del oxalacetato con el resto acílico que lleva la coenzima A. Para ello se necesita
adicionalmente un H2O y al final la coenzima A queda libre.

2 y 3 – La aconitasa cataliza la producción de cis-aconitato quitándo un H2O del citrato. Después incorpora un H2O al cis-
aconitato para formar isocitrato.

4 – La isocitrato deshidrogenasa oxida el isocitrato (y reduce al mismo tiempo NAD +, produciendo NADH/H+). Como
producto intermedio de este paso resulta oxalosuccinato (no aparece en el esquema) que se convierte en alfa-
cetoglutarato mediante la descarboxilación. Resulta que el producto de este paso contiene 5 átomos de carbono en vez
de 6. El grupo carboxílico se libera en forma de dióxido de carbono (CO2).

5 – El alfa-cetoglutarato se une con una coenzima A con la ayuda de la alfa-cetoglutarato-deshidrogenasa para formar
succinil-CoA. En este paso se libera otro CO2, lo que deja el producto con 4 átomos de carbono. Además se genera un
NADH/H+.

6 - Durante la reacción 6 que es catalizada por la succinil-CoA-sintetasa, se genera el succinato y una molécula de GTP
(un compuesto rico en energía). La coenzima A queda libre otra vez para reacciones siguientes.
7 – La succinato-deshidrogenasa procede a la oxidación del succinato formando el fumarato. En la misma reacción se
obtiene un FADH2, que a continuación reduce a la coenzima Q (ubiquinona), generando QH 2 (ubiquinol).

8 – Sigue la hidratación del fumarato por la fumarasa y se obtiene el malato.

9 – Finalmente, la malato-deshidrogenasa permite la oxidación del malato, generando oxalacetato y otro NADH/H +.
Regenerado, el oxalacetato puede aceptar de nuevo un acetil-CoA y recorrer el ciclo, ganando más “energía” en forma
de NADH/H+ y QH2 que puede ser utilizada en la cadena respiratoria.

El ciclo de Krebs no es solamente una ruta catabólica sino que también juega un papel importante en varios procesos
anabólicos (por eso se llama una vía anfibólica). Por ejemplo, el oxalacetato y el alfa-cetoglutarato sirven como
precursores en la biosíntesis de algunos aminoácidos. Otros de los metabolitos del ciclo participan en la gluconeogénesis
y en la síntesis de los ácidos grasos.

Transporte de Electrones en el Ciclo de la Energía de la Célula

El camino más eficiente de la célula eucariota para la producción del vitalATP,

es la respiración aeróbica que tiene lugar en las mitocondrias. Después de
laglucólisis, el producto piruvato es tomado en la mitocondria, y oxidado
adicionalmente en el ciclo TCA. Este ciclo deposita energía en las coenzimas
reducidas, que la transfieren a través de lo que se llama la cadena de
transporte de electrones.

Este es un gráfico activo.

La energía dada a los electrones de la coenzima reducida NADH y al succinato, por el ciclo TCA, se transfiere en
pequeños pasos en la membrana interna de la mitocondria a través de una cadena de cinco complejos de proteínas.
Estos pequeños pasos de oxidación logran la conversión del ADP en la molécula de la divisa de energía ATP. Esta serie
de reacciones acopladas, son referidas a menudo como fosforilación oxidativa.
La energía utilizada en el transporte de electrones, bombea los protones a través de la membrana mitocondrial interna de
la matriz interior, al espacio intermembrana, produciendo un fuerte gradiente de concentración de hidrógeno. Este
proceso lo llamó su descubridor Peter Mitchell, quimiosmosis. Esta diferencia en la concentración de protones produce
tanto un potencial eléctrico, como un potencial de pH a través de las membranas. Luego, el complejo de proteínas de
la sintasa ATP, hace uso de este potencial de membrana para llevar a cabo la fosforilación del ADP en ATP.

Los Complejos de Proteínas de la Cadena de Transporte de Electrones

Se han dedicado muchos años de esfuerzo, al estudio de los procesos destacables en la mitocondria. La cadena de
transporte de electrones es la etapa final de larespiración aeróbica, que conduce a la formación de la ATP en la
membrana interna de la mitocondria. La imagen que surge es la de reacciones acopladas a través de cinco estructuras
de proteínas asociadas con la membrana interna.

Complejo I (coenzima-NADH oxidorreductasa Q). La coenzima reducida

NADH se une al Complejo I y lleva a cabo la reducción de la coenzima Q10.
Los electrones se transfieren a través del Complejo I, usando el FMN
(mononucleótido de flavina) y una serie de grupos Fe-S. El proceso logra el
bombeo de cuatro protones a través de la membrana mitocondrial interna al
espacio intermembrana.

El complejo II (succinato-Q oxidorreductasa). Este complejo forma un

segundo punto de entrada a la cadena de transporte de electrones,
utilizando el producto succinato del ciclo TCA.

Complejo III (Q-citocromo c oxidorreductasa). Este complejo lleva a cabo la

oxidación del ubiquinol y la reducción de dos moléculas de citocromo-c. Son
bombeados cuatro hidrógenos a través de la membrana hacia el espacio
intermembrana.

Complejo IV (Citocromo c oxidasa). Este complejo final en la cadena de

transporte de electrones lleva a cabo la transferencia final de los electrones
al oxígeno, y bombea dos protones a través de la membrana. Esto hace un
total de 10 protones a través de la membrana, para una molécula de NADH
en la cadena de transferencia de electrones.
 Sintasa ATP. Este complejo hace uso del potencial de protones creado por la
acción de la cadena de transporte de electrones. Transporta un protón hacia
abajo del gradiente y utiliza la energía para completar la fosforilación de ADP
en ATP. El modelo actual de esta acción se denomina mecanismo de unión,
y parece que parte de este gran complejo proteico, lleva a cabo una rotación
mecánica en el proceso de la fosforilación, y la liberación de la molécula de
ATP. Así que parte de su acción es como la de un motor molecular.

Organización de la cadena

A partir de la membrana interna mitocondrial pueden ser aislados cinco complejos enzimáticos denominados I,II, III, IV y
V. Los complejos I-IV contienen parte de la cadena de transporte de electrones, mientras que el complejo V cataliza la
síntesis de ATP por lo que no es propiamente un componente de la cadena de transporte de electrones. Cada complejo
acepta o dona electrones a acarreadores relativamente movibles como la coenzima Q y el citocromo c. Cada acarreador
de la cadena de transporte de electrones puede recibir electrones de un donador y subsecuentemente pueden donarlos
al siguiente acarreador de la cadena, finalmente se combinan con Oxígeno y protones formando agua. Este
requerimiento por Oxígeno hace al proceso de transporte de electrones la cadena respiratoria, la cual utiliza la mayoría
del Oxígeno consumido por un organismo aerobio.

Reacciones de la cadena de transporte de electrones

Con la excepción de la coenzima Q, todos los miembros de esta cadena son proteínas. Estas proteínas pueden
funcionar como enzimas como en el caso de varias deshidrogenasas, pueden contener fierro como parte de su
centro fierro-azufre o pueden contener cobre, como en el caso de los citocromos a y a3.

1.- Formación de NADH

El NAD+ es reducido a NADH por deshidrogenasas las cuales remueven dos átomos de Hidrógeno de su substrato.
Ambos electrones pero sólo un protón (ion hidruro :H-)son transferidos al NAD+, formando NADH mas un protón libre, H+,
el cual es liberado al medio.

2.- Deshidrogenasas de NADH

El protón libre mas el ion hidruro acarreado por el NADH son ahora transferidos a una deshidrogenasa de
NADH, un complejo enzimático embebido en la membrana interna mitocondrial. Este complejo tiene una molécula de
flavín mononucleótido (FMN) unido fuertemente que acepta los dos átomos de Hidrógeno (2e- + 2H+), reduciéndose a
FMNH2. La deshidrogenasa de NADH también contiene átomos de fierro apareados con átomos de azufre lo que hace
centros fierro-azufre. Estos centros son necesarios para la transferencia de átomos de Hidrógeno al siguiente miembro
de la cadena, la ubiquinona.

3.- Coenzima Q: (CoQ)

Esta coenzima es un derivado de quinona con un largo tallo isoprenoide. Es ubicua en los sistemas biológicos
por ello se denomina también ubiquinona. La CoQ puede aceptar átomos de Hidrógeno tanto del FMNH 2producido por la
NADH deshidrogenasa y del FADH2 producido por la succinato deshidrogenasa en el ciclo del ácido cítrico y la acil-
CoA deshidrogenasa en el metabolismo lipídico.
4.- Citocromos
Los demás miembros del la cadena de transporte de electrones son citocromos. Cada uno contiene un
grupo hemo hecho de un anillo porfirínico que contiene un átomo de fierro. A diferencia del hemo de la hemoglobina, el
átomo de fierro del citocromo es reversiblemente transformado mediante oxido reducciones en su forma férrica (Fe 3+) y
ferrosa (Fe2+). Los electrones son pasados a los citocromos b, c y a + a3 desde la CoQ.

5.- Citocromo a + a3

Este citocromo es el ínico acarreador de electrones en el cual el hemo de fierro tiene un ligando libre que
puede rreaccionar directamente con el Oxígeno molecular. En este sitio los electrones transportados, el Oxígeno
molecular y los protones libres se unen para formar agua. El Citocromo a + a3 (también llamado citocromo oxidasa)
contiene átomos de cobre unidos que son requeridos para que la reacción ocurra.

A la fecha se han identificado inhibidores específicos del transporte de electrones. Estos compuestos previenen el paso
de electrones al unirse a componentes específicos de la cadena de transporte de electrones, su acción es bloquear la
reacción de oxido-reducción. Antes de el bloqueo los transportadores de electrones están reducidos, después de la
acción del inhibidor, están oxidados. Dado que la cadena de transporte de electrones está íntimamente ligada a la
fosforilación oxidativa, estos inhibidores también detienen la si de ATP.

El flujo de electrones en las reacciones de oxido-reducción es responsable, directa o indirectamente de todo el trabajo
realizado en los organismos vivientes. En los organismos no fotosintéticos, las fuentes de electrones son compuestos
reducidos (los alimentos); en los organismos fotosintéticos, el donador inicial de electrones es una especie química
excitada por la absorción de la luz solar. El flujo de los electrones en el metabolismo es un proceso complejo, los
electrones se mueven a partir de varios metabolitos intermedios a acarreadores de electrones especializados en las
reacciones catalizadas por enzimas. Posteriormente, los acarreadores donan los electrones a aceptores con elevadas
afinidades por los electrones, este último proceso, genera energía. Las células contienen una variedad de transductores
de energía, los cuales convierten la energía del flujo de electrones en trabajo.

El transporte de electrones, es la fuente principal de energía para las actividades celulares, libera grandes cantidades de
energía libre, la mayor parte de la cual se almacena en forma de ATP en la fosforilación oxidativa. Las enzimas
que catalizan el este proceso, son generalmente más complejas tanto estructuralmente como en su mecanismo catalítico
que las enzimas de las otras vías metabólicas, y por tanto son menos conocidas. La mayoría están en la membrana
interna mitocondrial, por lo cual es complicada su extracción y purificación. Tampoco es bien conocido cómo la liberación
de energía libre que se produce durante el transporte de electrones se conserva y transforma en la energía del enlace
fosfato durante la fosforilación oxidativa y las síntesis del ATP. Por lo anterior, estas enzimas son un modelo de estudio
muy atractivo.

Todos los siguientes procesos: el transporte de electrones, la energía libre de la transferencia de electrones del NADH y
FADH2 al O2 vía centros redox unidos a proteínas, está acoplada a la síntesis de ATP.