INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas RESULTADOS

Bioquímica General
Práctica No. 5.1: Curva Tipo de Ázucares Reductores. [ Azúcar ] mL [µ mol] Absorbencia
0.1 0.1 1 0.117
GRUPO: 4QV2 EQUIPO: SECCIÓN: 0.2 0.1 2 0.340
0.4 0.1 4 0.622
INTEGRANTES:
0.8 0.1 8 0.927
1 0.1 10 1.169

INTRODUCCIÓN Tabla 1.-Resultados de Absorbencia de Azucares Reductores.

La curva tipo o de calibración es un método de química

analítica empleado para medir la concentración de una sustancia en Curva Tipo de Ázucares Reductores
una muestra por comparación con una serie de elementos de
concentración conocida. Se basa en la existencia de una relación en 1.4
principio lineal entre un carácter medible por ejemplo la absorbancia 1.2
(usando el espectrofotómetro) de una solución colorida y la
1

Absorbencias
y = 0.2691x - 0.1723
concentración, que es nuestra variable a determinar usando un
0.8 R² = 0.9975
despeje en la ecuación de la recta. Para ello, se efectúan diluciones Absorbencia
de unas muestras de contenido conocido y se produce su lectura y se 0.6
determina su interpretación matemática que relacione ambas; 0.4 Linear
después, se lee el mismo carácter en la muestra problema y,
0.2 (Absorbencia )
mediante la sustitución de la variable independiente de esa función,
se obtiene la concentración de esta. Se dice pues que la respuesta 0
de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva de 1 2 4 8 10
calibración, se puede interpolar el dato de la muestra problema μ moles del azucar reductor
hasta encontrar la concentración del analito. Las curvas de
calibración suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal sobre
la que se realiza un test estadístico de regresión para evaluar su Fig 1.-Curva Tipo de Azucares Reductores.
sensibilidad.
OBJETIVO
DISCUSIONES
Obtener una curva de calibración, mediante la cual se pueden
transformar las lecturas de absorbencia obtenidas a lo largo de las
experiencias de cinética enzimática: para poder obtener así la Se elaboró una curva tipo para poder determinar la cantidad de
actividad de la enzima invertasa en unidades internacionales (U.I). azucares reductores en micromoles.
Al preparar nuestras diluciones, nosotros conocemos la cantidad de
azúcar reductor que estamos adicionando, y luego, para poder
obtener la absorbancia en el espectrofotómetro adicionamos en
compuesto 3,5-DNS para que el azúcar, al tener la propiedad de
reducir compuestos por la acción de su grupo aldehído libre, y éste a
su vez reducirse, se forma un compuesto de coloración amarilla-
marrón la cual puede leerse a 540nm.
El propósito de la curva de calibración es que la concentración vaya
aumentando para obtener valores proporcionales de absorbancia,
así como en la ley de Bouger y Beer, la cual nos menciona que la
concentración es proporcional a la absorbancia, y como podemos
observar en la gráfica de la figura 1 se cumple con esta ley, ya que
los valores van en aumento y se puede obtener una recta. Con la
ecuación de la recta obtenemos el valor de la pendiente y la
ordenada al origen, con la cual podemos calcular la concentración
en micromoles del azúcar reductor presente.

CONCLUSIONES

 Mientras aumenta la concentración de azúcar reductor,

tambien aumentará la absorbancia, como se observa en la
gráfica.
 Se obtuvo una curva de calibración en donde se obtuvo la
concentración en micromoles mediante las lecturas de
absorbancia.
 El poder reductor de los azúcares se puede poner de
manifiesto y será de gran utilidad para obtener la actividad
de la enzima invertasa en Unidades Internacionales para las
siguientes prácticas de cinética enzimática.

BIBLIOGRAFIA
 Voet Donald; Fundamentos de Bioquímica “La Vida a Nivel
Molecular”; Ed Medica Panamericana, Buenos Aires-Argentina
2009, pp. 134-136.
 http://es.scribd.com/doc/67221317/Cinematica-enzimatica-5-1
CONSULTADO EL 22-Septiembre-2013 a las 20:30 hrs.