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A. Partes de una pipeta

Calibrador Botón de pipetagem

Botón Ejecutor

Numero de serie
Empuñadura

Visor digital Cámara de

indicador isolamento
de volumen
Rosca de conexión

Ejecutor de TIP

Figura 1.1 Esquema de una pipeta y sus partes

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B. Fases de pipeteado
1. Preparación
Sostenga el instrumento en una posición casi vertical. Presione el émbolo suavemente hasta la posición
más alta primero.

2. Aspiración
Sumerja unos milímetros la punta de la pipeta en el líquido. Suelte con suavidad el émbolo para que se
mueva hacia arriba a la posición de reposo.

3. Estabilización
Espere un segundo, para que todo el líquido tenga tiempo de moverse hacia arriba en la punta (ver abajo
cuadro con tiempos de estabilización por modelos).

4. Dispensado
Coloque la punta de la pipeta en ángulo contra la pared interior del recipiente receptor. Presione el
émbolo suavemente hasta la primera posición.

5. Purga
Espere un segundo y luego presione el émbolo a la posición de la segunda parada. Este golpe elimina
cualquier resto de la muestra de la punta de la pared lateral de deslizamiento hacia arriba por la pared.

Figura 1.2
esquema
de las fases
del pipeteo

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C. Mantenimiento
1. Inspección Frecuencia Diaria
i. Verificar la integridad y ajuste de los mecanismos. Los mismos deben poder moverse de forma
suave. El pistón debe desplazarse suavemente.
ii. Confirmar que la porta puntas no presente distorsiones o marcas de desgaste, dado que es
esencial para la exactitud de las medidas. Verificar el ajuste de las puntas.
iii. Colocar una punta y llenarla con agua destilada. La pipeta no debe presentar ningún tipo de fuga.

2. Limpieza y descontaminación
i. Verificar cada día que la pipeta se encuentra limpia, en sus superficies interiores y exteriores. Si
se detecta suciedad, la misma debe limpiarse utilizando un solvente adecuado o una solución
jabonosa. Revisar las recomendaciones del fabricante relativas a la compatibilidad que tienen los
materiales con que está fabricada la pipeta para seleccionar aquellos solventes que no produzcan
efectos dañinos a la integridad de los componentes.
ii. Esterilizar la pipeta siguiendo las indicaciones de los fabricantes. Algunas pipetas se pueden
esterilizar en un autoclave, utilizando un ciclo de 121 °C y un tiempo estimado de 20 minutos;
algunas requieren ser desensambladas para que el vapor esté en contacto con
iii. El desensamble consiste en liberar o desenroscar el cuerpo central de la pipeta
iv. La pipeta solo debe ensamblarse de nuevo, cuando el ciclo de esterilización haya terminado y la
temperatura se haya estabilizado con la del ambiente. En ese momento se verifica que los
componentes se encuentren secos y se procede al ensamble

3. Si una pipeta ha sido utilizada con sustancias peligrosas para la salud, es responsabilidad del usuario
asegurar que está completamente descontaminada, antes de que la misma sea utilizada en otros
procedimientos o sea retirada del laboratorio.

D. Verificación

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1. Limpiar los anillos en O, el émbolo y las paredes interiores del cilindro antes de lubricar
2. Lubricar el émbolo y el pistón con grasa siliconada especial para pipetas
3. Ensamblar siguiendo un proceso inverso al utilizado para desensamblar.

Figura 1.3 esquema Desensamble de una pipeta

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E. Calibración de pipeta
1. Elementos y equipos requeridos
i. Una balanza analítica
ii. Un termómetro de tipo electrónico con resolución de 0,1 °C o mejor, capaz de medir en el
rango de temperatura en el cual se realiza el ensayo, cuya sonda pueda ser sumergida en el
líquido bajo análisis.
iii. Un higrómetro con una incertidumbre estándar 10 % o mejor
iv. Un barómetro con una incertidumbre estándar de 0,5 kPa o mejor
v. Un cronómetro
vi. Micropipetas de varios volúmenes
vii. Puntas desechables de varios volúmenes
viii. Viales de fondo plano
ix. Agua bi o tridestilada y desgasificada
x. Recurso humano entrenado

2. medir el volumen de una muestra de agua, a partir de la masa de agua que dispensa una pipeta de
capacidad conocida
i. Comparar diversos tipos de pipetas entre sí para detectar si hay diferencias entre ellas.
ii. Controlar la precisión y la exactitud de una pipeta.
iii. Controlar la exactitud y la precisión de un lote de pipetas.
iv. Controlar factores atribuibles a la utilización de una pipeta por diversos usuarios.

3. Procedimiento
i. Instalar una punta nueva en la pipeta.
ii. Succionar con la pipeta agua destilada del recipiente de almacenamiento y desecharla en el
recipiente de desperdicio al menos 5 veces, para estabilizar la humedad del volumen de aire en
el interior de la pipeta.
iii. Añadir agua al recipiente que se utilizará para pesar, hasta que se obtenga una altura del líquido
de al menos 3 mm.
iv. Registrar la temperatura del agua, la presión ambiental y la humedad relativa.
v. Reemplazar la tapa del recipiente de pesado, si aplica.
vi. Registrar el peso que presenta la balanza o efectuar la tara para que la lectura de la misma
quede en cero (0).

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Li mpi eza La punta Si n goteo Mante

con a jus ta
Ca l i bra ci ón de pi peta s
i s opropa n correcta
100 µl Fecha ol mente
Pes o i ni ci a l 78,819 28.8.17 X X X X
Regi no Enri que Qui m Lopez 1 78,715 0,1036
2 78,613 0,1019
3 78,511 0,102
4 78,41 0,1011
5 78,308 0,1022
6 78,216 0,0922
7 78,116 0,1003
8 78,014 0,1017
9 77,915 0,0988
10 77,816 0,0995
Promedi o 0,1003
Vol umen medi o 0,1007
Des vi a ci on Es ta nda r 9E-05
Coefi ci ente de va ri a ci ón 0,0904

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F. Identificación de cambio

Versión Fecha Modificación

01 25/08/2017 Emisión del documento
02 01/09/2017 En el inciso E se cambio el formato
de la calibración de las pipetas

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