Práctica 6.

Diagnóstico de candidosis y critpcocosis

Candidosis Micosis causada por diversas especies de levaduras oportunistas del

género Candida, en especial Candida albicans; presenta una variedad
de cuadros clínicos; afecta en particular mucosas (boca, vagina, etc.),
piel, uñas y de manera excepcional otros órganos como pulmones e
intestino.
Criptococosis Es una micosis de curso subagudo o crónico, causada por levaduras
patógenas oportunistas denominadas Cryptococcus neoformans y
Cryptococcus gattii; se caracteriza por afectar inicialmente
pulmones, y después diseminarse a piel y vísceras, con una clara
predilección hacia el sistema nervioso central (SNC).

1. Investigar los componentes y funciones del agar BIGGY.

Uso: medio selectivo de primo aislamiento para diversas levaduras.

Componentes: Citrato de bismuto amónico 5 g. Sulfito de sodio 3 g. Dextrosa10 g. Extracto de

levadura 1 g. Glicina 10 g. Cloranfenicol 0.5 g. Agar 20 g. Agua destilada 1 000 ml.

2. Investigar los componentes y funciones del agar harina de maíz.

Harina de maíz agar (Medio corn-meal agar):

Componentes: Harina de maíz 40 g. Agar bacteriológico 20 g. Agua destiladan1 000 ml.

Preparación: esterilizar en autoclave a 121°C, durante 15 minutos.

Uso: medio de esporulación y conservación de diversos hongos. Identifi cación de Acremonium

sp., Fusarium sp. y dermatofi tos

3. Investigar los colores que se obtienen en el CHROMAgar Candida® de cada especie.

Elaborar una tabla con la información obtenida.

4. ¿Por qué se forman las clamidoconidias? ¿Quiénes las presentan?

Son conidios que se crean del engrosamiento de las hifas; pueden ser intercalares o terminales,
propias de los hongos mohos y específicas de C. albicans.

No se consideran estrictamente formas de reproducción, sino deresistencia, porque por lo general

nacen en condiciones adversas (por ejemplo, algunos clamidoconidios terminales los forman C.
albicans y C. dubliniensis y un intercalar lo hace Mucor sp.).

5. Investigar qué otros medios de cultivo pueden emplearse para que se formen las
clamidoconidias, además del agar harina de maíz. Anotar los componentes de cada uno de
ellos.

Agar arroz:

Arroz blanco molido 8 g. Agua destilada 25 ml.

Preparación: poner los ingredientes en matraz Erlenmeyer y esterilizar en autoclave a 121°C,

durante 15 minutos.

Uso: para esporulación de dermatofitos.

Agar cereal para Gymnoascaceae:

Pasta de tomate (Hunt’s) 10 g. Cereal mixto para bebé (Beech-nut o fruto del haya) 10 g. Sulfato
de magnesio 1 g. Fosfato de potasio 1 g. Nitrato de sodio 1 g. Agar bacteriológico 20 g. Agua
destilada 1 000 ml.

Preparación: mezclar y llevar a ebullición. Enfriar y ajustar pH de 5.6 con NaOH. Esterilizar a 121°C
durante 20 minutos.

Uso: para aislamiento y estimulación del género Arthroderma.

Papa zanahoria agar (PZ agar):

Pulpa de zanahoria 20 g. Pulpa de papa 20 g. Agar bacteriológico 20 g. Agua destilada 1 000 ml.

Preparación: las pulpas maceradas se hierven a fuego lento por 1 h, posteriormente se filtran con
gasa y se le adiciona al filtrado la cantidad respectiva de agua para completar a 1 L. Se esteriliza en
autoclave a 121°C, durante 15 minutos.

Uso: medio de conservación y esporulación.

6. Anotar el fundamento de la prueba de filamentación en suero o formación de tubo

germinativo.

Se realiza en suero humano o sueros con glucosa, glucosamina o sales de amonio. Se siembra la
cepa a investigar en 0.5 ml de suero, se incuba a 37°C durante 3 a 3½ horas, después se practica
un examen en fresco con algún colorante o tinción (Gram).

Esta prueba es presuntiva de C. albicans y de C. dubliniensis si se forma un tubo germinal de

aproximados 5 a 15 μm de largo que parte de la levadura.

7. Anotar el fundamento de la prueba de ureasa.

Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno proveniente de la
urea, la hidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos
alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo.

8. Anotar los componentes, preparación y funciones del agar alpiste negro.

Medio de alpiste negro agar:

Alpiste negro o Níger* (pulverizado) 70 g. Cloranfenicol 50 mg. Agar bacteriológico 20 g. Agua

destilada 1 000 ml.

Preparación: remojar el alpiste negro en 1 000 ml de agua, hervir durante 30 minutos; después
filtrar en gasa y papel fi ltro. Aforar a 1 000 ml de agua. Esterilizar en autoclave a 110°C, por 15
minutos.

Uso: medio de identifi cación de Cryptococcus neoformans.

9. Anotar el fundamento de auxonograma.

-Se basa en la utilización de carbohidratos.

Se realiza en medio sólido base peptonado, carente de carbohidratos, los cuales se agregan en
forma de penicilindros o sensidiscos (de manera similar a como se emplean en los antibiogramas);
con anticipación se siembra la cepa problema, y el carbohidrato a investigar se aplica en una
solución del 1 al 2%; se incuban a 25°C durante cinco a 15 días. El desarrollo de la colonia
alrededor del carbohidrato indica una lectura positiva.

10. Anotar el fundamento de zimograma.

-Se basa en la fermentación de carbohidratos.

Debe realizarse en medio de cultivo líquido con una proporción de carbohidrato que fl uctúa entre
1 y 5%, agregándole un indicador para pH ácido (rojo fenol o púrpura de bromocresol) y una
campana de fermentación, para detectar la producción de gas. Los medios se siembran a partir de
colonias diferenciadas, después se incuban a 25°C durante 5 a 15 días; la lectura debe hacerse por
el viraje del indicador, así como por la formación de gas.