METROLOGIA-2003 – Metrologia para a Vida
Sociedade Brasileira de Metrologia (SBM)
Setembro 01−05, 2003, Recife, Pernambuco - BRASIL
OTIMIZAÇÃO E AVALIAÇÃO DO DESEMPENHO DE UM MÉTODO DE
DETERMINAÇÃO DE TPH (TOTAL PETROLEUM HYDROCARBONS) EM
AREIA POR DETECÇÃO NO INFRAVERMELHO
Alexandre Rodrigues do Nascimento1 , José Araruna Junior2 , Roberta Lourênço Ziolli3
1
Programa de Pós-graduação em Metrologia para a Qualidade Industrial - PUC, Rio de Janeiro, Brasil
2
Departamento de Engenharia Civil - PUC, Rio de Janeiro, Brasil
3
Departamento de Química - PUC, Rio de Janeiro, Brasil
Resumo: No presente trabalho realizou-se a otimização da
metodologia de análise de TPH (Total Petroleum
Hydrocarbons) em amostras de areia contaminadas com
petróleo, validando a técnica de detecção na região do
infravermelho com o equipamento da Infracal TOG/TPH.
Os ensaios foram realizados utilizando Óleo Marine Fuel
380, com densidade igual 0,987 g cm-3 e viscosidade de
5313 cP a 20°C. Este óleo foi fornecido pelo Centro de
Pesquisa da Petrobrás (CENPES/PETROBRÁS/RJ), sendo o
mesmo óleo derramado no acidente ocorrido em janeiro de
2000 na Baia de Guanabara, RJ, quando 1.300 m3 vazaram
do duto que interliga a REDUC (Refinaria Duque de Caxias,
RJ) ao terminal da Ilha d’Água/RJ, atingindo praias. A
metodologia otimizada foi aplicada na determinação de TPH
em amostras de areia contaminada com petróleo do referido
acidente, sendo que em 110 amostras analisadas, foram
obtidos resultados de TPH na faixa de 10,0 a 155,0 g kg -1 .
Os resultados da validação da metodologia indicaram que o
desempenho da metodologia foi muito favorável à aplicação
que se destina. Entre os parâmetros metrológicos obtidos
neste trabalho, o limite de detecção do método foi de 9,44
mg l-1 , consideravelmente inferior à faixa de concentração
normalmente obtida para tais amostras.
Palavras chave : TPH; Areia contaminada com Petróleo;
Determinação de Petróleo por Detecção no Infravermelho.
1. INTRODUÇÃO
O petróleo é um combustível fóssil de grande significado
para a economia mundial, que também representa um
problema devido à sua freqüente introdução no meio
ambiente, não apenas pelas atividades de transporte deste
combustível como também pela sua larga utilização
industrial. Por este motivo, a contaminação do solo por
petróleo tem merecido pesquisas extensas nos últimos anos.
Paralelamente, técnicas analíticas para determinação do grau
dessa contaminação estão sendo cada vez mais aprimoradas
tanto para uso nos programas de monitoramento químicos
para a avaliação dos impactos de petróleo ao ambiente
quanto para avaliar a eficiência de novas tecnologias para a
remediação das áreas atingidas.
principal responsável por essas conseqüências danosas à
saúde ambiental são os hidrocarbonetos, que de acordo com
Zíllio e Pinto (2002), o petróleo brasileiro está agrupado em
dois conjuntos distintos. O primeiro grupo são petróleos
com teor de hidrocarbonetos saturados acima de 55%, e
apresentam valores de °API superiores a 29. O segundo são
óleos com °API inferior a 29 e possuem uma composição
onde os saturados estão abaixo de 55%, e ambos os teores
de aromáticos e polares estão abaixo de 35%. Entre os
hidrocarbonetos do petróleo, de um modo geral, a toxicidade
dos compostos mais pesados é maior. Entretanto, na água,
os efeitos tóxicos serão maiores com os componentes mais
leves, como parafinas de C12 a C14 pelo fato de serem mais
solúveis. De modo geral pode-se definir que os óleos leves
(refinados ou não) tem principalmente o efeito químico
sobre as comunidades biológicas, enquanto que óleos
pesados tem efeitos físicos sobre as mesmas (Milanelli,
1994).
Além do impacto a saúde ambiental, os derrames de óleo
podem ter um sério impacto econômico nas atividades
costeiras e exploração dos recursos do mar. Quanto às
atividades pesqueiras comerciais, sabe-se que um derrame
de petróleo pode contaminar equipamentos de pesca e
instalações de maricultura. As populações de peixes adultos
raramente são afetadas devido à grande mobilidade dos
mesmos. A contaminação destas áreas leva à insatisfação do
público pela interferência nas atividades recreacionais, tais
como natação, pesca, mergulho e navegação. Algumas
indústrias precisam de suprimento de água do mar para suas
operações normais e podem ser afetadas por estes derrames.
Segundo o TPH Criteria Working Group (1998), um dos
parâmetros freqüentemente usado para a avaliação de uma
contaminação proveniente de um vazamento de petróleo, é o
“Total Petroleum Hydrocarbon”, denominado TPH, que
fornece informações sobre a concentração dos
hidrocarbonetos totais presentes em determinada amostra.
A definição proposta para TPH, segundo a Agência de
Proteção Ambiental dos Estados Unidos, USEPA (2001),
emprega dois conceitos. Um deles é o uso do fracionamento
como uma alternativa para medir os constituintes da mistura
de petróleo, dessa forma, tudo que for medido é somado e
daí se tem o dado TPH. O outro conceito sugere que TPH
são todos os hidrocarbonetos que foram extraídos de uma
amostra e detectados por uma técnica particular.
Devido à existência de muitas substâncias químicas
presentes no petróleo e seus derivados, não é prático medir
cada uma dessas substâncias separadamente para efeito de
monitoramento do progresso da remediação de uma área
contaminada. Torna-se muito mais útil medir a concentração
total de TPH nessa área.
O TPH Criteria Working Group (1998), sugere que a
resposta de TPH não pode ser usada para estimar
quantitativamente o risco à saúde. As mesmas concentrações
de TPH podem representar composições muito diferentes e
consequentemente riscos diferentes à saúde humana e ao
ambiente. Pois, como foi visto anteriormente, TPH é a soma
de todos os hidrocarbonetos presentes na amostra. Ou seja,
com a resposta TPH tem-se a soma da concentração de
todos os hidrocarbonetos presentes na amostra e não a
concentração de cada classe de hidrocarbonetos. Se os dados
de TPH indicarem que pode haver uma contaminação
significativa do ambiente, outras análises devem ser
realizadas de modo que o dano possa ser quantitativamente
avaliado. O TPH Criteria Working Group (1998) considera
TPH como sendo uma ferramenta de baixo custo e que pode
ser usada para três finalidades: (i) identificação de uma
contaminação; (ii) avaliação do grau de contaminação; e (iii)
avaliação do progresso de uma remediação.
Para medidas de TPH no campo, são utilizados kits de
diluição de amostra e instrumentos portáteis de
infravermelho. Estes últimos apresentam algumas
limitações, tais como a confiabilidade da faixa de trabalho,
limite de detecção ou até mesmo a utilização do solvente
adequado (Wilks Enterprise, 1995). Por isso, torna-se
necessário o uso de um equipamento robusto, que possa
gerar uma resposta com rapidez e com confiabilidade.
Visando eliminar esta lacuna, o presente trabalho
procura implementar uma metodologia para analises de TPH
no equipamento denominado Infracal TOG/TPH através da
otimização do método de determinação estabelecido pela
USEPA (USEPA Method 418.1).
2. REVISÃO DOS MÉTODOS DE MEDIDA DE TPH
As análises de hidrocarbonetos de petróleo totais (TPH)
são realizadas para determinar a quantidade total de
hidrocarbonetos presentes numa amostra. Há uma variedade
de métodos de determinação de TPH. Métodos diferentes
dão freqüentemente resultados diferentes porque são
destinados a extrair e medir frações diferentes de
hidrocarbonetos de petróleo (TPH Criteria Working Group,
1998). As técnicas freqüentemente usadas incluem a
cromatografia gasosa (CG) com detector de ionização em
chama, infravermelho (IR), imunoensaio e gravimetria.
2.1. CROMATOGRAFIA GASOSA (CG) COM
DETECTOR DE IONIZAÇÃO EM CHAMA
O método que utiliza cromatografia gasosa é,
atualmente, o mais usado para a determinação de TPH,
porque além do alto grau de sensibilidade e seletividade, ele
pode ser usado para a identificação individual dos
hidrocarbonetos (TPH Criteria Working Group, 1998).
Para este método, o TPH é definido como tudo o que é
extraído por um solvente ou removido por um fluxo gás de
arraste adequado, separado por uma fase estacionária e
posteriormente detectável por cromatografia em fase gasosa
utilizando-se um detector de ionização de chama. A
vantagem do método de CG é que este é um método
qualitativo além de quantitativo.
2.2. GRAVIMETRIA
O método que utiliza a gravimetria baseia-se na pesagem
de amostra após a extração do analito e evaporação do
solvente. Esta quantidade é chamada TPH e relatada em
percentagem do peso seco da amostra total do solo. Alguns
métodos gravimétricos incluem uma etapa de cleanup
(limpeza da amostra) para remover a fração de
hidrocarbonetos biogênicos, aqueles que não são
considerados provenientes de petróleo.
A amostra é extraída com um solvente apropriado, e
posteriormente os compostos polares biogênicos presentes
nela podem ser parcialmente, ou completamente removidos,
com sílica gel.
A vantagem dos métodos gravimétricos é que eles são
simples e de baixo custo. Estes métodos não são apropriados
para a medida dos hidrocarbonetos de baixo peso molecular
que volatilizam em temperaturas abaixo de 70-85°C.
Somente solos altamente contaminados; amostras que
contêm hidrocarbonetos de alto peso molecular, ou amostras
aquosas quando o hexano é recomendado como o solvente, é
que recomenda a determinação de TPH por este método. Os
métodos gravimétricos não fornecem informação sobre a
natureza dos compostos presentes no petróleo, nem sobre a
toxicidade e nenhuma informação específica sobre o risco
potencial associado com a contaminação.
2.3 IMUNOENSAIOS
Os métodos de imunoensaios correlacionam TPH com a
resposta das substâncias que reagem especificamente com o
petróleo. Existem kits utilizando diferentes reagentes
baseados na metodologia de imunoensaio disponíveis para a
determinação rápida de TPH. Os kits são sistemas portáteis
projetados para conduzir o trabalho analítico no campo e
inclui componentes para a preparação da amostra,
instrumentação para leitura e obtenção de resultados.
Segundo estudos do TPH Criteria Working Group
(1998), atualmente, a maioria destes métodos mede somente
compostos aromáticos. O imunoensaio é usado como uma
técnica de seleção, ou seja, dependendo do composto de
interesse, usa-se substâncias biológicas específicas para
reagir com o analito. E sua precisão e exatidão são mais
baixas do que os métodos padrões de laboratório tais como
GC/FID ou medidas de IR.
2.4. INFRAVERMELHO (IR)
Os estudos do TPH Criteria Working Group, (1998),
mostram que para o método de IR, a determinação de TPH é
definida como tudo que é extraído por um solvente, que não
seja removido na coluna de cleanup (uma coluna recheada
com material adsorvente, sílica gel ou alumina, para
retenção de possíveis hidrocarbonetos provenientes de
fontes de não petróleo) e que possa ser detectado por IR. A
vantagem deste método é sua rapidez e baixo custo. A
exatidão e precisão deste método são freqüentemente baixas,
especialmente para amostras não homogêneas de solo.
A determinação de TPH utilizando um detector de IR
ficou temporariamente restrito devido à proibição da
produção de Freon (que era utilizado para a extração da
amostra). Este fato conduziu a modificações no método e a
troca do solvente para um menos danosos ao meio ambiente
2.4.1. DETERMINAÇÃO DE TPH NA REGIÃO DO
INFRAVERMELHO USANDO O ANALISADOR
INFRACAL TOG/TPH
A chamada radiação infravermelha corresponde à parte
do espectro eletromagnético situado entre as regiões do
visível e das microondas. Pode ser dividida conforme o
Quadro 1.
Quadro 1. Relação entre comprimentos de onda, número de
onda e freqüência.
Comprimento de Número de
Designação
Onda (µm) Onda (cm-1)
IR Próximo 0,78 – 2,6 12.800 - 4000
(região de harmônicos)
IR Médio
(região de vibração- 2,6 – 50 4000 - 200
rotação)
IR Distante
50 – 1000 200 - 10
(região de rotação)
A espectrometria de infravermelho mede a transição
entre estados vibracionais que ocorrem quando uma
molécula absorve energia na região do infravermelho do
espectro eletromagnético. Os diferentes grupos funcionais e
os seus tipos de ligações têm freqüências e intensidades de
absorção distintas no infravermelho.
As ligações C-H na moléculas absorvem energia num
comprimento de onda específico resultando em vibrações
moleculares. Há dois modos fundamentais de vibração das
moléculas: estiramento, em que a distância entre dois
átomos aumenta ou diminui, mas os átomos ficam no
mesmo eixo de ligação, e deformação, em que a posição do
átomo muda em relação ao eixo original da ligação. As
vibrações de estiramento e de deformação de uma ligação
apenas ocorrem em freqüências quantizadas. Quando incide
na molécula luz infravermelha de mesma freqüência, há
absorção de energia e aumento de amplitude daquela
vibração, Dyer (1969).
Algumas entre as vibrações de estiramento e de
deformação que podem existir em uma molécula estão
esquematizadas na Figura 1. Vibrações de deformação
geralmente requerem menos energia e ocorrem em maiores
comprimentos de onda (menor número de onda) do que as
vibrações de estiramento. Estas dependem das forças de
ligação. A tripla ligação (absorção a 4,4-5,0 µm) é mais
forte do que a dupla ligação (absorção a 5,3-6,7 µm), a qual,
por sua vez, é mais forte do que a simples ligação (absorção
C-C, C-N e C-O a vez, é que mais forte do que a simples
ligação (absorção C-C, C-N e C-O a 7,7-12,5 µm). Quando
uma ligação simples envolve um próton (C-H, O-H ou N-
H), as vibrações de estiramento ocorrem a energias muito
maiores, com comprimentos de onda entre 2,7 a 3,8 µm.
O
O O O
O O
Simétrica Assimétrica
Vibrações de estiramento
+ +O + -
O O O O O O O
O O O O
Tesoura Balanço Sacudida Torção
Vibrações de deformação no plano Vibrações de deformação fora do plano
Figura1. Vibrações de um grupo de átomos (+ e - significam vibrações
perpendiculares ao plano do papel).
Segundo Dyer (1969), um valor aproximado para a
freqüência do estiramento (ν, em cm-1 ) de uma ligação é
relacionada às massas dos dois átomos (M e M, em gramas),
à velocidade da luz (c), e constante de força da ligação (k,
em dina/cm):
1 k
ν=
2πc M x M y /( M x + M y )
Ligações simples, duplas e triplas têm constantes de força
que são aproximadamente 5,10 e 15 x 105 dina/cm,
respectivamente.
O valor do coeficiente de extinção molar na
espectroscopia infravermelha varia de quase zero até ao
redor de 2.000. O valor é proporcional ao quadrado da
variação do momento dipolar na molécula causado por uma
determinada vibração. Picos de absorção devidos a vibração
de estiramento são geralmente os picos mais intensos do
espectro.
Estão apresentados nas Figuras 3 e 4, espectro de
absorção de dois tipos de hidrocarbonetos.
O espectro de absorção do butano (Figura 3) é um
exemplo de um alcano, que é um hidrocarboneto alifático,
ou seja, de cadeia aberta e apenas com ligações simples
entre carbono e hidrogênio.

Figura 3. Espectro de absorção da ligação C-H em um hidrocarboneto
alifático, C4 H10 – Butano. (NIST Chemistry WebBook, 2003).
O espectro de absorção do benzeno (Figura 4) é um
exemplo de um hidrocarboneto aromático.
Figura 4. Espectro de absorção da ligação C-H em um hidrocarboneto
aromático, C6 H6 - Benzeno. (NIST Chemistry WebBook), 2003.
As intensidades das bandas são expressas como
transmitância (T) ou absorbância (A). A transmitância é a
razão entre a energia radiante transmitida por uma amostra e
a energia radiante que nela incide. A absorbância é o
logaritmo, na base 10, do recíproco da transmitância, isto é,
A=log10 (1/T) (Silverstein, 1979).
A determinação de TPH por IR baseia-se na medida da
absorbância da ligação C-H, dos hidrocarbonetos presentes
na amostra.
As ligações C-H dos hidrocarbonetos alifáticos
absorvem energia num comprimento de onda específico, a
intensidade de absorção é proporcional à quantidade de
moléculas de hidrocarbonetos numa amostra. Isto pode ser
diretamente convertido à quantidade total de óleo na amostra
original se a razão do solvente com o óleo for
cuidadosamente controlada, através de uma calibração.
Assim, em todos os métodos de determinação de TPH na
região do IR, a quantificação é realizada comparando a
absorbância da ligação C-H de uma determinada amostra
com as absorbâncias de padrões de concentrações
conhecidas através de uma curva de calibração.
Conseqüentemente, é importante usar um padrão de
calibração de natureza o mais similar possível da amostra a
ser analisada.
Portanto, os resultados de análises de TPH por IR devem
ser interpretados cuidadosamente considerando as limitações
e interferências do método.
Com o analisador Infracal TOG/TPH (Figura 5) mede-se
a radiação absorvida por um extrato de uma amostra em dois
comprimentos de onda, um em que é fortemente absorvido
por hidrocarbonetos presentes no extrato (o comprimento de
onda analítico) e outro no qual o extrato apresenta baixa
absorção (o comprimento de onda de referência).
Cubeta
Figura 5. Equipamento de medição de hidrocarbonetos totais
O logaritmo da razão entre a intensidade no
comprimento de onda de referência e o comprimento de
onda analítico representa adequadamente os resultados da
Lei de Beer-Lambert, permitindo que se obtenha um valor
para absorbância proporcional à concentração do analito no
extrato.
Esta aproximação é bastante válida desde que possamos
garantir duas coisas: que a lâmpada emita radiação nas
bandas IA e IR com a mesma intensidade e que a absorbância
do solvente seja a mesma nestas duas regiões.
Para entendermos melhor o procedimento operacional do
equipamento, é fundamental que se entenda primeiramente a
Lei de Beer-Lambert, onde se explica que a absorção de
radiações electromagnéticas pela matéria obedece aos
seguintes princípios:
1. A intensidade da radiação transmitida decai
exponencialmente em função do número de centros
absorvedores (moléculas ou ligações químicas) ao longo do
caminho da radiação;
2. O número de moléculas pode ser obtido a partir da
multiplicação do volume irradiado (a.d; onde “a” é a área
irradiada e “d” é o caminho óptico) pela concentração de
moléculas.
Estes dois princípios foram integrados na expressão
designada de "Beer-Lambert", que serve de base a todo e
qualquer ensaio espectrofotométrico quantitativo. A
tradução matemática desta lei implica a definição de dois
parâmetros: a Absorbância (A) (referida nos manuais menos
recentes como densidade óptica) e a Transmitância (T).
 A percentagem de radiação que atravessa uma solução
homogênea é designada por transmitância (Eq. 2.1) e
apresenta unidades (%). Contudo, os resultados
espectrofotométricos são expressos geralmente em
absorbância (Eq. 2.2) que corresponde ao logaritmo do
inverso da transmitância. Este parâmetro é desprovido de
unidades e apresenta sobre a transmitância a vantagem de
variar linearmente com a concentração das amostras desde
que se trabalhe em condições que não tenham outros fatores
interferindo na absorção das moléculas, segundo a lei de
Beer-Lambert. Estas expressões, extremamente úteis do
ponto de vista prático, deixam em aberto a relação entre
radiação absorvida e concentração, que foi condensada na
expressão de Beer-Lambert (Eq. 2.3).
T = I / I0 (Eq. 2.1)
A = -log T (Eq. 2.2)
A = ε.d.c (Eq. 2.3)
Onde:
T - Transmitância
A - Absorbância
ε - coeficiente de absortividade molar (cm-1 .M -1 );
d - comprimento do percurso que a radiação atravessa a
amostra (cm);
c - concentração da amostra (M).
As medições de Absorbância são feitas a comprimentos
de onda específicos (λ), sendo freqüente esse comprimento
de onda figurar como índice de A: A λ.
É importante notar que a linearidade constatada na lei de
Beer-Lambert se restringe a zonas de aplicabilidade
características de cada método para as condições
experimentais utilizadas. Efetivamente, a concentrações de
amostra excessivamente reduzidas ou elevadas, poderão
ocorrer erros originados, respectivamente, pela falta de
sensibilidade do método, ou pela acentuação da turbidez das
soluções devido à polimerização inespecífica de moléculas
em solução. As zonas de aplicabilidade de cada ensaio
devem ser determinadas experimentalmente, antes de
ensaiar qualquer amostra, por forma a garantir a validade
dos resultados experimentais obtidos para as soluções
problema.
A proporcionalidade direta existente entre a quantidade
de radiação absorvida a comprimentos de onda específicos e
a concentração de soluções, permite a utilização da
espectrofotometria como método quantitativo. Para o efeito,
é necessário possuir valores de referência ou, melhor ainda,
uma relação entre Absorbâncias registradas
experimentalmente para uma série de soluções com
conhecidas. Na prática isso equivale à construção de retas de
calibração.
Quando forem conhecidos valores de absorbância de
soluções das amostras (extratos) - obtidos
experimentalmente - o recurso às retas de calibração permite
determinar matematicamente as concentrações respectivas.
No analisador Infracal, utiliza-se uma banda fixa (isto é,
uma mesma faixa de comprimento de onda definida pelo
filtro), então a absorbância calculada varia somente com a
concentração de óleo. A intensidade coletada no
comprimento de onda analítico (IA ), é reduzida quando
comparada à intensidade coletada na banda de referência
(IR), também definida por um filtro. A concentração do óleo
é determinada pelo cálculo do logaritmo da razão dessas
intensidades, segundo a Lei de Beer-Lambert, como
esquematizado na Figura 5.
O analisador do TOG/TPH da Infracal (Figura 5) inclui
um feixe simples com um sistema duplo do detetor,
medindo a intensidade relativa da luz transmitida (e portanto
absorvida) em função do comprimento de onda. No modelo
do analisador usado neste trabalho, um feixe de radiação
infravermelha é emitido por uma lâmpada de tungstênio e
transmitido através de uma cubeta de quartzo que contém
um extrato da amostra. A radiação que passa através do
extrato incorpora o sistema duplo do detetor, cujos filtros
isolam um comprimento de onda de referência (2,5 :m) e um
comprimento de onda analítico (3,4 :m).
O extrato da amostra (analito+solvente) é colocada
diretamente numa cubeta de quartzo com capacidade para
5ml e é irradiado com um comprimento de onda conhecido.
Neste momento, um feixe atravessa a amostra sendo
focalizado diretamente no detector, como apresentado na
Figura 6.
Amostra
Filtros
Ι0 Ι A = log ΙR/ΙA
Fonte Detector
d
Figura 6. A medição da absorção IR de uma amostra de óleo em uma
cubeta de quartzo
2.4.2 PREPARAÇÃO DA AMOSTRA PARA ANÁLISE
DE TPH NO INFRACAL
O método mais utilizado para a determinação de TPH
por IR é USEPA 418.1 da Agência de Proteção Ambiental
Americana (EPA). Este método utiliza como solvente de
extração freon, atualmente proibido por ser potencialmente
poluidor e contribuindo significativamente para a destruição
da camada de ozônio. Este método é aplicável também na
determinação de combustíveis, embora haja uma perda de
aproximadamente metade de toda a gasolina durante as
manipulações de extração.
 A Figura 7 mostra as etapas do método 418.1 USEPA
para a determinação de TPH por detecção no IR.
Amostra Filtração
IR Cleanup
Figura 7. Etapas da metodologia para a determinação de TPH, segundo o
método 418.1 USEPA.
As amostras são extraídas com um solvente apropriado,
isto é, um solvente com ausência de ligações C-H. Ele deve
apresentar poucas absorções, principalmente na região de
interesse.
Os compostos polares biogênicos podem ser removidos
através de um cleanup utilizando-se sílica gel, entretanto,
esta etapa pode remover também alguns hidrocarbonetos
polares presentes no petróleo.
Este trabalho utilizou o método 418.1 da EPA nas
determinações de TPH, com algumas modificações,
principalmente em relação ao solvente, trocando o então
proíbido freon pelo tetracloroetileno.
3. VALIDAÇÃO DE METODOLOGIAS ANALÍTICAS
Sempre que disponível e apropriado, o laboratório deve
referenciar seus procedimentos analíticos em métodos
normalizados, isto é, publicados como normas nacionais ou
internacionais, procedimentos oficiais de organismos
públicos ou privados de renome e reconhecimento em
âmbito nacional ou internacional ou, ainda, publicados em
revistas de reconhecimento pela comunidade científica
pertinente. A aderência do procedimento analítico utilizado
à norma referenciada deve ser completa no que diz respeito
aos aspectos substantivos do método. Qualquer desvio com
relação ao método normalizado deve ser justificado e,
quando necessário, validado (Paiva, 2001).
A validação de um método estabelece por meio de
estudos laboratoriais que suas características de desempenho
estão de acordo com as especificações apresentadas para a
intenção do uso dos resultados analíticos (Paiva, 2001).
Segundo o manual de orientações sobre validação de
métodos de ensaios químicos do INMETRO, as
características de desempenho determinadas incluem:
• Seletividade e especificidade;
• Faixa de trabalho;
• Linearidade;
• Sensibilidade
• Limite de Detecção;
• Limite de Quantificação;
• Exatidão;
• Precisão;
Depois de determinados todos esses parâmetros, o
método deve conte-los de forma clara, para que o usuário
possa avaliar se o método é adequado para as suas
necessidades (INMETRO, 2000).
Segundo a EURACHEM, citado por Paiva (2001), são
feitas milhões de medidas analíticas diariamente em
milhares de laboratórios em todo o mundo. Entretanto, o
custo de realização dessas medições é alto, e custos
adicionais decorrem das decisões feitas em cima desses
resultados. Fica claro, portanto, a importância de se obter
resultados corretos e de ser capaz de mostrar que os mesmos
estão corretos.
4. MATERIAIS E METODOLOGIAS
4.1. EQUIPAMENTOS
- Analisador TOG/TPH, modelo CVH-50 da Wilks
Enterprise;
- Agitador orbital com suporte para 16 erlenmeyers de
125 ml;
- Balança Analítica, Modelo AB 204.
4.2. MATERIAL UTILIZADO NOS EXPERIMENTOS
- Balões volumétricos com tampa de vidro, da marca
SCHOTT/LABORGLAS – com capacidade de 50 ml ± 0,6,
100 ml ± 0,8, 500 ml ± 0,20 e 1000 ml ± 0,30;
- Erlenmeyer doca estreita com rolha de vidro da marca
SCHOTT/LABORGLAS - com capacidade de 150 ml;
- Funil de vidro da marca LABORGLAS - com diâmetro de
5 cm;
- Pipeta graduada da marca SCHOTT – com capacidade de
10 ml; - Divisão 0,1 ml.
- Pipetas Volumétricas de vidro boro graduado da marca
SCHOTT – com capacidade de 5 ml ± 0,015, 10 ml ± 0,02,
20 ml ± 0,03 e 50 ml ± 0,06;
- Pipeta automática de volume fixo (1 ml;);
- Bastão de vidro;
- Pisseta;
- Algodão hidrofóbico;
- Cubetas de quartzo, com capacidade para 5 ml e caminho
ótico de 1cm.
4.3. REAGENTES E SOLVENTE
- Tetracloroetileno (C2 Cl4 ) – 97,5% de pureza (VETEC);
- Sulfato de sódio anidro (NaSO4 ) – (MERCK).
4.4. PETRÓLEO
- Óleo Marine Fuel 380. Densidade igual 0,987 g.cm-3 e
Viscosidade de 5313 cP a 20°C (amostra de petróleo).
4.5. AMOSTRAS REAIS (PARA OS ENSAIOS DE
APLICAÇÃO DO MÉTODO) PROVENIENTES DAS
PRAIAS DA ILHA DE PAQUETÁ, RJ.
A eficiência da metodologia analítica validada neste
trabalho foi testada através de ensaios de extração e
determinação de TPH em 36 amostras de areia contaminadas
com petróleo, provenientes de praias distintas na Ilha de
Paquetá, RJ. Estas amostras fornecidas pelo Centro de
Pesquisa da Petrobras (CENPES/PETROBRAS/RJ) são
representativas de uma situação de contaminação de areia
por petróleo.
5. METODOLOGIA DE DETERMINAÇÃO DE TPH
A metodologia usada neste trabalho seguiu o método
USEPA 418.1 com algumas modificações, como segue:
As amostras foram homogeneizadas manualmente
durante 1 minuto a temperatura ambiente utilizando um
almofariz. 5,0 g da amostra homogeneizada foram pesados
em balança analítica e extraídos com 30 ml de
tetracloroetileno (PCE), dentro de erlenmeyer com tampa de
vidro, utilizando um agitador orbital a 160 rpm, por 4 horas,
a temperatura ambiente. Após esse período, o sobrenadante
foi filtrado utilizando um funil de vidro com um pedaço de
algodão contendo Na 2 SO4 (sulfato de sódio).
Posteriormente, a amostra foi novamente extraída com mais
15 ml de PCE por mais 30 min, e filtrada. Os dois extratos
orgânicos foram então somados e avolumados com PCE em
balão volumétrico a 50,00 ml. Uma alíquota dessa solução
foi então transferida para a cubeta e efetuada a leitura na
região do Infravermelho, em aparelho TOG/TPH Infracal
CV-50 previamente calibrado.
5.1. PREPAÇÃO DAS SOLUÇÕES PADRÕES PARA
CALIBRAÇÃO DO INFRACAL
5.1.1. SOLUÇÃO ESTOQUE
Primeiramente, preparou-se uma solução estoque do óleo
em tetracloroetileno com concentração de 10.000 mg.l-1 ,
pesando 5,0 g de petróleo em um balão volumétrico de 500
ml, e posteriormente avolumado com o tetracloroetileno. A
partir desta solução foram feitas diluições para a obtenção
das soluções com as concentrações desejadas.
5.2. CÁLCULO DE CONCENTRAÇÃO DAS
AMOSTRAS
É válido ressaltar que os valores de concentração
apresentados pelo equipamento estão expressos em massa,
em mg, por volume, em l. Entretanto, esta unidade de
concentração é representativa do extrato depois de diluído
com o solvente, exatamente aquilo que é lido pelo Infracal,
ou seja, é a massa de TPH presente em volumes de solvente.
Para se fazer a conversão de massa de TPH presente em
massa de amostras (areia), é necessário usar os seguintes
passos:
m = VL (Eq. 3.1)
m
C= (Eq. 3.2)
M
Onde:
m: Massa (mg) de HC presente no extrato
L: Leitura do IR (mg.l-1 ) – resposta do Infracal
V: Volume (l) do extrato
C: Concentração de HC na amostra de solo (mg.Kg -1 )
M: Massa (Kg) de amostra de solo
6. RESULTADOS
6.1. OTIMIZAÇÃO DA METODOLOGIA DE
EXTRAÇÃO
6.1.1. SOLVENTE
O solvente indicado pelo método USEPA 418.1 é o
Freon-113, porém, este solvente tem sido regulado pelas
agências ambientais por ser nocivo ao meio ambiente.
Vários solventes têm sido estudados para a substituição
do na determinação de TPH em amostras ambientais.
Segundo a Wuilks (empresa fabricante do equipamento
Infracal TOG/TPH) alguns solventes podem ser indicados:
Tetracloroetileno - Esse solvente é incolor, não possui
ligações C-H e tem moderada toxicidade, além de ter a
capacidade de extrair desde os hidrocarbonetos mais leves
aos mais pesados. Ele é aceito como substituto oficial de
Freon no Reino Unido.
Ak-225 - Tem baixa eficiência, porém não tanto prejudicial
a camada de ozônio quanto o Freon. Os testes indicaram que
este deve ser um solvente adequado para a substituição do
Freon-113. Entretanto, por causa da absorção na região de
C-H, tem uma sensibilidade mais baixa do que Freon-113
mas é ainda usado para a análise por métodos da
transmissão. Este solvente é mais pesado do que a água e,
conseqüentemente, depois da extração, os hidrocarbonetos
ficaram no fundo do recipiente, tendo que ser feita uma
etapa de remoção de umidade, podendo ser aplicado sulfato
de sódio para tal.
S-316 – Este solvente é ausente de hidrocarbonetos, portanto
não apresenta absorção na região do C-H, sua manipulação é
segura e oferece mínimos riscos ambientais. O S-316
também é mais pesado do que a água e por isso a etapa de
remoção de umidade também deve ser aplicada.
O solvente que foi efetivamente utilizado nos
experimentos foi o tetracloroetileno. Este é um bom
substituto e, mesmo sendo medianamente tóxico, é
amplamente usado como uma solução de limpeza e
conseqüentemente pode ser aceitável para uso em
laboratório, além de apresentar um custo inferior aos outros
substitutos. Todavia, a pureza recomendada para o
tetracloroetileno era de 99% e a pureza do solvente utilizado
era de 97,5%, ou seja, abaixo da recomendada, devido a
disponibilidade no mercado.
O método USEPA 418.1 original recomenda apenas uma
extração da amostra e, neste trabalho, a mesma amostra foi
extraída duas vezes com menores porções de solvente, com
o intuito de aumentar a eficiência da extração. A primeira
extração foi feita com 30 ml de solvente e a segunda com
mais 15 ml, somando 45 ml de solvente e restando ainda 5
ml para completar o volume aferindo no balão volumétrico,
suficiente para a lavagem do frasco de vidro.

Para ser um bom solvente para utilização em IR, deve 6.2. PARÂMETROS DE AVALIAÇÀO DO
apresentar poucas absorções, principalmente na região de DESEMPENHO DA METODOLOGIA DE
interesse. A Figura 8 mostra o espectro do solvente usado DETECÇÃO
(tetracloroetileo) extraído da literatura, e a Figura 9
apresenta o espectro do tetracloroetileo utilizado nos Parâmetro Resultado Unidade
experimentos, feito no Departamento de Química da PUC- Faixa de trabalho 0 a 10.000 mgl-1
Rio, utilizando um equipamento FTIR System 200, da Faixa Linear 0 a 500 mgl-1
Sensibilidade 0,466 sinal/mg.l-1
marca Perkin Elmer. Limite de Detecção 4,29 mgl-1
Limite de Detecção do Método 9,44 mgl-1
Limite de Quantificação 4,61 mgl-1
Erro 19,08 %
Limite de Repetitividade 5,82 -
Limite de Reprodutibilidade 5,29 -

8. CONCLUSÕES
Otimizou-se o método 418.1 diminuindo a quantidade de
amostra extraída e aumentando o numero de extração, essa
medida visou aumentar a eficiência de extração
minimizando a geração de resíduos.

O desempenho do método de determinação de TPH em

Figura 8. Espectro de Absorção do Tetracloroetileno (C2 Cl4). Fonte: NIST areia por detecção no infravermelho se mostrou muito
Chemistry WebBook (1985). satisfatório para as analises das amostras normalmente
recebidas para análise no laboratório.

A faixa de trabalho sugerida pelo fabricante do

equipamento utilizado não apresentou linearidade em todas
as concentrações.

A faixa linear obtida experimentalmente neste trabalho

foi de 0 a 500 mg.l-1 . Caso o laboratório receba amostras
com concentrações fora da faixa linear do método, os
extratos dessas amostras devem ser diluídos para valores
dentro da faixa linear e obter resultados com um nível de
confiança maior. Demonstrando condições de obter
resultados precisos e reprodutíveis. Além disso, o limite de
detecção do método se apresentou consideravelmente
inferior às concentrações das amostras normalmente
analisadas no laboratório, ou seja, a utilização da
metodologia não apresentou falhas nesse sentido.

O procedimento de quantificação para as concentrações

Figura 9. Espectro de Absorção do Tetracloroetileno (C2Cl4) feito no
Departamento de Química da PUC-Rio.
Verifica-se que a região entre 3,23 a 3,51 µm (± 3095
cm-1 ), que é a região de absorção da ligação C-H e portanto
a região de interesse para as determinações de TPH por IR,
não apresenta interferência quando se usa o tetracloroetileno
como solvente.
de hidrocarbonetos é fácil operação, não necessita de
operador especializado, e é de baixo custo, além de ser um
equipamento portátil que possibilita o uso em campo.
Como produto final, este trabalho gerou o POP
(procedimento operacional padrão) que estará
disponibilizado para os integrantes do LEA (Laboratório de
Estudos Ambientais, Dep. Química, PUC-Rio) e do NGA
(Núcleo de Geotecnia Ambiental da PUC-Rio).
REFERÊNCIAS
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Compostos Orgânicos. São Paulo. E. Blucher: USP, 1969,
c1965. 155p.

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Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics.
Teddington, Eurachem, 1998.

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Ensaios Químicos. Duque de Caxias, INMETRO 2002.

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pollution. CRC Press - Marine Science Series, New York,
1997.

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determinação de clorofila a em amostras de águas marinhas
por espectrofotometria. Dissertação de Mestrado. PUC-Rio,
Rio de Janeiro, 2001.

(6) Portes, V. O. Aplicação da Desorção Térmica na Remediação

dos Resíduos da Limpeza de Praias Atingidas por Derrames
de Óleo. Dissertação de Mestrado. PUC-Rio, 2002.

(7) Rosenberg, F. J. & Silva, A. B. M. Sistemas da qualidade em

laboratórios de Ensaio: Guia Prático para a Interpretação e
Implementação da ABNT ISO/IEC Guia 25. Rio de Janeiro,
Quality Mark, 2000.

(8) Silverstein, Robert; Identificação Espectrometrica de

compostos orgânicos. 3. ed. - Rio de Janeiro: Guanabara
Dois, 1979.

(9) TPH Criteria Working Group. Analysis of Petroleum

Hydrocarbons in Envirronmental Media, 1998. Disponível
em: < http://www.aehs.com >. Acesso e Download em 10 de
setembro de 2002.

(10) Zanardi, E., 1996. Hidrocarbonetos no Canal de São

Sebastião e na plataforma interna adjacente - Influência no
derrame de maio de 1994. Dissertação de mestrado.
Universidade de São Paulo, Instituto Oceanográfico.

(11) Zíllio, Evaldo, & Pinto, Ulysses. Identificação e distribuição

dos principais grupos de compostos presentes nos petróleos
brasileiros. Bol. Téc. PETROBRAS, Rio de Janeiro, 45 (1):
21-25, jan./mar, 2002.

Alexandre Rodrigues do Nascimento. Otimização e Avaliação do

Desempenho de um Método de Determinação de TPH (Total
Petroleum Hydrocarbons) em Areia por Detecção no
Infravermelho. Programa de Pós -graduação em M etrologia para a
Qualidade Industrial, Centro Técnico Científico, Pontificia
Universidade Católica do Rio de Janeiro (Av. Marquês de São
Vicente 225, CEP: 22453-900, Rio de Janeiro, Brasil), e-mail:
arn_alexandre@hotmail.com, tel: 55 21 3114-1542, fax: 55 21
3114-1543.