Universidad de Oriente

Núcleo de Bolívar

Unidad de Estudios Básicos

Área de Química.

Química Analítica y sus

Métodos
Definición y clasificación de química analítica
y aplicaciones del método analítico.
Profesor: Jesús Gómez Deffitt
Primer semestre de 2013

Material preparado con fines estrictamente académicos, como herramienta de trabajo y

estudio para los alumnos de la sección 02 de química analítica durante el semestre 1 – 2013
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Química Analítica y sus Métodos

DEFINICIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA

La Química Analítica puede definirse como la ciencia que desarrolla y mejora

métodos e instrumentos para obtener información sobre la composición y
naturaleza química de la materia.

Análisis Químico que es la parte práctica que aplica los métodos de análisis
para resolver problemas relativos a la composición y naturaleza química de la
materia.

Es interesante realizar una definición de términos ligados al análisis:

Muestra: Parte representativa de la materia objeto del análisis.

Analito: Especie química que se analiza.
Técnica: Medio de obtener información sobre el analito.
Método: Conjunto de operaciones y técnicas aplicadas al análisis de una
muestra.
Análisis: Estudio de una muestra para determinar sus composición o
naturaleza química.

Dentro de la Química Analítica también pueden diferenciarse diversas áreas

según la información que se desea obtener. Así, la Química Analítica
Cualitativa se centra en identificar la presencia o ausencia de un analito,
mientras que la Química Analítica Cuantitativa desarrolla métodos para
determinar su concentración.

Ejemplos:

a. El porcentaje de magnesio en una muestra de mineral es de 12,20 %.

b. Una muestra de roca lunar, muestra la presencia de trazas de uranio.
c. Una determinada muestra orgánica confirma la presencia de nitrógeno y
azufre.
d. El análisis de sangre de un paciente dio positiva la presencia de alcohol
etílico en una concentración de 5 mg/dl.
e. El agua de mar contiene 35,5 gramos de sal por litro de agua de mar.

Investigue Usted

a) Qué importancia tiene la química analítica Cualitativa para el análisis

químico?
b) Qué importancia tiene la química analítica Cuantitativa en el análisis
químico?
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Química Analítica y sus Métodos

c) Para el análisis de ácido úrico detallado al final del contenido, represente

un esquema de la aplicación de las ramas de la química analítica en
dicho análisis.

MÉTODOS DE ANÁLISIS QUÍMICO

Se definen como la secuencias de pasos y procedimientos lógicos y

secuenciales para el estudio cualitativo y cuantitativo de una determinada
muestra.

a) Métodos Clásicos. (Gravimetría, Volumetría)

Métodos de Análisis b) Métodos Instrumentales o Fisicoquímicos.

(Potenciométricos, Colorimétricos,
Espectroscópicos y Cromatográficos)

c) Métodos de Separación. (Intercambio Iónico y

Absorción

Métodos clásicos

Se basaban en propiedades químicas del analito. Se incluyen las gravimetrías,

las volumetrías y los métodos de análisis cualitativo clásico. Entre estos
métodos tenemos:

Precipitación: El constituyente buscado se

Métodos Gravimétricos:
El análisis gravimétrico se
basa en el peso de una
sustancia de composición
conocida y químicamente
relacionada con el Analito.
determina como producto insoluble de una
reacción química, este producto es de composición
química conocida. Este método implica relaciones
estequiometrias fijas.
Volatilización : El analito o sus productos de
descomposición se volatilizan a una temperatura
adecuada, las medidas pueden ser directas por
aumento de peso de un absorbente o indirecta, por
pedida de peso de la muestra.
Electro deposición: La electrolisis da como
resultado la separación de un producto sólido de
un electrodo.
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Química Analítica y sus Métodos

Volumetría de Neutralización : EL análisis

Métodos Volumétricos:
Se basan en la
cuantificación del volumen
de una solución patrón que
reacciona totalmente con
el Analito de interés,
relacionado
estequiométricamente
volumétrico de neutralización se basa en la
medición del volumen gastado de una solución
patrón (de alta pureza) que reacciona o neutraliza
estequiometricamente al analito buscado.
Volumetría de precipitación: Aquí se
aprovechan las reacciones que producen
sustancias de solubilidad limitada. Esta sustancia
es el analito o una sustancia relacionada
estequiometricamente con este.
Oxido reducción : Se basan en las reacciones
químicas en las cuales los electrones se
transfieren de un reactivo a otro. Estos método
son los más numerosos, que los basado en otro
tipo de reacciones.

Volumetría de Formación de Complejos: Aquí

la reacción de formación de complejos es usada
para determinar la composición del Analito.

Métodos Instrumentales o Fisicoquímicos:

Los métodos fisicoquímicos se basan en propiedades de interacción (absorción

o emisión) de la materia con energía radiante o electromagnética. Estos
métodos están muy difundidos gracias a las características de estas
interacciones y al amplio espectro de las radiaciones. Entre estos métodos se
encuentran:

Métodos de separación.

Se incluyen en este grupo los métodos cuya finalidad es la separación de

compuestos para eliminar las interferencias y facilitar las medidas.
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Química Analítica y sus Métodos

MMétodos Potenciometricos: Estos miden una diferencia

de potencial causada por el analito. Aquí la variable en
estudio es la variación del potencial de un electrodo en
presencia de una especia química cuya concentración va
variando.

Métodos Colorimétricos: Aquí se mide la intensidad de

color que tiene una sustancia química relacionada con el
analito, también se mide la absorción de luz en ciertas
longitudes de onda del campo visible, esta absorción esta
relacionada con la concentración de interes.
Métodos
Instrumentales Métodos Espectroscópicos: Basados en la intereaccion
de una muestra con diferentes longitudes de onda de
energía radiante; a este grupo pertenecen la
espectroscopia de Absorción Atómica, Espectroscopia
Ultra violeta – Visible, Espectroscopia Infrarroja y la
Espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear
(RMN).

Métodos Cromatograficos: Estrictamente es un método

de separación de mezclas complejas, por arrastre de una
fase móvil a través de una fase fija. Por medio de
patrones preestablecidos se puede cuantificar la
presencia de un analito.

El intercambio iónico:

Es un intercambio reversible y estequiométrico de iones entre

una fase sólida iónica y una fase líquida externa, sin un cambio
sustancial de la estructura del sólido. La fase sólida consiste
usualmente en una matriz polimérica (por lo general una resina) o
una red cristalina, insoluble pero permeable, sobre la cual se
ubican grupos cargados y fijos y contraiones móviles de de carga
Métodos de opuesta que pueden ser intercambiados por otros iones de la fase
Separación líquida externa.

Absorción.

Entre los compuestos gaseosos hay algunos que presentan

reacciones irreversibles cuando se hacen pasar por líquidos o
sólidos. Gracias a esto, se puede lograr la separación del CO2,
SO2 o NH3 de otros compuestos.
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Química Analítica y sus Métodos

Metodología del proceso analítico

La Química Analítica alcanza sus objetivos mediante una metodología que se

fundamenta en la aplicación del método científico. Desde un punto de vista
formal, esta metodología es común a todas las ciencias experimentales y sigue
el proceso mostrado en la figura:

La definición del problema es la primera etapa, en ella se plantea el tipo de

análisis que se necesita y la escala de trabajo. Tras ello, debe realizarse la
elección del método analítico, aspecto clave para una resolución adecuada
del problema. Una vez elegido el método, se procede a su ejecución.
Posteriormente, se pasa a valorar los resultados obtenidos para establecer
si el problema ha sido resuelto de forma satisfactoria. Si no es así, se debería
reiniciar el proceso analítico y replantear el problema. El desarrollo práctico del
método analítico consta de tres etapas:

Las operaciones previas o preliminares, pueden descomponerse en dos

subetapas. En la primera, se realiza una toma de muestra representativa del
material a analizar. En la segunda, se lleva a cabo una transformación de la
muestra o parte de la misma, de forma que la especie o especies químicas de
interés pasen a una forma medible inequívocamente. Esta transformación, de
ser necesaria, podría requerir etapas de separación de sustancias interferentes
y etapas de reacción química que hagan más sensible y específica la medición
de la señal debida al analito.
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Química Analítica y sus Métodos

En la etapa de adquisición de datos tiene cada vez más importancia la

instrumentación analítica. El proceso de medida instrumental básico puede
separarse en tres etapas: la generación de un flujo de energía, la interacción de
este flujo con la muestra y la medición y procesado de la señal procedente de
la muestra.

Por último, la etapa de tratamiento de datos consiste en el procesado

matemático de los datos para obtener unos resultados que den el valor más
probable de la información buscada, así como la incertidumbre acompañada.

Características de calidad de los métodos analíticos

Exactitud: Grado de concordancia entre el resultado y un valor de referencia

certificado. En ausencia de exactitud se tiene error sistemático.

Precisión: Grado de concordancia entre los datos obtenidos de una serie.

Refleja el efecto de los errores aleatorios producidos durante el proceso
analítico.

Sensibilidad: Capacidad para discriminar entre pequeñas diferencias de

concentración del analito. Se evalúa mediante la sensibilidad de calibración,
que es la pendiente de la curva de calibración a la concentración de interés.

Límite de detección: Concentración correspondiente a una señal de magnitud

igual al blanco más tres veces la desviación estándar del blanco.

Intervalo dinámico: Intervalo de concentraciones entre el límite de

cuantificación (LOQ) y el límite de linealidad (LOL).

Selectividad: Cuantifica el grado de ausencia de interferencias debidas a otras

especies contenidas en la matriz.

Seguridad: Amplitud de condiciones experimentales en las que puede

realizarse un análisis.
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Química Analítica y sus Métodos

APLICACIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO PARA LA DETERMINACIÓN DE

ÁCIDO ÚRICO EN SUERO

1. INTRODUCCIÓN
El ácido úrico en los mamíferos es el metabolito final del catabolismo de las
bases púricas y su elevación está asociada a la gota, es decir, los reumatismos
hiperuricémicos. En los pacientes con tal disfunción, aparecen cristales de ácido
úrico en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones
reumáticas características. Niveles altos de ácido úrico están también asociados a
patología renal por retención de productos nitrogenados, asociándose en estos
casos a valores también altos de urea y de creatinina.

2. OBJETIVOS
 Aplicar el manejo adecuado de la técnica para la determinación de ácido
úrico en una muestra biológica.

 Establecer los valores de referencia de ácido úrico y comparar con el

valor de nuestra muestra problema a analizar.

 Definir cuáles son las principales patologías que se presentan si

tenemos valores altos o bajos de ácido úrico en una muestra biológica.

3. FUNDAMENTO DEL MÉTODO

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que en
presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosáceo. Quinona.

ác. úrico + 2H20 + 02 → Alantoína + CO2 + 2H202

2H202 + 4AF + DCPS → Quinona + 4H20

4-AF = 4 aminofenazona

DCPS = 2,4,diclorofenol sulfonato.

4. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Suero, plasma u orina.

Orina: Diluir la orina al 1:10 con agua destilada, mezclar y seguir la técnica.
Multiplicar el resultado por 10.

5. EQUIPO

Fotómetro con filtro de lectura de: 520 nm.

Centrífuga
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Química Analítica y sus Métodos

6. CONTENIDO DEL EQUIPO

Reactivo 1 Fosfatos pH 7.4, 50 mM

Sol. Tampón 2-4 DCPS, 4 mM
Reactivo 2 Uricasa 60U/L
Vial Enzimas Peroxidasa 660 U/L
Ascorbato-Oxidasa 200 U/L
4 - Aminofenazona 1Mm
Standard Sol. Ác. Úrico 6.0 mg/dL

7. PROCEDIMIENTO

TECNICA
Longitud de onda: . . . . . . . 520 nm (490-550)
Temperatura : . . . . . . . . . . 25/30/37ºC
Paso de luz : . . . . . . . . . 1 cm paso de luz

Blanco Estándar Muestra

Estándar 25 μL
Muestra 25 μL
Reactivo 1 ml 1 ml 1 ml

8. CALCULOS.

𝒎𝒈 𝑨𝒃𝒔 𝑴𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂
Á𝒄𝒊𝒅𝒐 Ú𝒓𝒊𝒄𝒐 ( )= 𝒙 𝑪𝒐𝒏𝒄 𝑬𝒔𝒕𝒂𝒏𝒅𝒂𝒓𝒅
𝒅𝒍 𝑨𝒃𝒔 𝑬𝒔𝒕𝒂𝒏𝒅𝒂𝒓𝒅

Estándar= 6.0 mg/dL

Cuando la muestra sea orina, multiplicar el resultado por 10. Si la concentración

de la muestra es superior al límite de linearidad (25mg/dL) diluir ésta a la mitad y
el resultado final se multiplicará por 2.

9. LIMITES DE SEGURIDAD.

Hombre Mujer
Suero o Plasma mg/dl 3,4 a 7,0 2,5 a 6,0
mmol/L 202 a 416 148 a 357
mg/dl 250 a 750
Orina
mmol/L 14872 a 44616
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Química Analítica y sus Métodos

10. ACTIVIDADES.

a) Aplique la metodología analítica al análisis de ácido úrico.

b) Aplique la metodología analítica para análisis de colesterol, glucosa y urea

en sangre.

c) ¿Cuál será la concentración de ácido úrico en una muestra de suero, que

luego de ser tratada tiene una absorbancia de 0,150. La absorbancia del
estándar es 0,111.

d) Al analizar una muestra de orina para la determinación de ácido úrico mediante

el método colorimétrico – enzimático, una muestra 10 ml de orina son diluidos a
50 ml con agua destilada, la absorbancia de esta muestra diluida medida a 320
nm es de 0,753. Determine la concentración de ácido úrico en la orina
conociendo que una solución estándar del ácido de concentración 8 mg/dl tiene
un absorbancia de 0,576.

e) Al analizar una muestra de Suero para la determinación de glucosa mediante el

método colorimétrico – enzimático, una muestra 1 ml de suero son diluidos a
50 ml con agua destilada, la absorbancia de esta muestra diluida medida a
430 nm es de 0,153. Determine la concentración de glucosa en suero
conociendo que una solución estándar de glucosa de concentración 10 mg/dl
tiene un absorbancia de 0,375.

f) Al analizar una muestra de suero para la determinación de ácido úrico

mediante el método colorimétrico – enzimático, una muestra de 25 μl del suero
muestra una absorbancia 0,236 a 320 nm. Para corregir el efecto matriz se
corrió un blanco que muestra una absorbancia de 0,011. Determine la
concentración de ácido úrico en el suero conociendo que 25 μl de una solución
estándar del ácido de concentración 5 mg/dl tiene un absorbancia de 0,576.
Interprete los resultados obtenidos.

RESPUESTAS

Ejercicio d.

52,29 mg/dl.

Ejercicio e.

204 mg/dl.

Ejercicio f.

1,95 mg/dl.