Tema 10: Ingeniería Genética y

Biotecnología

Conceptos de: Ingeniería Genética,

enzimas de restricción, clonación de
genes y vectores de clonación.
Microorganismos utilizados.
Aplicaciones de la Ingeniería Genética:
Médicina, Agricultura y Ganadería

Yolanda Loarce Tejada Universidad de Alcalá Patrimonio de la Humanidad

 ¿Qué es la Ingeniería Genética?
Es el conjunto de técnicas derivadas de la
Biología Molecular, que permiten manipular el
genoma de los seres vivos

Aplicación de los
conocimientos de la Biotecnología
Ingeniería Genética

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La Ingeniería Genética es
posible porque: Adenina

Apareamiento:
G:C
Bases A:T
nitrogenadas Citosina
El ADN de todos los
organismos tiene la Timina
misma composición
y estructura Guanina

Esqueleto
Azúcar- Fosfato

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 Arber descubre las enzimas de restricción (1968)

Son las “tijeras moleculares”

que cortan el ADN por sitios
específicos

T2

Las bacterias las utilizan como

E. coli defensa frente a la infección vírica

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 5’ 3’
A T

G C 5’
3’
EcoRI

5’ 3’

3’ 5’

Extremos
cohesivos
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ADN 1 ADN 2

ligasa

ADN
recombinante

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 La tecnología del ADN recombinante permite la
CLONACIÓN de fragmentos de ADN

ADN CLONACIÓN
recombinante

Las bacterias son las encargadas de multiplicar los ADNs que se quieren clonar

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Para clonar un fragmento de ADN precisamos la
ayuda de las BACTERIAS

plásmido
Escherichia coli
Genoma
bacteriano

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 Los plásmidos se utilizan como
VECTORES DE CLONACIÓN

ligasa
Crecimiento
en medio de
cultivo

ADN recombinante

Microorganismos
transgénicos
¿Cómo se introduce el ADN recombinante en
el interior de la bacteria?

1 2
ºC

La tasa de entrada o “TRANSFORMACIÓN” espontánea es

muy baja. Para aumentar el rendimiento se recurre a
tratamientos químicos y físicos

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Los virus también se utilizan para introducir ADN en
el interior de las células

T2

E. coli

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 Extremos cos
del fago
ADN vírico

Gen para DNA recombinante

clonar

Proteínas de
la cubierta del
fago

Construcción de
fagos in vitro

Fagos con el gen

insertado

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 Los cósmidos son vectores de clonación como
los plásmidos, con fragmentos (cos) que permiten
su empaquetamiento en el interior de los fagos

Formas replicativas de los cósmidos

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¿Cómo sabemos qué bacteria ha incorporado la
molécula recombinante?

Amp
Los vectores de
clonación llevan
genes chivatos
o delatores

Medio SIN Medio CON ampicilina

ampicilina
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 Bacillus Bordetella Clostridium Escherichia

Spirulina Staphylococcus Streptococcus Salmonella

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 Aplicaciones de los microorganismos
transgénicos

Medicina: producción de Insulina humana, hormona del

crecimiento, vacunas y anticuerpos....

Medio Ambiente: desarrollo de microorganismos capaces de

degradar compuestos tóxicos o peligrosos…

Industria alimentaria: producción de edulcorante artificiales,

compuestos que se utilizan en panaderías, producción de
queso y cerveza....

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 ¿Cómo se obtienen las plantas transgénicas?

Mediante el
plásmido Ti de
Agrobacterium
tumefaciens

Se sustituye la región del plásmido que

produce el tumor o agalla de la corona por el
gen de interés. Este plásmido recombinante se
introduce en la bacteria.

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 Partes de la planta se ponen en contacto con las
bacterias en medio de cultivo

Planta sensible

Las células que

incorporan el plásmido
crecen en un medio
especial o selectivo

Planta resistente A partir de las células transformadas

se obtienen plantas adultas
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 Para transformar plantas que no son atacadas por
Agrobacterium se recurre a la pistola o cañón de genes

Plásmido
recombinante
Pistola de
genes

Partícula
de oro

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Aplicaciones de la Biotecnología vegetal

Resistencia a herbicidas

Resistencia a plagas y a enfermedades

Mejoras de las propiedades nutritivas

Resistencia a sequía y frío (estrés abiótico)

Otras aplicaciones: producción de variedades coloreadas,

plantas transgénicas productoras de vacunas, etc...

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 Genes cry de Bacillus thurigiensis y su aplicación en la
obtención de plantas resistentes a insectos

Bacillus thurigiensis es una bacteria

Gram-positiva del suelo, que en el
momento de la esporulación, forma
un cristal (cuerpo paraesporal) que
puede llegar a alcanzar el 40% del
peso seco de la célula.

Las proteínas que componen el

cristal se denominan proteínas Cry,
codificadas por los genes cry que
se encuentran en plásmidos de
gran tamaño (se conocen unos 130
genes y alrededor de 150
variedades alélicas).

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 Modo de acción de las toxinas cry en las larvas de insectos

Activación
Ingestión Solubilización
Bacillus Thurigiensis

Cristal
endotoxina
Algodón Bt

Caderina Septicemia
Muerte de la larva

APN

Células AMP
Formación poros
intestino medio ATP-Mg2+ Muerte celular
GDP GTP-Mg2+ membrana

Señalización
celular
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 ¿Qué entendemos por CLONACIÓN animal?

clonar significa obtener uno o varios individuos a partir de una

célula o núcleo de otro individuo, de modo que los individuos
clonados son idénticos o casi idénticos al original.

Individuos idénticos

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 Transgénesis y clonación en animales

Oveja que se Oveja donadora de

quiere clonar célula huevo

Medio de cultivo de
embriones

Oveja
descendiente
clónica

Oveja en cuyo útero se

desarrollará el embrión Universidad de Alcalá Patrimonio de la Humanidad
 Aplicaciones de la clonación animal

• La eficiencia de clonación a partir de un animal adulto es muy baja, lo que

limita su aplicación en la industria agropecuaria.

Mejoramiento genético

Conservación de especies silvestres en peligro de extinción

Producción de animales transgénicos:

•Productores de fármacos por sangre leche u orina(Ej.
factor de coagulación IX humano)
• Producción de órganos de cerdo para xenotransplantes
• Producción de animales resistentes a enfermedades

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