UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

PRÁCTICA 5

DILUCIÓN SERIADA
Nombre: Nelson Heredia
Fecha: Quito, 13 de noviembre de 2017.
1. TEORÍA

1.1. Dilución seriada

En muchos casos se necesita preparar disoluciones con concentraciones extremadamente
bajas de un soluto, hasta un punto que es difícil o imposible en la práctica medir la
cantidad necesaria de producto sólido o el volumen de solución madre. En esas
situaciones es necesario preparar una solución de mayor concentración (solución de stock
o solución madre) y hacer diluciones sucesivas a partir de ésta hasta alcanzar la
concentración deseada. (García J., 2004)
1.2. Aislamiento
Es la separación en de un determinado microorganismo del resto de microorganismos fue
le acompañan. El método más usual es la siembra por estría simple sobre un medio de
cultivo sólido adecuado dispuesta en una placa de Petri. ( S. López Díaz, 2004)
1.3. Técnicas de aislamiento
1.3.1. Placa de diseminación
El método de aislamiento por diseminación en placa es un procedimiento en el cual el
investigador disemina una mezcla diluida de células sobre una superficie de agar, utiliza
una varilla doblada de vidrio esterilizada, de tal forma que cada célula crece en su propia
colonia separada. (Colectivo de autores, 2004).
1.3.2. Placa vertida
El procedimiento de placa vertida se utiliza extensivamente con bacterias y hongos y
también puede producir colonias aisladas. Se prepara una muestra bacteriológica diluida.
El investigador introduce una pequeña cantidad dentro de un plato de petri vacío. Se vierte
agar derretido dentro del plato de petri que contiene la muestra. El agar y la muestra se
mezclan meticulosamente al cubrir el plato e inclinarlo y revolverlo suavemente. (López
Tévez, Leonor, 2006)
1.3.3. Placa estriada
El método de estrías en placa es el procedimiento clásico para aislar cepas de bacterias.
El investigador esteriliza un lazo de alambre con una llama. Luego de enfriarse, el lazo
de alambre es colocado en una placa de agar estéril. El investigador sumerge el lazo
dentro de la muestra, recogiendo miles de bacterias, y a continuación realiza estrías con
el lazo en la superficie de agar. (King E.O., 1954).
1.3.4. Placa de exposición
La exposición de un medio estéril al ambiente demuestra la técnica aséptica. El
investigador etiqueta dos placas de agar de nutrientes para una comparación y
observación posterior y se las deja descubiertas. Se permite que una placa de agar
permanezca como está, exponiéndola al ambiente por un corto periodo de tiempo. La
segunda placa es expuesta a una fuente de posibles contaminantes, tales como un
estornudo, tos o dedos colocados en contacto directo con la superficie de agar. Las placas
se cubren, invierten e incuban a temperatura ambiente por un periodo de tiempo antes de
la observación. (López Tévez, Leonor, 2006)
1.4. Dilución seriada ejemplos en industria
1.4.1. En homeopatía
La homeopatía forma parte de los métodos biológicos, puesto que trabaja en el sentido
del curso de la enfermedad y la aviva por medio de una enfermedad medicamentosa que
se desarrolla en una dirección similar. Por lo tanto, la homeopatía conoce también el
empeoramiento inicial, es decir, una intensificación de los síntomas patológicos y de las
molestias después de comenzar el tratamiento que luego se convierte en una fase curativa.
(Clavell, L., 1992).
La dilución se elabora con una proporción siempre ascendente, con las llamadas
"potencias". Por lo general se diluye con potencias decimales, o sea:
1:10 = D 1
1:100 = D 2
1:1.000 = D 3
1:10.000 = D 4

1.4.2. Diluciones seriadas de una proteína

La albúmina sérica bovina es la proteína que más usualmente se emplea como patrón para
calcular la cantidad de proteínas totales en una muestra incógnita. Las unidades que
habitualmente se usan para la solución de stock son mg/ml, y en general una solución de
1 mg/ml puede resultar adecuada para realizar diluciones seriadas y medir luego la
concentración de proteínas en una muestra. Las diluciones se harán al medio en una serie
de tubos rotulados 1; 0,5; 0,25; 0,12; 0,06; 0,03; 0,015, a todos se les agrega 2 ml de agua
destilada y luego la solución correspondiente: (Clavell, L., 1992).

Tabla 1.4.2 - 1

Tubo concentración ml de H2O ml solución x dilución

1 0.5 mg/ml 2 ml 2 ml solución madre (1 mg/ml) 1/2

2 0.25 mg/ml 2 ml 2 ml de la solución 0.5 mg/ml 1/4

3 0.125 mg/ml 2 ml 2 ml de la solución 0.25 mg/ml 1/8

1.4.3. Diluciones seriadas de un neurotransmisor

La noradrenalina, ya que las concentraciones que se emplean para producir un efecto

biológico suelen ser tan pequeñas que es necesario hacer diluciones muy grandes de la
sustancia. Por ejemplo, se parte de una solución madre 0,1 M y se hacen diluciones 1/10
hasta 10-9 M. (Clavell, L., 1992).

Tabla 1.4.3 -1

Tubo concentración ml de H2O ml de solución x dilución

1 0.01M (10-2) 9 ml 1 ml solución 0.1M 1/10
2 0.001M (10-3) 9 ml 1 ml solución 0.01M 1/100
3 0.0001M (10-4) 9 ml 1 ml solución 0.001M 1/1000

2. Referencias Bibliográficas
2.1.Bibliografía
2.1.1. García J. (2004) Manual Del Técnico Superior de Laboratorio de Análisis
Clínicos. Modulo I. España: Editorial MAD
2.1.2. Zoila del S. López Díaz MSc. Colectivo de autores, (2004). Introducción a la
Salud Pública. Editorial Ciencias Médicas. Ciudad de la Habana a. Ed. E-book.
2.1.3. López Tévez, Leonor; Torres, Carola, (2006) Medios de cultivo Microbiología
General. Recuperado de: http://www.microbiologia.com.ar/
2.1.4. King E.O., M. Ward y D.E. Raney (1954). Centro Nacional de Alimentación y
Nutrición, (CENAN) Métodos Recomendados para el Examen microbiológico de
Alimentos y Bebidas. Madrid: Editorial; Universidad Nacional del Nordeste
2.1.5. Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. (1992). Microbiología. Manual de Métodos
Generales (2da edición). Venezuela: Editorial; Facultad de Farmacia. Universidad
Central de Venezuela.