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TRABAJO PRCTICO N 7 METABOLISMO II (FOTOSNTESIS)

Temas propuestos:
Pigmentos fotosintticos. Fotosistemas I y II: flujo cclico y no cclico de electrones. Etapas
luminosa y oscura: reactivos y productos. Fosforilacin fotosinttica. Fijacin del carbono: ciclo de
Calvin.

OBJETIVOS:
Interpretar la frmula general de la fotosntesis y todas las reacciones involucradas dentro
del proceso fotosinttico.
Extraer y separar los pigmentos que intervienen en la fotosntesis, teniendo en cuenta sus
diferencias de solubilidad y color.
Demostrar la capacidad reductora de los cloroplastos y que la luz y el CO2 son
necesarios para la fotosntesis.
Determinar el efecto de un herbicida sobre el poder reductor de los cloroplastos.

Material necesario provisto por el alumno:


- Caja de diseccin completa.
- Fibra indeleble.

Material necesario provisto por la ctedra:


- Cinco o seis hojas de espinaca o de acelga.
- Hojas de Elodea.

Bibliografa
Solomon, E., Berg, L. y Martin, D. W. 2013. Biologa. Editorial CENGAGE Learning,
9 Ed.- Captulo 9: Fotosntesis: captura de energa luminosa.

Bibliografa ampliatoria

Curtis, H. y Barnes, N.S. 2000. Biologa. Editorial Mdica Panamericana S.A. 6 Ed.
(en espaol). Captulo 7: El flujo de energa. Captulo 9: Fotosntesis luz y vida.

De Robertis, E., Hib, Ponzio. 2005. Biologa Celular y Molecular de De


Robertis. Editorial El Ateneo. 15 Ed. Captulo 19: La clula vegetal. Cloroplasto.

En base a la lectura de la bibliografa indicada, desarrolle las preguntas planteadas.

La fotosntesis puede definirse como un proceso fisiolgico de tipo anablico mediante el


cual muchos seres vivos son capaces de utilizar la energa luminosa para sintetizar materia
orgnica.

Este proceso es el origen de todos los seres vivos que habitan la Tierra ya que la energa
solar es utilizada para sintetizar los compuestos orgnicos que despus sern ingeridos y
degradados por los individuos no fotosintticos. As, gracias a la fotosntesis, la energa solar es el
origen de la energa qumica de todas las clulas.
La importancia de la fotosntesis tambin radica en su economa ya que utiliza como fuente
de energa el sol, como fuente de carbono el CO2 y para reducir este ltimo, utiliza agua.

6CO2 + 12H2O + luz C6H12O6 + 6O2 + 6H2O

NOTA: Debido a que todo el O2 liberado proviene del H2O, deben asimilarse 12 molculas de H2O
por cada molcula de C6H12O6 formada en la fotosntesis, para balancear la ecuacin.
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El resultado neto es la oxidacin de dos molculas de agua para formar oxgeno mediante
la liberacin de cuatro electrones, y la reduccin de una molcula de dixido de carbono por esos
cuatro electrones para producir carbohidratos (proceso de xido-reduccin).

Por qu la fotosntesis se considera un proceso anablico y endergnico?

Cules son los reactivos y los productos de la reaccin del proceso fotosinttico?

En las clulas vegetales (Fig. 1), la fotosntesis se lleva a cabo en los cloroplastos, los
cuales son grandes estructuras subcelulares rodeados por una membrana doble. En su interior,
hay membranas que forman una especie de sacos llamados tilacoides. En las plantas superiores,
esos sacos estn apilados unos sobre otros en grupos formando los denominados grana. La
matriz llena de lquido que rodea los grana es el estroma. La clorofila y los dems pigmentos
fotosintticos se localizan en las membranas tilacoidales. Los tilacoides participan en las
reacciones fotodependientes, y las reacciones fotoindependientes ocurren en el estroma.

Figura 1. Cloroplastos en un organismo vegetal


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Por qu son importantes los cloroplastos?

Cmo se relaciona la estructura del cloroplasto con su funcin?

Cul es la importancia de los pigmentos fotosintticos?

Por qu la fotosntesis requiere luz visible?

En realidad, el proceso es muy complejo y requiere de una primera etapa en la que se


absorbe la energa solar y se transforma en energa qumica libre y en poder reductor (etapa
fotodependiente), y una segunda etapa donde se utilizan esos productos para la reduccin del
CO2 (etapa fotoindependiente) (Fig. 2).

Figura 2. Etapas de la fotosntesis

Etapa fotodependiente: involucra reacciones de transferencia de electrones. Se


produce la captacin de energa luminosa y su transformacin en energa qumica libre (ATP) y
poder reductor (NADP reducido). Para ello se oxida el oxgeno del H2O que cede sus hidrgenos
reduciendo el NADP. Como es necesaria la presencia de luz, se denomina tambin fase
luminosa.

Etapa fotoindependiente: involucra reacciones de fijacin del carbono. Se produce la


fijacin del CO2 en una molcula aceptora y su posterior reduccin para formar hidratos de
carbono para lo cual se utilizan los productos obtenidos en la fase anterior. No se pueden dar esta
serie de reacciones si previamente no se tienen los productos resultantes de la fase luminosa. No
es necesaria la presencia de luz, por lo que se denomina tambin fase oscura.
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Cules son los reactivos y productos de cada etapa?

Cul es la importancia de cada etapa y cmo se relacionan entre s?

Absorcin de la energa luminosa. Las clulas fotosintticas poseen una serie de


pigmentos localizados en los tilacoides, clorofilas y pigmentos accesorios (carotenoides: carotenos
y xantfilas). Se encuentran en la membrana tilacoidal asociados en grupos o conjuntos
funcionales que constituyen unidades fotosintticas llamadas fotosistemas (Fig. 3).
Cada fotosistema est compuesto
por cientos de molculas de clorofila
y carotenoides que actan como
molculas antena o colectoras
(complejo antena) que absorben la
luz y la transmiten como en un
embudo hacia una molcula de
clorofila especializada (tipo a) que
forma el llamado centro de
reaccin, el cual al recibir la
excitacin por la energa transmitida
es capaz de perder un electrn.
Este hecho recibe el nombre de
acto fotoqumico y supone la
transformacin de la energa
luminosa en energa qumica.

Figura 3. Absorcin de la luz.

Cuando una molcula de clorofila recibe luz a una determinada longitud de onda, uno de
sus electrones alcanza un estado energtico excitado, pero vuelve inmediatamente al estado
fundamental. As emite la energa recibida a una clorofila cercana por fluorescencia, es decir, con
una longitud de onda un poco mayor debido a una ligera prdida de energa en forma de calor. El
paso de la energa luminosa de clorofila en clorofila se denomina resonancia y hace que sta
vaya teniendo cada vez mayor longitud de onda (y por lo tanto menor energa) hasta que es
absorbida por la clorofila del centro de reaccin, momento en el que se produce el acto
fotoqumico.

En las clulas eucariotas fotosintticas y en las cianobacterias hay dos tipos de fotosistemas
que se diferencian en el mximo de absorcin de la clorofila que forma el centro de reaccin. El
fotosistema I tiene un mximo de absorcin a 700 nm y su clorofila se llama P700 (pigmento
700 nm), mientras que el fotosistema II tiene el mximo a 680 nm (P680). El resto de bacterias
fotosintticas slo poseen el fotosistema I.

Cuando inciden dos fotones sobre el fotosistema I (PSI), el P700 se excita y emite dos
electrones a una rbita de elevada energa que son inmediatamente captados por la ferredoxina
(Fd). El NADP+ acepta los electrones y se reduce a NADPH (Fig. 4).
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Cmo se rellena el hueco dejado por los electrones en el P700? Para ello acta el
fotosistema II (PSII). Al ser iluminado por dos fotones el P680 se excita y emite dos electrones que
son captados por una cadena transportadora de electrones formada por la plastoquinona (PQ), el
complejo de los citocromos b6-f y la plastocianina (PC). El complejo citocromo b6-f acta
adems como una bomba de protones, utilizando parte de la energa en impulsar protones al
espacio tilacoidal. De la plastocianina los electrones pasan ya al P700 que recupera los que justo
antes haba perdido.

Ahora es el P680 el que presenta un hueco electrnico. ste es rellenado por los
electrones procedentes del agua como consecuencia de la ruptura de la molcula de agua
(fotlisis del agua), proceso en el que interviene un enzima con manganeso no muy bien
conocido y mediante el cual una molcula de agua se escinde en dos protones, dos electrones y
un tomo de oxgeno.
Los protones que libera la fotlisis del agua en el espacio tilacoidal se suman a los que
bombea el complejo de citocromos b6-f con lo que se genera un gradiente electroqumico. Ahora,
al igual que ocurre en las mitocondrias segn la hiptesis quimiosmtica, los protones son
impulsados por el gradiente de pH a travs del ATP-sintetasa que se encuentra en la membrana
tilacoidal, con lo que se sintetiza ATP a partir de ADP + Pi.
Esta sntesis de ATP recibe el nombre de fotofosforilacin no cclica debido a que el
flujo de electrones comienza en la molcula de agua y termina en el NADP+. En conjunto, en la
transferencia no cclica, a partir de una molcula de agua y 4 fotones de luz, se forman una
molcula de NADPH, una de ATP y O2.

Figura 4. Fotofosforilacin no cclica.

Adems del flujo no cclico de


electrones, en casi todas las especies
tiene lugar tambin un flujo cclico en el
que interviene slo el fotosistema I. Se
dice que es un proceso cclico porque
los electrones perdidos por el P700
regresan de nuevo a dicho pigmento
(Fig. 15). La finalidad del proceso cclico
es generar ATP para subsanar el dficit
que, en caso contrario, se producira ya
que en la fase oscura se necesitan 3
molculas de ATP por cada 2 de
NADPH.

Figura 5. Fotofosforilacin cclica.


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Al igual que en el proceso no cclico, al incidir los fotones sobre el fotosistema I, los
electrones adquieren la energa necesaria para ser capturados por la ferredoxina, pero ahora, en
vez de continuar hacia el NADP+, son desviados hacia la cadena de transporte de electrones que
conecta los fotosistemas I y II, concretamente al complejo citocromo b6-f que bombea protones al
espacio tilacoidal para que luego se sintetice ATP al pasar por el canal de la ATP-sintetasa. Se
llama ahora fotofosforilacin cclica ya que el flujo de electrones es cclico, son los mismos que
perdi el P700 los que vuelven cclicamente a l. As pues, en este caso no se forma NADPH, no
interviene el agua ni se libera O2.

El flujo cclico de electrones es tambin caracterstico de las bacterias fotosintticas que no


desprenden oxgeno (bacterias del azufre y purpreas) ya que no tienen el fotosistema II.

En la fase oscura (ciclo de Calvin) se utilizan el poder energtico (ATP) y el poder reductor
(NADPH) obtenidos durante la fase luminosa para impulsar la transformacin de sustancias
inorgnicas en materia orgnica. Esta transformacin es muy desfavorable energticamente y por
ello se acopla a las reacciones de la fase luminosa.
El proceso fundamental de la fase oscura es la fijacin reductora del C a partir del CO2
formndose primero glcidos sencillos (gliceraldehdo fosfato PGAL) de los que derivarn el resto
de compuestos orgnicos.

Cmo funcionan el fotosistema I y II?

En qu consiste la fotofosforilacin cclica?

Ciclo de Calvin

La fijacin reductora del CO2 ocurre en la mayora de las plantas a travs de una
secuencia cclica de reacciones conocida como ciclo de Calvin o ciclo C3 debido a que la mayora
de los metabolitos intermediarios tienen 3 carbonos (Fig. 6). El ciclo se inicia a partir de un enzima
de elevado peso molecular, la ribulosa difosfato carboxilasa (RuBisCo), que cataliza la
incorporacin al ciclo del CO2 atmosfrico o disuelto en agua si se trata de plantas acuticas. Este
enzima se encuentra en grandes cantidades en los cloroplastos y se considera que es la protena
ms abundante de la Biosfera.

Se distinguen 3 etapas:

1. Carboxilacin: Mediante el enzima RuBisCo el CO2 se fija a un azcar preexistente, la


ribulosa-1,5-difosfato formndose un compuesto muy inestable de 6 carbonos que se rompe
inmediatamente en 2 molculas de 3-glicerato.

2. Reduccin: El 3-glicerato se reduce a 3gliceraldehido consumindose el NADPH y


el ATP que se obtuvieron en la fase luminosa.

3. Recuperacin: De cada 6 molculas de 3gliceraldehido que se forman, una se


considera el rendimiento neto de la fotosntesis. Las otras 5 sufren una serie de transformaciones
consecutivas en las que tambin se consume ATP para regenerar la ribulosa 1,5-difosfato, con la
que se cierra el ciclo.
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Figura 6. El ciclo de Calvin.


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Produccin de ATP y formacin del gradiente de protones en una bacteria, una mitocondria y un
cloroplasto.
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Figura 7. Respiracin vs Fotosntesis.

Referencias:
C.K.: Ciclo de Krebs
C.C.: Ciclo de Calvin
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EXPERIENCIA N1

EXTRACCIN Y RECONOCIMIENTO DE PIGMENTOS


Como se dijo anteriormente, el principal pigmento fotosinttico de las plantas superiores es
la clorofila a. Adems, existen pigmentos accesorios: la clorofila b y los carotenoides
(carotenos y xantfilas), que son capaces de transferir la energa que absorben de la luz a la
clorofila a. Las molculas de estos pigmentos tienen distintos grados de solubilidad frente a
solventes polares y no polares. As, la clorofila a y los carotenos presentan una mayor afinidad por
los solventes orgnicos no polares (cloroformo, ter, acetona, etc.), en tanto la clorofila b y las
xantfilas se disuelven mejor en sustancias polares (agua, etanol) (Fig. 8).

Figura 8. Pigmentos.
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a- Solubilidad diferencial
Procedimiento:
1- Colocar en un mortero 15 mL de alcohol y trocitos de hojas verdes (sin
nervaduras), y aplastar suavemente hasta que el lquido adquiera una coloracin
similar a la de las hojas (verde transparente).
2- Filtrar la solucin de pigmentos con papel de filtro
(embudo) y recogerla en un erlenmeyer.
3- De la solucin de pigmentos contenida en el vaso,
colocar 4 mL en un tubo de ensayo, y 2 mL en una
cpsula de Petri.
4- En el tubo de ensayo, aadir 2 mL de ter de petrleo y
agitar suavemente por inversin con tapn de goma,
durante 30 segundos.
5- Aadir 2 mL de agua destilada volviendo a agitar con
suavidad otros 30 segundos.
6- Dejar el tubo reposando en la gradilla 15 minutos y
observar las distintas fases.

b- Cromatografa: Anlisis de los pigmentos disueltos


La cromatografa es un mtodo de separacin de los componentes de una mezcla
por la distribucin de los mismos entre una fase estacionaria y una fase mvil, mediante un
solvente o mezcla de solventes, que arrastran las sustancias de la mezcla con diferente
velocidad.

Mecanismo de separacin
En la cromatografa ascendente sobre papel, la fase estacionaria consiste
principalmente de molculas de agua unidas al papel. El papel de cromatografa contiene
entre 6 a 10% de agua adsorbida a las fibras de celulosa. Los solutos en la mezcla se
disuelven en cierto grado en estas molculas de agua e interaccionan con la fase
estacionaria.
La fase mvil comprende el/los solvente/s (alcohol, acetona, ter de petrleo) en
el/los cual/es cada soluto se disuelve en diferente grado.
El grado de separacin obtenido es funcin de la solubilidad relativa de cada soluto
en la fase estacionaria (agua) y en la fase mvil (solventes) (Fig. 9).

Figura 9. Separacin de molculas pequeas mediante cromatografa sobre papel. Despus de


aplicada la muestra en el origen, y una vez seca, se hace fluir lentamente, a lo largo del papel, por
accin capilar, una solucin que contiene por ejemplo una mezcla de dos solventes. Los
diferentes componentes de la muestra se desplazan a velocidades distintas sobre el papel en
funcin de su solubilidad relativa, y por lo tanto, de acuerdo a cmo interacciona cada uno con la fase
mvil y con la fase estacionaria.
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Procedimiento:
1- Preparar un frasco con la mezcla de solventes (ter de petrleo y acetona en la
proporcin 9:1) y taparlo.
2- Dejar el frasco en reposo durante aproximadamente 30 minutos antes de colocar el
papel de cromatografa (saturacin).
3- Extraer los pigmentos segn protocolo de extraccin explicado anteriormente.
4- Sobre un papel de cromatografa (Whatman 3MM) sembrar la mezcla de pigmentos:

- Trazar una lnea (lnea de siembra) con lpiz, a 1 cm de la base


aproximadamente y marcar el punto de siembra.
- Con el borde de un portaobjetos
sembrar el extracto de pigmentos sobre
el papel.
- Dejar secar y repetir la operacin 20
veces ms.
- Cuando la ltima gota se haya secado
colocar la tira de papel dentro del
frasco con mucha precaucin, pues la
mancha de pigmentos debe quedar
ms arriba que el nivel de solvente
dentro del frasco (para evitar que los
pigmentos queden disueltos en el
solvente fuera del papel). Tapar y dejar
en reposo.
- Observar como asciende el solvente por
el papel. Cuando llegue hasta la parte
superior del papel, destapar y retirar
con cuidado el papel.
- Dejarlo un rato al aire hasta que se seque.
- Observar y reconocer los diferentes pigmentos de acuerdo con su color.

El papel con las distintas manchas es un cromatograma.

Figura 10. Cromatograma.


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EXPERIENCIA N2

a- Aislamiento de cloroplastos
Las tcnicas de aislamiento de cloroplastos no son demasiado sencillas, sin embargo
pueden utilizarse tcnicas aproximadas, que permiten mantener, por lo menos, algo de la
actividad del cloroplasto.

Para preservar esta actividad es necesario:

- Mantener los utensilios (recipientes), reactivos, y medios a baja temperatura (para


ello las operaciones que se describen a continuacin se harn en un bao de hielo).
- Colocar los cloroplastos y los tejidos de los que se vayan a extraer en una solucin
osmticamente compatible y tamponada (buffer).

Procedimiento:

1- Colocar en un mortero trozos de hojas (sin nervaduras) de espinaca o acelga fresca y


lavada con 10 mL de buffer isotnico STN (sacarosa-tricina-ClNa, pH 8), que se triturarn
sin golpear hasta que el lquido adquiera una coloracin similar a la de la hoja.
2- Filtrar la solucin de pigmentos por medio de una gasa y recoger en un tubo de centrfuga.
3- Centrifugar 2 minutos a baja velocidad (1000 - 1600 rpm).
4- Recoger el sobrenadante en otro tubo de centrifuga en fro y centrifugar de nuevo durante
10 minutos a velocidad mxima (5000 rpm).
5- Descartar el sobrenadante verde claro.
6- Resuspender el precipitado (pellet) en 2 mL de buffer STN, homogeneizando suavemente
con varilla de vidrio hasta obtener una suspensin uniforme.
7- Mantener la suspensin de cloroplastos en hielo y recubriendo el tubo de centrfuga con
papel metlico.

NOTA: El macerado en mortero se usa para destruir la estructura celular del vegetal y as liberar los
cloroplastos intactos, impidiendo que pierdan su actividad. El filtrado es para separar residuos celulares y
fragmentos de hojas. La primera centrifugacin remueve clulas enteras y otros fragmentos de hojas ms
pequeos. En la segunda centrifugacin se sedimentan los cloroplastos. El fro se utiliza para mantener
inactivas las enzimas que pudieran destruir las protenas de los complejos proteicos que intervienen en la
fase luminosa de la fotosntesis.
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b- Demostracin de la capacidad reductora de los cloroplastos aislados


Los cloroplastos aislados segn el procedimiento anterior, mantienen, en parte, su
capacidad fisiolgica de reducir el NADP+ a NADPH; es decir mantienen la capacidad, propia del
sistema no cclico de electrones dependiente de la luz, de disociar el agua.
Si bien el NADP+ es el aceptor final de electrones
en el proceso de fotosntesis, los cloroplastos pueden
reducir una gran variedad de compuestos. En el trabajo
prctico se utilizar 2,6-diclorofenol indofenol como
aceptor artificial de electrones por ser ms estable y
econmico que el NADP+.

Procedimiento:
Aadir a la suspensin de cloroplastos obtenida
anteriormente (y que se habr mantenido en un bao de
hielo) una solucin de DCPIP al 0,0004 M (cinco partes
de solucin de DCPIP por cada parte de suspensin de
cloroplastos).
El DCPIP es un colorante azul, que en su forma reducida pierde el color; se utiliza en este
caso, en lugar del NADP+, para demostrar fcilmente la capacidad reductora de los cloroplastos.

c- Determinacin del efecto del herbicida diurn (DCMU) sobre el poder reductor
de los cloroplastos
Ms de la mitad de los herbicidas de uso agronmico ejercen su accin fitotxica
inhibiendo la actividad fotosintetizadora de la planta. Las posibilidades de actuacin son muy
variadas, entre los que se destacan los que inhiben el transporte de electrones entre los
fotosistemas II y I. El diurn (DCMU) pertenece a esta categora de herbicidas, secuestrando
electrones a nivel de la Plastoquinona; se usa en una concentracin de 0,001 M para inhibir la
fotosntesis.
Desde la perspectiva agronmica, el conocimiento de la estructura y funcin de la
maquinaria fotosinttica, conducen al diseo de variedades vegetales resistentes a los herbicidas.
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d- Influencia del dixido de carbono (CO2) en el proceso de la fotosntesis en la


planta Elodea
Durante la fijacin de carbono, las plantas captan el dixido de carbono e incorporan (fijan)
los tomos de carbono a una molcula orgnica ms grande, para formar la glucosa.
Debido a la capacidad del bicarbonato de sodio (NaHCO3) de liberar dixido de carbono, se
lo puede utilizar como una fuente artificial de dixido de carbono para evaluar los distintos niveles
de dixido en la fotosntesis.
El objetivo de esta experiencia es demostrar la influencia del dixido de carbono (CO2) en el
proceso de la fotosntesis en la planta Elodea mediante la presencia de un sustrato que libere
dixido de carbono al contacto con el agua, como el NaHCO3.

Incorporacin del CO2

Procedimiento:

- Tomar 5 tubos de ensayo, enumerarlos y agregar entre 8 y 10 ml de agua a cada tubo.


- Aadir 10 gotas de rojo Fenol a cada tubo.
- Hacer burbujear CO2 soplando en el agua con una pajilla o pipeta en los tubos 3, 4 y 5,
menos en los tubos 1 y 2.
- Suspender el burbujeo cuando se observe un cambio de color.
- Sumergir un vstago sano de Elodea de 5 cm de largo en cada uno de los tubos.
- Someter a los tubos 1 y 3 a luz intensa, empleando una lmpara con luz brillante (70 w).
- El tubo 4 colocarlo en un sitio con luz tenue, donde la luz no sea directa.
- Los tubos 2 y 5 colocarlos en total oscuridad.
- Mantener as durante 20 min o ms si el tiempo lo permite.

Recordar que el rojo Fenol se usa como indicador de pH.


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PARA PENSAR Y DISCUTIR

1- Las molculas que intervienen en la cadena de transporte de electrones entre los


fotosistemas II y I se encuentran:

a- disueltas en el citoplasma.
b- disueltas en el estroma del cloroplasto.
c- incluidas en la membrana externa del cloroplasto.
d- incluidas en la membrana interna del cloroplasto.
e- incluidas en la membrana tilacoidal.

2- Durante el ciclo de Calvin:

a- se libera oxgeno al medio por hidrlisis del agua.


b- se obtiene ATP a partir de la incorporacin de dixido del medio.
c- se sintetizan molculas orgnicas a partir de dixido de carbono.
d- se sintetizan molculas orgnicas a partir del agua.

3- Teniendo en cuenta el siguiente esquema, responder verdadero (V) o falso (F):

El bombeo de protones provoca un aumento del pH en el interior del tilacoide.

El oxgeno liberado durante la fotlisis del agua es utilizado para la fijacin de CO2 en el ciclo
de Calvin.

La ATP sintetasa requiere de un gradiente de protones para sintetizar ATP a partir de ADP.

Los electrones transportados son finalmente aceptados por el NADP+.

El flujo lineal de electrones sigue el recorrido desde el fotosistema I al fotosistema II.


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4- Completar la siguiente tabla:

ETAPA
ETAPA FOTODEPENDIENTE
FOTOINDEPENDIENTE
H2O H+ + e- + O2

CO2 + H+ + e- (CH2O)n
ATP
ADP + Pi
NADPH
NADP+ + H+
6 O2
6 CO2 + luz

5- Indicar verdadero (V) o falso (F). El diurn (DCMU) es un herbicida que inhibe el proceso de
fotosntesis, especficamente en la cadena de transporte de electrones. Si agregamos DCMU a una
suspensin de cloroplastos y colocamos estos a la luz:

El NADP+ no podr ser reducido a NADPH.

No se formar un gradiente de protones para generar ATP.

No se formar O2 a partir del CO2 incorporado.

El diclorofenol indofenol no se va a decolorar si lo agregamos a la muestra.

Las enzimas que intervienen en la reduccin del CO2 perdern su actividad.

6- Una mutacin que inactivase el complejo citocromo b/f:

a- inhibira el movimiento de los electrones desde el PSII hacia el PSI.


b- inhibira el movimiento de los electrones desde el PSI hacia el PSII.
c- inhibira la reduccin de la plastoquinona.
d- promovera la formacin de NADPH.

7- Indica V o F:
Los carotenos presentan una gran afinidad por solventes no polares, por lo tanto tienden a

quedar retenidos en la fase estacionaria de una cromatografa en papel.


Las clorofilas a y b no pueden ser separadas realizando un cromatograma en papel, porque
poseen una estructura qumica muy similar.
Las xantofilas por tener grupos polares en su molcula, tienen ms afinidad por los solventes
polares que los carotenos.
En la cromatografa en papel, la fase mvil corresponde al solvente polar y la fase estacionaria
al solvente no polar.
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8- Analizar el siguiente esquema y responder las preguntas:

a- Cul es la importancia de la reaccin sealada con la letra A?


b- Cul es la importancia de la reaccin sealada con la letra B?
c- Cules son los productos de esta etapa que se utilizan en la fase fotoindependiente?
d- Puede este sistema funcionar prescindiendo de la ruptura de la molcula de agua? Por qu?
e- Indicar el nombre de los componentes representados con los nmeros:

1 2 3 4 5
6 7 8 9 10

9 - Dado el siguiente esquema


que representa un tilacoide,
indica:

a- el sentido del bombeo de

protones.

b- b- la ubicacin de la

ATPasa.

Tachar lo que NO correspoda:


En cul de estos dos compartimientos se produce NADPH? ESTROMA / TILACOIDE

Despus del bombeo de protonoes en el interior del tilacoide el pH se hace ms CIDO / BSICO

La fotlisis del agua ocurre en el ESTROMA / INTERIOR DEL TILAILACOIDE


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10- Un laboratorio de control de calidad debe verificar la composicin de una mezcla de
pigmentos de origen comercial que se vende en forma de polvo. Para ello se disuelve la
mezcla en alcohol y se agrega a esta solucin un solvente orgnico apolar (ter). Luego se
siembra la solucin inicial (1), la fase etrea (2) y la alcohlica (3) por separado en un papel
y se realiza una cromatografa utilizando como fase mvil un solvente apolar.

Sabiendo que segn el fabricante la mezcla contiene 4 pigmentos con la siguiente afinidad por los
solventes apolares B>C>>D>A
Indicar:
a- en qu punto se sembr cada una de las muestras (1, 2 y 3).
b- a qu pigmento corresponde cada banda.

11- En ausencia de luz, una clula vegetal:


a- genera poder reductor en forma de NADPH.
b- respira aerbicamente.
c- incrementa el consumo de CO2.
d- produce glucosa y O2.

12- Teniendo en
cuenta el siguiente
esquema, responde
las consignas que se
presentan a
continuacin:
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a- Completar el cuadro en blanco que se encuentra al lado de cada molcula con la cantidad de
tomos de carbono que presenta cada una.

b- Cuntas vueltas del ciclo son necesarias para sintetizar una molcula de glucosa?

____________________________________________________________________________

c- La transformacin de 1,3-difosfoglicerato en gliceraldehdo 3-fosfato es una oxidacin o una


reduccin?

____________________________________________________________________________

d- La conversin de gliceraldehdo 3-fosfato en ribulosa 1,5-bisfosfato es endergnica o


exergnica?

____________________________________________________________________________

e- Cul es el costo energtico en cantidad de molculas de ATP para la fijacin de una molcula
de glucosa?

____________________________________________________________________________

f- En qu lugar de la clula ocurren estas reacciones?

____________________________________________________________________________

g- Cul es la importancia biolgica de este ciclo?

____________________________________________________________________________

13- El electrn eliminado de la clorofila P680 hace que esta molcula requiera su reemplazo el cual
es...

a- tomado del anhdrido carbnico convirtindolo en hidrato de carbono.


b- tomado de la clorofila P700.
c- tomado del agua, la que se "rompe" liberando oxgeno a la atmsfera.
d- tomado del NADPH producido durante la etapa luminosa.

14- Marque con una cruz la respuesta correcta. Cul de los siguientes hechos NO ocurre en la
fotofosforilacin cclica?

a- Se produce ATP.
b- El centro de reaccin del fotosistema I est activo.
c- Hay transporte electrnico en las membranas fotosintticas.
d- Se utiliza la energa luminosa.
e- Se forma NADPH.

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