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RESUMEN
La uva Isabella (Vitis labrusca) es una variedad tinta que se ha adaptado ptimamente a las condiciones
edafoclimticas de la regin de Villa del Rosario (Norte de Santander), y ha tenido buena aceptacin en
los mercados locales. Actualmente la uva se consume en fresco y se desconoce su contenido fenlico para
la elaboracin de vinos. El objetivo de este trabajo fue establecer el contenido fenlico e identificar las
levaduras de importancia vnica de esta variedad. Para ello, se tomaron bayas de dos vendimias consecutivas.
Se analizaron parmetros como densidad, slidos solubles, pH, acidez y el contenido fenlico total y
extrable. Asimismo, se identificaron las levaduras morfolgica y bioqumicamente. Los resultados de los
parmetros fisicoqumicos de las dos vendimias se promediaron y compararon con las uvas procedentes
del Valle del Cauca. Se concluy que las bayas de las dos regiones fueron similares en sus caractersticas
fsicas, y diferentes significativamente en cuanto a su composicin qumica. El contenido fenlico total
fue mayor en las uvas del Valle del Cauca, mientras que el extrable fue similar en las dos regiones. El
examen microbiolgico identific cinco especies de levaduras: Kloeckera apiculata, Criptococcus laurentii,
Candida guillermondii, Candida novergensis y Rhodotorula glutinis.
Palabras clave: Isabella, antocianinas, taninos, levaduras, contenido fenlico.
ABSTRACT
The Isabella grape (Vitis labrusca) is a red variety that has been optimally adapted to the edafoclimatic
conditions in the region of Villa del Rosario (Norte de Santander) and has been accepted also in local
markets. Currently, the grape is eaten fresh and its potential for winemaking is unknown. Therefore, the
purpose of this study was to establish the phenolic potential and identify important yeasts of this kind of
grape for winemaking. To this end, berries taken from two consecutive vintages were analyzed. Parameters
analyzed were density, soluble solids, pH, acidity and total and removable phenolic potential. The yeasts
were identified morphologically and biochemically. The results of the physicochemical parameters of
1
Grupo de investigacin en Ingeniera y Tecnologa de Alimentos (GINTAL). Universidad de Pamplona, Km 1 Va a Bucaramanga,
Pamplona, Norte de Santander, Colombia.
2
Maestra en Ciencia y Tecnologa de Alimentos. Universidad de Pamplona, Km 1 Va a Bucaramanga, Pamplona, Norte de Santander,
Colombia.
* Autor a quien se debe dirigir la correspondencia: danielduran@unipamplona.edu.co
18 Vitae j. d. hernndez c. et al.
the two vintages were averaged and compared with results for grapes from Valle del Cauca. The results
indicated that the berries of the two regions were similar in physical characteristics but significantly
different in terms of chemical composition. The total phenolic potential was higher in grapes from
Valle del Cauca, while removable was similar in the two regions. Five yeast species: Kloeckera apiculata,
Criptococcus laurentii, Candida guillermondii, Candida novergensis and Rhodotorula glutinis were microbiologically
isolated and identified.
Keywords: Isabella, anthocyanins, tannins, yeasts, phenolic potential.
1998 (25), calculada como la suma de las absorbancias levadura (YPD), para la siguiente identificacin
a 420, 520 y 620nm. El contenido fenlico de las uvas segn Combina et al., (15).
se determin utilizando los mtodos de Glories et al.,
(24) y Saint-Criq et al., 1998 (26), y la extractabilidad Identificacin morfolgica y bioqumica de levadura
antocinica, mediante la ecuacin: A las levaduras aisladas en el agar YPD se les
examin la morfologa celular por microscopa. Se
%EA=[(ApH1-ApH3.2)/ApH1)]*100 Ecuacin 1. utiliz agar adicionado con Tween 80 en placas Dal-
mau, para determinar la habilidad de formar hifas y
Las medidas de estos parmetros se obtuvieron
pseudohifas. Para la identificacin bioqumica, las
por duplicado en un espectrofotmetro UV-Visible
levaduras se sometieron a pruebas de asimilacin
Hach DR/4000U, utilizando cubetas de 1 cm de
de hidratos de carbono, utilizando el sistema API
recorrido ptico.
20C AUX (Bio-Merieux), segn las instrucciones
Identificacin de levaduras de la uva Isabella del fabricante.
Tratamiento estadstico de los datos
Tratamiento de pre-aislamiento
Los resultados se analizaron mediante el paquete
Dos racimos de uvas fueron transferidos asp- de software estadstico SPSS versin 13.0 con an-
ticamente a una bolsa plstica estril y macerados lisis de varianza (ANOVA un factor).
a mano durante 2 minutos, de acuerdo con lo
estimado por Combina et al., 2005 (15). Para la RESULTADOS Y DISCUSIN
enumeracin y aislamiento se utiliz el mtodo de
diluciones (agua de peptona micolgica al 0,1%) Caractersticas fsico-qumicas de la uva
seriadas hasta 10 -6. Posteriormente, las diluciones
fueron inoculadas en alcuotas de 0,1 mL en placas Caractersticas fsicas de la uva
de agar extracto de malta (MEA), suplementado
con rosa de bengala (30 mg L -1), cloranfenicol (50 En la tabla 1 aparecen los valores promedio de
g L -1) y eritromicina (70 g L -1), ajustando el pH las caractersticas fsicas de la uva de las regiones de
del medio a 4,5. Las placas de Petri inoculadas se Villa del Rosario y Valle del Cauca que, en general,
incubaron a 25C y se examinaron a diario hasta que son muy similares. En el caso de la densidad de
las colonias tuvieron un tamao que permitiera la la baya, la proveniente de la finca C del Valle del
diferenciacin entre los diferentes tipos. Ms tarde Cauca es la que registra mayor densidad. Al hacer
se recuperaron nmeros representativos de cada tipo el anlisis de la varianza se encontraron diferencias
de colonia y se estim su porcentaje. El recuento de significativas y se determin que es posible estable-
colonias se efectu por triplicado. Los aislamientos cer dos grupos, cada uno conformado por las fincas
se purificaron en placas de agar glucosa, peptona, de la misma regin.
Peso (g)
FINCAS Densidad (g/cm3)
Baya Pulpa Hollejos Semillas
Villa del Rosario A 1,0572 0,0044a 35,46 0,7 29,19 0,8 4,39 1,3 1,88 0,2a
Villa del Rosario B 1,0546 0,0008b 34,64 0,8 28,08 0,5 4,70 1,3 1,86 0,1b
Valle del Cauca C 1,0858 0,0060a; b; c 32,41 0,7 26,93 1,2 4,12 0,5 1,32 0,04a; b
Valle del Cauca D 1,0477 0,0305c 33,56 0,6 28,44 1,3 3,61 0,2 1,51 0,2 a; b
a; b; c,
Letras iguales en superndices iguales en columna indica que existen diferencias mnimas significativas (DMS) entre fincas.
contenido fenlico e identificacin de levaduras de importancia vnica de la uva isabella... 21
En cuanto a la composicin macro de la uva: una fermentacin (3,2 a 3,9), en tanto que al ob-
peso de la baya entera, peso de la pulpa, peso tenido con las uvas del Valle del Cauca se le debe
del hollejo, son similares en las diferentes fincas hacer una correccin si se desea vinificar. De igual
muestreadas y en las regiones, salvo en el peso de forma sucede con la acidez. En este caso, al efectuar
las semillas, ya que las uvas provenientes de Villa la correccin se correra el riesgo de la formacin
del Rosario tuvieron mayor peso. En este mismo de tartratos en los mostos obtenidos con las uvas
sentido, los pesos de la uva entera, pulpa y hollejo, del Valle del Cauca. Por otra parte, el contenido
no registraron diferencias estadsticamente signifi- de azcares es de importancia en la vinificacin,
cativas a diferencia del peso de las semillas. ya que de ellos depende la formacin de alcohol.
Estas caractersticas son de importancia, ya que Por tanto, con contenidos de azcares superiores
el tamao de la baya es conocido como factor de- a 18Brix se podran obtener vinos con promedios
terminante en la calidad de la uva para vinificacin, de alcohol entre 10 y 12% respectivamente (31). El
porque se relaciona directa o inversamente con la anlisis de la varianza indic diferencias estadsti-
proporcin de pulpa, hollejos y semillas, y con la camente significativas entre las uvas provenientes
concentracin de los compuestos fenlicos en la de las dos regiones para cada caracterstica qumica
uva (27, 28). medida. Asimismo, la prueba post hoc defini dos
Al estimar los resultados como porcentajes de las grupos homogneos de fincas: uno, conformado
diferentes partes de la composicin macro de la uva por las fincas de Villa del Rosario, y el otro, por las
Isabella de las dos regiones, se obtienen estas cifras: del Valle del Cauca.
81% de pulpa, 14% de hollejo y 5% de semillas, que
Contenido polifenlico de la uva
comparadas con las obtenidas por Roby y Matthews
(29), en uvas Cabernet Sauvignon (80% de pulpa, ndice de polifenoles totales (IPT)
15% de piel y 5% de semillas), demuestra que las
proporciones en la uva Isabella son similares a las En la figura 1 se muestran los resultados del
de la Cabernet Sauvignon, con la diferencia de que ndice de polifenoles totales y extrables (pH 1,0
la primera registra ms peso (3,33 g promedio) que y 3,2 respectivamente) de las uvas provenientes de
la Cabernet Sauvignon (1,24 g promedio), segn las regiones de Villa del Rosario y Valle del Cauca.
Muoz et al., 2002 (30). Estos valores son similares, exceptuando la finca
D del Valle del Cauca, en donde el IPT total es
Caractersticas qumicas ms alto y el extrable ms bajo. Generalizando, el
Los resultados sobre el pH, la acidez total porcentaje de IPT que pasara de las uvas al vino
y los slidos solubles se aprecian en la tabla 2. en una eventual vinificacin sera en promedio del
Estos valores son similares para las fincas de 78% para las uvas de las fincas A, B y C, mientras
que para la finca D sera del 42,5%. El anlisis
cada regin. El pH y los slidos solubles son
estadstico mostr que existen diferencias entre el
superiores en las uvas de Villa del Rosario, al IPT de las uvas a pH 1,0, mientras que a pH 3,2
tiempo que la acidez es menor. no se apreci ninguna diferencia en las uvas de las
Tabla 2. Caractersticas qumicas de la pulpa. Media diferentes regiones.
desviacin tpica de 100 mL de mosto.
Acidez total Grados
FINCAS pH
(g a. tartrico/L) Brix
Villa del Rosario A 3,22 0,03a 7,05 0,07a 19,94 0,09a
Villa del Rosario B 3,22 0,03b 7,07 0,04b 20,01 0,5b
a; b a; b
Valle del Cauca C 2,71 0,01 10,75 0,07 18,0 0,0a; b
a; b a; b
Valle del Cauca D 3,07 0,007 8,05 0,07 18,0 0,0a; b
p 0,05 0,0000 0,0000 0,0000
a; b
Letras iguales en superndices iguales en columna indica que existen
diferencias mnimas significativas (DMS) entre fincas.
El IPT se relaciona inversamente con el tamao que proporciona informacin sobre la cantidad
de la baya, por la relacin superficie/volumen de la de antocianos que pasan de la uva al vino durante
baya; as, aumenta a medida que el dimetro dismi- la etapa de maceracin, de manera que cuanto
nuye, es decir que a menor volumen de las bayas, mayor sea su valor, mayor ser la dificultad para su
mayor es la proporcin de hollejos, o viceversa extraccin. El %EA de las uvas de las dos regiones es
(32). Asimismo, los compuestos fenlicos de la uva similar. El anlisis de varianza no indic diferencias
se concentran mayormente en los hollejos, de lo significativas para este parmetro entre fincas y
que se puede deducir que, a mayor proporcin de regiones.
hollejo, ms alta es la concentracin de polifenoles
80,00
en mostos y vinos tintos, como se puede observar 70,00
1000,00
las uvas internacionales, quiz por su menor
800,00
600,00
proporcin de hollejos por kilogramo de fruta.
400,00
Estas diferencias pueden deberse a que la uva
200,00 Isabella, por su tamao, contiene menor proporcin
0,00 de hollejos por kilogramo de fruta que las otras
Villa del Rosario A Villa del Rosario B Valle del Cauca C Valle del Cauca D
1,5
las uvas de las fincas A y B obtuvieron valores
1
menores que en la segunda. De otro lado, entre
las fincas tuvieron conteos de levaduras similares
0,5
para cada vendimia. El anlisis estadstico no indic
0
Villa del Rosario A Villa del Rosario B Valle del Cauca C Valle del Cauca D diferencias significativas entre las uvas de cada finca
Taninos totales (pH 1,0) Taninos extrables (pH 3,2) para cada vendimia, en tanto que s se dieron entre
vendimias.
Figura 4. Taninos totales y extrables de la uva Isabella.
Tabla 3. Conteos medios (log ufc g-1 desviacin tpica)
Intensidad colorante (IC) de levaduras de la uva Isabella de Villa del Rosario.
El gnero mayormente aislado en las uvas de las Valle del Cauca; solamente difieren en el peso de
dos vendimias fue la levadura apiculada Kloeckera las semillas. De otra parte, segn los resultados de
apiculata. El porcentaje de recuperacin en esta es- acidez, pH y slidos solubles, la uva de Villa del
pecie fue similar para las uvas de la finca B en las Rosario es ms apta para la vinificacin, porque
dos vendimias. El Criptococcus laurentii, especie que estos parmetros se encuentran dentro del rango
se encontr nicamente en las uvas de la finca A tecnolgico que una uva debe tener para ello.
durante la primera vendimia, fue la segunda. No se Las caractersticas del contenido polifenlico total
hallaron levaduras altamente fermentativas. fueron siempre superiores en las uvas de la finca D
El informe sobre las especies de levaduras que se del Valle del Cauca, pero en los extrables presentaron
hallaron en las uvas de Villa del Rosario concuerda el nivel ms bajo. De otra parte, las uvas procedentes
parcialmente con reportes de diferentes pases. Es de Villa del Rosario exhibieron uniformidad entre
habitual encontrar Kloeckera spp., Criptococcus laurentii las fincas de origen. La uva Isabella demostr una
y Rhotorula glutinis en las bayas y mostos (20, 21, extractabilidad antocinica alta, comparada con
38, 39). La frecuencia de levaduras apiculadas en la algunas variedades internacionales, por lo que sera
superficie de la uva, que pueden representar entre el interesante utilizar enzimas pectolticas en la mace-
50 y 90% de la poblacin total de levaduras en uvas racin, con el fin de acrecentar su aporte polifenlico
maduras saludables, se ha estudiado ampliamente al vino durante su proceso de vinificacin.
(21, 38, 40). En otros estudios, sin embargo, las Las poblaciones de levaduras fueron mayores en
levaduras apiculadas son especies escasas, y otras la segunda vendimia que la primera. Se aislaron e
como Criptococcus, Rhodotorula y algunas especies de identificaron cinco especies de levaduras: Kloeckera
Candida, conforman los gneros ms frecuentes de apiculata, Criptococcus laurentii, Candida guillermondii,
levaduras (17, 20, 41). Candida novergensis y Rhodotorula glutinis, siendo el
La Kloeckera apiculata (especie fermentativa) gnero Kloeckera apiculata el que presenta el meta-
acta durante las primeras fases de fermentacin bolismo fermentativo que contribuye al bouquet
del mosto, donde es responsable de la sntesis de de los mostos de uva fermentados. Sin embargo,
algunos de los componentes del aroma (42), por los mostos que procedan de estas uvas debern ser
tanto, es conveniente para la produccin del vino, inoculados con cultivos comerciales de levaduras
al que aporta parte del bouquet. Las dems especies para lograr un proceso de fermentacin ptimo.
aisladas, tales como Criptococcus laurentii, Candida
guilliermondii, C. novergensis y Rhodotorula glutinis,
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