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464 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, undecima ed/cion.
Titular lentamente con SV de tiosulfato de sodio 0.01 M con
agitacion vigorosa hasta que casi desaparezca el color amarillo.
Adicionar 0.5 mL de SI de almidon y continuar titulando
lentamente, mientras se agita vigorosamente para liberar todo el
yodo de la fase organica, hasta que desaparezca el color azul.
Correr un blanco de reactivos; el volumen gastado en la
titulacion del blanco no debe ser mayor que 0.1 mL.
Notas:
(1) Dependiendo del volumen gastado en la titulacion de la
muestra, si es necesario se puede utilizar tiosulfato de sodio
0.1 M en lugar de 0.01 M, especialmente en muestras cuyo
valor de indice de peroxido sea mayor que 150.
(2) En muestras con valores de indice de peroxido mayores 0
iguales que 70, puede haber un retraso de 15 a 30 s para
neutralizar el almidon debido a la tendencia del trimeW-
pentano a flotar sobre la superficie de la fase acuosa, ya que
esto afecta el tiempo necesario para mezc1ar adecuadamente
el disolvente y el titulante acuoso. Se puede adicionar a la
mezc1a una pequefia cantidad de emulsificante (0.5 a 1.0 %),
del tipo de polisorbato 60, para retardar la separacion de
fases
Calcular el indice de peroxido utilizando la formula indicada
para el metodo A.
La escala de pH es una serie de val ores que representan
convencionalmente la concentracion de iones hidrogeno en
una solucion acuosa. Originalmente fue definida como:
pH = -log[H+]
expresando la concentracion de iones hidrogeno en moles/litro.
Esta definicion se ha actualizado y ahora se define al pH
como la actividad del ion hidrogeno:
pH = -logaH
Internacionalmente se ha aceptado definir operacionalmente
al pH a partir del Potencial 0 Fuerza Electromotriz (E) de
una celda de medicion especifica. Dicha celda asigna valores
de pH a materiales de referencia -patrones primarios 0
secundarios-, y establece el pH de la muestra a analizar
empleando la ecuacion de N ernst.
Donde:
Valor de pH a determinar de la preparacion de la
muestra.
pHs = pH de la preparacion de referencia.
E= Potencial, expresado en volts, de la celda conteniendo
la muestra a determinar (solucion de prueba).
Potencial de la celda de la solucion de referencia (pH
conocido).
k= Cambio del potencial, expresado en volts, por el
cambio en una unidad de pH.
MGA 0701. MEDIC/ON DEL pH
Dicha constante puede calcularse como:
k = 2.3026 R T / F
Donde:
R Constante de los gases.
T = Temperatura tennodinamica (en K).
F = Constante de Faraday.
Asi definida la cantidad es un numero adimensional. En
la tabla 0701.1 se dan los valores numericos del factor (K)
2.3026 RT/F a algunas temperaturas.
Tabla 0701.1. Valores numericos del factor (K) 2.3026 RT/F
a diferentes temperaturas.
2.3026 RT/F (mV)
10 56.18
15 57.l7
20 58.17
25 59.16
30 60.15
FUNDAMENTO
Esta prueba se basa en la determinacion de la actividad de
iones hidrogeno, empleando un instrumento potenciometrico,
con sensibilidad para reproducir valores de pH de 0.05 unidades
usando un electrodo indicador al ion hidrogeno como
electrodo de vidrio y un electrodo de referencia apropiado,
tal como el de calomel 0 el de c1oruro de plata-plata. EI
aparato detecta el potencial en milivolts y en unidades de pH
a traves del par de electrodos.
Para las mediciones de pH, se utiliza ampliamente el electrodo
de vidrio, porque da una respuesta inmediata a los cambios
rapidos de las concentraciones de lones hidrogeno aun en
soluciones poco reguladas. Como el mecanismo de este
electrodo, no implica un cambio de electrones, resulta ser el
unico electrodo sensible a los iones hidrogeno, al cual no
perturban los agentes de oxidacion 0 de reduccion. Los
valores de pH, de las soluciones 0 suspensiones que son solo
parcialmente acuosas y que pueden considerarse solamente
como "valores aparentes de pH" pueden medirse con un
electrodo adecuado y normalizando adecuadamente el
medidor de pH.
Como los valores de pH dependen de la temperatura, las
mediciones se efectuan a determinadas temperaturas cons-
tantes. Las soluciones empleadas para determinar el pH se
preparan con agua exenta de dioxido de carbona.
SOLUCIONES PARA SER
USADAS COMO PATRONES SECUNDARIOS
Las soluciones amortiguadoras (SA) se preparan, como se
indica a continuacion, y se emplean para la calibracion del
aparato; y estan hechas con sustancias de adecuada calidad
metrologica. EI periodo maximo de uso de las soluciones
amortiguadoras es de 3 meses, siempre que se almacenen en
recipientes de vidrio de borosilicato con tap on esmerilado.
 Metodos Generales de Analisis 465

por casas COJrnerclale:s. opera sobre

y con pnnClplO de cero,
'"''-j,.UHIJULV lecturas
de deflecci6n directa con escala
ser corriente directa
o alterna. El de manual
las condiciones de
soluciones de
agua hasta obtener 1 000 mL. va a medir el de la soluci6n a traves de los
electrodos en milivolts y 10 transformara en unidades de
M. Disolver 10.12 g
secado a
"" ... <n"'''"YV'>a .... ~c.

110C durante 1 h, en agua hasta obtener 1 000 mL. de calomel 0 el de cloruro de

nes son: a) calomel-mercurio.
0.05 M. Disolver 3.53 g de
eqllilllOlllli cloruro de HCl La conexi6n del
y 3.39 g de fosfato mono- electro do de calomel a la soluci6n de prueba, se hace
basico de cada uno secado a a traves de una soluci6n saturada de cloruro de potasio y la
120C durante 2 h en agua, hasta obtener 1 000 mL. conexi6n electrica es a traves de un alambre de platino en
contacto con el mercurio.
Solucion D. Tetraborato de sodio 0.01 M. Disolver 3.80 g
de tetraborato de sodio decahidratado (Na2B407 10H20) en ELECTRODO DE VIDRIO. Se emplea como electrodo
agua hasta obtener 1 000 mL. la soluci6n de la indicador. Es del tipo de membrana y su uso primordial es
absorci6n de di6xido de carbono. para la determinaci6n de la concentraci6n de iones
hidr6geno en soluciones acuosas. La red de silicatos de la
Solucion E. Hidroxido de calcio saturado. A 25C. Agitar membrana provoca un intercambio de iones en las super-
un exceso de hidr6xido de calcio [Ca(OH)2] en agua, decantar ficies exteriores e interiores del vidrio, tomando potenciales
a 25C antes de su uso. Proteger la soIuci6n de la absorci6n que dependen de la soluci6n con la que se encuentran en
de di6xido de carbono. contacto; por 10 tanto el potencial del electrodo de vidrio
varia solo con el pH de la soluci6n extema. La membrana
TABLA DE VALORES DE DE LAS SA PARA CALI- del electrodo tiene alta resistencia (l 000 MQ a 25C). La
corriente que sale de esta celda, se mantiene menor de lOa
La tabla 0701.2 indica los valores de que presentan las 11 A, para evitar errores en la medici6n (l mY). Todos los
soluciones amortiguadoras en funci6n de la temperatura. electrodos de vidrio se acondicionan, sumergiendolos por
En caso necesario las soluciones deberan ajustarse al pH algun tiempo en agua 0 en SA diluida.
indicado, con otra soluci6n de referencia.
Nota: actualmente, tanto el electrodo de vidrio como el de
Tabla 0701.2. Valores de pH de la soluciones referencia ya vienen ensamblados de manera combinada.
amortiguadoras para calibraci6n.
CALIBRACION. Debido a las variaciones en la naturaleza y
en la operaci6n de potenci6metros apropiados, no es pnictico
A B C D E
C indicar directrices aplicables universalmente para determina-
10
ciones potenciometricas de pH. Los principios generales son
1.67 4.0 6.92 9.33 13.00
efectuados siguiendo las instrucciones previstas para cada
15 l.67 4.0 6.90 9.28 12.81 instrumento por su fabricante. Examinar los electrodos antes
20 1.68 4.0 6.88 9.23 12.63 de usarlos observando si presentan el puente salino, previo a
25 1.68 4.01 6.86 9.18 12.45 su uso, si es necesario, abastecer de soluci6n salina el puente
y observar las precauciones indicadas por el fabricante para
30 1.68 4.02 6.85 9.14 12.29 el instrumento y el electrodo. Encender el aparato y dejarlo
35 l.69 4.02 6.84 9.10 12.13 calentar 10 suficiente, siguiendo las instrucciones del
40 1.69 4.04 6.84 9.07 11.98 fabricante. Seleccionar dos soluciones amortiguadoras, patr6n
de referencia certificado para calibraci6n, cuya diferencia en
45 1.70 4.05 6.83 9.04 1l.84
no exceda de 4 unidades. Llenar el recipiente con una de
50 1.71 4.06 6.83 9.01 11.71 las soluciones amortiguadoras para calibraci6n, teniendo en
55 1.72 4.08 6.83 8.99 11.57 cuenta la temperatura a la cual el material de prueba es
60
medido. Colocar el control de temperatura a la de la soluci6n
1.72 4.09 6.84 8.96 11.45
y ajustar el control de calibraci6n hasta hacer que los valores

MGA 0701. MEDICION DEL pH

466 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, undecima edici6n.
de pH observados sean identicos a los tabulados. Enjuagar
los electrodos y los recipientes con varias porciones de la
segunda solucion amortiguadora, seleccionada para
la calibracion. Llenar los recipientes a la misma temperatura
a la que el material es medido. El pH de la segunda solucion
amortiguadora esta dentro de 0.07 unidades de pH del
valor tabulado. Si se observa mayor desviacion revisar los
electrodos y si estan afectados, reemplazarlos. Ajustar el
control de calibracion para hacer que el valor de pH
observado sea igual al valor tabulado (vease tabla 0701.2).
Repetir la calibracion hasta que las dos soluciones amortigua-
doras den valores observados de pH dentro de 0.05 unidades
de los valores tabulados, sin mas ajuste de los controles.
Evitar frotar los electrodos durante las mediciones, ya que se
pueden cargar electrostaticamente y provocar alteraciones en
la lectura.
AJUSTE DEL Aplicar el mismo
procedimiento descrito para la calibracion, pero utilizando
patrones secundarios. Esto se realizara inmediatamente antes
de cada determinacion.
PROCEDIMIENTO. Efectuar las determinaciones a
25 2 C a menos que se indique otra cosa en la monografia
correspondiente. Ajustar el aparato de acuerdo al punto
anterior, a continuacion, lavar los electrodos y recipientes
varias veces con agua destilada, dejando que los electrodos
escurran el agua, y secar el recipiente con papel absorbente.
Ajustar la temperatura con el control, a la que tiene la
Solucion de Prueba. Enjuagar los electrodos y el recipiente
con la solucion de prueba. Posteriormente, llenar el reci-
piente con esta solucion y efectuar la determinacion de pH.
el procedimiento, minimo con una segunda muestra.
La difer.encia entre muestras no debera ser mayor a 0.05 para
que la realizacion de la prueba sea valida.
RESUL T ADOS. Los valores de pH obtenidos mediante este
procedimiento se deben reportar hasta centesimas de unidad.
Para poder promediar las medici ones realizadas, estas no
deberan presentar una variacion mayor a 0.02 unidades de pH.
1.
La prueba mide aumento de temperatura corporal, como
respuesta a la presencia de agentes pirogenicos, en conejos a
los que se inyecta por via intravenosa una solucion esteril del
producto a analizar.
La prueba esta disefiada para productos que pueden ser
tolerados en una dosis intravenosa que no exceda de
10 mL/kg de peso del conejo administrada en un periodo no
mayor de 10 min.
Cuando se trate de que una preparacion
a condiciones de
MGA 0711. PRUEBA DE PIROGENOS
-~-- ......---------------------
administracion se deben seguir las indicaciones establecidas
en la monografia del producto.
Animales de Utilizar conejos albinos, sanos, adul-
tos, de un peso no men or de 1.5 kg, alimentados con una
dieta balanceada libre de antibioticos, alojados en jaulas
individuales en un lugar con temperatura ambiente controla-
da de 20 a 23 sin ruido u otros factores que los exciten.
Retirar el aljmento 18 h antes de una prueba, pennitiendoles
solo el acceso al agua. Antes de usar por primera vez un
conejo en una prueba de pirogenos, se debe acondicionar y
realizarse con una anticipacion maxima de 7 dias.
Realizar un ensayo simulado que incluya todos los pasos
indicados en el Procedimiento, omitiendo la inyeccion. No
utilizar el mismo conejo para prueba de pirogenos antes de
48 h 0 de dos semanas cuando ocurra una elevacion de la
temperatura corporal de 0.6 C 0 mas.
y material. Utilizar sensores, sondas 0
algun sistema de medici on de calibrado, con una
precision de 0.1 C y que alcancen su maxima lectura en
menos de 5 min.
El material de vidrio y el que no sufra modificaci6n por
accion de calor seco se despirogeniza a 250C durante
por 10 menos 30 min, 0 por otro metodo validado.
Preparacion de diluyentes y reactivos. Todos los diluyen-
tes y reactivos necesarios para la preparacion de las muestras
o para el enjuague de las superficies de equipos medicos,
deben estar esteriles y libres de pirogenos para evitar falsos
positivos. Deben comprobarse las caracteristicas de apiro-
genicidad sometiendo porciones representativas de los
diluyentes y de las soluciones a la prueba de pirogenos.
Los reactivos y diluyentes se preparan como se indica a
continuacion:
Cloruro de sodio libre de pirogenos. Calentar el cloruro de
sodio a 200C por no menos de 2 h.
Carbonato de sodio !ibn de pirogenos. Calentar el carbo-
nato de sodio anhidro a 170C durante no menos de 4 h.
Agua libre de Utilizar agua purificada por destila-
cion u otra tecnologia equivalente 0 superior que demuestre
la eliminacion de agentes pirogenicos Verificar la ausencia
de pirogenos agregando cloruro de sodio al 0.9 % e inyectar
10 mL/kg de peso del conejo.
Solucion salina al 0.9 010. Disolver el cloruro de sodio en agua,
ambos libres de pirogenos, esterilizar en autoclave. Verificar la
ausencia de pirogenos inyectando 10 mL/kg de peso del conejo.
Solucion de carbonato de sodio al 2.5 0/0. Disolver el
carbonato de sodio libre de pirogenos en agua libre
de pirogenos, esterilizar en autoclave. Verificar la ausencia de
pirogenos inyectando 1.0 de peso del
Solucion de hidroxido de sodio 0.05 N. Pesar 2 g de
hidroxido de sodio y disolver con agua libre de y
llevar al aforo a 1 000 mL.
Procedimiento. el peso de cada uno de los
VV.UVIVoJ_colocarlos en cepos insertar el sensor
de temperatura en el recto a una profundidad no menor de