CENTRO DE ENSINO SUPERIOR MORGANA POTRICH

Curso de Farmcia

KAYMIR FRANCES DE FREITAS

MTODOS DE DIAGNSTICO NA ROTINA LABORATORIAL PARA

CANDIDASE VULVOVAGINAL: UMA REVISO DA LITERATURA

MINEIROS GO

2017
 KAYMIR FRANCES DE FREITAS

MTODOS DE DIAGNSTICO NA ROTINA LABORATORIAL PARA

CANDIDASE VULVOVAGINAL: UMA REVISO DA LITERATURA

Trabalho de concluso de curso apresentado

faculdade Morgana Potrich, como parte das
exigncias do curso de Farmcia para
concluso do curso de graduao.

Orientador: Prof. Esp. Vincius Calos Costa Silva

MINEIROS GO

2017
 KAYMIR FRANCES DE FREITAS

MTODOS DE DIAGNSTICO NA ROTINA LABORATORIAL PARA

CANDIDASE VULVOVAGINAL: UMA REVISO DA LITERATURA

Trabalho de concluso do curso apresentado Faculdade Morgana Potrich como requisito

para obteno do grau de bacharel em Farmcia.

BANCA EXAMINADORA:

___________________________________________
Prof. Esp.Vincius Calos Costa Silva
Orientador

___________________________________________
Prof. Me.Fabio B. Machado
Membro da banca

___________________________________________
Prof. Ma. Milena Figueiredo
Membro da banca

Trabalho defendido e aprovado em ____/____/____

Dedico essa conquista a Deus, minha famlia,
esposa e filhos, que me motivaram a realizar esta
conquista onde me incentivaram a nunca desistir.

Kaymir Frances de Freitas

 AGRADECIMENTOS

Agradeo primeiramente a Deus, que guiou-me com teu pode e fora de pai, no
deixando-me cair em meio a tantas dificuldades. O que seria de mim sem a f que tenho por
ti, muito obrigado Senhor.

Agradeo a minha me, Vanie Luce Pereira de Freitas, pelo incentivo, fora e por
sempre acreditar que eu fosse capaz dessa conquista, obrigado por voc existir, te amo
incondicionalmente.

Agradeo aos meus irmos, Kaison Neves de Freitas Filho e Vanessa Pereira de
Freitas, pelos momentos que passamos juntos, proporcionando momentos de alegrias, sempre
mostraram-me a importncia de cuidar um ao outro e quo valioso o amor entre irmos,
amo-os demais! E claro que no poderia esquecer de agradecer ao meu av que aqui no esta
presente mais, onde foi fundamental na construo do meu carter e determinao em busca
de algo maior. Muito obrigado!

Agradeo essa conquista a minha esposa, Rosimeire Palmeira de Freitas, que sempre
se fez presente na minha vida, apoiando-me em todas as situaes. Onde o nosso amor intenso
vem rompendo barreiras para um bem maior.

Enfim, tenho muito a agradecer a pessoas maravilhosas que aqui no citei, mas que
agradeo a Deus pela oportunidade de t-las conhecido, Muito obrigado a todos!

Kaymir Frances de Freitas

MTODOS DE DIAGNSTICO NA ROTINA LABORATORIAL PARA
CANDIDASE VULVOVAGINAL: UMA REVISO DA LITERATURA

Methods of diagnosis in the laboratory routine for vulvovaginal candidiasis: a review of the
literature

Kaymir Frances de Freitas

Vincius Calos Costa Silva

Acadmico do curso de Farmcia da Faculdade Morgana Potrich (FAMP), Mineiros - GO,

Brasil.

Farmacutico Generalista, Especialista em Hematologia Clnica Laboratorial e Banco de

Sangue (AC&T), Mestrando em Cincias Aplicadas Sade (Universidade Federal de Gois),
professor pela Faculdade Morgana Potrich (FAMP), Mineiros - GO, Brasil.
 RESUMO

A candidase vulvovaginal consiste em sndrome clnica causada por um fungo do gnero

Candida. A Candida albicans a espcie que mais provoca esta infeco no ser humano,
acometendo principalmente as mulheres. Vrias espcies de Candida so colonizadoras na
microbiota normal da pele, do trato gastrointestinal e geniturinrio, como colonizadora essas
espcies no causam infeco a no ser que haja um desequilbrio na microbiota bacteriana.
Quando a levedura se prolifera causa um incomodo clnico, identificado por corrimento
vaginal abundante, prurido vulvar e vaginal intenso, ardncia genital e sintomas urinrios. O
diagnstico clnico pode ser confirmado por ocorrncia de prurido vulvar intenso e o
corrimento caracterstico, ademais necessrio tambm a realizao de exames laboratoriais.
Esta reviso teve como objetivo principal revisar os principais mtodos de diagnstico da
candidase vulvovaginal na rotina laboratorial de anlises clnicas a fim de ampliar os
conhecimentos sobre doenas ginecolgicas, com enfoque na candidase vulvovaginal.

PALAVRAS-CHAVE: Candidase, Candida albicans, diagnstico laboratorial.

 ABSTRACT

Vulvovaginal candidiasis consists of a clinical syndrome caused by a fungus of the genus

Candida. Candida albicans is the species that most causes this infection in humans, affecting
mainly women. Several species of Candida are colonizers in the normal microbiota of the
skin, gastrointestinal and genitourinary tract, as colonizer these species do not cause infection
unless there is an imbalance in the bacterial microbiota. When the yeast proliferates, it causes
a clinical discomfort, identified by abundant vaginal discharge, intense vulvar and vaginal
itching, genital burning and urinary symptoms. The clinical diagnosis can be confirmed by the
occurrence of intense vulvar pruritus and characteristic discharge, in addition, laboratory tests
are also necessary. This review had as main objective to review the main methods of
diagnosis of vulvovaginal candidiasis in routine laboratory of clinical analyzes in order to
increase the knowledge about gynecological diseases with a focus on vulvovaginal
candidiasis.

KEYWORDS: Candidiasis ,Candida albicans, laboratory diagnosis

 SUMRIO

1 INTRODUO ........................................................................................................ 10

2 METODOLOGIA .................................................................................................... 11

3 REVISO DA LITERATURA ................................................................................... 12

3.1 Candidase vulvovaginal ....................................................................................... 12

3.2 Diagnostico Laboratorial Candidase .................................................................... 13

3.2.1 Exames micolgicos ......................................................................................... 13

3.2.2 Exame microscpico a fresco ............................................................................ 14

3.2.3 Cultura e isolamento dos gneros Candida .......................................................... 16

4 CONDERAES FINAIS ......................................................................................... 17

5 REFERNCIAS........................................................................................................ 18
 10

1 INTRODUO

A Candidase Vulvovaginal (CVV), tambm denominada de vulvovaginite por

cndida, uma micose provocada pelo fungo da espcie candida, habitualmente pelo gnero
albicans causando a infeo da mucosa genital (DA SILVA et al., 2007; NORBERG et
al.,2017; DA SILVA et al., 2017). A doena envolve principalmente a vulva e vagina, em
decorrncia da proliferao da levedura (PEIXOTO et al., 2008).
A Candidase Vulvovaginal atualmente um importante problema de sade pblica,
portanto torna-se fundamental que profissionais atuantes nessa rea conheam sua patogenia
de maneira atualizada para que, dessa forma, auxiliem no manejo da infeco
(VASCONCELOS et al., 2016).
Os profissionais da sade relatam que a CVV a infeo vaginal mais comum na
prtica da ginecologia, ou seja, o principal motivo que levam as mulheres a procurarem uma
clinica ginecolgica, quer no sistema pblico quanto na medicina privada (ROCHA et al.,
2014; RODRIGUES; SIMES; DINIZ, 2009).
A CVV causa um incomodo clnico, identificado por corrimento vaginal abundante,
prurido vulvar e vaginal intenso, ardncia genital e sintomas urinrios (HOLANDA et al.,
2007; OLIVEIRA et al., 2008; TOZZO; GRAZZIOTIN 2012; SANTI et al., 2014; LEAL et
al., 2016).
O diagnstico clnico confirmado por ocorrncia de prurido vulvar intenso,
dispaurenia, disria, edema eritema vulvovaginal, sendo o prurido um dos sintomas mais
importantes para o diagnostico do quadro desta vulvovaginite, considerado tambm o
corrimento vaginal branco, espesso e inodoro e a realizao dos exames laboratoriais (ROSSI,
2009; ZIMMERMMANN et al., 2009; KUMAR et al., 2010).
Devido a magnitude do problema, o nmero de informaes na literatura sobre a
doena ainda insatisfatrio e a CVV tem recebido pouca ateno das autoridades sanitrias e
das agncias de apoio s pesquisas (HOLANDA et al., 2007). Nesse sentido, este trabalho
teve como objetivo realizar uma reviso atualizada da literatura sobre os principais mtodos
de diagnstico da candidase vulvovaginal na rotina laboratorial de analises clnicas, a fim de
ampliar os conhecimentos sobre doenas ginecolgicas,com enfoque na candidase
vulvovaginal.
 11

2 METODOLOGIA
O presente trabalho trata-se de uma reviso de literatura, o qual foi realizado no
perodo de maio a dezembro de 2017, teve como fonte de pesquisa os sites de busca Scientific
Eletronic library online (SCIELO), Google Acadmico, LILACS e NCBI Pubmed, e livros do
acervo da Biblioteca da Faculdade Morgana Potrich-FAMP. Na realizao deste estudo foram
utilizados os seguintes descritores: doenas ginecolgicas, Candidase vulvovaginal,
diagnostico laboratorial da CVV. Os critrios de incluso dos artigos a este trabalho foram
aqueles publicados no perodo de 2000 a 2017, relacionados s palavras-chaves e que ainda
apresentaram qualidade e relevncia com o tema proposto.
 12

3 REVISO DA LITERATURA
3.1 Candidase vulvovaginal

A candidase vulvovaginal uma infeco da mucosa genital que envolve a vulva e a

vagina causadas por fungos do gnero cndida sp, os quais possuem aproximadamente 200
espcies (PEIXOTO et al.,2014) destas, 20 esto relacionadas com processos infecciosos no
ser humano, e consistem umas das principais causas de infeces no trato genital feminino,
causando a candidase vulvovaginal (MURRAY et al., 2004). A espcie Candida albicans a
principal causadora da infeco, entretanto ainda podem ser responsveis pelos quadros
infecciosos a C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. guilliermondi
(MURRAY et al., 2004).
O gnero Candida uma espcie leveduriforme com o tamanho aproximado de 2 a
6m e se reproduzem por brotamento; a maioria das espcies formam pseudo-hifas e hifas nos
tecidos (Figura 1). Quando cultivadas em meios de cultura as colnias tm colorao branca a
creme e possuem superfcie lisa ou rugosa (Figura 2) (PEIXOTO et al.,2014).
Figura 1- Candida albicans Figura 2 - Aspecto da colnia da. Candida sp.

Fonte: TORTORA; FUNKE; CASE 2005. Fonte: TORTORA; FUNKE; CASE 2005.

A candida normalmente faz parte da microbiota comensal das mulheres saudveis,

porm quando h um desequilbrio no balano normal do meio ambiente vaginal, ou quando o
sistema imune do hospedeiro se encontra comprometido, as espcies do gnero candida
tendem a se manifestar desencadeando um processo patolgico denominado Candidase
vulvovaginal (JUNIOR et al., 2011; PEIXOTO et al.,2014).
Os sinais e sintomas vo depender do nvel de infeco ou infestao das leveduras e
principalmente do local do tecido inflamado, podendo ser isolado ou associado por formas de
colnias. Em face disso pode apresentar purido (LEAL et al.,2016;S et al 2012), ardor ou
 13

dor a mico, corrimento branco, grumoso, inodoro e com aspecto caseoso (leite coalhado),
edema vulvar, fissuras e macerao da vulva (HOLANDA et al.,2006).
A candidase pode ser transmitida por meio de contato com mucosas, secrees,
contato sexual, gua contaminada e transmisso vertical durante o parto normal (TOZZO,
GRAZZIOTIN, 2012; BRASIL, 2010). A relao sexual no considerada a principal forma
de transmisso, pois Candida spp. pode fazer parte da flora endgena em at 50% das
mulheres assintomticas (BRASIL, 2006).
Os hbitos higinicos inadequados podem ser fatores que predispe a contaminao
vaginal, dentre elas a higiene anal realizada no sentido do nus para a vagina, arrastando
resduos de fezes para as roupas intimas, o uso de roupas intimas justas e/ou sintticas, com
pouca aerao no rgo genital aumentando a umidade favorecendo o desenvolvimento de
Candida (HOLANDA et al.,2006).
Alguns fatores de risco para CVV tem sido relatado na literatura, como a presena de
ciclos menstruais regulares, onde tem sido considerado relevante fator de risco com maior
incidncia de casos relatados a partir do pico de estradiol (LINHARES et al., 2005;
MARTINS et al., 2007; RIBEIRO et al., 2007; RODRIGUES; SIMES; DINIZ, 2009). A
gravidez, o uso de contraceptivos orais em altas doses e terapia de reposio hormonal pode
levar a situaes de hiperestrogenismo, aumentando assim a concentrao dos nveis de
glicognio, sendo que este responsvel pelo aumento do substrato nutricional para fungos no
meio vaginal, favorecendo desta forma a infeco da mucosa genital por estes
microrganismos (COUTO et al., 2015; JESUS et al., 2015; LOPE, et al., 2017; ROSSI et al.,
2009).

3.2 Diagnostico Laboratorial Candidase

3.2.1 Exames micolgicos

Na rotina laboratorial diversa so as amostras biolgicas a serem examinados pelo
analista: escaro, urinas, fezes, pele, unhas e secrees em geral. Esse variado nmero de
amostras justificado porque a candidase afeta localidades diferentes no corpo e possui
formas clinicas distinta. A Candidase vaginal instala-se nas mucosas da vagina gerando
corrimento branco, grumoso, inodoro e com aspecto caseoso (Figura 3), desta forma o
material clnico de escolha para diagnostico da CVV a secreo vaginal colhida em
consultrio ginecolgico e encaminhado para o laboratrio (LEAl et al.,2016;S et al., 2012).
 14

Para que se alcance o isolamento e identificao do patgeno importante que o tipo e

a qualidade da amostra biolgica, submetida ao laboratrio de micologia, seja de boa
qualidade. A assepsia antes da coleta e a quantidade da amostra so fatores primordiais para o
sucesso do diagnstico fngico por leveduras do gnero Candida (PEIXOTO et al., 2014)
A coleta do material vaginal comumente coletada com zaragatoas, as quais so
colocadas em tubos de ensaio contendo 0,5 ml de gua destilada esterilizada ou soluo
fisiolgica. Preferencialmente as amostras devem ser acondicionadas a 4oC, antes do envio
para o laboratrio (HOLANDA et al.,2006).

Figura 3 - Aspecto da secreo anormal branca e floculosa em placas aderentes s paredes vaginais hipermicas
sugestiva de candidase.

Fonte: https://goo.gl/images/GyFNqV

3.2.2 Exame microscpico a fresco

Para realizao deste exame a coleta feita por uma ala bacteriolgica descartvel,
onde-se colhe do fundo do saco vaginal, uma representativa quantidade de secreo.
Posteriormente esta secreo introduzi-la num tubo de ensaio contendo 1 ml de soluo
fisiolgica glicosada previamente preparada (ALVARES et al.,2007;SILVA, 2004). O exame
a fresco fundamenta-se na observao de microrganismos vivos (bactrias, protozorios,
fungos e leveduras) em suspenso do material biolgico entre lminas e lamnulas, pois desta
forma pode-se observar as estruturas fngicas e os movimentos de hifas e pseudohifas (Figura
4). (BOATTO et al., 2015;BRASIL 2004;BRASIL 2010).
A amostra ser positiva quando o analista observar a presena destas estruturas
fngicas, onde relatar no laudo a sugestividade da doena que ser diagnosticada juntamente
com os dados clnicos e exames laboratoriais adicionais (LEITE et al.,2014).
 15

FIGURA 4: Morfologia da Candida sp em microscopia ptica em exame a fresco.

Fonte:https://goo.gl/images/ayRWti.

3.2.2 Colorao de secreo vaginal pelo mtodo de Gram

Todos os fungos so gram positivos (Figura 5), assim a utilizao da colorao no

visa a diferenciao dos microrganismos, mas possibilita discriminar elementos fngicas de
artefatos existentes em secrees, fezes e urina. A amostra (secreo vaginal) espalhada de
modo homogneo, em movimentos circulares, em uma lmina de microscopia, fixada com
calor e submetida colorao (ALVES et al.,2016; BRASIL 2010).
O mtodo da colorao de Gram baseado na capacidade das paredes celulares de
bactrias e fungos gram-positivos de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante
um tratamento com etanol-acetona, enquanto que as paredes celulares de bactrias gram-
negativas no o fazem( S et al., 2012; ROSA et al., 2004). Uma colorao de Gram positiva,
por norma, inclui a descrio do que se observou na lmina, nomeadamente se as bactrias
so gram-positivas (prpura) ou gram-negativas (rosa). No caso da anlise da secreo
vaginal com suspeita de CVV pelo mtodo de colorao de gram, espera-se observar ao
microscpio estruturas leveduriformes, hifas ou pseudohifas ( TORTORA et al.,2005). Caso
no seja visualizado nenhuma estrutura fngica deve-se realizar uma cultura da secreo, pois
a mesma possui maior sensibilidade (ALVES et al.,2016).
Figura 5: Foto de microscopia de leveduras de pseudo hifas por colorao de gram.

Fonte: TORTORA; FUNKE; CASE 2005.

 16

3.2.3 Cultura e isolamento dos gneros Candida

As tcnicas convencionais para identificao das espcies de Candida atravs de
cultura so baseadas principalmente em mtodos bioqumicos, como fermentao e
assimilao de carboidratos e habilidade de crescer em tubos germinativos a 37C (ARAUJO
et al.,2005).
Atualmente o meio que se mais utiliza no isolamento de Candida o gar Sabouraud
dextrose (ADS), pois ele permite o crescimento da levedura e inibe o crescimento de outras
bactrias, devido ao pH cido. Sugere-se a adio de cloranfenicol, um antibitico, ao meio de
cultura, com a finalidade de inibir melhor as contaminaes bacterinas. Normalmente, as
culturas em ADS so incubadas em aerobiose 37C por 24-48 horas. Nessas condies,
geralmente as colnias se apresentam lisas ou rugosas, cremosas e de tonalidade branco-
amarelada (ACHKAR et al.,2010).
Outro meio de cultura utilizado o CHROMagar Candida (Quadro 1). Este gar
contm substncias cromognicas (que conferem colorao a uma reao), e til para
verificao de diferentes cepas da levedura Candida em uma mesma amostra, dessa forma
permitida uma identificao rpida. Por ser um meio cromognico, ele modifica a cor da
colnia, as colnias de Candida albicans se apresentam em tons de verde claro. A utilizao
deste meio importantssima, pois garante um diagnstico precoce de infeces causadas pelo
gnero Candida, melhorando a terapia antifngica para que os pacientes tenham um
tratamento adequado (VIEIRA et al.,2014).

Quadro 1-Relao da colorao de colnias em meio CHROMagar Candida com leveduras

do gnero Candida sp.
Quadro 1 Identificao de Candida albicans
Espcies de Candida Morfologia e pigmentao
C. albicans Verde
C. tropicalis Azul
C. krusei Rosa, rugosa
C. glabrata Lils
C. parapsilosis Rosa, lisa
Fonte: ARAJO et al., 2005.
 17

4 CONDERAES FINAIS

Esta reviso da literatura abordou a candidase, que corresponde uma infeco

mictica mais prevalente na populao. A candidase uma infeco fngica de grande
importncia em sade pblica e gera grande impactos na sade da populao em geral,
principalmente na feminina. So diversas as espcies j reconhecidas como agentes causais,
embora a mais bem estudada seja a C. albicans, j que maior o seu isolamento e sua
identificao em amostras. Os trabalhos consultados para a realizao desta reviso
destacaram a importncia desta patologia e sua associao com fatores locais e sistmicos
predisponente. A atuao dos referidos fatores na etiopatogenia da leso evidencia a
diversidade de situaes clnicas que exigem o conhecimento necessrio para o diagnstico
dos tipos de candidase, que pode ser formulado a partir de dados clnicos ou laboratoriais.
Torna-se assim imprescindvel o diagnstico correto e tratamento precoce desta afeco
visando assim a preveno de complicaes mais graves.
 18

5 REFERNCIAS

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