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OBJETIVO
El alumno ser capaz de calcular las cantidades necesarias para preparar
el coctail de reaccin en la PCR de punto final
INTRODUCCIN
MATERIAL
Materiales
Calculadora
Lpiz
Borrador
Tabla de conversiones
PROCEDIMIENTO
Nota: Se cuidadoso (a) con las unidades en las que estn los reactivos y las
especificaciones del artculo, deben ser iguales, en caso contrario, convierte
alguno de los dos para que puedan ser utilizadas en los clculos.
RESULTADOS
-Calculos para obtener los volumenes de los reactivos necesarios para
confeccionar el coctail.
1. Buffer
Datos:
Concentracin recomendada 1.25X Volumen de reaccin 50L
X (10X) = (1.25X)(50 L)
X= 6.25 L
Datos:
Concentracin recomendada 50 mM Volumen de reaccin 50 L
Concentracin reactivo 50 L
X= 25 L
3. dNTP
Datos:
Concentracin recomendada 200 nM Volumen de reaccin 50 L
Concentracin reactivo 10 nM
X (10Mm) = (0,2Mm)(50 M)
X= 1 L
4. Oligonucletido F
Datos:
Concentracin recomendada 0.5 M Volumen de reaccin 50 L
Concentracin reactivo 20 nM
X (20Mm)=(50 L)(o,5 M)
X= 1.25 L
5. Oligonuclotido R
Datos:
Concentracin recomendada 0.5 M Volumen de reaccin 50 L
Concentracin reactivo 20 nM
X (20Mm)=(50 L)(o,5 M)
X= 1.25 L
6. Agua adicionada
Bu 6,35
MgCl 25
Oligo f 1.25
Oligo 1.25
DNTP 1
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OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
Se calcul que cada concentracin para la preparacin del coctail, la cuales son
clculos muy bsicos ya que si se conoce a que concentracin se necesitan los
reactivos solo se necesita sustituir la ecuacin C1V1=C2V2.
BIBLIOGRAFA
1. Bolivar, A.M., Rojas, A., y Garca-Lugo, P., 2014. PCR y PCR multiplex:
parmetros crticos y protocolo de estandarizacin. Avances en Biomedicina
3, 25-33.
2. Joshi, M., and Deshpnade, J. D., 2010. Polymerase Chain Reaction:
Methods, Principles and Application. International Journal of Biomedical
Research 1, 81-97.
3. McDaniels, A.E., Rice, E.W., Reyes, A.L., Johnson, C.H., Haugland, R.A.,
Stelma, G.N., Jr., 1996. Confirmational identification of Escherichia coli, a
comparison of genotypic and phenotypic assays for glutamate
decarboxylase and beta-D-glucuronidase. Appl Environ Microbiol 62, 3350-
3354.
CUESTIONARIO
MECANISMO DE EVALUACIN
La presente se calificar en una escala del 0 al 100 y los puntos a evaluar se listan a
continuacin: