Rev. bras. hematol. hemoter.

2007;29(2):168-178 Murador P et al

Reviso / Review

Aspectos estruturais da membrana eritrocitria

Structural aspects of the erythrocyte membrane

Priscila Murador1 Este artigo descreve as estruturas e funes da membrana eritrocitria e sua impor-
tncia na medicina transfusional. A membrana eritrocitria uma das membranas
Elenice Deffune2
mais conhecidas em termos de estrutura, funo e gentica. Como qualquer membrana
plasmtica, tem como funo mediar transportes e, ainda, fornece ao eritrcito resis-
tncia e maleabilidade. De acordo com a International Society of Blood Transfusion
(ISBT), so mais de 500 antgenos expressos na membrana das hemcias e, destes,
cerca de 270 esto envolvidos nos casos de reao transfusional e doena hemoltica
do feto e do recm-nascido. Na classificao feita pela ISBT, destaca-se a srie de alta
freqncia representada por antgenos presentes em mais de 99% dos indivduos de
uma populao. Estes antgenos so conhecidos tambm como antgenos pblicos e a
maioria, quando ausente, determina problemas graves do ponto de vista transfusional.
Como exemplo dessa problemtica, uma gestante com ausncia do antgeno P j sofreu
seis abortos de repetio por insuficincia placentria devido ao anticorpo formado
pela ausncia do antgeno. Protenas importantes so descritas nesta reviso como:
banda 3, glicoforinas, espectrina e outras. A banda 3 a mais abundante protena
integral da membrana do eritrcito e sua principal funo mediar a troca de cloro e
nions de bicarbonato atravs da membrana plasmtica. A segunda protena integral
mais abundante a sialoglicoprotena glicoforina A (GPA). Com um alto contedo de
cido silico, a GPA contribui com a rede de carga negativa na superfcie da membrana
do eritrcito, minimizando, assim, a interao clula-clula e prevenindo sua agrega-
o. Glicoforina C (GPC) o receptor para PfEBP-2 (baebl, EBA-140), o mais novo
local de ligao identificado para o Plasmodium falciparum. O complexo tercirio
espectrina, actina e 4.1R define a rede de citoesqueleto da membrana do eritrcito e
ainda responsvel pela estabilidade sob mecanismos de estresse. Essa reviso da
membrana eritrocitria importante para um melhor entendimento das reaes
transfusionais, onde a formao de anticorpos contra antgenos de alta freqncia
dificulta a transfuso compatvel. O estudo da diversidade antignica, a caracterizao
bioqumica de diferentes protenas trar uma contribuio para o estabelecimento da
sade, assim como para o diagnstico, desenvolvimento de tecnologias, como a produ-
o de anticorpos monoclonais e conduta teraputica para muitas enfermidades. Rev.
bras. hematol. hemoter. 2007;29(2):168-178.

Palavras-chave: Membrana eritrocitria; protenas; antgenos; glicoforinas.

A membrana da hemcia plasmticas de um modo geral apresentam-se como barrei-

ras seletivas que asseguram a composio interna constan-
A membrana da hemcia o modelo primrio para es- te das clulas, atravs do controle da transferncia ativa e
tudo de membrana plasmtica celular animal, pelo fato de passiva de inmeras molculas. Estas membranas tm um
ser desprovida de ncleo e organelas. As membranas sistema estrutural complexo, citoesqueleto, que envolve

1
Mestre em Biotecnologia Mdica pelo Hemocentro da Faculdade de Medicina de Botucatu. Biloga do Hemocentro de Botucatu.
2
Doutora em Imunologia Universidade Pierre et Marie Curie - IV - Paris. Docente do Dept de Urologia da Fac. de Medicina de Botucatu (Unesp).

Correspondncia: Priscila Murador

Hosp. das Clnicas da Faculdade de Medicina de Botucatu Diviso Hemocentro - Distrito de Rubio Jr. s/n
Lab. de Engenharia Celular
18618-000 Botucatu-SP Brasil
E-mail: pmurador@fmb.unesp.br

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Murador P et al Rev. bras. hematol. hemoter. 2007;29(2):168-178

tanto a forma da clula, como sua mobilidade, deforma-

bilidade e o transporte de macromolculas. Entre os dife-
rentes constituintes da membrana apresentam-se recepto-
res envolvidos em funes complexas que permitem a co-
municao entre as clulas, reconhecimento imunolgico e
fenmenos de adeso celular.1
A membrana eritrocitria, como as milhares de outras
clulas do organismo humano, essencialmente constituda
de lipdeos e protenas. A hemcia no um simples "saco"
contendo hemoglobina. Os lipdeos e protenas esto dis-
postos na superfcie da hemcia de forma to complexa que
so comparveis com os mais sofisticados mosaicos bizan-
tinos.2 Esta membrana consiste em uma bicamada fosfo-
lipdica, que representa aproximadamente 50% de sua massa
total e forma a barreira entre dois compartimentos lquidos,
intra e extracelular.3 As trocas entre estes compartimentos
so feitas atravs de bombas, canais de trocas de ons e
transporte molecular como o da glicose.2 Alm disso, a Figura 1. Modelo de mosaico bilipdico e fludico da membrana celular
deformabilidade de sua membrana, a fluidez de seu citoplasma
e a complexidade de sua superfcie membranria, em relao dades mecnicas e elsticas, regulando a viscosidade san-
ao seu volume interno, asseguram as funes de transporte gnea. Todas as protenas de transporte da membrana do
de O2 dos pulmes e remoo do CO2 dos tecidos para os eritrcito so produzidas nos estgios primordiais dos
pulmes. Esta capacidade de transporte depende das condi- eritroblastos.3
es de adaptao circulatria e tambm da hemoglobina O modelo estrutural de membrana eritrocitria mais
citoslica e de um polipeptdio maior da membrana: a banda 3 aceito o de mosaico bilipdico e fludico proposto e des-
ou protena de troca de ons (anion exchanger 1, AE1). Como crito por Singer e Nicolson em 19721 como representado na
transportador de membrana, a AE1, ou banda 3, media as Figura 1.
trocas de Cl-/HCO3-, aumentando ento a capacidade san- Diversas doenas podem ser associadas a defeitos na
gnea de transporte de CO2, garantindo a homeostase e o estrutura dessa membrana que, embora a mais estudada, ain-
equilbrio cido-bsico. Por interao com lipdeos e prote- da possui vrias caractersticas sem um completo entendi-
nas, a banda 3 multifuncional (AE1) une o complexo multi- mento. Estes defeitos podem envolver outras protenas re-
protico do citoesqueleto e confere aos eritrcitos proprie- presentadas graficamente na Figura 2.

FC= Fosfatidilcolina; EM= Esfingomielina; FS= Fosfatidilserina; FE= Fosfatidiletanolamina; GPA= Glicoforina A e GPC= Glicoforina C
Figura 2. Protenas integrais e perifricas da membrana do eritrcito.

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Protenas de membrana
As protenas que compem a membrana eritrocitria
so estruturalmente classificadas em integrais ou trans-
membranrias e perifricas ou extramembranrias. Essas pro-
tenas do citoesqueleto membranrio formam uma verdadeira
malha, que constitui quase uma concha para o material intra-
celular. Este esqueleto responsvel pela forma, bicncava
normal ou anormal, em caso de defeitos genticos, dos
glbulos vermelhos, e representa por si s 60% da massa
protica de toda a membrana.2
As protenas integrais penetram ou atravessam a bica-
mada lipdica e interagem com a poro hidrofbica das mo-
lculas lipdicas. Fazem parte destas as protenas de trans-
porte, como a banda 3, denominada protena transportadora
de ons, e as glicoforinas A, B, C, D, que possuem receptores
de membrana e antgenos que participam do reconhecimento
clula-clula na extremidade externa e auxiliam na estabiliza-
o do citoesqueleto atravs de ligaes com a protena 4.1
na face interna da membrana.5
Das diferentes protenas da membrana eritrocitria, o
domnio citoplasmtico da banda 3 se destaca como um gran-
de centro organizacional que interage com muitas outras pro-
tenas perifricas ou ligantes: anquirina (a maior ponte para o
citoesqueleto espectrina-actina), protena 4.1, protena 4.2,
aldolase, gliceraldedo-3-fosfato desidrogenase (G3PD),
fosfofrutoquinase (PFK), desoxihemoglobina, tirosina-
quinase p72syk e hemicromos, que regulam a interao do
citoesqueleto com enzimas glicolticas.6
Protenas integrais
Banda 3, anion exchanger 1 (AE1)7
As protenas integrais da membrana ou transmem-
branrias esto incorporadas na parte mais profunda da
bicamada lipdica. Seu domnio funcional pode se estender
tanto nas zonas extra como intramembranrias. Exemplos dis-
so so: a banda 3 ou anion exchanger 1 (AE1), implicada no
mecanismo de transporte de muitas molculas e situada no
compartimento extramembranrio, a citocromo- -5-redutase,
que participa do mecanismo de reduo da metaemo-
globina.7,8
A banda 3 considerada a principal protena integral
da membrana e seu peso molecular de 102kDa. Representa
25%-30% de todas as protenas da membrana e tem em torno
de 106 cpias por hemcia. Seu gene est localizado no
cromossomo 17q21-q22. A banda 3 est expressa na membra-
na plasmtica de todos os eritrcitos e pode ser detectada
tambm na membrana basolateral das clulas intercaladas
nos tbulos distais e nas alas de Henle, proximal e distal. A
banda 3 tem, recentemente comprovada, atuao na retirada
de CO2 dos tecidos, regulando tambm o transporte de
HCO3-. Alm disso, regula o metabolismo da glicose, man-
tm a morfologia eritrocitria e remove clulas senescentes.
Murador P et al
Mutaes da banda 3 tm sido associadas esferocitose
hereditria e acidose tubular renal. Outras mutaes foram
identificadas no sudoeste da sia, determinando aumento
da rigidez do eritrcito e resistncia infeco por malria
associados ovalocitose. Um caso registrado na literatura
relata ausncia de banda 3 com esferocitose hereditria e
nefrocalcinose. A banda 3 tem sido considerada, ainda, como
receptora para o Plasmodium. falciparum.7,9
Ela possui um domnio transmembranrio de 52kDa que
atravessa de 12 a 13 vezes a bicamada lipdica, e um domnio
citoplasmtico de 43kDa. O domnio transmembranrio tem
um papel primordial na troca de ons, principalmente o cloro
(Cl-) e bicarbonato (HCO3-). O Cl- transportado 1 milho de
vezes mais rpido que o ction correspondente o potssio
(K+) e apenas 1.000 a 10.000 vezes mais rpido do que um
nion divalente como o sulfato (SO42-). Este mecanismo fisi-
olgico muito importante quando se tem perda rpida
sangnea ou de volume atravs de outras vias.1,2,9 A combi-
nao de diferentes tecnologias tais como time-resolved
optical anisotropy (TOA) e saturation-transfer electron
paramagnetic resonance (ST-EPR) spectroscopie tem sido
utilizada para anlise da flexibilidade do domnio cito-
plasmtico prximo ao domnio transmembranrio, onde ocor-
re a troca de ons.10
A forte concentrao de resduos carregados negati-
vamente no domnio citoplasmtico da banda 3 tem papel
importante na interao desta protena com outras, sendo
esta a responsvel pela fixao das protenas membranrias
4.1, 4.2 e anquirina. Este segmento citoplasmtico tem forte
afinidade pelas hemoglobina, aldolases, G3PDH e a PFK.
Estes stios tm o significado fisiolgico tambm na regulao
da gliclise e auxiliam a formao de complexos multi-
enzimticos.12
Em 2003, estudos descreveram aspectos da poro N-
terminal da banda 3 ou AE1(CDB3) de hemcias humanas. A
poro CDB3 o substrato executor da apoptose induzida
pela caspase 3. A ao da caspase 3 observada em hemcias
adultas, mas no em necitos ou hemcias jovens. Esta
descoberta esclarece a eluio de alguns antgenos eritro-
citrios durante o tempo de conservao das hemcias in
vitro.12
No ano seguinte foi publicado um trabalho sobre a
purificao e caracterizao do domnio C- terminal da banda
3, tambm denominada de HEM-B3, com 33 aminocidos. Os
autores isolaram dois peptdios, C1 e KS4. O peptdeo C1,
quando colocado em presena de extrato de membrana
eritrocitria humana, desempenhou uma atividade de protease
sobre a poro C- terminal GPA. No entanto, esta atividade
inibida pela tripsina. O outro peptdeo isolado, KS4, no pos-
sui esta caracterstica.13
Ao analisar a importante contribuio das protenas de
membrana e o formato das hemcias, o autor relacionou, por
estudos dinmicos e por microscopia eletrnica, a acanto-
citose no s com as alteraes da banda 3, com deficincias
170
Murador P et al
da piruvato-quinase e pirimidina-5-nucleotidase. As altera-
es da banda 3 esto tambm confirmadamente relaciona-
das com a estomacitose hereditria, fentipo In(Lu), corea-
acantocitose e fentipo McLeod (KX).14
Em outro trabalho foi estudado o gene AE1 de dois
irmos portadores de acidose tubular renal e nefrocalcinose.
Este gene codifica a protena transportadora de nions (AE1)
ou banda 3, expressa em hemcias e clulas dos tbulos re-
nais. Os autores identificaram que uma deleo determina a
mutao no cdon 888 (Ala-888-->Leu) seguida de stop codon
na posio 889, truncando a protena em 23 aminocidos. Os
autores sugerem que a anlise precoce do gene AE1 e a iden-
tificao da mutao descrita sejam decisivas para o diag-
nstico de nefrocalcinose.15
Casos de malformao congnita com proeminncia
frontal e alteraes perifricas do Sistema Nervoso Central
tm sido associados deficincia de glicosilao do tipo Ig.
Esta deficincia compromete a glicosilao da protena ban-
da 3 da superfcie da hemcia. Trata-se de uma mutao do
gene ALG12 que codifica a dolichol-P-manose do sistema
retculo-endoplasmtico, o que determina a hipoglicosilao
da GPA e alteraes estruturais da banda 3. Portanto, o estu-
do eletrofortico desta protena em caso de malformao con-
gnita pode levar ao diagnstico.16
O sucesso ou a refratariedade da esplenectomia no
controle clnico da esferocitose hereditria foram analisados
tambm. Nos estudos, os autores identificaram que os paci-
entes que tm sucesso com a esplenectomia mantm menos
de 60 molculas de IgG fixadas sobre as hemcias ps-proce-
dimento, caso estruturalmente tenham defeito na espectrina
e na anquirina. Nos casos de refratariedade, observaram que
as hemcias dos pacientes, aps o ato cirrgico, mantinham
mais de 140 molculas de IgG fixadas e, portanto, continua-
vam sendo opsonizadas. Neste caso, o paciente era portador
de deficincia na banda 3.17
A interao do marcador CD47 (Integrin-associated
protein/IAP) na matriz extracelular de membranas que co-
expressam a integrina tem sido alvo de pesquisas. Concluiu-
se que este marcador nos eritrcitos um ligante entre a
banda 3 e o complexo Rh na manuteno da integridade da
membrana.
Macrfagos e clulas dendrticas expressam o receptor
SIRP, o que os torna menos ativos, minimizando o efeito da
doena auto-imune. Quando as clulas so CD47 negativas,
o efeito inibidor da opsonizao no ocorre. Portanto, a
interao CD47 e SIRP tem um papel importante na limita-
o do processo de destruio das hemcias em casos de
anemia hemoltica auto-imune.18
Glicoforinas
Glicoforina A (GPA)
a maior sialoglicoprotena transmembrana dos
eritrcitos, correspondendo a 2%-4% das protenas de mem-
171
Rev. bras. hematol. hemoter. 2007;29(2):168-178
brana. Em geral, as glicoforinas tm trs domnios: um dom-
nio externo, onde esto os oligossacardeos, um segmento
includo no interior da bicamada e um segmento interno
citoplasmtico. O domnio externo carrega determinantes
comumente conhecidos como Ena. A concentrao de GPA
sobre as hemcias responsvel por 80% da carga negativa
destas clulas em funo da sua constituio bioqumica com-
posta de cido silico e carboidratos terminais. Essa super-
fcie negativa celular ajuda a minimizar a interao clula-
clula e prevenir a aglutinao eritrocitria. A GPA suscet-
vel clivagem pela enzima tripsina, ficina e papana na regio
prxima membrana eritrocitria. Seu peso molecular de
16kDa. A GPA parece estar presente de forma macia nas
linhagens celulares eritrides e pode ser detectada em dife-
rentes fases da diviso celular em eritroblastos basfilos e
normoblastos.1,19
Os domnios extracelulares da GPA e banda 3 so extre-
mamente polimrficos. A associao da GPA com o AE1 ou
banda 3 contribui com propriedades mecnicas na membrana
eritrocitria e tambm apresenta relao com o grupo
sangneo Wrb cujo stio de ligao encontra-se exatamente
na regio das duas protenas. Sobre o segmento N- terminal
externo da GPA, esto representados os antgenos dos gru-
pos sangneos M e N e os receptores de lectina, do vrus
influenza e myxovirus. Esta poro da GPA atua ainda como
receptora para o parasita da malria P. falciparum e para o
vrus Sendai.20,21
A GPA e a GPB so pontos de ancoragem para 43
antgenos dos sistemas MNSs. Muitas anormalidades das
glicoforinas esto descritas na literatura especializada. A au-
sncia de GPA no homem determina um grupo sangneo
denominado En (a-), j a ausncia de GPA e GPB no mesmo
indivduo determina um fentipo denominado Mk, e a ausn-
cia apenas da GPB determina a falta dos antgenos S e s.21
Glicoforina B (GPB)
uma glicoprotena transmembranria de 10kDa, co-
dificada pelo gene localizado no cromossomo 4q28-31. Ex-
pressa determinantes para os antgenos S e s. Est presente
em todas as hemcias e seus precursores. A funo das
hemcias parece ser normal mesmo em indivduos com defi-
cincia de GPA e GPB. Os indivduos com fentipo nulo MN:
En(a-) so totalmente resistentes a infeces por Plasmodium
falciparum.8,9,21
Glicoforina C (GPC)
A GPC o menor componente protico da membrana
eritrocitria. codificada pelo gene GYPC localizado no
cromossomo 2. Este mesmo gene codifica uma forma truncada
conhecida como glicoforina D - GPD. A GPC uma protena
de 35kDa. As glicoforinas C e D definem os grupos sang-
neos Gerbich: Ge:1, Ge:2, Ge:3 e Ge:4. A maioria dos fentipos
expressa os quatro antgenos, no entanto alguns indivduos
que sofreram mutao podem expressar fentipos raros como
Rev. bras. hematol. hemoter. 2007;29(2):168-178 Murador P et al

Quadro 1. Glicoforinas A,B,C/D e banda 3: gene, localizao cromossmica, peso molecular, stio de expresso e interaes 31
Stio
Protena Gene Localizao PM (Da)* Sinnimos Interaes
de expresso
GYPA 4q28.2-q31.1 16274 Grupo sangneo MN Hemcias, feto, Banda 3
GPA, MN, PAS-2 reticulcito Receptor de Lectina
Sialoglicoprotena Eritroblastos Receptor de Mixovrus
GPA Sialoglicoprotena MN Rc virus influenza
Antgeno CD235a
GYPB 4q28-q3 9796 Grupo sangneo Ss Hemcias Complexo
protico Rh
GPB PAS-3, GYPB, GPB,
CD235b, Ss
GPC Hemcias Banda 4.1
GPC, D 35124 Glicoforina D Fgado Protena de membrana
GYPD, GPD, CD236 Palmitolato 1
SLC4A1 17q21-q22 101798 SLC4A1 Ubiquitria Anidrase carbnica IV
Banda 3 da
Anidrase carbnica II
membrana da hemcia
BND3 Calnexina
Banda 3 Protena eritride Banda 3 Anquirina
EPB3 Anquirina 1
Anion exchanger protein 1 Complexo Rh
AE1, Antgeno CD233 Banda 4.1
Adaptado de Peri, S. Genome Research 2003
*A literatura demonstra diferentes pesos moleculares, sendo assim, foi padronizado usar a mdia entre o menor e o maior peso descrito
e adotar a unidade em daltons (Da).

o fentipo Leach (Ge1-,2-, 3-,4-), onde ocorre a deficincia
completa tanto da GPC quanto da GPD. Todos os indivduos
de fentipo Leach apresentam eliptocitose hereditria, des-
tacando o papel importante da GPC e da banda 4.1 no com-
plexo juncional.22 Informaes e caractersticas das diferen-
tes glicoforinas esto descritas no Quadro 1.
H muito tempo acredita-se que as glicoforinas servem
como receptores para o P. falciparum. No entanto, a maioria
dos estudos indicava a GPA como a receptora primria e a
GPB como a secundria. A protena PfEBF-2 que se liga ao
eritrcito humano dependente de cido silico; os autores
demonstraram que ela no se liga nem GPA e tampouco
GPB. A interao com o receptor da GPC representa um ter-
ceiro caminho para a invaso.23
Outras protenas da membrana eritrocitria
Outras protenas maiores tm sido descritas na mem-
brana do eritrcito. So receptores enzimticos ou hormonais
como o receptor da insulina e o transportador de glicose que
corresponde a uma protena da banda 4.5.
As protenas perifricas formam o citoesqueleto da mem-
brana constituindo-se, principalmente, por espectrina, actina,
anquirina, protena 4.1 e 4.9. Mesmo aps a extrao das
protenas de membrana do eritrcito em presena de deter-
gente, o esqueleto membranrio conserva a forma da clula
originria. Trs das protenas j mencionadas interferem
essencialmente na estrutura: a espectrina, a actina e a ban-
da 4.1.3
Protenas perifricas
Espectrina
A espectrina a mais abundante protena perifrica
do citoesqueleto e est presente em um nmero de 105 cpi-
as por clula. Apresenta peso molecular de 285kDa. uma
protena longa e fibrilar constituda por duas cadeias poli-
peptdicas e com peso molecular de 240 e 220kDa res-
pectivamente, correspondendo s bandas 1 e 2 na repre-
sentao esquemtica da eletroforese de protenas mem-
branrias (Figura 3).
A espectrina recebe esse nome por servir de sustenta-
o membrana e ser a protena perifrica responsvel pelo
fenmeno dos ghosts eritrocitrios. A espectrina e poli-
peptdios associados so responsveis tanto pelo formato
do glbulo vermelho quanto pela sua deformabilidade, alm
de constiturem elementos estabilizadores da bicamada
lipdica.1
Esta protena, durante muito tempo, foi considerada
especfica dos glbulos vermelhos; no entanto, sabe-se que
ela est presente em muitos outros tecidos. Ela faz parte da

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Murador P et al
Figura 3. Representao esquemtica de eletroforese de extrato
de membrana eritrocitria; G3PDH = gliceraldedo-3-fosfato-
desidrogenase (banda 6); PAS = Periodic Acid Schiff, colorao
especfica para ster de cido silico 2
famlia de protenas dimricas, interage com a actina e com a
calmodulina, que, por sua vez, interagem com clulas espec-
ficas no crebro e polipeptdeos especficos da camada ciliar
do intestino. Os estudos bioqumicos mostram que a espec-
trina clivada pela tripsina em cinco segmentos: domnios
I,II,III,IV e V partindo da extremidade NH2- terminal. Na ca-
deia , os domnios individualizados por ao da enzima so
denominados de -I a IV a partir da extremidade C- terminal,
como pode ser visto no Quadro 2. Ambas as cadeias e
so fortemente homlogas, possuindo 30% de absoluta iden-
tidade e esto associadas de forma antiparalela; o grupamento
NH2- terminal da cabea do domnio -I fica face ao grupo
C- terminal do domnio -I. Os dmeros da espectrina so
associados in vitro sobre a forma de tetrmeros dependendo
da fora inica e temperatura. A zona de interao do tetrmero,
que tambm a forma fisiolgica, constituda pela regio N-
terminal de uma cadeia que est de frente para a regio C-
terminal de uma cadeia do dmero oposto.12
Os tetrmeros de espectrina se unem a outros pela sua
extremidade distal, atravs de curtos filamentos de actina
que formam "ns" na malha do citoesqueleto eritrocitrio.
Quadro 2. Ao da tripsina sobre a espectrina: domnios e
com seus respectivos pesos moleculares11
Domnios Peso molecular Domnios Peso molecular
(kDa) (kDa)
-I 80 -I 28
-II 46 -II 65
-III 52 -III 33
-IV 41 -IV 74
-V 41 - -
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Estas interaes espectrina-actina tm um elemento facilitador
representado pela protena 4.1. A rede de espectrina se fixa a
um fragmento de 43kDa que emergem no citoplasma, ligado
banda 3 por intermdio da anquirina (banda 2.1).2
A anquirina, banda 2.1 ou sindena
A anquirina possui trs domnios estruturais: domnio
funcional, que se liga subunidade da espectrina; um se-
gundo domnio funcional que interage com a banda 3; um
domnio regulador que controla a funo dos dois preceden-
tes. Esta protena tem peso molecular de 434kDa e est repre-
sentado em um nmero de 105 cpias por clula. Nos estudos
eletroforticos em gel de poliacrilamida, as membranas dos
eritrcitos podem conter no local da corrida da anquirina
(banda 2.1) bandas adicionais produtos de protelise da ban-
da 2.1. Estas ltimas so denominadas 2.2, 2.3 etc.2
Arritmias cardacas ocorrem devido a mutaes da
anquirina-B, tambm conhecida como anquirina 2. Essas
mutaes resultam, ainda, em uma desregulao na organiza-
o celular da bomba de sdio, na troca sdio/clcio e nos
receptores inositol-1,4,5-triphosphate, os quais reduzem os
nveis e a atuao desta protena em tbulos transversos.
Alteraes na sinalizao de Ca2+ em cardiomicitos adultos
tambm ocorrem, resultando em extrasstoles. Os autores iden-
tificaram um novo mecanismo para arritmia cardaca devido
coordenao anormal de funes mltiplas relacionadas aos
canais de transporte de ons.24
Banda 4.1
A banda 4.1 uma protena do citoesqueleto com gen-
tica e localizao tpicas e diversas. Esta protena pode ser
encontrada, alm da membrana plasmtica, em outras locali-
zaes intracelulares e no ncleo. Possui peso molecular de
97kDa e est presente numericamente em 2x 105 cpias por
clula.25
Os mecanismos de adeso celular so importantes no
s para o mecanismo em si mas tambm para a manuteno
da morfognese do tecido. A banda 4.1 integrante de uma
famlia de protenas definidas sobre a membrana do eritrcito
como "organizadores" do sistema de aderncia. Seu estudo
eletrofortico tambm mostra subunidades denominadas 4.1a
e 4.1b. A subunidade 4.1b est localizada no compartimento
basal, regio de adeso da espermatognia.26
Estudos demonstram que o maior ponto de ligao da
banda 4.1 na membrana do eritrcito com a glicoforina C
(GPC) e D (GPD), e que a banda 4.1 purificada pode se ligar a
dois locais distintos nas glicoforinas C/D. Uma destas inte-
raes direta, envolvendo resduos 82-98 na GPC (61-77 na
GPD), enquanto a outra interao medida pela p55, uma
outra protena perifrica de membrana. A protena p55 tam-
bm se liga GPC. No existem evidncias de que ocorra
interao da banda 4.1 com a banda 3 tambm. Acredita-se
que a distribuio nas ligaes das trs protenas a uma
membrana normal seja correspondente a 40% para p55, 40%
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para GPC/D e 20% para a banda 3. Uma mesma regio da do citoesqueleto da maioria das clulas eucariontes. abun-
banda 4.1 liga GPC/D e banda 3, enquanto o local de ligao dante e localiza-se logo abaixo da membrana citoplasmtica.
da p55 diferente. A interao envolvendo a banda 4.1 com uma protena de 33kDa que forma o denominado comple-
p55 e esta com GPC/D so de alta afinidade, enquanto a xo juncional composto por 12 molculas de actina associa-
GPC/D com banda 3 de baixa afinidade.27 O Quadro 3 mos- das banda 4.1, aducina e tropomiosina. Este complexo
tra as propriedades das principais protenas do cito- fortalece a ligao da actina com a espectrina. Existem dois
esqueleto eritrocitrio. tipos de actina: actina G (globular) e actina F (funcional),
sendo esta ltima a que se compacta para formar o comple-
Quadro 3. Propriedades das principais protenas do citoesqueleto xo juncional.12
Migrao Outras PM
Interaes
Eletrofortica denominaes (kDa) Banda 6
Banda 1 espectrina 240 anquirina, banda 4.1 Corresponde enzima gliceraldedo-fosfato desidro-
Banda 2 espectrina 220 Actina genase (GAPD) de peso molecular de 36kDa que se liga
Banda 2.1 anquirina ou 434 espectrina, banda 3 banda 3 no mesmo local da hemoglobina.
sindena
Banda 4.1a 80 espectrina, actina Banda 7
Banda 4.1b 78 Actina, glicoforinas uma banda composta principalmente por tropomiosina
de peso molecular de 32kDa. Para serem visualizadas no es-
Banda 4.9 dematina 46 Actina
tudo eletrofortico, o extrato membranrio tem que ser trata-
Banda 5 actina 33 espectrina, banda 4.1
do com MgCl2. Essa protena integra o complexo juncional
Banda 7 tropomiosina, 32 ? associado actina.12
estomatina
Adaptado de Peri, S. Genome Research 2003 Aducina
um heterodmero constitudo de trs subunidades:
Banda 4.2 ou palidina aducina 1, com peso molecular de 84kDa, aducina 2 com 81kDa
Protena de peso molecular de 80kDa, est representa- e aducina 3, com 79kDa. Liga-se s actina e espectrina. Des-
da 100 mil vezes em cada hemcia e liga-se com a banda 3 e taca-se que a ligao da aducina espectrina inibida pela
com anquirina, desempenhando um papel organizacional na banda 4.1, provavelmente por competirem pelo mesmo stio
membrana.12 um importante componente no citoesqueleto de ligao.12
da membrana eritrocitria porque regula a estabilidade e flexi- Os quadros 4, 5 e 6 descrevem as protenas mem-
bilidade dos eritrcitos.28 branrias perifricas quanto a: nome, gene, localizao, PM,
sinnimos, stios de expresso e interaes.31
Banda 4.9 ou dematina A imunoematologia, a imunoqumica e a imunogentica
A Banda 4.9 fosforilada por vrias protenas quinases so as trigmeas do ltimo sculo: elas nasceram, de fato,
(PK) do eritrcito e apresenta peso molecular de 46kDa. Ao em Viena, em 1900, quando tudo comeou com a descrio
realizar cromatografia das protenas da membrana do do grupo sangneo ABO, por Karl Landsteiner. A desco-
eritrcito, duas protenas com similares mobilidades no gel berta desse sistema permitiu, mais concretamente, o esta-
de eletroforese foram encontradas: a primeira com peso belecimento das bases cientficas da transfuso sangnea.
molecular de 49kDa e pH bsico, e a segunda, com peso Nos anos seguintes sua descoberta, Landsteiner previu
molecular de 50,5kDa, pH cido. Foi verificado que a protena que os grupos sangneos permitiriam, um dia, identificar
de 49kDa se liga a filamentos de actina.29 os homens to bem, ou melhor, que as suas prprias im-
Para demonstrar a versatilidade de atuao da banda presses digitais.
4.9, realizou-se um estudo no qual os autores usaram a tcni- Desde 1908, sabe-se cientificamente que os grupos
ca de immunoblotting revelando-a com um anticorpo anti- sangneos pertencem ao capital hereditrio que cada um de
banda 4.9, purificado e marcado. Demonstrou-se e quan- ns recebe, que eles so transmitidos dos pais aos filhos,
tificou-se a presena de uma forma de reao imune na banda seguindo as leis da gentica, que alguns so constantes e
4.9 nos crebros e cristalino de aves e bovinos, no corao diversos, constantes no mesmo indivduo, diversos na cole-
de aves, tanto quanto em plaquetas humanas e de mamfe- tividade, distribudos segundo certas propores atravs dos
ros, aves, peixes e eritrcitos de anfbios. A banda 4.9 foi sculos. So milenares dentro de uma populao dada, per-
encontrada, ainda, em fibras corticais de cristalino e em manecendo os mesmos do nascimento morte do indivduo
neurnios cerebrais de aves.30 at o advento do transplante da medula ssea. O mosaico
constituinte da membrana eritrocitria, os sistemas de grupo
Banda 5 ou actina sangneo, suas colees e sries so testemunhos inequ-
A banda 5 ou actina o maior componente protico vocos da hereditariedade. A intrincada diversidade expressa

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Quadro 4. Protenas de membrana e caractersticas

PM Stio de
Protena Gene Localizao Sinnimos Interaes
(Da)* Expresso
espectrina SPTAN1 9q33-q34 285081 -I espectrina Hemcia tirosina fosfatase tipo 4A.1
no-eritride
NEAS Crebro actina
-II espectrina aducina 1 e 2
SPTAN1 sinapsina I
SPTA2 e3B1
Calspectina actina
desmina
anquirina 1 e 2
1 proteioquinase C
banda 4.2
Espectrina beta I
banda 8 (Na/Ca)
banda 9 - isoforma A2
calpana 3
banda 4.1
caderina associada 1
anquirina ANK2 4q25-q27 433768 anquirina no-eritride Crebro Espectrina
anquirina cerebral Msculo Espectrina 1
anquirina neuronal banda 8 (Na/Ca)
anquirina B Sigma receptor 1
molcula de adeso L1
NrCAM
ANK1 8p11.2 206289 anquirina R Hemcias Obscurina
ANK Crebro Espectrina
anquirina eritride Msculo molcula de adeso L1
banda 4 anion exchanger
neurofascina
Linfoma clulas T
AE2
Titina
Complexo Rh
Banda 4.1 EPB41 1p36.2-p 97062 Protein 4.1 presles Ubiquitria Receptor de dopamina D2 e D3
EPB41 1 espectrina
GPC
banda 4.2
Espectrina
banda 4.2
4.1, espectrina, Ras p21
Banda 4.2 EPB42 15q15 79896 Protena eritride 4.2 Hemcia banda 3
EPB42 sitaxina 12
E42P anquirina 1 e 2
Palidina CD47
Adaptado de Peri, S. Genome Research 2003

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Quadro 5. Protenas de membrana e caractersticas

PM Stio de
Protena Gene Localizao Sinnimos Interaes
(Da)* Expresso
Banda 4.9 EPB49 8p21.1 45643 Dematina Crebro actina
EPB49 Corao espectrina
Protena 4.9 Msculo Actina
Rins Banda 4.2
Pulmes
Stem cell
Placenta
Pncreas
Fgado
CAZ1 Hemcia CD2AP
Banda 5 CAPZA1 1p13.1 32924 CAPPA1 Placenta Actina
CAPZ Feto 2 CapZ
1 Cap protein Msculo esqueltico
1 Capping protein,
1 F-actina
1 CAPZ
EcapZ
GAPDH Ubiquitria Receptor de
andrognio
Banda 6 GAPD 12p13.31-p13.1 36056 G3PD Fosfolipase D2
Gliceraldedo 3 fosfato Tubulina
Desidrogenase Actina
Banda3
Banda 7 STOM 9q34.1 31733 Banda 7.2 Hemcia Anion exchanger 1
EPB72 Amiloridina
EPB7 Leuccito

Protena integral de membrana Clon

eritrocitria banda 7
BND7 Intestino delgado

Estomatina Ovrio
Testculo
Prstata
Timo
Bao
Corao
Placenta
Pulmo
Fgado
Msculo esqueltico
Pncreas, rins
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Quadro 6. Protenas de membrana e caractersticas

PM Stio de
Protena Gene Localizao Sinnimos Interaes
(Da)* Expresso
Aducina1 ADD1 4p16.3 84324 aducina Ubiquitria Aducina 2
ADD1 pt de choque 105 kDa
Aducina eritride espectrina
ADDA Calmodulina 1
Espectrina
I espectrina
Na+-K+-ATPase
Aducina 2 ADD2 2p14-p13 80859 ADD2 Crebro Espectrina
aducina Stem cell Rabphilin-3A
Subunidade Hemcia Aducina
da aducina
ADV Aducina 2
Calmodulina 1
Fyn
ADD3 10q24.2-q24.3 79159 Aducina like 7.0

Aducina 3 ADDL
ADD3 Ubiquitria
Adaptado de Peri, S. Genome Research 2003

na membrana eritrocitria define a identidade biolgica de
cada um, reconhecendo o carter nico do ser humano.
O estudo da diversidade dos antgenos, a caracteriza-
o bioqumica das diferentes protenas e o estabelecimento
das funes desta multiplicidade antignica trar uma subs-
tancial contribuio tanto para o estabelecimento do estado
de sade, assim como para o diagnstico, desenvolvimento
de tecnologias como a produo de anticorpos monoclonais
e a conduta teraputica de muitas enfermidades, como o
exemplo da malria.
Abstract
This article describes the structures and functions of the erythrocyte
membrane and its importance in transfusional medicine. The
erythrocyte membrane is one of the best known membranes in terms
of structure, function and genetic disorders. As any other plasma
membrane, it mediates transport functions. It also provides the
erythrocytes with their resilience and deformability. According to
the International Society of Blood Transfusion (ISBT), more than
500 antigens are expressed in the erythrocyte membrane, and around
270 are involved in transfusion reaction cases and hemolytic diseases
of the fetus and newborn. In the ISBT classification, the high frequency
series is represented by antigens in more than 99% of population
(high prevalence antigen). In transfusion, the absence of these
antigens determines severe problems as for example, one woman
without the P antigen suffered 6 repetitive miscarriages due to
placental insufficiency, which was caused by an antibody formed
against the absent P antigen. Some important erythrocyte membrane
proteins are described here including Band 3, Glycophorins and
spectrin. The most abundant integral membrane protein is Band 3
and its main function is to mediate exchange of chloride and
bicarbonate anions across the plasma membrane. The second most
abundant integral membrane protein in the human erythrocyte is
sialoglycoprotein glycophorin A (GPA). With its high sialic acid
content, GPA is the main contributor to the net negative cell-surface
charge and is thus critical for minimizing cell-cell interactions and
preventing red cell aggregation. Glycophorin C (GPC) is the recep-
tor for PfEBP-2 (baebl, EBA-140), the newly identified erythrocyte
binding ligand of Plasmodium falciparum. The ternary complex of
spectrin, actin and 4.1R defines the nodes of the erythrocyte
membrane skeletal network, and is inseparable from membrane
stability when under mechanical stress. This erythrocyte membrane
review is important for a better understanding of transfusion
reactions, where the antibody formation against high prevalence
antigens makes compatible transfusions difficult. The study of antigen
diversity and biochemical characterization of different proteins will
contribute to healthcare, as well as diagnosis, development of
technology such as monoclonal antibody production and the
therapeutic conduct of many diseases. Rev. bras. hematol. hemoter.
2007;29(2):168-178.
Key words: Erythrocyte membrane; proteins; antigens;
glycophorins.
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