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Efeito de lisado bacteriano (OM-85) no desenvolvimento de

X Salo de
resposta pulmonar alrgica em modelo murino
Iniciao Cientfica
PUCRS

Sirlem Ferraz1, Lucien Peroni Gualdi2, Cristiane Stefenon2, Raquel Giacomelli Cao2, Nail Karine
Nuez2, Larissa Masiero Fagundes2, Ana Cludia Pereira2, Rafael Magalhes Rabelo2, Paulo
Mrcio Condessa Pitrez3 (orientador)
1
Faculdade de Enfermagem, PUCRS 2Instituto de Pesquisas Biomdicas, HSL-PUCRS 3Professor da
Faculdade de Medicina, PUCRS

Introduo

A asma uma doena crnica das vias areas que ocorre em todas as idades,
freqentemente iniciando nos primeiros anos de vida, com elevada morbidade e custos.
Caracterizada por limitao do fluxo areo, a inflamao brnquica exerce um papel central
na fisiopatogenia da doena, a partir da sensibilizao a alergenos especficos.2 O impacto da
asma na criana muito grande, com importante repercusso na qualidade de vida. A
prevalncia de asma de origem atpica tem aumentado em diversos pases nas ltimas
dcadas, particularmente em pases desenvolvidos ou em populaes em processo ativo de
urbanizao. No Brasil, a asma uma doena prevalente e de elevada morbidade. As doenas
alrgicas so causadas por uma interao complexa entre caractersticas genticas e fatores
ambientais.2,3
Resultados de estudos epidemiolgicos tm demonstrado uma relao inversa entre a
prevalncia de asma e atopia e exposio a infeces (vrus, bactrias e parasitas) e produtos
bacterianos (endotoxinas).4,5 A partir destas evidncias foi desenvolvida a hiptese da
higiene, postulando que infeces inibem o desenvolvimento de atopia, tornando-se claro o
efeito protetor de diversos microorganismos (fator ambiental) no desenvolvimento de alergia.4
Entre os microorganismos, os agentes bacterianos parecem inibir asma e atopia de forma
potente. Estudos com um lisado bacteriano, chamado OM-85, demonstraram que este produto
apresenta um efeito imunomodulador que ativa diferentes sistemas na cadeia de reaes
imunolgicas de defesa.1 Partindo do pressuposto de que o OM-85 estimula a reposta imune
Th-1, a realizao de estudos sobre seu efeito no tratamento ou preveno de asma atpica
bastante atraente. No existem estudos prvios analisando especificamente esta questo.

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Avanos no conhecimento nesta rea podem gerar potenciais novas linhas de pesquisa para
estimular o surgimento de alternativas de tratamento e preveno mais eficazes desta doena
to cruel e prevalente na infncia.

Metodologia

Sero utilizados camundongos BALB/c, fmeas (n=38), divididos em 4 grupos, de

diferentes idades. Os animais sob interveno sero divididos em: 1) animais filhos de
camundongo fmea exposta ao extrato bacteriano OM-85 durante gestao (exposio
intrauterina, n=10); 2) animais com duas semanas de vida expostos ao OM-85 (n=10); 3)
animais adultos expostos ao OM-85 (n=10). O grupo controle no ser exposto ao OM-85
(Grupo 4, n=8). Ser utilizado Paxoral (OM-85, Farmasa S. A.), na dose de 0,002 mg/dia (7
mg/dia em adultos humanos). Os animais do grupo interveno sero expostos ao OM-85, no
incio do estudo (Dia 0), atravs do processo de gavagem (1x/dia, por 7 dias). Os animais
sero mantidos sem interveno por sete dias, at incio do protocolo de resposta pulmonar
alrgica. Todos os animais sero sensibilizados ento com OVA (grau V, Sigma, USA)
intraperitoneal (dose: 20g) em um intervalo de 14 dias, por duas vezes. Uma semana aps,
ser realizada instilao pulmonar de soluo com OVA (dose: 100 g), por 3 dias seguidos.
Ser realizado lavado broncoalveolar (LBA) ao final do protocolo de OVA, com contagem
total de clulas e citologia diferencial. Sero isolados linfonodos mediastinais que sero
fenotipados atravs de marcadores de anticorpos (CD3, CD4, CD25 e FOXP3) para linfcitos
reguladores, por citometria de fluxo. No LBA citocinas sero mensuradas por ELISA (IFN-,
IL-4, IL-5 e IL-10). Lminas so preparadas a partir de blocos de parafina de tecido
pulmonar, coradas com HE. As variveis quantitativas sero comparadas atravs do teste
ANOVA ou Kruskal-Wallis. As variveis qualitativas sero analisadas atravs do teste qui-
quadrado ou Exato de Fisher. O nvel de significncia determinado de 0,05.

tica

Todos os procedimentos adotados, durante as tcnicas, envolvendo os animais,

seguiro o preconizado pelo Colgio Brasileiro de Experimentao Animal (COBEA),
utilizando o menor nmero de animais e com protocolos de anestesia e eutansia adequados.

Resultados e Discusso

O estudo est em andamento, ainda sem resultados preliminares.

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Referncias

1. Emmerich B, Emslander HP, Milatovic D, Hallek M, Pachmann K. Effects of a bacterial extract on local
immunity of the lung in patients with chronic bronchitis. Lung 1990;168 Suppl:726-31.

2. Participantes das Diretrizes de Asma. IV Diretrizes Brasileiras para o Manejo da Asma. J Bras Pneumol
2006;32(Suppl 7):S447-S474.

3. Redd SC. Asthma in the United States: Burden and current theories. Environ Health Perspect
2002;4(Suppl 110):557-560.

4. Strachan DP. Family size, infection and atopy: the first decade of the higiene hypothesis. Thorax
2000;55(Suppl 1):S2-S10.

5. Weiss ST. Parasites and asthma/allergy: what is the relationship? J Allergy Clin Immunol 2000;105:205-
210.

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