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Resumen
Facultad de Ciencias Biolgicas,
Universidad Nacional Mayor de Se evalu la patogenicidad y virulencia sobre Dysdercus peruvianus de una cepa de Acremonium y una de
San Marcos, Av. Venezuela cdra 35
s/n Ciudad Universitaria. Apartado Scopulariopsis, aisladas de adultos infectados de D. peruvianus procedentes de Mala, Provincia de Caete.
110058, Lima 11, Per. Tambin se evalu una cepa de Beauveria sp. aislada de Schistocerca piceifrons peruviana procedente de
Email Pedro Castellanos: Ayacucho. Los bioensayos se realizaron sobre ninfas del cuarto estado de D. peruvianus y las concentraciones
pcastellanoss@unmsm.edu.pe empleadas fueron 3,7x108, 1,9x108, 9,4x107 conidias/mL para Beauveria sp., Acremonium sp. y Scopulariopsis
sp. respectivamente. Veinte das posteriores al tratamiento, los mayores porcentajes de mortalidad los cau-
saron Beauveria sp. (83,3%) y Acremonium sp. (80%). Scopulariopsis sp. causo una mortalidad de 23,3%.
Acremonium sp. fue la cepa ms agresiva con un tiempo de letalidad (TL50) 3,8 das.
Palabras clave: entomopatgeno, Dysdercus, Beauveria, Acremonium, Scopulariopsis, arrebiatado.
Abstract
Presentado: 22/11/2009
Aceptado: 09/04/2010 We assessed the pathogenicity and virulence on Dysdercus peruvianus with a strain of Acremonium and one
Publicado online: 14/12/2010 of Scopulariopsis isolated from infected adult D. peruvianus from Mala, Caete, south of Lima. A strain of
Beauveria sp., isolated from Schistocerca piceifrons peruviana from Ayacucho, was also evaluated. Bioassays
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were conducted on the fourth instar nymphs of D. peruvianus, and the concentrations used were 3,7 x108, 1,9
x108, 9,4 x107 conidia / mL for Beauveria sp., Acremonium sp. and Scopulariopsis sp. respectively. At 20 days
after treatment, the highest mortality rates were caused by Beauveria sp. (83,3%) and Acremonium sp. (80%).
Scopulariopsis sp. caused a mortality of 23,3%. Acremonium sp. was the more aggressive strain with a lethal
time (LT50) of 3,8 days.
Keywords: entomopathogenic, Dysdercus, Beauveria, Acremonium, Scopulariopsis, cotton stainer.
Introduccin infecciones latentes que pudieran traer del campo; muertos los
Los hongos entomopatgenos causan una alta mortalidad insectos, fueron sumergidos en una solucin de hipoclorito al 5%
sobre sus hospederos (Lecuona et al. 2001, Thara et al. 2001, por 1 minuto y luego se lavaron tres veces en agua destilada para
Liu et al. 2002). Algunos como los del gnero Metarhizium ser colocados en placas petri con algodn hmedo. A partir de
(Ascomycota), invaden directamente a su husped a travs de la estos ejemplares se aislaron cepas de hongos que se conservaron
cutcula por lo que son ampliamente utilizados en el de control en Agar Papa Dextrosa (APD) hasta su evaluacin entomocida.
biolgico (Lubeck et al. 2008). Se han estimado cerca de 700 Los hongos fueron identificados en base a sus caractersticas
especies de hongos entomopatgenos en aproximadamente 90 morfolgicas segn Egorova (1980) y Barnet y Hunter (1998).
gneros. Beauveria, Metarhizium, Lecanicillium e Isaria son Adems se emple la cepa de Beauveria sp. PR-11 aislada de
los gneros fciles de producir en masa y comercializados para Schistocerca piceifrons peruviana procedente de Ayacucho (Pa-
control biolgico. Sin embargo el grado de patogenicidad est riona et al. 2007).
en funcin de condiciones ambientales (Vega et al. 2009). El Multiplicacin de los hongos.- La suspensin de conidias
cultivo del algodn sufre el ataque de muchas plagas, siendo usadas como inoculo fueron obtenidas de los cultivos de 21 das
Dysdercus peruvianus Gurin-Mneville, 1831, el arrebiatado, de incubacin, crecidas sobre frascos con APD en pico de flauta
una de las ms comunes (Beingolea, 1973). a temperatura de laboratorio. Las conidias fueron cosechadas de
El objetivo del presente trabajo fue evaluar tres cepas de hon- los frascos por raspado agregando una solucin estril de agua
gos: Beauveria sp. cepa PR-11 y dos hongos aislados de insectos destilada con Tween 80 (0,1%). La concentracin del inoculo
adultos de Dysdercus peruvianus. fue calculada empleando la cmara de Neubauer.
El porcentaje de germinacin (viabilidad) se realiz en natural por posibles hongos entomopatgenos en los insectos
placas petri conteniendo APD se marcaron 6 puntos en la super- recolectados fue baja 9,8%. Esta baja frecuencia de infeccin
ficie externa inferior de la placa. Se tomaron 5 L de diluciones encontrada tambin fue reportada por Shah et al. (1997) quie-
10-4 de cada cepa de hongo preparada para la prueba de conteo nes sealan que en la Repblica de Benin (frica) entre 1990 y
de conidias (previa agitacin) y se depositaron en los puntos 1992, se mantuvieron bajo cra masiva ms de 23000 insectos,
marcados, a razn de 6 alcuotas por placa (cada alcuota es una y se obtuvieron 79 aislamientos siendo 8 de ellos de B. bassiana
repeticin para cada cepa de hongo evaluado). Las muestras (0,03%) y 67 de Metharhizium flavoride (0,29 %).
fueron mantenidas a 22 C, despus de las 24 horas se agreg
Nuestros resultados permiten remarcar la presencia natural
azul de lactofenol para detener la germinacin y dar contraste a
de hongos entomopatgenos y la factibilidad de obtener cepas
las conidias. Cada sector de agar que contena una alcuota fue
fngicas, a partir de insectos aparentemente sanos. Es importante
cortado y colocado en un portaobjeto y cubierto con un cubre-
destacar que los gneros Acremonium y Scopulariosis no fueron
objeto. El conteo se realiz en 5 campos para cada repeticin.
reportados anteriormente en el Per como entomopatgenos y
Bioensayos en Dysdercus peruvianus.- Los bioensayos con se desconoce sobre su distribucin.
ninfas del cuarto estadio de D. peruvianus fueron realizadas en
Conocidos hongos entomopatgenos como Beauveria spp. y
condiciones de laboratorio. La prueba de patogenicidad fue rea-
Paecilomyces fumosoroseus no fueron aislados en nuestro trabajo, a
lizada por inmersin de 10 insectos en una suspensin conidial
diferencia de Samson et al. (1984) que si encontraron B. bassiana
(108 conidia/mL) por aproximadamente 5 segundos. Para todos
frecuentemente en insectos troglobios. Otro entomopatgeno
los tratamientos se empleo el mismo mtodo de aplicacin con
como Metarhizium anisopliae tampoco fue encontrado. Esta
tres repeticiones de 10 insectos. Los testigos fueron sumergidos
especie solo tiene ocurrencia sobre colepteros (Domsch et al.
en una solucin de agua destilada estril con Tween 80 al 0,1%.
1993).
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mL, seguido de la cepa de Acremonium sp. DperMa-052B con significativamente diferentes a Scopulariopsis sp. DperMa-053M
2,9x108 conidias/mL. El valor ms bajo lo present la cepa Sco- que produjo slo 16,67% de mortalidad, existiendo diferencias
pulariopsis sp. DperMa-053M con 2,2x107 conidias/mL. A partir significativas. Al finalizar el estudio los tres hongos presentaron
de estos resultados podramos considerar a Beauveria sp. PR-11 valores significativamente diferentes al testigo (Duncan, P<0,05;
como la cepa ms promisoria ya que en iguales condiciones de Tabla 1). No fue necesario aplicar la formula de Abbot para
temperatura, humedad y tiempo de incubacin produjo mayor corregir los datos de mortalidad acumulada debido a que no se
cantidad de conidias. registro mortalidad en los testigos.
Los hongos evaluados presentaron valores altos de esporula- Teniendo en cuenta los resultados de porcentaje de mortali-
cin con un porcentaje de 92,24% para Beauveria sp. PR-11, dad, la cepa Beauveria sp. PR-11 fue la ms virulenta sobre ninfas
95,12% para Acremonium sp. DperMa-052B y 94,90% para de D. peruvianus ya que obtuvo un mayor valor. Este resultado
Scopulariopsis sp. DperMa-053M. No se observaron diferencias muestra una patogenicidad inespecfica del hongo, por no tener
significativas entre los porcentajes de esporulacin (ANOVA, una relacin con el hospedero de origen. Respecto a este hecho,
p<0,05). Los porcentajes de germinacin obtenidos a las 24 Feng et al. (1994) sealan que en general cepas de B. bassiana,
horas coinciden con los valores considerados para el control de tienden a mostrar gran virulencia sobre su hospedante original o
calidad de hongos entomopatgenos (85% en 24 h) sealado sobre especies cercanamente relacionadas, tal como lo reportado
por Gmez (1998), para que al asperjar el hongo en el campo, por Romaa y Fargues (1987), quienes observaron que solo las
tenga un rpido efecto sobre la plaga y un corto perodo de cepas aisladas a partir de Hemiptera fueron altamente patgenas
exposicin a condiciones ambientales (Alean 2003). a Rhodnius prolixus. Sin embargo Moorhouse et al. (1993) sugie-
ren que la especificidad hospedero patgeno no es tan estricto;
Prueba de patogenicidad.- De los tres hongos evaluados, dos
esto explicara los resultados de alta virulencia presentada por
produjeron porcentajes de mortalidad superiores al 50% sobre
la cepa heterloga Beauveria sp. PR-11 aislada del ortptero
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las ninfas del cuarto estadio de D. peruvianus, con mortalidades
Schistocerca peruviana sobre las ninfas de D. peruvianus, as
como fue el caso de una cepa aislada del lepidptero Diatraea
0,9 saccharalis que caus 97% de mortalidad sobre el hemptero
0,8
Triatoma infestans (Klug) (Lecuona et al. 2001).
0,7 Los insectos muertos por el hongo Acremonium sp. DperMa-
0,6 052B presentaron una coloracin oscura causada posiblemente
Mortalidad %
Tabla 1. Tasa de mortalidad total causadas por las cepas de Beauveria sp., Acremonium sp. y Scopulariopsis sp.
Da 5 Da 10 Da 15 Da 20
Tratamiento
% arcsen % arcsen % arcsen % arcsen
PR-11 43,33 0,72B 56,67 0,85B 66,67 0,95B 83,33 1,15C
DperMa-052B 56,67 0,85B 80,00 1,11B 80,00 1,11B 80,00 1,11C
DperMa-053M 6,67 0,26A 13,33 0,37AB 16,67 0,42A 23,33 0,50B
Testigo 0,00 0,00A 0,00 0,00A 0,00 0,00A 0,00 0,00A
Valores con la misma letra no presentan diferencias significativas segn el anlisis de Duncan (P< 0,05). ANOVA (P< 0,05).
Tabla 2. Tiempo letal al 50 y 80% (TL50 y TL80) de la poblacin de hmeda. Cuando el hongo esporul en los cadveres de las ninfas
las cepas evaluadas del arrebiatado, adquirieron un aspecto pulverulento. Segn el
anlisis de varianza (ANOVA), la variable ninfas infectadas pre-
Tratamiento TL 50 TL 80 sent valores altamente significativos (p<0,01) para Beauveria sp.
PR-11 5,6 19,2 PR-11, mientras que para los hongos Acremonium sp. DperMa-
DperMa-052B 3,8B 10 052B y Scopulariopsis sp. DperMa-053M el valor de esta variable
fue significativo (p<0,05). Para la variable ninfas infectadas el
Valores con la misma letra no presentan diferencias significativas segn el
anlisis de Tukey(P< 0,05). ANOVA (P< 0,05).
tratamiento Beauveria sp. PR-11 fue la que causo el mayor por-
centaje de ninfas infectadas (96,3%), siendo significativamente
diferente a los tratamientos Acremonium sp. DperMa-052B y
Scopulariopsis sp. sobre el arrebiatado plantea la necesidad de
Scopulariopsis sp. DperMa-053M, en los que los porcentajes de
utilizar concentraciones de conidias ms elevadas de este hongo
infeccin fueron de 37,14% y 33,3% respectivamente (Tabla 3).
a fin de obtener una mayor virulencia. El ensayo realizado en el
presente estudio fue en condiciones de temperatura y humedad La cepa de Beauveria sp. mostr una mayor capacidad de
de laboratorio, sin embargo los resultados obtenidos fueron sa- esporulacin en comparacin a los otros dos hongos evaluados
tisfactorios; donde las cepas Beauveria sp. PR-11 y Acremonium sobre los cadveres de D. peuvianus, este comportamiento obser-
sp. DperMa-052B eliminaron al doceavo da post tratamiento vado tiene una importancia practica para la aplicacin del hongo
entre 63 y 80% de la poblacin tratada, respectivamente con como bioinsecticida ya que si las condiciones son apropiadas,
concentraciones de 108 conidias/mL. podra incrementar la densidad del propgulo infectivo en el
campo, trasmitiendo el inculo horizontalmente y prolongar el
Letalidad al 50 y 80% de la poblacin (TL50 y TL80).-
tiempo de infeccin (Ayasse & Paxton 2002).
Se realiz el anlisis de varianza (ANOVA) a los hongos que
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Valores con la misma letra no presentan diferencias significativas segn el anlisis de Tukey(P< 0,05). ANOVA (P< 0,05). Sig. = Significancia. s = significativo
Gmez H. 1998. Importancia de los hongos entomopatgenos. En Moorhouse S.R., A.T. Gillespie & A.K. Charnley. 1993. Laboratory
Nuevos Aportes del Control Biolgico en la Agricultura selection of Metarhizium spp. Isolates for control of vine
sostenible. Editores: A. Lizarraga T., U. Barreto C. y J. weevil larvae (Otiorhynchus sulcatus). Journal Invertebrate
Hollands. Red de Accin e Alternativas al uso de Agro- Pathology. 62: 15 21.
qumicos. p: 97-112. Pariona N., P. Castellanos, E. Leon. 2007. Capacidad entomocida de
Gmez H. 1999. Aislamiento e identificacin de hongos entomopa- cepas nativas de Beauveria sp. sobre schistocera piceifrons
tgenos de la mosca blanca Bemisia tabaci (Gennadius) peruviana (Lynch Arribalzaga, 1903). Revista Peruana de
(Homoptera: Aleyrodiae) en Lima, Per. Revista peruana Biologa. 14(2): 253-257.
de entomologa 41: 83-86. Rodrguez M., M.E. Gerding & A. France. 2006. Seleccin de aisla-
Inglis G.D., M.S. Goettel, T.M. Butt, H. Strasser. 2001. Use of mientos de hongos entomopatgenos para el control de la
Hyphomycetous fungi for managing insect pests. Fungi polilla del tomate (Tuta absoluta Meyrick) (Lepidoptera:
as Biocontrol Agents: progress, problems and potential Gelechiidae). Agricultura Tcnica. (Chile). 66:159 165.
(Butt, T.M., Jackson, C. y N. Magan Eds.). CABI Publis- Romaa C., & J. Fargues. 1987. Sensibilit des larves del hmip-
hing. pp. 23-69. tre hmatophage, Rhodnius prolixus (Triatominae) aux
Jaronski S.T. 1997. new paradigms in formulations mycoinsecticides. hyphomycte entomopathognes. Entomophaga. 32: 167
Pesticide Formulations and Appications Systems. 17va 179.
Volume. ASTM STP. 1328. pp. 93-112. Samson R.A., M.C. Rombach, K.A. Seifert. 1984. Hirsutella guignar-
Kachatourians G.G. 1996. Biochemestry and Molecular biology dii and Stilbella kerviellei, two troglobiotic entomogenous
of entomopathogenic fungi. En Luna Rodriguez, J. A. Hyphomycetes. Persoonia 12: 123134.
& Lecuona, R. E. 2002. Seleccin de cepas de hongos Shah P.A., C. Kooyman & A. Paraiso. 1997. Surveys for fungal
entomopatgenos nativos para el control de la tucura pathogens of locust and grasshoppers in Africa and Near
Rhammatocerus pictus (Bruner) (Orthoptera: Acrididae). East. En Goettel, M. and Johnson D. (Eds). Microbial
RIA, INTA, Argentina. 31 (1):67 84. Control of Grasshoppers and Locusts. Mem. Entom. Soc.
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/biologia/biologiaNEW.htm
Lecuona R. 1990. El control microbiano como regulador de insec- Can. 171: 27-35.
tos plaga. Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria Shah P.A., J.K. Pell. 2003. Entomopatogenic fungi as biological
INTA. Agricultura Sostenible. Publicacin No 4. control agents. Applied Microbiology and Biotechnology.
Lecuona R., J. Edelstein, M. Berretta, F. La Rosa & A. Arcas. 61: 413-423.
2001. Evaluation of B. bassiana (Hyphomycetes) Strains Thara F., K. Yaginuma, N. Kobayashi, K. Mishiro, T. Sato. 2001.
as Potencial Agents for Control of Triatoma infestans Screening of entomopathogenic fungi against the brown-
(Hemiptera:Reduviidae). Journal of Medical Entomology. winged green bug, Plautia stali Scott (Hemiptera: Penta-
38(2): 172-179. tomidae) Appl. Entomol. Zool. 36(4): 495-500.
Liu H., M. Skinner, L. Parker, M. Brownbridge. 2002. Pathogenicity Vargas M. 2003. Caracterizacin de tres cepas de Beauveria brong-
of Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae (Deute- niartii (Saccardo), Petch y su virulencia sobre Phthorimaea
romycotina: Hyphomycetes), and other Entomopathogenic operculella (Zeller) y Symmetrischema tangolias (Gyen).
Fungi Against Lygus lineolaris (Hemiptera: Miridae) Tesis para obtener el Ttulo Profesional de Bilogo,
Journal of Economic Entomology. 95(4): 675-681. mencin en Microbiologa y Parasitologa. Universidad
Luna Rodriguez J.A. & R.E. Lecuona. 2002. Seleccin de cepas Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Per.
de hongos entomopatgenos nativos para el control de Vega F.E., S.M. Goettel, M. Blackwell, et al. 2009. Fungal entomo-
la tucura Rhammatocerus pictus (Bruner) (Orthoptera: pathogens: new insights on their ecology. Fungal Ecology
Acrididae). RIA, INTA, Argentina. 31 (1):67 84. 2(4): 149-159.
Lubeck I., W. Arruda, B. K. Souza, et al. 2008. Evaluation of Metarhi-
zium anisopliae strains as potential biocontrol agents of the
tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and the cotton
stainer Dysdercus peruvianus. Fungal Ecology 1(2): 78-88.