Jairo Por Dios

MANUAL DE PRCTICAS
ANLISIS INSTRUMENTAL
Elaborado por:
JAIRO ALBERTO VILLAMIZAR GELVEZ

Estudiante de Tecnologa Qumica
Cdigo: 1930022
Directora:
DORA CECILIA RODRIGUEZ ORDOEZ

Qumica, M. Sc.
UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE INGENIERAS
DEPARTAMENTO DE QUMICA
PLAN DE ESTUDIOS DE TECNOLOGA QUMICA
AO 2012
AGRADECIMIENTOS
El autor del trabajo expresa sus agradecimientos a la Universidad Francisco de Paula

Santander y a las siguientes personas, cuyos aportes fueron valiosos para llevar a cabo el
desarrollo de este manual: al Ingeniero Juan Mara Torres Caicedo, director del
Departamento de Qumica, a la profesora y directora del presente trabajo Dora Cecilia
Rodrguez Ordoez por su valiosa colaboracin en el desarrollo de cada prctica propuesta,
a Mara Ascensin Acevedo, Mara Eugenia Moreno, Guillermo Nio, Gloria Cecilia
Medina, Mirian Carvajal Valderrama y Yolanda Meja Toro, docentes y auxiliares del
Laboratorio de Qumica por su colaboracin, y a todas aquellas personas que de una u otra
forma brindaron su colaboracin.
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TABLA DE CONTENIDO
Pg.
INTRODUCCIN 10
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INTRODUCCIN
La ciencia encargada de la separacin y determinacin de especies qumicas (analitos), con

base en sus propiedades fsicas tales como la conductividad, el potencial del electrodo, la
absorcin o emisin de la luz, la relacin masa/carga, la fluorescencia ,entre otras, adems
de utilizar correctamente los instrumentos analticos modernos recibe el nombre de Anlisis
Instrumental.
El Anlisis Instrumental es una asignatura de vital importancia en la formacin bsica de

los estudiantes de Tecnologa Qumica, Ingeniera Qumica, Ingeniera Biotecnolgica,
Licenciatura en Biologa y Qumica, Qumica Industrial y dems profesiones afines con la
Qumica; debido a que en los ltimos aos se han producido diversos instrumentos
sensibles que han incrementado considerablemente la capacidad de conocer, cuantificar y
controlar las especies qumicas (analitos), cuya complejidad va en aumento.
Cada prctica incluida en este manual, fue elegida cuidadosamente entre muchas opciones
y fue probada y replanteada por el autor; siguen cada uno de los temas tericos del
programa acadmico, ajustndolos al contenido programtico de la asignatura y a las
condiciones con las que cuentan los laboratorios de qumica de la UFPS.
Al realizar cada experiencia el estudiante complementar su formacin, aplicando los

conceptos tericos recibidos en el aula de clase. Cada prctica est planteada mostrando
los objetivos que el estudiante debe cumplir al realizarla, una introduccin en la que el
estudiante se puede apoyar para solucionar algunas dudas; el procedimiento, el cual fue
consultado de diversas fuentes antes de elegir el adecuado y un cuestionario final que
permite que el estudiante a travs de su desarrollo indague, investigue y saque sus propias
conclusiones sobre los temas tratados. La bibliografa que se muestra fue buscada de
fuentes actualizadas.
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PRCTICA N 1
NORMAS DE SEGURIDAD, ORGANIZACIN Y PRESNENTACIN DE

TRABAJOS DENTRO DEL LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL
1.1 OBJETIVOS
Conocer las normas de seguridad y comportamiento dentro del laboratorio de

Anlisis Instrumental para comprender la importancia de respetarlas, para as poder
optimizar el trabajo.
Conocer los diferentes riesgos fsico-qumicos y biolgicos de las diferentes
sustancias que se utilizaran en los laboratorios de anlisis instrumental.
Comprender la importancia de contar con el botiqun de emergencias e identificar
sus componentes bsicos.
Conocer la organizacin en la presentacin de trabajos dentro del laboratorio de
anlisis instrumental.
1.2 FUNDAMENTOS TERICOS
Para poder trabajar dentro del laboratorio de anlisis instrumental es necesario el

entendimiento de las diferentes normas que rigen el buen comportamiento por parte de los
estudiantes dentro del laboratorio, gracias a estas normas los estudiantes podrn desarrollar
sus prcticas ms cmodamente respetando a su docente como a sus compaeros de curso.
Para prevenir distintos incidentes dentro del laboratorio tales como incendios, explosiones,
entre otros, los estudiantes deben conocer los riesgos tanto fsico-qumicos como biolgicos
de las diferentes sustancias que se utilizan diariamente en el laboratorio, as tambin los
estudiantes deben identificar los distintos componentes que deben conformar un excelente
botiqun de emergencias. Para la presentacin de los diferentes trabajos el estudiante
deber cumplir con las normas expuestas por el docente al inicio del curso. El
cumplimiento de las diferentes normas le permitir al estudiante mejorar sus hbitos de
seguridad en caso de accidentes as como su compromiso con el desarrollo de la materia.
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1.3 PROCEDIMIENTO
Para conocer las normas que se deben cumplir en los laboratorios se debe tener en cuenta lo
siguiente:
1.3.1 NORMAS GENERALES PARA EL LABORATORIO DE ANLISIS

INSTRUMENTAL
Es condicin indispensable para entrar en una prctica, vestir la bata de laboratorio.

La puntualidad es indispensable para el desarrollo de la prctica de lo contrario se le
negara la entrada al laboratorio.
Para el desarrollo de las prcticas se deben conformar grupos de trabajo, que
previamente son designados por el docente.
Dentro del laboratorio quedara prohibido fumar, comer, correr, entre otras acciones
que puedan llegar a generar accidentes.
Todo alumno debe traer la gua de la prctica, bolgrafo y un cuaderno de
laboratorio y dems utensilios que permitan optimizar el trabajo.
Leer con anterioridad y cuidadosamente el contenido de la prctica y la bibliografa
correspondiente antes de entrar en el laboratorio.
Utilizar siempre que sea necesario utensilios de seguridad tales como tapabocas,
guantes, gafas de proteccin, careta de gases, entre otros para protegernos de
cualquier accidente.
No colocar sobre los mesones de trabajo maletas, prendas personales, libros. Ello
quita espacio para trabajar y pueden estropearse con los reactivos. Solo deben estar
sobre los mesones los materias de trabajo que se estn usando.
Al inicio de cada prctica lavar el material de vidrio cuidadosamente con agua
destilada, as como limpiar los mesones al inicio de cada clase.
Al finalizar cada prctica se debe lavar el material de vidrio cuidadosamente con
agua destilada para poder ser entregado en la bodega.
Identifique las propiedades fsico-qumicas y biolgicas de cada reactivo que se
utilizara en la prctica para prevenir cualquier accidente dentro del laboratorio.
No use nunca una sustancia sin estar seguro que es la indicada de la prctica, evite
accidentes.
Las materias solidas inservibles, como fsforos, papel y desechos deben depositarse
en un recipiente adecuado y en ningn caso, en el canal de desage.
No verter los residuos de reactivos al canal de desage, algunos pueden ser
contaminantes y llegar a los afluentes de agua.
Al finalizar cada prctica, limpiar su sitio de trabajo y dejarlo en perfecto estado.
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1.3.2 NORMAS DE SEGURIDAD PARA EL LABORATORIO DE ANLISIS
INSTRUMENTAL
Antes de utilizar un reactivo, verificar los datos anotados en la etiqueta, revisar sus
propiedades fsicas, qumicas y toxicolgicas para ser manejadas adecuadamente.
Para manejar sustancias voltiles, inflamables y explosivas se deben llevar a la
campana de extraccin o en su defecto a un lugar ventilado.
No pipetear con la boca ningn lquido.
Para la dilucin de los cidos: aadir lentamente el cido al agua contenida en un
vaso agitando constantemente y enfriando. Recuerde: al cido no le gusta que lo
mojen.
Al calentar soluciones exotrmicas hgalo en recipientes adecuados para este efecto
(gran desprendimiento de calor).
Cualquier material caliente debe colocarse sobre una placa de asbesto.
No se debe llevar a la boca ningn material ni reactivo.
Nunca devuelva al recipiente original una sustancia que se haya sacado del mismo,
pues podra contaminarla.
Si se derrama algn acido sobre la mesa, se debe recoger inmediatamente y lavar la
superficie con agua varias veces.
1.3.3 IDENTIFICACIN DE SUSTANCIAS PELIGROSAS
Cualquier producto qumico presente en un laboratorio de trabajo debe contener

informacin sobre el riesgo inherente a su uso. Esta informacin aparecer en forma de
etiquetas o fichas de seguridad, en la que aparecer el nombre de la sustancia o preparado e
identificaciones de peligro. En la ficha de datos de seguridad aparecer informacin
precisa como lo son:
La identificacin de la sustancia: el trmino empleado para la identificacin de la

sustancia deber ser idntico al que figure en la etiqueta.
Composicin: la informacin aportada debe permitir al destinatario conocer sin

dificultad los peligros que puedan presentar los componentes de la sustancia. No es
necesario indicar la composicin completa (naturaleza de la sustancia y su
concentracin) aunque puede ser til la descripcin general de la sustancia y su
concentracin.
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Identificacin de los peligros: aqu debe proporcionarse la clasificacin de la
sustancia. Deben indicarse clara y brevemente los peligros que representa la
sustancia para el estudiante y el medio ambiente. Distinguir claramente de las
sustancias clasificadas como peligrosas o como no peligrosas, describir los
principales efectos adversos tanto fsico-qumicos como para la salud y el medio
ambiente. Algunos peligros dentro del laboratorio son:
- Riesgo de inflamabilidad: el riesgo ms comn dentro de un laboratorio es un

incendio, el cual puede ocurrir debido a diversos combustibles, comburentes y
fuentes de igniciones que se encuentran en el laboratorio. Para tal caso se
describe una serie de recomendaciones de prevencin y seguridad.
- Riesgo de explosin: las explosiones pueden ocurrir fcilmente en un

laboratorio si no se conocen las propiedades de las sustancias. Algunos riesgos
de explosiones se poder presentar por: reacciones exotrmicas no controladas en
las que se liberen grandes cantidades de energa, exposicin al fuego de
sustancias altamente inflamables, mal manejo de sustancias incompatibles entre
otras.
Primeros auxilios: debe especificarse en primer lugar si se precisa asistencia mdica

inmediata. La informacin sobre primeros auxilios debe ser breve y fcil de
entender por parte del afectado, los all presentes y los servicios de emergencia.
Deben describirse brevemente los sntomas y los efectos, adems es importante
indicar si se requiere o es aconsejable consultar a un mdico.
Manipulacin y almacenamiento: especificar las precauciones necesarias para

garantizar una manipulacin sin peligro, incluyendo recomendaciones sobre
medidas de orden tcnico tales como las de contencin, de ventilacin local y
general, las destinadas a impedir la formacin de aerosoles y polvo, o para prevenir
incendios, as como las medidas de proteccin del medio ambiente. Para el
almacenamiento se debe especificar las condiciones necesarias para un
almacenamiento seguro como lugares ventilados y protegidos contra variables de
temperatura, humedad, luz, entre otras.
Propiedades fsicas y qumicas: para permitir la adopcin de las medidas adecuadas

de control. Proporcionar toda la informacin pertinente sobre la sustancia como lo
es:
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- Aspecto: indicar el estado fsico (solido, liquido, gas) y el color de la sustancia
tal y como se suministra. Si el olor es perceptible, describirlo brevemente.
Indicar el pH de la sustancia tal y como se suministra, en caso de solucin
acuosa indicar la concentracin.
- Otros datos: indicar otros parmetros importantes para la seguridad, tales como
la miscibilidad, conductividad, punto de ebullicin o de fusin, grupo de gases,
entre otros.
Informaciones toxicolgicas: las sustancias o algunos preparados que por algn

efecto como inhalacin, ingestin o penetracin cutnea, puede producir efectos
nocivos no hereditarios en la descendencia, o aumentar la frecuencia de stos, as
como afectar de forma negativa a la funcin o a la capacidad reproductora
masculina o femenina, se consideran como sustancias toxicas. A estas sustancias se
les debe prestar total cuidado con la finalidad de evitar accidentes graves.
1.3.4 PRIMEROS AUXILIOS EN EL LABORATORIO DE ANLISIS

INSTRUMENTAL
Cuando se trabaja en un laboratorio los estudiantes se encuentran expuestos a diversos

accidentes que pueden afectar su integridad fsica, por tal razn se deben exponer las pautas
que se deben cumplir como parte de prevencin en caso de algn accidente. Los accidentes
ms comunes en los laboratorios son: cortes y heridas, quemaduras o corrosiones,
salpicaduras en los ojos e ingestin de productos qumicos. Los primeros auxilios que se
deben prestar en caso de alguno de los anteriores accidentes se describen a continuacin:
Cortes y heridas: Lavar la parte del cuerpo afectada con agua y jabn. No importa
dejar sangrar, algo la herida, pues ello contribuye a evitar la infeccin. Aplicar
despus agua oxigenada y cubrir con gasa esterilizada y algodn. Si persiste la
hemorragia o han quedado restos de objetos extraos acudir inmediatamente a un
centro de salud.
Quemaduras o corrosiones: Por fuego u objetos calientes, no lavar la lesin con

agua, tratarla con disolucin acuosa o pomada especial para quemaduras,
posteriormente cubrir la herida con una venda. Por cidos en la piel, cortar lo ms
rpidamente empapada de cido, echar abundante agua en la parte afectada. Aplicar
crema especial para quemaduras, posteriormente cubrir la herida con una venda.
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Salpicaduras en los ojos: Por cidos, inmediatamente despus del accidente irrigar
los ojos con grandes cantidades de agua templada si es posible. Mantener los ojos
abiertos, de tal modo que el agua penetre debajo de los parpados. Continuar con la
irrigacin por lo menos durante 15 minutos. Por lcalisis, Aplicar agua abundante
y aclarar con solucin saturada de cido brico o solucin de cido actico al 1%.
Secar. Cubrir la parte afectada con pomada de cido tnico. Por halgenos,
Echarse inmediatamente un chorro de hidrxido de amonio al 20%. Seguidamente
lavarse con agua. Secarse y finalmente poner linimento leo-calcreo o similar.
Inhalacin de sustancias qumicas: Llevar al paciente al aire fresco inmediatamente

prestarle atencin mdica tan pronto como sea posible. Al primer sntoma de
dificultad respiratoria, iniciar la respiracin artificial boca a boca. El oxgeno debe
ser administrado solamente por personal entrenado. Continuar la respiracin
artificial boca a boca hasta que el mdico lo aconseje. Tratar de identificar el humo
o vapor causante de la dificultad respiratoria.
Ingestin de sustancias qumicas: antes de cualquier actuacin concreta es de vital

importancia llevar al paciente a una entidad promotora de salud.
- cidos corrosivos, no provocar jams el vmito. Administrar lechada de

magnesia en grandes cantidades; administrar grandes cantidades de leche.
- lcalis corrosivos, no provocar jams el vmito, administrar abundantes tragos

de disolucin de cido actico al 1%; administrar grandes cantidades de leche.
- Sustancias toxicas, cuando se haya ingerido una sustancia toxica o venenosa,

tratar al paciente con antdoto universal, el cual se prepara con 2 partes de
carbn activado. 1 parte de xido de magnesio y 1 parte de cido tnico. Se
homogeniza totalmente y se guarda en seco. Para administrarlo se disuelven 15
gramos en medio vaso de agua caliente.
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1.3.5 EL BOTIQUN DE PRIMEROS AUXILIOS
En cada laboratorio se debe tener un botiqun de primeros auxilios, que proporcione

diferentes herramientas que permitan controlar un accidente u otro riesgo. Un excelente
botiqun debe contener:
MATERIALES PRODUCTOS
Algodn Alcohol etlico

Gasas esterilizadas Agua destilada
Bandas adhesivas Solucin cido actico al 1 %
Esparadrapo Antdoto universal
Hisopos Pomada de cido tnico
Vendas, cinta adhesiva Crema de sulfadiacina de plata.
Tijeras Bicarbonato de sodio
Pinzas Agua oxigenada
1.3.6 ORGANIZACIN EN EL LABORATORIO DE ANLISIS

INSTRUMENTAL
La organizacin en el laboratorio debe estar debidamente respaldada por una serie de

responsabilidades claramente definidas al inicio de la materia. Los deberes que se deben
cumplir dentro del laboratorio de anlisis instrumental son los siguientes:
Preparacin de la prctica: antes de realizar la prctica en el laboratorio, se debe

preparar la prctica acordada con anterioridad, para la cual se debe conocer la gua
de laboratorio, leer completamente la gua e identificar los objetivos y el
fundamento terico de la prctica; si se debe realizar ejercicios previos el estudiante
deber desarrollar los ejercicios; si es necesario preparar soluciones para la prctica
los estudiantes debern acudir el da anterior a la prctica para preparar dichas
soluciones.
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Puntualidad: la permanencia en el laboratorio es de vital importancia para reforzar
los conocimientos adquiridos en clase, adems de ser muy limitado el tiempo en el
cual podemos desarrollar cada prctica, por tal razn se debe aprovechar al mximo
y se deben cumplir con los horarios acordados al inicio de clases con el
correspondiente docente de la materia. Recuerde al que madruga Dios le ayuda.
Limpieza: al inicio de cada prctica de laboratorio se debe contar con materiales y

herramientas de imprescindible uso, las cuales deben estar completamente limpias y
fuera de interferencias que puedan alterar un resultado. Para preservar las pautas de
higiene se debe cumplir una serie de indicaciones como limpiar al inicio de cada
prctica los mesones de nuestro sitio de trabajo, lavar el material de vidrio con agua
destilada para evitar interferencias, utilizar nuestro equipo de proteccin y calibrar
los equipos que se desean utilizar. Esta serie de recomendaciones nos permitirn
trabajar de forma segura, confiada y adecuada.
1.3.7 LA BITCORA O CUADERNO DE LABORATORIO
Durante el desarrollo de las diferentes prcticas de laboratorio se proporcionan diversos

resultados que se deben reportar al docente de clase, para dichos reportes es fundamental
contar con la utilizacin de una bitcora o cuaderno de laboratorio. En esta bitcora o
cuaderno se reportaran los datos obtenidos de cada prctica, as como las diferentes
conclusiones y ejercicios que se desglosen del desarrollo de cada tema. Para llevar la
bitcora o cuaderno de trabajo se deben cumplir algunas normas como:
Es aconsejable el uso de un cuaderno cuadriculado, ya que la cuadrcula facilita la

escritura y lectura de tablas de datos y la realizacin de grficas y diagramas de
flujo.
Se debe utilizar letra legible y clara, que le permita al docente la evaluacin.
Todos los resultados deben registrarse en la bitcora. En esta no se debe borrar; los
posibles errores deben tacharse por medio de una raya la cual debe ir encima de lo
que se desea eliminar.
Todos los resultados y observaciones deben anotarse con prolijidad, siempre que
convenga, los resultados deben tabularse.
Las tablas deben prepararse antes de concurrir al laboratorio, siempre que sea
posible.
Las operaciones correspondientes a los clculos deben indicarse mediante un solo
ejemplo, sin incluir detalles aritmticos innecesarios
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Una buena bitcora de trabajo cientfico debe contener una descripcin completa y
autentica del trabajo realizado, incluyendo resultados positivos o negativos, el
experimento deber contener la fecha de realizacin el nombre de la prctica, las
conclusiones obtenidas y las preguntas propuestas.
Las pginas de la bitcora o cuaderno de laboratorio debern estar enumeradas y
bajo ningn contexto se deben arrancar hojas.
La bitcora o cuaderno de laboratorio debe sin ninguna excepcin llevarse a cada
prctica de laboratorio.
1.3.8 EL INFORME DE LABORATORIO
Al finalizar cada prctica de laboratorio, el estudiante deber presentar ante su docente un

informe correspondiente a la prctica realizada, en el cual plasme los resultados y
conclusiones obtenidas, adems de ser un escrito serio, claro y que precise el contenido de
la prctica. El informe de laboratorio se debe conformar de la siguiente manera:
Ttulo de la prctica: En l se coloca el nombre completo de la prctica realizada.

Integrantes de grupo: en este apartado se deben plasmar los nombres completos y
apellidos de los diferentes integrantes que conforman el grupo de trabajo.
Marco terico: en este apartado se debe realizar una breve resea sobre los
fundamentos de la prctica realizada.
Objetivos: en este apartado se describen los objetivos que se buscan con la
realizacin de la prctica.
Procedimiento: en este apartado se deben plasmar todos los pasos que se debieron
seguir para realizar la prctica de laboratorio. (De ser necesario se puede realizar un
diagrama de flujo).
Recoleccin de datos y resultados: en este apartado se deben plasmar todos los
datos obtenidos con el desarrollo de la prctica. Los datos pueden darse en tablas,
diagramas de flujo, ejercicios, graficas, entre otras que permitan desglosar de buena
manera el contenido temtico de cada prctica.
Conclusiones: en este apartado se deben estructurar las conclusiones de cada
prctica las cuales debern ser acordes con los objetivos, es decir en que medida se
cumplen los objetivos propuestos.
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Bibliografa: en este apartado se deben relacionar los medios de consulta utilizados
para la elaboracin del informe es decir textos, revistas cientficas, monografas,
direcciones electrnicas (internet), entre otras que permitan soportar las
conclusiones aportadas por el estudiante.
1.4 CUESTIONARIO
1. Antes de manipular una sustancia qumica Qu se debe conocer de ella?
R/ antes de entrar en contacto con una sustancia qumica se debe conocer sus
propiedades fsicas, qumicas y biolgicas, las cuales se encuentra en las fichas de
seguridad de cada sustancia.
2. Qu se entiende por ficha de seguridad de una sustancia qumica?
R/ una ficha de seguridad es una etiqueta que se encarga de indicar los datos de gran
importancia para la salud y seguridad del usuario, as como para la proteccin del
medio ambiente. Estas fichas de seguridad deben contener las diferentes
propiedades fsico-qumicas y biolgicas, as como los diferentes riesgos pertinentes
de salud a los cuales pueden quedar expuestos las distintas personas que manipulen
dichas sustancias.
3. Estructurar la ficha de seguridad para el etanol al 96%.
R/ A continuacin se muestra la ficha de seguridad tomada de la MERCK
Etanol 96%
Sinnimos Alcohol etlico

Peso molecular 46,07 g/mol
Formula molecular C2H5OH
Identificacin de Fcilmente inflamable
peligros
Primeros auxilios Tras inhalacin: aire fresco
Tras contacto con la piel: lavar con abundante agua
Tras ingestin: hacer beber inmediatamente abundante
agua
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Medidas en caso de Medios de extincin adecuados: CO2, espuma, polvo
incendios Riesgos especiales: combustible, vapores mas pesados que
el aire. Son posibles mezclas explosivas con el aire a
temperaturas normales. En caso de incendio posible
formacin de gases de combustin o vapores peligrosos.
Medidas en caso de No inhalar los vapores, proceder a ventilacin en lugares
vertido accidental cerrados. En caso de vertido accidental recoger con
material absorbentes debido a que si se incorpora en el
desage puede generar riesgo de explosin
Almacenamiento Bien cerrado, en un lugar ventilado. Alejado de fuentes de
ignicin y calor de + 15C a + 25C
Propiedades Estado fsico: lquido
Color: incoloro
Olor: alcoolico, alcohlico
4. Qu se entiende por un emtico, antdoto y como se prepara el antdoto universal?
R/
Emtico: consiste en una mezcla de sustancias que sirven para inducir el vmito
y liberar al estmago del veneno.
Antdoto: consiste en una sustancia que se suministra para hacer inofensivo un
veneno o para retardar la accin de mismo.
Antdoto universal: es la sustancias que se conoce universalmente para
prevenir la salud de las personas afectadas por sustancias qumicas, se prepara
con dos partes de carbn activado, una de xido de magnesio y una de cido
tnico. Se homogeniza totalmente y se guarda en seco. Se administra
disolviendo 15 gramos de antdoto en medio vaso de agua caliente.
5. Cmo se deben almacenar las distintas sustancias qumicas segn sus propiedades
y riesgos fsico-qumicos y biolgicos?
R/ A continuacin se puede observar la informacin de cmo se debe almacenar

correctamente las distintas sustancias qumicas en funcin de sus propiedades y
peligrosidades:
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Figura 1. Cuadro de incompatibilidades de los productos qumicos al momento de su
almacenamiento.
1.5 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
RODRGUEZ Mencas Emilio., FRANCO Luis Manuel., Manual de Toxicologa

Bsica. 1a ed., Ediciones Daz de Santos S.A, Espaa 2000.
VALCRCEL M., ROS A. La Calidad en los Laboratorios Analticos. 1 a ed. Ed.

Revert, S.A, Barcelona 2002.
CALVO Verde J. R., EESCANILLA Hurtado Mara de Lourdes., DORANTES R.

Alberto., SNCHEZ M. Frida. Manual de Prcticas de Qumica Analtica 2; 1 a ed.
Universidad Autnoma Metropolitana, Unidad Iztapalapa. Mxico, D.F 1999.
16
PRCTICA N 2
ESTANDARIZACIN DE HIDRXIDO DE SODIO (NaOH)
2.1 OBJETIVOS
Conocer la importancia de las valoraciones cidobase y sus propiedades analticas.

Conocer los instrumentos y materiales necesarios para realizar una valoracin
qumica.
Adquirir destrezas en la estandarizacin de NaOH a partir de Biftalato de potasio
pesado.
Analizar una muestra problema y determinar su concentracin expresada en
porcentaje (% P/V),
2.2 MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES REACTIVOS
6 Matraces Erlenmeyer de 250 mL Solucin hidrxido de sodio

Probeta de 100 mL (NaOH)
Bureta de 50 mL Biftalato de potasio (KHP)
3 Vasos de precipitado de 50 mL Solucin acuosa de cido actico
Balanza analtica Solucin acuosa de cido ctrico
Esptula, varilla de vidrio Agua destilada
Frasco lavador
Las valoraciones o titulaciones qumicas son todos aquellos mtodos de anlisis

cuantitativo en los cuales la sustancia a valorar se determina en forma indirecta, por medio
de la medicin del volumen de una solucin apropiada, de concentracin conocida, que
reacciona completamente con la sustancia analizada o analito. Estas valoraciones se logran
gracias a instrumentos de anlisis como la bureta, un instrumento conformado por un tubo
largo graduado, terminado en una llave que permite dispensar la cantidad necesaria de
reactivo valorante con gran precisin.
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Una condicin indispensable para el anlisis volumtrico es que el analito se encuentre en
forma lquida o en solucin, y que sea miscible con el valorante; cuando se tiene una
muestra o analito en estado slido, est debe ser pesada, disuelta y llevada a un volumen
determinado previamente con agua destilada. Las valoraciones se utilizan ampliamente
para anlisis de rutina, debido a que son rpidos, adecuados, exactos y se pueden
automatizar fcilmente.
En el anlisis volumtrico se utiliza una solucin patrn o estndar, de concentracin

conocida. La titulacin se lleva a cabo aadiendo lentamente, de una bureta, una solucin
patrn, a la solucin con el analito hasta que la reaccin se termina. La solucin patrn se
puede preparar en forma directa o por normalizacin con un patrn primario:
Directo: Cuando se disuelve una cantidad exactamente pesada de la sustancia

patrn, de pureza conocida y se lleva a un volumen determinada en un matraz
volumtrico. La concentracin del patrn se determina a partir del volumen y el
peso conocidos.
Indirecto: Muchos compuestos no se consideran patrones primarios, por lo cual el

patrn se pesa, se disuelve y se lleva a un volumen determinado, se normaliza o se
valora frente a un patrn primario.
Un patrn primario o estndar primario, es una sustancia utilizada como referencia al

momento de hacer una valoracin o estandarizacin. Estos estndares primarios deben
cumplir con las siguientes caractersticas:
Tienen composicin conocida. Es decir se debe conocer la estructura y elementos

que lo componen, lo cual servir para hacer los clculos estequiometricos
respectivos.
Deben tener elevada pureza. Para una correcta estandarizacin se debe utilizar un
patrn que tenga la mnima cantidad de impurezas que puedan interferir con la
titulacin.
Debe ser estable a temperatura ambiente. No se pueden utilizar sustancias que
cambien su composicin o estructura por efectos de temperatura, ya que ocasionara
error en las mediciones.
Debe ser posible su secado en la estufa. Adems de los cambios a temperatura
ambiente, tambin debe soportar temperaturas mayores para que sea posible su
secado. Normalmente debe ser estable a temperaturas mayores que la del punto de
ebullicin del agua.
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Debe reaccionar rpida y estequiomtricamente con el titulante. De esta
manera se puede visualizar con mayor exactitud el punto final de las titulaciones por
volumetra y entonces se puede realizar los clculos respectivos de manera exacta y
con menor incertidumbre.
Debe tener un peso equivalente grande. Ya que este hecho reduce
considerablemente el error de la pesada del patrn.
La tcnica de titulacin o valoracin para cidos y bases, se fundamenta en el principio de

equivalencia en el punto de neutralizacin de stas sustancias. En otras palabras, cuando el
pH de una sustancia es 7 (solucin neutralizada) o sta muy prximo a ste, se asume que la
cantidad de equivalentes cidos y equivalentes base se han igualado.
El nmero de equivalentes est definido en funcin del nmero de moles de la sustancia y

del nmero de iones o que sta libere dependiendo si es un cido o una base. De
sta manera tenemos:
El coeficiente n depende de la cantidad de moles que libera la sustancia al momento de

reaccionar, por lo cual es necesario conocer las semireacciones tanto de la sustancia cida
como de la sustancia bsica:
a) Biftalato de potasio e hidrxido de sodio (NaOH):
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b) cido Actico e hidrxido de Sodio (NaOH):
Semireacciones:
c) cido Ctrico e hidrxido de Sodio (NaOH):
Semireacciones:
Para estandarizar bases como el hidrxido de sodio (NaOH), un estndar o patrn primario
de excelente calidad es el Ftalato cido de potasio o Biftalato de potasio, KHC8H4O4 o
(KHP). Este producto comercial debe ser calentado a 105 C para eliminar la humedad y
posteriormente ser preparado para titular el NaOH. El Punto final de la titulacin se
determina de forma visual con la ayuda de un indicador, que para este caso fue la
Fenolftalena la cual es incolora al estar disuelta en un medio cido, y cambia a un color
fucsia, una vez que la solucin se torna bsica.
2.4 PROCEDIMIENTO
2.4.1 Preparacin de las Soluciones:
a) Ftalato cido de potasio o Biftalato de potasio (KHC8H4O4 o KHP estndar

primario). Realizar los clculos necesarios para preparar 3 muestras, utilizando 25
mL de solucin como volumen.
20
b) Solucin de hidrxido de sodio (NaOH). Esta solucin ser entregada por el asistente
de laboratorio previamente, la concentracin real de la solucin se determinara por
medio de la valoracin o titulacin.
c) Solucin de cido actico, utilizada como muestra problema.
d) Solucin de cido ctrico, utilizada como muestra problema.
2.4.2 Determinacin:
Realizar los clculos necesarios para determinar los gramos de Biftalato de potasio que se
deben pesar en la balanza analtica, para preparar tres muestras de KHP. Diluir los gramos de
Biftalato de potasio en 25 mL de agua destilada, agitar vigorosamente durante unos minutos
hasta que la dilucin sea completa. Transferir la solucin a un Erlenmeyer de 250 mL y
adicionar 3 gotas de indicador de fenolftalena.
Preparar el montaje para realizar una titulacin

qumica. Lavar con abundante agua la bureta y
purgarla con la solucin de NaOH. Llenar la
bureta hasta el aforo con la solucin de NaOH.
Colocar el Erlenmeyer con el estndar primario

solucin de (KHP), debajo de la bureta y abrir
la llave, aadir lentamente la solucin de
NaOH hasta que se observe una aproximacin
hacia el punto de equilibrio; cerrar la llave y
luego adicionar cuidadosamente gota a gota la
solucin de NaOH. El final de la valoracin se
determinara por el cambio de color de la
solucin, pasara de incoloro a rosa claro.
Figura 2. Montaje para realizar una valoracin o titulacin qumica.
21
Realizar la titulacin de las tres muestras de KHP y anotar el volumen gastado de NaOH
(requerido en la titulacin), para realizar los clculos necesarios y determinar la concentracin
del NaOH. Cuando se tenga la solucin de NaOH estandarizada, realizar la titulacin de las
soluciones problema (cido actico y cido ctrico).
Transferir a un Erlenmeyer, 10 mL de cido actico y adicionar 3 gotas de indicador de

fenolftalena, agitar vigorosamente por 1 minuto; realizar la titulacin con NaOH y anotar el
volumen gastado de NaOH en la valoracin. Transferir a un Erlenmeyer, 10 mL de cido
ctrico y adicionar 3 gotas de indicador de fenolftalena, agitar vigorosamente por 1 minuto;
realizar la titulacin con NaOH y anotar el volumen gastado de NaOH en la valoracin. Nota:
Estos anlisis se deben realizar por triplicado.
Con los datos obtenidos despus del desarrollo de la prctica, calcular la concentracin de
cido actico y cido ctrico. Los resultados deben ser expresados en % P/V.
2.5 RECOLECCIN DE DATOS Y RESULTADOS
Para la realizacin de nuestra prctica se prepararon las siguientes soluciones:
Solucin de Biftalato de Potasio (KHP): Desecar una cantidad de biftalato de

potasio patrn primario, durante 2 horas a 110 C, y dejar reposar por 15 minutos en el
desecador. Se prepararon tres soluciones de KHP, para las cuales se deben realizar
los clculos respectivos.
Solucin de hidrxido de sodio (NaOH): se debe pesar 0,4 gramos de NaOH y

adicionarlo en un vaso de precipitado con 50 mL, agitar vigorosamente durante
unos minutos, hasta que la muestra se diluya completamente. La solucin de NaOH
se trasfiere a un baln de 100 mL y se lleva hasta aforo con agua destilada. Nota:
esta solucin debe ser preparada por el asistente de turno y entregada a los
estudiantes al inicio de la prctica. Cabe resaltar que la solucin de NaOH se
prepara para que los estudiantes puedan realizar la estandarizacin.
Solucin de cido actico: esta solucin se encontraba prepara en el laboratorio de

qumica de la UFPS y su concentracin era desconocida, esta solucin es utilizada
como muestra problema.
22
Solucin de cido ctrico: esta solucin se encontraba preparada en el laboratorio
de qumica de la UFPS y su concentracin era desconocida, esta solucin es
utilizada como muestra problema. Nota: las muestras problema se adquirieron por
medio de la asistente de laboratorio Mirian Carvajal, quien nos brind su ayuda en
la realizacin de la presente prctica.
Con las soluciones previamente preparadas, se procedi a calcular los gramos de Biftalato
de potasio necesarios, que se deben pesar para preparar las tres muestras de KHP. Los
clculos utilizados se presentan a continuacin:
Se calcularon los gramos de KHP, utilizando como muestra un volumen de solucin de 25

mL, este valor se utiliz para el desarrollo de nuestra prctica, pero se pueden utilizar
diferentes volmenes.
Hallamos el equivalente-mol de NaOH:
1 gramo de NaOH pesado x 1 equivalente-mol de NaOH = 0,1 equiv-mol de NaOH

40 g NaOH
Gracias a que los equivalente del acido son iguales a los equivalentes de la base en el punto
de equilibrio.
25 mL de s/n x 1 L x 0,1 equiv-mol. NaOH x 204,22 g KHP x 99,5 g puro de KHP

1000 mL 1 L s/l 1 equiv-mol KHP 100 g impuro KHP
Peso en gramos de KHP = 0,5080 gramos de KHP = 0,2540 gramos KHP

2
Se deben pesar 0,2540 gramos de KHP, y llevar a un Erlenmeyer con 25 ml de agua

destilada, agitar vigorosamente y aadir 3 gotas de fenolftalena.
23
Se prepararon tres muestras de KHP, como se muestra en la siguiente tabla:
Gramos de KHP Volumen (mL) utilizado para titular Indicador utilizado

0,2540 g 25 mL 3 gotas fenolftalena
Tabla 1. Pesos de Biftalato de potasio (KHP), utilizados en la titulacin.
Figura 3. Preparacin de la muestra de KHP y titulacin qumica.
Con las muestras preparadas se procedi a realizar la titulacin del Biftalato de potasio.
Los resultados obtenidos se muestran a continuacin.
Peso KHP Volumen inicial Volumen final Volumen consumido Concentracin

mL mL de NaOH mL del NaOH
0,2540 g 50,0 34,9 15,1 0,082 M

0,2538 g 34,9 20,1 14,8 0,084 M
0,2547 g 20,1 4,4 15,7 0,080 M
Concentracin Promedio Solucin NaOH 0,082 M
Tabla 2. Resultados obtenidos de la titulacin del Biftalato de potasio (KHP).
24
Luego de determinar el volumen de NaOH gastado en la titulacin se procedi a
determinar la concentracin real de la solucin de NaOH, para lo cual se realizaron los
siguientes clculos:
Primera muestra:
0,2540 g KHP x 1 mol de KHP = 1,238 x 10-3

204,22 gramos de KHP
( ) ( ) = 0,082 M
Segunda muestra:
0,2538 g KHP x 1 mol de KHP = 1,243 x 10-3

( ) ( ) = 0,084 M
Tercera muestra:
0,2547 g KHP x 1 mol de KHP = 1,247 x 10-3

( ) ( ) = 0,080 M
Para conocer la concentracin de NaOH se realiza un promedio de las concentraciones:

primera muestra + segunda muestra + tercera muestra / 3 = 0,082 + 0,084 + 0,080 / 3 =
0,082M, la concentracin de NaOH por medio de la estandarizacin es igual a 0,082 M.
25
Con la solucin de NaOH estandarizada se procedi a titular las muestras problema (cido
actico y cido ctrico), los resultados obtenidos de la titulacin se muestran a
continuacin:
Muestra Indicador Volumen Volumen Volumen

problema inicial mL final mL consumido en la
titulacin mL
10 mL cido 3 gotas fenolftalena 50,0 38,6 11,4
actico
actico
actico
ctrico
ctrico
ctrico
Tabla 3. Resultados obtenidos de la titulacin de las muestras problema con la solucin de

NaOH 0,082M.
Figura 4. Titulacin de las muestras problema con la solucin estandarizada de NaOH.
26
2.6 CUESTIONARIO
1. Calcular la concentracin de cido actico por medio de la titulacin y expresar el

resultado en % P/v.
R/ Con los datos obtenidos de la titulacin del cido actico se realizan los siguientes
clculos:
Muestra Volumen de Indicador Volumen Volumen Volumen

N cido actico utilizado inicial mL final mL consumido en la
titulacin mL
1 10 mL cido 3 gotas 50,0 38,6 11,4
actico fenolftalena
2 10 mL cido 3 gotas 38,6 27,0 11,6
actico fenolftalena
3 10 mL cido 3 gotas 27,0 15,7 11,3
actico fenolftalena
Muestra N 1: Los clculos se realizan con la solucin estandarizada de NaOH (0,082 M)

y el volumen consumido en la titulacin (11,4 mL).
( ) ( )
Moles de soluto NaOH = 0,082 mol/L x 0,0114 L
Moles de soluto NaOH = 9,348 x 10-4
El equivalente-mol de NaOH = 9,348 x 10-4 mol NaOH x ( ) = 9,348 x 10-4 eq-mol
Teniendo en cuenta que en el punto de equivalencia:
El equivalente-mol de cido actico = moles de cido actico x nmero de H+
Moles de cido actico = Equivalente-mol NaOH en el punto de equivalencia

Nmero de H+ cido
27
Moles de cido actico = 9,348 x 10-4 equivalente-mol
2 H+
Moles de cido actico = 4,674 x 10-4 moles cido actico
4,674 x 10-4 moles de cido actico x 90 g de cido actico = 0,0421 g cido actico
1 mol de cido actico
Con los gramos de cido actico identificados, podemos calcular la concentracin (% P/v) del
cido actico en la muestra por medio de la siguiente formula:
= 0,421 %

( ) ( )
28
Nmero de H+ cido

2 H+
= 0,428 %

( ) ( )
29

Nmero de H+ cido

2 H+
= 0,417 %
2. Calcular la concentracin de cido ctrico por medio de la titulacin y expresar el

resultado en % P/v.
R/ Con los datos obtenidos de la titulacin del cido ctrico se realizan los siguientes
clculos:
30
Muestra Volumen de Indicador Volumen Volumen Volumen
N cido actico utilizado inicial mL final mL consumido en la
titulacin mL
1 10 mL cido 3 gotas 50,0 14,3 35,7
ctrico fenolftalena
2 10 mL cido 3 gotas 44,3 8,3 36,0
ctrico fenolftalena
3 10 mL cido 3 gotas 40,0 5,7 34,3
ctrico fenolftalena

( ) ( )
El equiva-mol de NaOH = 2,9274 x 10-3 mol NaOH x ( ) = 2,9274 x 10-3 eq-mol
El equivalente-mol de cido ctrico = moles de cido ctrico x nmero de H+
Moles de cido ctrico = Equivalente-mol NaOH en el punto de equivalencia

Nmero de H+ cido
Moles de cido ctrico = 2,9274 x 10-3 equivalente-mol

1 H+
Moles de cido ctrico = 2,9274 x 10-3 moles cido ctrico
2,9274 x 10-3 moles de cido ctrico x 192,13 g de cido ctrico = 0,5624 g cido ctrico
1 mol de cido ctrico
31
Con los gramos de cido ctrico identificados, podemos calcular la concentracin (% P/v) del
cido ctrico en la muestra por medio de la siguiente formula:
= 5,624 %

( ) ( )

Nmero de H+ cido

1 H+
32
= 5,672 %

( ) ( )

Nmero de H+ cido

1 H+
33
= 5,404 %
3. Se prepararon 50 mL de una solucin de cido actico y se aadieron 3 gotas de

indicador de fenolftalena, se titul con 43 mL de una solucin de NaOH (0,095 M).
calcular la concentracin de cido actico en la solucin y expresarla en % P/v?
R/ Primero se identifican los datos necesarios para realizar el ejercicio:
El volumen de la solucin = 50 mL
Volumen de NaOH gastado en la titulacin = 43 mL --------- 0,0430 L
Concentracin del hidrxido de sodio NaOH = 0,095 M
( ) ( )
34

Nmero de H+ cido

2 H+
= 0,37 %
La concentracin (% P/v) de cido actico contenida en la solucin es igual a 0,37 %
35
4. Cules son los indicadores para determinar el punto de equivalencia?
R/ Un indicador qumico es una sustancia que se adiciona a una muestra sobre la cual se
desea realizar un anlisis, este indicador produce un cambio qumico apreciable,
generalmente, un cambio de color. El cambio de color se da cuando la muestra analizada
alcanza el punto de equivalencia. El indicador qumico mas utilizado por los laboratorios
para realizar las titulaciones o valoraciones es el indicador de Fenolftalena, otro indicador
muy utilizado es el azul de bromotimol, que en solucin bsica toma una coloracin
azulosa y cuando alcanza el punto de equivalencia vira a color verde. Existen diferentes
indicadores como el tornasol, el cual es muy antiguo y es un tinte vegetal que adquiere
coloracin roja en disoluciones acidas y azul en las bsicas. Otros indicadores son la
alizarina, el rojo de metilo.
SKOOG Douglas A., WEST D. M., HOLLER James., CROUCH Stanley R.

Fundamentos de Qumica Analtica 8a ed. Editorial Revert 1997.
HARRIS Daniel C., Anlisis Qumico Cuantitativo. Captulo 7 Valoraciones

Editorial Revert, S. A., Barcelona Espaa (2007)
CABRERA Riao Nstor. Fundamentos de qumica analtica bsica, Anlisis

Cuantitativo. Captulo 7, Volumetra. 2a ed. Editorial Universidad de Caldas 2007.
Wikipedia: La Enciclopedia Libre. Artculo Valoraciones cido - base. [En lnea],

Wikipedia Foundation, Inc. ltima modificacin: 25 de julio de 2012, a las 17:22.
[citada 10 agosto 2012], disponible en < http://es.wikipedia.org/wiki/Valoraci%
C3%B3n_ %C3%A1cido-base.
36
PRCTICA N 3
DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DE LA ACIDEZ DEL VINAGRE
3.1 OBJETIVOS
Identificar los componentes de un equipo utilizado para registrar una valoracin

potenciomtrica cido-base.
Adquirir destreza en la calibracin del pH-metro, para la posterior excelencia en la
toma de lecturas.
Conocer la importancia de los indicadores qumicos utilizados en las valoraciones
cido-base
Determinar la acidez total de una solucin de cido actico (vinagre) mediante la
deteccin potenciomtrica del punto final utilizando el pH-metro.
Elaborar las grficas de los resultados potenciomtricos, para la posterior deteccin
del punto final.
Bureta de 50 mL Hidrxido de sodio

Pipeta graduada de 1, 5, 10 mL cido actico
Pipeta aforada de 5, 10 mL Biftalato de potasio
2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL Fenolftalena
Baln aforado de 100 mL Solucin Buffer de pH 7
Baln aforado de 250 mL Solucin Buffer de pH 4
Vasos de precipitado de 100, 250, Agua destilada
500 mL
Esptula
Agitador de vidrio
Soporte para bureta con pinzas
pH-metro
Agitador magntico
Frasco lavador
37
Quizs la medicin qumica que ms se aplica en toda serie de laboratorios qumicos,

biolgicos, geolgicos, clnicos; empresas de agua potable, de investigacin ambiental, de
control industrial, entre otros, es la determinacin del pH de una solucin. Las mediciones
de pH son fciles de llevar a cabo gracias a instrumentos modernos de anlisis, que le
permiten al analista recolectar los datos necesarios para analizar una muestra problema.
Cuando se practican valoraciones potenciomtricas el inters se enfoca en el cambio de pH

cuando se agrega un titulante de concentracin perfectamente conocida, a una solucin del
analito, hasta que la reaccin qumica entre las dos disoluciones sea completa. Si se
conocen los volmenes de las dos disoluciones y la concentracin de una de ellas, se puede
calcular la concentracin de la otra disolucin.
Los mtodos volumtricos se basan en el hecho de que la concentracin del reactivo

valorante es conocida dentro del grado de precisin requerido. En este sentido, hay
reactivos con los cuales es posible preparar disoluciones de concentracin conocida y
estable con el tiempo. Estos reactivos se llaman patrones primarios; tpicamente, un patrn
primario es una especie de elevada pureza, qumicamente estable, no higroscpica, de peso
equivalente alto, y que tras ser disuelto, da lugar a especies en disolucin qumicamente
estables, es decir, que no sufren cambios qumicos por el contacto con la luz, el aire, entre
otros; con lo cual, tras su disolucin y enrase a un volumen conocido es posible determinar
su concentracin con precisin. Por el contrario, un reactivo slido como el hidrxido de
sodio no es un patrn primario, porque adems de su difcil manipulacin, es higroscpico
y tiende a carbonatarse en contacto con el CO2 del aire; todo ello origina un error en la
pesada que impide la obtencin de datos fiables de concentracin, por ello es necesario
valorar esta disolucin previamente con un patrn primario como el Biftalato de potasio.
El problema crtico en una valoracin potenciomtrica es el de reconocer el punto en el cual

las cantidades de especies reactantes se encuentran presentes en cantidades equivalentes,
el punto de equivalencia. La curva de titulacin puede seguirse punto por punto,
proyectando valores sucesivos de pH contra el volumen de titulante aadido. Las adiciones
de titulante deben ser cantidades muy pequeas, exactamente medidas, a travs del margen
de pH. En la mayor parte del margen de la valoracin, el pH vara gradualmente, pero
cerca del punto de equivalencia el pH sufre una rpida variacin. El problema, en general,
es el de detectar este agudo cambio en el pH que tiene lugar en las proximidades del punto
de equivalencia.
38
En las valoraciones potenciomtricas de un cido dbil - base fuerte, se pueden considerar
cuatro etapas, como se puede observar en la Figura 5, la cual representa la evolucin del pH
de una disolucin de cido actico titulada con NaOH:
En el punto inicial hay una disolucin de un cido dbil, cuyo pH se puede calcular
a travs de la ecuacin de su constante de equilibrio (Ka). En la grfica corresponde
a la ordenada en el origen.
Entre el punto inicial y el punto de equivalencia, la disolucin valorada contiene el

cido dbil y la sal de su base conjugada, que se va formando al aadir la base
fuerte. Por tanto, es una disolucin reguladora, cuyo pH puede calcularse,
comprobndose que se mantiene prcticamente constante. Corresponde
aproximadamente al tramo comprendido entre el origen y el pH de 6.
En el punto de equivalencia todo el cido se ha neutralizado, encontrndose como la

sal de su base conjugada. En consecuencia, el pH ser bsico, y la eleccin del
indicador est condicionada a que su viraje se produzca en torno a ste. En la
grfica corresponde al punto de inflexin.
Una vez que se haya alcanzado el punto de equivalencia, si se sigue aadiendo la

base fuerte, el pH se har muy bsico con rapidez. Corresponde al tramo final de la
grfica.
Figura 5. Valoracin potenciomtrica de una solucin de cido actico vs NaOH
39
El vinagre, es un producto obtenido por la accin del aire en presencia de cierta clase de
bacterias como la Bacterium aceti (conocidas genricamente como bacterias acticas). Las
soluciones diluidas (de 4 a 8%) preparadas de este modo a partir del vino, sidra o malta
constituyen lo que conocemos como vinagre. El vinagre puede caracterizarse como una
disolucin acuosa que contiene diferentes cidos orgnicos (principalmente cido actico),
adems de otros componentes como sulfatos, cloruros, dixido de azufre, etc. Un ndice de
la calidad de un vinagre es la denominada acidez total (o grado actico), que es la cantidad
total de cidos que contiene el vinagre expresada como gramos de cido actico por 100
mL de vinagre.
La cantidad total de cidos presentes en una muestra de vinagre puede determinarse

fcilmente por valoracin con una disolucin de hidrxido de sodio previamente
normalizada, el hidrxido de sodio reacciona con el cido actico del vinagre segn la
siguiente reaccin:
CH3COOH + NaOH CH3COONa + H2O
Puesto que la racin se produce mol a mol, en el punto de equivalencia se cumplir que:
N de moles de cido = N de moles de base
McidoVcido = MbaseVbase
En el punto de equivalencia de esta valoracin el pH de la disolucin ser bsico (debido a

la presencia del ion acetato) y, por tanto, para detectar el punto final de esta valoracin hay
que elegir un indicador que cambie de color al pH adecuado. En este caso, se utiliza
indicador de fenolftalena, que en soluciones acidas es incolora, mientras que en presencia
de bases toma una coloracin rosa.
La valoracin tambin puede realizarse por potenciometra, con ayuda de un pH-metro. En

este caso, el punto de equivalencia corresponde al momento en el cual se produce la
variacin ms rpida del pH. La mejor forma de determinar el punto de equivalencia es
calcular la primera y segunda derivada de la curva de valoracin, que mide la velocidad de
cambio del pH, y que presentar un mximo en el punto de equivalencia. As puede
determinarse con exactitud el punto de equivalencia, y por lo tanto la concentracin de la
solucin de cido actico.
40
Mtodo directo: consiste en
graficar los datos de potencial en
funcin del volumen de reactivo.
El punto de inflexin en la parte
ascendente de la curva se estima
visualmente y se toma como
punto final.
Mtodo de la primera derivada:

implica calcular el cambio de potencial
por unidad de volumen de titulante
(E/V). El grfico de estos datos en
funcin del volumen promedio V
produce una curva con un mximo que
corresponde al punto de inflexin. Si la
curva es simtrica, el punto mximo de la
pendiente coincide con el punto de
equivalencia. Las curvas asimtricas dan
un pequeo error de titulacin si el punto
mximo se toma como el final. Estas
curvas son comunes cuando el nmero de
electrones transferidos es diferente en las
semi-reacciones del analito y titulante.
Mtodo de la segunda derivada: En

este caso se grafica 2E/2 V, de la figura
puede verse que la segunda derivada de
los datos cambia de signo en el punto de
inflexin. Este cambio de signo es
tomado en algunos casos como punto
final. El punto final de la titulacin se
toma en el punto de interseccin de la
segunda derivada con cero. Este punto
puede ser ubicado con mucha precisin.
Figura 6. Graficas representativas de la determinacin potenciomtrica de una solucin.
41
El cido actico concentrado se prepara industrialmente mediante distintos procesos, como
la reaccin de metanol (alcohol metlico) y de monxido de carbono (CO) en presencia de
un catalizador, o por la oxidacin del etanal (acetaldehdo). El cido actico tiene un punto
de ebullicin de 118 C y un punto de fusin de 17 C. La mayor parte del cido actico se
produce por carbonilacin del metanol. En este proceso, el metanol y el monxido de
carbono reaccionan para producir cido actico, de acuerdo a la ecuacin qumica:
El proceso involucra al yodo-metano (CH3I) como un intermediario, y sucede en tres pasos.

Se necesita un catalizador, generalmente un complejo metlico, para la carbonilacin (etapa
2).
(1)
(2)
(3)
Al modificar las condiciones del proceso, tambin se puede producir anhdrido actico en la
misma planta. Debido a que tanto el metanol, como el monxido de carbono son materias
brutas baratas, la carbonilacin del metanol parece ser un mtodo atractivo para la
produccin de cido actico.
3.4 PROCEDIMIENTO
3.4.1 Preparacin de la Solucin de NaOH :
Pesar en un vaso de precipitado la cantidad de NaOH necesaria para preparar 250 mL, de una
disolucin 0,1 M. Pesar la cantidad de NaOH y aadir un poco de agua destilada, agitar
vigorosamente con la varilla hasta su completa disolucin. Trasvasar el contenido del vaso de
precipitado a un baln de 250 mL y llevar hasta aforo con agua destilada. Nota: en caso de
preparar la solucin con anterioridad a la prctica, se recomienda envasar la solucin en un
recipiente de plstico, para as evitar la reaccin del NaOH con el recipiente de vidrio.
42
3.4.2 Normalizacin del Hidrxido de sodio (NaOH):
Desecar una cantidad de Biftalato de potasio patrn primario, durante 2 horas a 110 C, y
dejar reposar por 15 minutos en el desecador. Pesar la cantidad de Biftalato de potasio
necesaria para valorar un volumen de disolucin de NaOH correspondiente a la mitad de la
bureta aproximadamente (anotando el valor de la pesada con cuatro cifras decimales).
Realizar dicha pesada por duplicado, disolviendo el slido en dos matraces Erlenmeyer de 250
mL con un volumen de agua destilada entre 75 y 100 mL. Aadir tres o cuatro gotas de
fenolftalena y valorar con la base hasta que el color rosa del indicador persista. Calcular la
normalidad del hidrxido de sodio. Nota: consultar los anlisis y resultados obtenidos en la
Prctica N 2 Estandarizacin de Hidrxido de Sodio (NaOH).
3.4.3 Calibracin del pH-metro:
Para la calibracin del pH-metro se realizan los siguientes pasos:
Encender el pH-metro
Lavar los electrodos con agua destilada y secarlos.
Colocar debajo de los electrodos en un vaso de precipitado la solucin buffer de pH 7
Introducir los electrodos en la solucin
Verificar que el botn de temperatura del equipo se encuentre a la temperatura de 25C
Colocar el pH-metro en la posicin de leer [pH]
Calibrar el pH al valor de 7
Repetir el mismo procedimiento con la solucin buffer de pH 4
Sacar los electrodos del vaso, y fijarlos en una posicin que permita quitar fcilmente
el vaso con la solucin buffer.
3.4.4 Determinacin:
Tomar una alcuota de 50 mL de la muestra problema (vinagre), en un vaso de precipitado de

250 mL y aadir 2 o 3 gotas de indicador de fenolftalena (no es necesario, solo se adiciona
para ir viendo los cambios), luego se coloca la solucin sobre el agitador magntico. Instalar
una bureta de tal manera que se pueda agregar la solucin de NaOH sin que se produzcan
salpicaduras; introducir los electrodos del pH-metro en la solucin que se va a valorar, luego
procedemos a colocar en marcha el motor del agitador, colocar el botn del pH-metro en la
posicin para leer pH; Leer y anotar el pH inicial.
43
Medir y anotar el pH despus de cada adicin de NaOH 0.1 M. Al principio, agregar
volmenes grandes de esta solucin (de 1 a 5 mL), no agregar ms reactivo hasta que el pH se
mantenga constante durante unos 30 segundos. En ocasiones el motor del agitador da lugar a
lecturas errneas de pH, es aconsejable detener el motor durante la toma de cada lectura.
Disminuir el volumen de NaOH que se agrega a la muestra, segn vaya aumentando el valor
de pH/mL, que se calcula para cada adicin. En la proximidad del punto de equivalencia,
agregar NaOH en incrementos de 0,1 mL. Continuar la valoracin hasta 5 mL despus del
punto de equivalencia, aumentando los volmenes agregados a medida que el pH/mL vuelva a
disminuir.
El siguiente anlisis potenciomtrico se realiz en las instalaciones del laboratorio de

qumica de la UFPS.
Se prepar una solucin de 250 mL de hidrxido de sodio (NaOH) 0,1 M.
( )
Teniendo en cuenta la anterior ecuacin realizamos los clculos necesarios para conocer los
gramos de NaOH que debemos pesar para preparar la solucin.
( )
Moles de NaOH = 0,25 L x 0,1 M

Moles de NaOH = 0,025 mol NaOH
0,025 moles NaOH x 40 g de NaOH = 1 g de NaOH

1 mol NaOH
44
Se pesaron 0.99 gramos de NaOH, se llevaron a un Erlenmeyer de 250 mL y se le aadi agua
destilada hasta dilucin, posteriormente se llev hasta aforo con agua destilada y se guard en
un envase de plstico (para evitar interferencias), debido a que el reactivo se utiliz al da
siguiente.
La titulacin del hidrxido de sodio se llev a cabo con una solucin de Biftalato de potasio
0,1M as:
Se realiz el montaje para valorar la solucin de Bifatalato de

potasio. Se coloc en la bureta 50 mL de NaOH. En un
Erlenmeyer de 250 mL se introdujo una alcuota de 10 mL de
solucin KHF 0.1 M, se le agrego 3 gotas de indicador de
fenolftalena y se titul hasta viraje a color rosa. Los resultados se
pueden observar a continuacin:
Alcuota Vi NaOH Vf NaOH V NaOH C1=V2C2/ V1

10 mL 50 mL 39,4 mL 10,6 mL 0,0943 M
10 mL 39,4 mL 29,7 mL 9,7 mL 0,1031 M
10 mL 29,7 mL 19,2 mL 10,5 mL 0,0952 M
C. promedio 0,0975 M
Se realiz la valoracin del KHF y se obtuvieron los resultados vistos anteriormente, luego se
calcul la concentracin real de NaOH por medio de la ecuacin:
V1C1=V2C2
Dnde:
V1 = Volumen gastado de NaOH

C1 = Concentracin real del NaOH
V2 = Volumen alcuota de Biftalato de potasio
C2 = Concentracin del Biftalato de potasio
Clculos: C1 = V2C2
V1
45
1. C1 = 10 mL x 0.1M / 10,6 mL = 0,0943 M
Concentracin promedio: 0.0975 M
2. C1 = 10 mL x 0.1M / 9,7 mL = 0,1031 M La concentracin real del NaOH
es 0.0975 M
3. C1 = 10 mL x 0.1M / 10,5 mL = 0,0952 M
Posteriormente, se procedi a preparar la solucin de cido actico que se desea analizar, para
el desarrollo de la prctica se utiliz cido Actico Glacial 99,8 % Pureza, y densidad = 1,05
g/mL.
Se prepar una solucin de 100 mL de cido actico (CH3COOH) 0.1 M:
( )
( )
Moles de CH3COOH = 0,1 mol/L x 0,1 L

Moles de CH3COOH = 0,01 moles de CH3COOH
0,01 mol CH3COOH x 60,05 g CH3COOH = 0,6005 g CH3COOH

1 mol CH3COOH
0,6005 g CH3COOH x 1 mL CH3COOH x 99,8 % = 0,571 mL CH3COOH

1,05 g CH3COOH 100 %
Se tomaron 0.571 mL de cido actico y se transfiri a un baln aforado 100 mL, se llev
hasta aforo con agua destilada, se rtulo y se guard para ser analizada el da prximo. Nota:
debido a la dificultad en la toma de la muestra de cido actico (0,571 mL), se utiliz una
pipeta graduada de 1 mL. Este inconveniente puede afectar un poco la concentracion de la
muestra.
46
Se procedi a calibrar el pH-metro para el anlisis de nuestra muestra:
Encender el pH-metro
el vaso con la solucin buffer.
Posteriormente se realiza el montaje para la medicin potenciomtrica como se muestra en la

figura 7. Se coloc en un vaso de precipitado de 500 mL la solucin de cido actico 0.1 M y
se aadieron 3 gotas de indicador de fenolftalena, con la finalidad de observar el viraje de
color.
Figura 7. Montaje Instrumental para la determinacin potenciomtrica del cido actico

(vinagre).
47
Luego se procedi a llenar la bureta con la solucin de NaOH previamente estandarizada. Se
enciende el potencimetro y se toma el pH inicial de la solucin de cido actico, luego se
reportan las mediciones de pH a medida que se adiciona la base, los resultados del anlisis
potenciomtrico se pueden observar a continuacin:
Muestra = pH inicial = 2,91
V promedio V NaOH
NaOH (mL) (mL) V (mL) pH pH pH/ V 2pH/V2
0,1 2,91 0
0,55 0,9 0,11 0,1222
1 3,02 0,0022
1,5 1 0,12 0,12
2 3,14 -0,01
2,5 1 0,11 0,11
3 3,25 -0,01
3,5 1 0,1 0,1
4 3,35 -0,03
4,5 1 0,07 0,07
5 3,42 0
5,5 1 0,07 0,07
6 3,49 0,01
6,5 1 0,06 0,06
7 3,55 0
7,5 1 0,06 0,06
8 3,61 -0,01
8,5 1 0,05 0,05
9 3,66 -0,01
9,5 1 0,04 0,04
10 3,7 0
11 2 0,08 0,04
12 3,78 0
13 2 0,08 0,04
14 3,86 -0,01
15 2 0,06 0,03
16 3,92 0
17 2 0,06 0,03
18 3,98 -0,0034
19,5 3 0,08 0,0266
21 4,06 -0,0033
22,5 3 0,07 0,0233
24 4,13 0
25,5 3 0,07 0,0233
48
27 4,2 -0,0067
28,5 3 0,05 0,0166
30 4,25 0,0034
32 4 0,08 0,02
34 4,33 -0,005
36 4 0,06 0,015
38 4,39 0,003
40,5 5 0,09 0,018
43 4,48 -0,0023
45,55 5,1 0,08 0,0157
48,1 4,56 0,0001
49,05 1,9 0,03 0,0158
50 4,59 0,0002
52,5 5 0,08 0,016
55 4,67 0
57,5 5 0,08 0,016
60 4,75 0
62,5 5 0,08 0,016
65 4,83 0
67,5 5 0,08 0,016
70 4,91 0,002
72,5 5 0,09 0,018
75 5 0,002
77 4 0,08 0,02
79 5,08 0
80,5 3 0,06 0,02
82 5,14 0,0033
83,5 3 0,07 0,0233
85 5,21 0
86,5 3 0,07 0,0233
88 5,28 0,0017
89 2 0,05 0,025
90 5,33 0,015
90,5 1 0,04 0,04
91 5,37 -0,01
91,5 1 0,03 0,03
92 5,4 -0,01
92,5 1 0,02 0,02
93 5,42 0,02
93,5 1 0,04 0,04
94 5,46 0
94,25 0,5 0,02 0,04
94,5 5,48 0
49
94,75 0,5 0,02 0,04
95 5,5 -0,02
95,25 0,5 0,01 0,02
95,5 5,51 0,03
95,8 0,6 0,03 0,05
96,1 5,54 -0,025
96,3 0,4 0,01 0,025
96,5 5,55 0,015
96,75 0,5 0,02 0,04
97 5,57 0
97,5 1 0,04 0,04
98 5,61 0,01
98,5 1 0,05 0,05
99 5,66 0
99,5 1 0,05 0,05
100 5,71 0,02
100,5 1 0,07 0,07
101 5,78 -0,01
101,25 0,5 0,03 0,06
101,5 5,81 0,01
102 1 0,07 0,07
102,5 5,88 0,01
102,75 0,5 0,04 0,08
103 5,92 0
103,25 0,5 0,04 0,08
103,5 5,96 0,02
103,75 0,5 0,05 0,1
104 6,01 0
104,25 0,5 0,05 0,1
104,5 6,06 0,02
104,75 0,5 0,06 0,12
105 6,12 0,0133
105,15 0,3 0,04 0,1333
105,3 6,16 0,0333
105,45 0,3 0,05 0,1666
105,6 6,21 -0,0666
105,7 0,2 0,02 0,1
105,8 6,23 0,1
105,9 0,2 0,04 0,2
106 6,27 -0,05
106,1 0,2 0,03 0,15
106,2 6,3 0,05
50
106,3 0,2 0,04 0,2
106,4 6,34 0,05
106,5 0,2 0,05 0,25
106,6 6,39 0
106,7 0,2 0,05 0,25
106,8 6,44 0
106,9 0,2 0,05 0,25
107 6,49 0
107,1 0,2 0,05 0,25
107,2 6,54 0,2
107,3 0,2 0,09 0,45
107,4 6,63 -0,25
107,45 0,1 0,02 0,2
107,5 6,65 0,2
107,55 0,1 0,04 0,4
107,6 6,69 0,1
107,65 0,1 0,05 0,5
107,7 6,74 0
107,75 0,1 0,05 0,5
107,8 6,79 0,3
107,85 0,1 0,08 0,8
107,9 6,87 -0,1
107,95 0,1 0,07 0,7
108 6,94 -0,3
108,05 0,1 0,04 0,4
108,1 6,98 1,1
108,15 0,1 0,15 1,5
108,2 7,13 0,8
108,25 0,1 0,07 0,7
108,3 7,2 0,9
108,35 0,1 0,16 1,6
108,4 7,36 1
108,45 0,1 0,26 2,6
108,5 7,62 2,6
108,55 0,1 0,52 5,2
108,6 8,14 -2,6
108,65 0,1 0,26 2,6
108,7 8,4 5,4
108,75 0,1 0,8 8
108,8 9,2 -5,9
108,85 0,1 0,21 2,1
108,9 9,41 -1,1
51
108,95 0,1 0,1 1
109 9,51 0,3
109,05 0,1 0,13 1,3
109,1 9,64 -0,1
109,15 0,1 0,12 1,2
109,2 9,76 0,1
109,25 0,1 0,13 1,3
109,3 9,89 -0,9
109,35 0,1 0,04 0,4
109,4 9,93 0,35
109,5 0,2 0,15 0,75
109,6 10,08 -0,35
109,7 0,2 0,08 0,4
109,8 10,16 0,05
109,9 0,2 0,09 0,45
110 10,25 0
110,1 0,2 0,09 0,45
110,2 10,34 -0,15
110,3 0,2 0,06 0,3
110,4 10,4 0,05
110,5 0,2 0,07 0,35
110,6 10,47 -0,1
110,7 0,2 0,05 0,25
110,8 10,52 0
110,9 0,2 0,05 0,25
111 10,57 -0,07
111,25 0,5 0,09 0,18
111,5 10,66 -0,02
111,75 0,5 0,08 0,16
112 10,74 -0,04
112,25 0,5 0,06 0,12
112,5 10,8 0
112,75 0,5 0,06 0,12
113 10,86 -0,02
113,25 0,5 0,05 0,1
113,5 10,91 0
113,75 0,5 0,05 0,1
114 10,96 0,02
114,5 1 0,08 0,08
115 11,04 0,02
115,5 1 0,06 0,06
116 11,1 -0,005
52
117 2 0,11 0,055
118 11,21 -0,015
119 2 0,08 0,04
120 11,29 -0,005
121 2 0,07 0,035
122 11,36 -0,005
123 2 0,06 0,03
124 11,42 -0,01
125 2 0,04 0,02
126 11,46 0,005
127 2 0,05 0,025
128 11,51 0,0083
129,5 3 0,05 0,0166
131 11,56 0
132,5 3 0,05 0,0166
134 11,61 0
135,5 3 0,05 0,0166
137 11,66 -0,0066
138,5 3 0,03 0,01
140 11,69 0,0033
141,5 3 0,04 0,0133
143 11,73
Tabla 4. Resultados Obtenidos tras la valoracin potenciomtrica de la acidez del vinagre
Figura 8. Medidas de pH reportadas para el anlisis potenciomtrico del vinagre.
53
3.6 CUESTIONARIO
1. Representar las siguientes graficas de los resultados potenciomtricos:
pH vs. V en ml de NaOH agregado.

pH / V vs. V promedio de NaOH agregado.
pH2 / V2 vs. V en ml de NaOH agregado.
R/ Se realizaron las diferentes grficas potenciomtricas para identificar el punto de

equivalencia o punto final de la valoracin.
Debido a la gran cantidad de datos obtenidos en el anlisis potenciomtrico, las grficas no

pueden ser analizadas fcilmente, debido a este inconveniente se decidi trabajar con una
muestra de 46 datos, los cuales de ninguna manera afectan el resultado real de los anlisis.
La mayora de los datos, fueron escogidos bsicamente sobre los datos ms prximos al
punto de equivalencia, lugar en el cual se puede observar los cambios ms representativos
para nuestro anlisis y la posterior construccin de las graficas potenciomtricas.
pH vs. V en ml de NaOH agregado
V NaOH (mL) pH V NaOH (mL) pH V NaOH (mL) pH

0,1 2,91 103 5,92 108,9 9,41
2 3,14 105 6,12 109,1 9,64
8 3,61 106 6,27 109,2 9,76
10 3,7 106,2 6,3 109,4 9,93
18 3,98 106,4 6,34 109,6 10,08
24 4,13 106,8 6,44 109,8 10,16
30 4,25 107 6,49 110 10,25
38 4,39 107,2 6,54 112 10,74
48,1 4,56 107,5 6,65 114 10,96
55 4,67 107,8 6,79 118 11,21
65 4,83 108 6,94 124 11,42
75 5 108,2 7,13 128 11,51
85 5,21 108,3 7,2 134 11,61
95 5,5 108,5 7,62 140 11,69
100 5,71 108,7 8,4
102,5 5,88 108,8 9,2
54
Con los anteriores datos se realiz el grfico potenciomtrico entre el volumen aadido
NaOH y el pH de la solucin de cido actico (ver figura 9). Despus de analizar los datos
se pudo determinar que el punto de equivalencia alcanzado en la solucin de cido actico
(identificado por el viraje de color de la solucin gracias al indicador de fenolftalena), se
centra en el punto (108,7 8,4) por tanto el pH reportado en el punto de equivalencia por
el pH-metro fue de 8,4.
14
12
10
8
pH
6 PH
4
Punto de equivalencia
2
= (8,4 - 108,7)
0
0 20 40 60 80 100 120 140 160
V NaOH (mL)
Figura 9. Grfica potenciomtrica entre el pH vs V NaOH aadido
pH / V vs. V promedio de NaOH agregado
V promedio pH / V promedio pH / V promedio pH /

NaOH (mL) V NaOH (mL) V NaOH (mL) V
0,55 0,1222 57,5 0,016 106,1 0,15
2,5 0,11 67,5 0,016 106,3 0,2
8,5 0,05 77 0,02 106,5 0,25
11 0,04 86,5 0,0233 106,9 0,25
19,5 0,0266 95,25 0,02 107,1 0,25
25,5 0,0233 100,5 0,07 107,3 0,45
32 0,02 102,75 0,08 107,55 0,4
40,5 0,018 103,25 0,08 107,85 0,8
49,05 0,0158 105,15 0,1333 108,05 0,4
55
V promedio pH / V promedio pH / V promedio pH /
NaOH (mL) V NaOH (mL) V NaOH (mL) V
108,15 1,5 109,25 1,3 119 0,04
108,35 1,6 109,5 0,75 125 0,02
108,45 2,6 109,7 0,4 129,5 0,0166
108,55 5,2 109,9 0,45 135,5 0,0166
108,75 8 110,1 0,45 141,5 0,0133
108,85 2,1 112,25 0,12
109,05 1,3 114,5 0,08
Con los anteriores datos se realiz el grfico potenciomtrico entre el volumen promedio de
NaOH y pH / V, en l se observa el punto de inflexin, el cual es caracterstico para el
mtodo de la primera derivada. En el grafico se pudo establecer, que la muestra de cido
actico alcanz el punto de equivalencia en (108,75 - 8).
Ttulo del grfico

9
6
pH / V
punto de equivalencia:
5
(8 - 108,75)
4
Series1
3
0
95 100 105 110 115 120
V promedio NaOH (mL)
Figura 10. Grfica potenciomtrica entre pH / V vs Volumen promedio de NaOH
56
2 pH / V2 vs. V en ml de NaOH agregado
V NaOH 2pH/V2 V NaOH 2pH/V2 V NaOH 2pH/V2

0,1 0 103 0 108,9 -1,1
2 -0,01 105 0,0133 109,1 -0,1
8 -0,01 106 -0,05 109,2 0,1
10 0 106,2 0,05 109,4 0,35
18 -0,0034 106,4 0,05 109,6 -0,35
24 0 106,8 0 109,8 0,05
30 0,0034 107 0 110 0
38 0,003 107,2 0,2 112 -0,04
48,1 0,0001 107,5 0,2 114 0,02
55 0 107,8 0,3 118 -0,015
65 0 108 -0,3 124 -0,01
75 0,002 108,2 0,8 128 0,0083
85 0 108,3 0,9 134 11,61
95 -0,02 108,5 2,6 140 11,69
100 0,02 108,7 5,4
102,5 0,01 108,8 -5,9
Con los anteriores datos se realiz el grfico potenciomtrico entre el volumen aadido
NaOH y 2pH/V2, en el grfico el punto de equivalencia de la titulacin se toma en el
punto de interseccin de la segunda derivada con cero. Este punto puede ser ubicado con
mucha precisin. Se pudo establecer que la muestra de cido actico necesit de 108,7 mL
de NaOH para alcanzar el punto de equivalencia.
Punto de equivalencia
Figura 11. Grfica potenciomtrica entre 2 pH / V2 vs Volumen de NaOH aadido
57
2. Calcular el porcentaje de cido actico [% cido actico (p/v)] en la muestra trabajada
en el laboratorio.
R/ Se deben realizar los clculos necesarios para identificar el porcentaje de cido actico
en la muestra, se realizaron los siguientes clculos, teniendo en cuenta la solucin
estandarizada de NaOH (0,0975 M) y el volumen consumido en la titulacin (108,7 mL).
Solucin de cido actico:
( ) ( )
Moles NaOH = 0,0975 mol/L x 0,1087 L
Moles NaOH = 0,0106
El equivalente-mol de NaOH = 0,0106 mol NaOH x ( ) = 0,0106 eq-mol NaOH

Nmero de H+ cido
Moles de cido actico = 0,0106 equivalente-mol

2 H+
58
= 0,477 %
3. Cul es la importancia del cido actico en la Industria Qumica?
R/ El cido actico, al ser un producto qumico de base tiene multitud de utilidades, la gran
mayora de ellas de corte industria. De entre todas estas utilidades podemos destacar:
Fabricacin de sus respectivos steres, principalmente los acetatos disolventes como

el de vinilo y el de celulosa (principal aplicacin).
Fabricacin de anhdrido actico y cloro-actico, as como de acetatos metlicos.
En la industria textil es utilizado en tinturas y estampados
Es utilizado en la industria de fertilizante
Fabricacin de vinagre sinttico
En la industria alimentaria se utiliza en la confitura de vegetales
En sntesis orgnica se utiliza como disolvente (obtencin de cloruro de acetil), ente
otros muchos usos.
4. Cules son los requisitos sanitarios que deben cumplir las fbricas que comercialicen
vinagre para consumo humano?
R/ Las industrias qumicas que se encarguen de producir y comercializar vinagre para

consumo humano, debern cumplir algunos requisitos sanitarios que le permitan contar con
el aval sanitario otorgado por el ministerio de salud. Algunas normar que deben cumplir las
industrias son:
Los establecimientos de procesamiento de vinagre deben disponer de laboratorios

para anlisis qumicos, dotados con los elementos suficientes para comprobar las
calidades y caractersticas de las materias primas, los productos ya terminadas y el
proceso de elaboracin.
59
Las materias primas utilizadas en el proceso de fabricacin del vinagre, no deben
estar alteradas, adulteradas o contaminadas.
El sitio de produccin no debe contener microrganismos o sustancias originadas por

los mismos, que puedan representar un grave riesgo para la salud.
El producto obtenido no debe contener una sustancia en una mayor concentracin

que las establecidas por la ley.
El producto final debe cumplir con los requerimientos tcnicos establecidos por la
ley como lo son: color, olor y sabor caracterstico.

Fundamentos de Qumica Analtica 8a ed. Editorial Revert 1997.
HOBART Willard H., MERRITT Lynne L., DEAN John A. Mtodos

Instrumentales de Anlisis. 4 a ed., Editorial Continental S.A., 1972.
WALTON Harold F., REYES Jorge. Anlisis Qumico e Instrumental Moderno.

Captulo 1, Potenciometra. El Medidor de pH. 1a ed. Editorial Revert, S. A.,
Espaa 1983.
Ministerio de la Proteccin social, resolucin N 0775 del 3 de marzo del ao 2008,

por la cual se establece el reglamento tcnico sobre los requisitos sanitarios que
deben cumplir las fbricas que procesen, envasen, transporten, expendan,
almacenen, importen, exporten y comercialicen vinagre para consumo humano.
[Pdf en lnea] disponible en URL: http://www.puntofocal.gov.ar/notific
_otros_miembros/col87a1_t.pdf.
Wikipedia: La Enciclopedia Libre. Artculo, cido actico, composicin y

produccin. [En lnea], Wikipedia Foundation, Inc. ltima modificacin: 17 octubre
de 2011, a las 10:13. [citada 20 octubre 2011], disponible en <URL:
http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_ac%C3%A9tico>.
60
PRCTICA N 4
DETERMINACIN DE ALCOHOL ETLICO POR REFRACTOMETRA
4.1 OBJETIVOS
Determinar la concentracin de etanol por refractometra.

Construir la grfica del ndice de refraccin vs concentracin para el sistema de
alcohol-agua.
Cuantificar el alcohol etlico presente en un licor.
Conocer la importancia del etanol en la industria.
Desarrollar habilidades en el manejo del refractmetro.
1 gradilla Alcohol etlico puro

13 tubos de ensayo con tapn 20 mL de un licor sin color
2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL Licor incoloro: vodka, aguardiente.
2 pipetas aforada de 10 mL
1 pipeta aforada de 1 mL
1 pipeta graduada de 10 mL
1 probeta de 50 mL
1 pera, 1 gotero
Refractmetro
El fenmeno de la refraccin est basado en el cambio de velocidad que experimenta la

radiacin electromagntica al pasar de un medio a otro, como consecuencia de su
interaccin con los tomos y molculas del otro medio. Dicho cambio de velocidad se
manifiesta en una variacin en la direccin de propagacin. La medida relativa de la
variacin entre dos medios tomando uno fijo como referencia se le conoce como ndice de
refraccin (n) y en general esta expresado con respecto al aire.
61
El ndice de refraccin est relacionado con el nmero, la carga y la masa de las partculas
vibrantes de la sustancia a travs de la cual se transmite la radiacin. As, se ha
comprobado que para grupos de compuestos anlogos el ndice de refraccin varia con la
densidad y el peso molecular de la muestra. En consecuencia, el ndice de refraccin, al
igual que el punto de fusin o el de ebullicin y la densidad, se puede utilizar para la
caracterizacin e identificacin de especies lquidas. En muchos casos, el ndice de
refraccin de las mezclas binarias vara linealmente con la composicin de las mismas,
aunque siempre ser conveniente comprobar esta aditividad mediante la construccin de
curvas de calibrado. En el caso de mezclas ms complejas, es necesario acudir previamente
a separaciones en fracciones simples o binarias, antes de realizar las mediciones.
El instrumento para medir el ndice de refraccin (n), es bsicamente un sistema ptico que
busca medir el ngulo que se ha desviado la radiacin, utilizando para ello dos prismas: uno
fijo de iluminacin sobre el cual se deposita la muestra y uno mvil de refraccin. Los
prismas estn rodeados de una corriente de agua termostatizada, ya que la temperatura es
una de las variables que afecta a la medida. Cuando la radiacin electromagntica atraviesa
un lmite entre dos medios, cambia su velocidad de propagacin. Si la radiacin incidente
no es perpendicular al lmite, tambin cambia su direccin. El cociente entre la velocidad
de propagacin en el espacio libre (vaco) y la velocidad de propagacin dentro de un
medio se llama ndice de refraccin del medio. El principio de funcionamiento de un
refractmetro se basa en la velocidad de la luz que depende del medio en el que viaja. Si
un rayo de luz atraviesa sesgadamente desde un medio haca otro de diferente densidad.
Cambia su direccin cuando traspasa la superficie. Este cambio en la direccin se
denomina refraccin; por lo tanto, cuando la luz atraviesa haca un medio ms denso, el haz
se aproximar a la perpendicularidad trazada sobre la superficie divisoria en el punto de
incidencia. Este fenmeno se debe fundamentalmente a que la velocidad de la luz cambia.
Es decir, se hace ms lenta cuanto ms denso sea el medio que traspasa.
Figura 12. Principio de refraccin, incidencia de un haz de luz.
62
Se denomina ngulo de incidencia (i) al ngulo formado entre el rayo en el primer medio y
la perpendicular, mientras que el correspondiente ngulo en el segundo medio se denomina
ngulo de refraccin (r). Existen diversas leyes, que son capaces de determinar el ndice de
refraccin de diversas sustancias, como se mencion anteriormente la velocidad de la luz
depende del medio que atraviesa; la relacin de velocidades de la luz en el vaco y en
cualquier otra sustancia se conoce como ndice de refraccin absoluto. Sin embargo, para
fines prcticos esta relacin se sustituye por:
Dnde:
n =ndice de refraccin a una longitud de onda ( )determinada.

V aire = es la velocidad de la luz en el aire
V M = es la velocidad de la luz en un medio M.
La ley de Snell plantea tambin que es posible demostrar que el ndice de refraccin podra
determinarse en funcin de la siguiente relacin:
Dnde:
n =ndice de refraccin a una longitud de onda ( )determinada.

(i) aire = es el ngulo de incidencia de la luz en el aire.
(r) M = es el ngulo de refraccin de la luz en un medio M.
63
El uso de la refractometra en diversos procesos productivos se ha hecho cada vez ms
necesaria debido a las exigencias en las normativas de calidad vigentes, las cuales incluyen
a toda la cadena de produccin desde el cultivo de las materias primas, su recepcin y la
elaboracin de productos finales en las industrias del rubro qumico, agroalimentario y
farmacutico, entre otros. La determinacin del ndice de refraccin (una propiedad fsica
fundamental de cualquier sustancia) se usa, por ejemplo para, conocer la composicin o
pureza de una muestra, a travs de un instrumento llamado refractmetro. Por esto, el uso
de los refractmetros ha cobrado gran inters en el rea de la fabricacin de bebidas
alcohlicas y un claro ejemplo est relacionado a la elaboracin de vinos. La presencia de
azucares es uno de los parmetros fundamentales de la enologa [Arte de producir vino],
debido a que esta familia de compuestos interviene prcticamente en todo el proceso de
elaboracin que conduce desde la uva al vino, determinando la calidad del producto final.
4.4 PROCEDIMIENTO
4.4.1 Preparacin de los patrones de alcohol etlico:
A partir de alcohol etlico (etanol) puro y agua destilada, preparar una serie de soluciones tipo
con las siguientes concentraciones (porcentaje en volumen %V): 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70,
80, 90 %. Preparar 10 mL de cada solucin y se colocan en tubos de ensayo con tapn
mantenindolos bien cerrados.
4.4.2 Determinacin:
Se toma cada tubo de ensayo con la solucin, se agita para una excelente homogenizacin y
con la ayuda del gotero se toma una muestra que se lleva hacia el refractmetro. Se le
determina el ndice de refraccin a cada solucin y los resultados se registran en la tabla de
valores. Con los valores obtenidos se realiza la grfica entre el ndice de refraccin vs
concentracin de alcohol etlico (etanol).
Luego de la realizacin de la grfica, se procede a medir el ndice de refraccin de la muestra

problema o del licor preferiblemente incoloro, una vez medido el ndice de refraccin con la
ayuda de la grfica se determina la concentracin alcohlica del licor. Nota: para que el
mtodo sea aplicable a todos los licores debe realizarse una destilacin previa de la
muestra.
64
El siguiente anlisis de etanol se realiz en el Refractmetro Digital Automtico (ATAGO

R
RX 007 CX), rango de trabajo comprendido entre 0 - 5% grados Brix.
Figura 13. Imagen del Refractmetro (ATAGO R RX 007 CX)
Para el desarrollo de la prctica se utiliz alcohol etlico (etanol) uso industrial al 95 %

Impotable. A partir del etanol al 95% se prepararon las soluciones patrn de 15, 25, 35, 45,
55, 65, 75, 85, 95%.
V1C1=V2C2
V1 = V2C2
C1
Dnde:
V1 hace referencia a la cantidad de etanol al 95 % que se debe transferir al tubo de ensayo

para preparar las soluciones ms diluidas de etanol.
C1 es la concentracin del etanol utilizado en el anlisis 95%
V2 es el volumen que se desea preparar en este anlisis 10 mL.
C2 es la concentracin que se desea obtener
65
Etanol a 15 % = V1 = 10 mL x 15% = 1,6 mL de etanol al 95%
95%
Para preparar la muestra se deben tomar 1,6 mL de etanol al 95% y llevar a una probeta,
luego completar con agua destilada hasta 10 mL y transferir la muestra a un tubo de ensayo
con tapa, agitar vigorosamente y dejar reposar. Las siguientes soluciones se realizan
aplicando el mismo principio.

95%

95%

95%

95%

95%

95%

95%
Etanol a 95 % = V1 = 10 mL x 95% = 10 mL de etanol al 95%

95%
Preparacin Muestra Problema: Para la muestra problema se coloc en la probeta 10 mL

de licor (para el anlisis se utiliz ginebra), luego se transfiri a un tubo de ensayo con tapa
y se agito vigorosamente durante 1 minuto.
66
Figura 14. Preparacin de los patrones de etanol.
N Patrn Volumen etanol (mL) al Volumen final en mL Concentracin final % de

95% Con agua destilada etanol
1 0 10 0
2 1,6 10 15%
3 2,6 10 25%
4 3,7 10 35%
5 4,7 10 45%
6 5,8 10 55%
7 6,8 10 65%
8 7,9 10 75%
9 8,9 10 85%
10 10 0 95%
11 Muestra de licor 10 mL de licor Grado real 47%
Tabla 5. Preparacin de patrones para el anlisis por refractometra.
NOTA: Con los patrones preparados se procedi a determinar el ndice de refraccin pero
el equipo en el cual trabajamos el (ATAGO R RX 007 CX), solo comprende un rango de
trabajo comprendido entre 0 - 5% grados Brix, por tal razn todas las mediciones que
realizamos no arroj resultados, indicando que el dato se sale del rango de trabajo del
equipo.
67
Como no se pueden obtener datos del ndice de refraccin de las muestras, se sugiri
realizar dilucin para poder obtener los resultados deseados. Las muestras preparadas de
etanol se diluyeron con agua destilada hasta 50 mL, es decir a cada muestra se le adiciono
40 mL de agua destilada, con la finalidad de que el ndice de refraccin pueda determinarse
teniendo en cuenta el rango de trabajo del equipo.
N Patrn Concentracin de etanol % Volumen final en mL Nueva Concentracin

en 10 mL de muestra Con agua destilada % etanol en 50 mL
1 0 50 0
2 15% 50 3
3 25% 50 5
4 35% 50 7
5 45% 50 9
6 55% 50 11
7 65% 50 13
8 75% 50 15
9 85% 50 17
10 95% 50 19
11 10 mL de licor (ginebra) 50 Grado real 9,4%
Tabla 6. Preparacin de los nuevos patrones para el anlisis por refractometra.
Para encontrar la nueva concentracin de etanol% despus de la dilucin con 50 mL de

agua destilada se aplica la frmula:
V1C1=V2C2
C2 = V1C1
V2
Etanol a 15 % = C2 = 10 mL x 15% = 3% de etanol, nueva concentracin.

50 mL

50 mL

50 mL
68
50 mL

50 mL

50 mL

50 mL

50 mL

50 mL
La muestra Problema se trat diluyendo la muestra de 10 mL de ginebra (grado alcohlico

real 47%), se llev hasta 50 mL con agua destilada.
Muestra Problema = C2 = 10 mL x 47% = 9.4% de etanol, nueva concentracin.

50 mL
Con las diluciones ya preparadas se procedi a realizar las lecturas del ndice de refraccin,
pero lo primero que se debe hacer es calibrar el refractmetro. Para iniciar la calibracin
del equipo, se utiliza el manual de funcionamiento del Refractmetro Digital Automtico
RX 007-CX, que se encuentra en el laboratorio de qumica de la UFPS y en el cual se
observan los pasos a seguir en el encendido, la calibracin, el anlisis de muestras y el
apagado del equipo.
Calibracin del refractmetro Digital Automtico RX-007CX:
Encender el equipo con el swiche que se encuentra al lado del cable en la parte
posterior del equipo.
Abrir la cubierta del porta muestra y limpiarlo con una gota de agua destilada o
alcohol de alta calidad, secndolo con un paito suave. Cerrar la cubierta.
Oprimir SW1 el cual indica ZERO en la pantalla del equipo, esperar unos segundos
hasta escuchar un sonido de aviso caracterstico.
69
Abrir la cubierta del porta muestra y adicionar con un gotero 4 gotas de agua
destilada sobre el lente porta muestra. cerrar la cubierta del porta muestra.
Oprimir la tecla SW1, esperar 40 segundos para realizar la lectura hasta escuchar un
sonido de aviso caracterstico y despus esperar 20 segundos ms y se vuelve a
escuchar el sonido de aviso caracterstico.
Aparece en la pantalla del equipo RI ZERO END, una flecha sealando la tecla
START la cual se debe oprimir.
En la pantalla del equipo se muestra el ndice de Refraccin del agua destilada.
Seleccionar el modo de trabajo a travs de la tecla SW3 la cual indica dentro de la
pantalla men.
Aparece en la pantalla del equipo la opcin Mode sealada y se oprime la tecla
ENTER con las flechas selecciono el numero 1 el cual me indica temperaturas y
medidas exactas.
Estando dentro de la opcin Mode se busca el parmetro TARGET TEMP: a travs
del cual se asigna la temperatura que se va a trabajar utilizando las flechas para
aumentar o disminuir segn se desee y confirmar oprimiendo la tecla ENTER dos
veces. Lo ideal es trabajar a 25 C.
Pulsar la tecla SW4 que indica en la pantalla del equipo QUIT para salir del men.
Esperar que calibre el equipo a la temperatura ajustada dando EJ: 1,332491 a 25 C.
Procedimiento para Anlisis de la Muestra:
Abrir la cubierta del porta muestra y adicionar con un gotero 4 gotas de muestra
sobre el lente porta muestra. cerrar la cubierta.
Se oprime la tecla START, esperar unos segundos hasta escuchar un sonido de
aviso caracterstico.
A continuacin se muestra en la pantalla del equipo la lectura del ndice de
Refraccin.
Se oprime la tecla SW4 que identifica escala y nos muestra en pantalla los grados
Brix de la muestra analizada. Nota: este equipo solo puede tomar lecturas entre
rangos comprendidos de 0 5 % de grados Brix.
Abrir la cubierta del porta muestra y limpiarlo con un pao suave, adicionar una
gota de agua destilada o alcohol de alta calidad. Secndolo con un paito suave.
Cerrar la cubierta.
Al finalizar el anlisis se limpia el lente porta muestra y se oprime el swiche que se
encuentra al lado del cable ubicado en la parte posterior del equipo, tapar el equipo
con su respectivo forro.
70
Una vez se tiene el equipo calibrado, se analizaron los patrones de alcohol previamente
preparados, siguiendo el procedimiento para anlisis de muestras en el refractmetro (este
procedimiento se encuentra en el manual de funcionamiento del equipo).
Figura 15. Mediciones del ndice de Refraccin para las muestras de alcohol.
Los datos obtenidos se ajustan a la escala de trabajo que aplica el Refractmetro Digital
Automtico RX-007CX. Con estos datos se puede construir la grfica de la concentracin
de etanol vs el ndice de refraccin ().
Concentracin de etanol Nueva Concentracin de ndice de

etanol % diluida a 50 mL Refraccin ()
0 0 1,332496
15% 3 1,333832
25% 5 1,333840
35% 7 1,334574
45% 9 1,336730
55% 11 1,337858
65% 13 1,339084
75% 15 1,339321
85% 17 1,341439
95% 19 1,341478
Muestra de licor (ginebra) Muestra ginebra 9,4% real 1,336076
Nota: Las concentraciones de etanol disminuyen en cada muestra debido a la dilucin.
71
4.6 CUESTIONARIO
1. Reportar los datos obtenidos de las determinaciones en la siguiente tabla.
N Tubo % de etanol ndice de Refraccin ()

1 0 1,332496
2 15% 1,333832
3 25% 1,333840
4 35% 1,334574
5 45% 1,336730
6 55% 1,337858
7 65% 1,339084
8 75% 1,339321
9 85% 1,341439
10 95% 1,341478
11 Muestra de licor (ginebra) 1,336076
Como se modificaron las muestras en el momento de las diluciones, debemos plasmar los
resultados reales obtenidos:
Concentracin de etanol Nueva Concentracin de ndice de

etanol % diluida a 50 mL Refraccin ()
0 0 1,332496
15% 3 1,333832
25% 5 1,333840
35% 7 1,334574
45% 9 1,336730
55% 11 1,337858
65% 13 1,339084
75% 15 1,339321
85% 17 1,341439
95% 19 1,341478
Muestra de licor (ginebra) Muestra ginebra 9,4% real 1,336076
72
2. Graficar los valores observados de ndice de refraccin vs Concentracin de alcohol
etlico (etanol). Cul es el porcentaje de etanol en el licor?
R/
GRFICO NDICE DE REFRACCIN VS CONCENTRACION DE ALCOHOL

ETILICO ETANOL
1,344
1,342
y = 0,0005x + 1,3319
1,34
NDICE DE REFRACCIN
1,338
1,336 y
linea del licor muestra
problema (Ginebra)
1,334
1,332
1,33
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
CONCENTRACIN DE ETANOL EN %
Por medio de la grfica del ndice de refraccin se pudo determinar que la ginebra
presenta aproximadamente un porcentaje de etanol entre 8,5 9 % de etanol.
La muestra diluida de ginebra por medio de la grfica nos arroja un valor cercano al 9 % de
etanol, este mismo valor pero en la muestra sin diluir, nos corrobora un valor cercano al
45% de etanol, muy ajustado a su valor real el cual para la muestra de ginebra analizada fue
de 47% de etanol. En conclusin, este mtodo es muy til por las industrias, para clasificar
sus licores y asegurar la calidad del producto.
73
3. Aparte del ndice de refraccin qu ms podemos medir con el refractmetro?
R/ adems de leer el ndice de refraccin en el refractmetro, se pueden medir los grados

Brix, los cuales sirven para determinar el cociente total de sacarosa disuelta en un lquido.
La escala de Brix es muy utilizada en el sector de los alimentos, para medir la cantidad
aproximada de azucares en zumos de fruta, vino o bebidas suaves, y en la industria
azucarera. Por tal razn el refractmetro es una herramienta instrumental con gran
importancia para la industria y los laboratorios de enseanza, en el cual se centran las bases
de estudio aplicada por los alumnos.
4. Cul es la importancia de la determinacin del % de alcohol etlico en la Industria de las

bebidas alcohlicas?
R/ La determinacin del porcentaje de alcohol etlico (% etanol) en la industria de las

bebidas es de vital importancia, debido a que de esta manera se pueden clasificar los licores
dependiendo el grado alcohlico, este % de etanol le permite a las industrias determinar la
calidad de sus productos y as estandarizar la composicin de cada uno.
5. Cules son las aplicaciones del etanol en la Industria Qumica?
R/ Aunque el alcohol etlico es ms conocido dentro del campo de las bebidas alcohlicas,
gran parte de l es utilizado de distintas maneras. A nivel industrial, el etanol se puede
producir por la hidratacin de acetileno o por la hidratacin de acetaldehdo. En la
industria qumica es utilizado como compuesto de partida para la sntesis del cido actico,
acetato etlico, ter dietilico, y otros productos.
74
6. Consulta el diagrama de flujo para la obtencin del alcohol etlico?
R/
75
SKOOG, Douglas A., HOLLER James., NIEMAN T. A. Principios del Anlisis

Instrumental. 5 ed. Editorial McGraw Hill, 2001.
a
PICKERING William F. Qumica analtica moderna. 2 ed. Editorial Revert
S.A, 1980.
MILLN Sagrario Mara., ESCOFET Jaume., PREZ Elisabeth. ptica

Geomtrica. 1 a ed. Editorial Ariel S.A., Cpitulo 14, Febrero 2003.
HAVEN Mary., TETRAULT Gregory., SCHENKEN Jeral. Laboratory

Instrumentation. Fourth Edition, Capitulo 5 Refractometry, Canad 1995.
Wikipedia: La Enciclopedia Libre. Artculo Etanol, sntesis y aplicaciones. [En

lnea], Wikipedia Foundation, Inc. ltima modificacin: 10 de noviembre de 2011,
a las 22:37. [citada 29 octubre 2011], disponible en <URL:
http://es.wikipedia.org/wiki/Etanol >.
Diagrama proceso de obtencin de etanol, CENICAA 2008, disponible en <URL:

http://www.cenicana.org/pop_up/fabrica/diagrama_etanol.php
76
PRCTICA N 5
POLARIMETRA
(ROTACIN ESPECFICA DE SUSTANCIAS PTICAMENTE ACTIVAS)
5.1 OBJETIVOS
Identificar los componentes de un Polarmetro, utilizado para detectar la rotacin

especifica de sustancias pticamente activas.
Adquirir destreza en la calibracin del Polarmetro, para la posterior eficacia en la
toma de lecturas.
Determinar el valor de la rotacin especifica de sustancias pticamente activas.
Estudiar el efecto que tienen ciertas sustancias sobre la luz polarizada.
Polarmetro POLAX-2L Soluciones de: glucosa, sacarosa,

Baln aforado de 100 mL maltosa.
Vaso de precipitado de 500 mL Agua destilada.
Esptula
Balanza analtica
Papel absorbente
La polarimetra, en su acepcin ms amplia, comprende todas las investigaciones de los

fenmenos pticos en que interviene la luz polarizada. Para los fines de este estudio el
tema se limita a la medida de la rotacin del plano de polarizacin de la luz cuando esta
atraviesa una capa de una sustancia pticamente activa. La estereoqumica, es el estudio de
la estructura tridimensional de las molculas. El descubrimiento de la estereoisomera fue
uno de los hitos ms importantes de la teora estructural de la qumica orgnica.
77
Podramos definir a los estereoisomeros, como aquellos que difieren slo en la orientacin
espacial de sus tomos, pero que son iguales en cuanto a que los tomos estn unidos entre
s. Existen dos tipos principales de isomera: la isomera geomtrica o cis - trans, que se
produce cuando la rotacin de un carbono respecto a otro se encuentra impedida por la
presencia de un enlace doble o en estructuras cclicas, y la isomera ptica. Los ismeros
pticos, tienen las mismas propiedades qumicas y fsicas, excepto en la direccin en que
hacen rotar el plano de una luz polarizada. El valor de la rotacin especfica es el mismo,
pero en sentido opuesto; estos compuestos se llaman enantimeros. Para que un compuesto
sea pticamente activo, sus molculas deben ser quirales (quiros = manos), es decir que una
molcula y su imagen especular no deben ser superponibles. El instrumento utilizado para
medir la rotacin especfica de las sustancias pticamente activas es el polarmetro.
El polarmetro consta bsicamente de dos elementos polarizantes, uno de los cuales es fijo
y la otra gira montada en una escala graduada que permite medir su orientacin respecto al
primero; la luz monocromtica de la lmpara de sodio esta paralela al eje del aparato a
travs de un colimador y es polarizada por un prisma de Ncol. Existe un prisma auxiliar
dispuesto de tal forma que intercepta la mitad del rayo de luz. La radiacin pasa despus a
travs de la muestra contenida en un tubo de vidrio de 20 cm de longitud; posteriormente
atraviesa el otro prisma de Ncol (analizador) y va al ocular.
El primer auxiliar divide el campo en dos porciones semicirculares iguales, la posicin de

equilibrio se alcanza girando la escala; entonces una mitad reduce su intensidad luminosa y
la otra la aumenta hasta que se consigue que las dos mitades tengan la misma intensidad de
luz. Al introducir una sustancia pticamente activa entre los dos prismas de Ncol
(polarizador y analizador) se deshace el equilibrio y es necesario mover la escala para
restablecerlo. El movimiento de la escala nos da una medida directa de la actividad ptica
de la sustancia.
Para eliminar posibles errores, es preferible hacer primero una medida con el tubo lleno de
disolvente (agua, en el caso de disoluciones acuosas). Es preciso asegurarse de que no haya
burbujas de aire en el tubo del polarmetro estas burbujas significaran interferencias en el
paso del haz de luz, y por tal razn una medida errnea. Para obtener medidas exactas es
preciso tener cuidado en llenar el tubo y asegurarse de que no hay filtraciones de luz por
ninguna rendija. Las dos tapas del tubo deben estar cuidadosamente limpias y secas. Antes
de realizar medida alguna deber mantenerse encendida la lmpara de vapor de sodio
durante 10 a 15 minutos para que, una vez caliente, de su luz caracterstica.
78
5.4 PROCEDIMIENTO
5.4.1 Calibracin del Polarmetro POLAX-2L:
Para comenzar a desarrollar la siguiente prctica es esencial la calibracin del equipo, debido a
la importancia de los resultados que se desean obtener, para lo cual se procede de la siguiente
manera:
Encender el Polarmetro POLAX-2L, para el cual se enchufa a un toma de corriente de

110 V y se acciona el swiche que se encuentra al lado del cable ubicado en la parte
posterior del equipo.
Tomar el tubo polarimtrico de 200 mm el cual es el indicado para los lquidos claros,
llenarlo con agua destilada hasta rebosar y deslizar el lente de vidrio que trae la tapa
del tubo de manera horizontal evitando que queden burbujas de aire dentro del tubo y
finalmente colocar la tapa del tubo.
Abrir la cubierta del polarmetro y colocar el tubo polarimtrico en el porta tubo del
equipo. Cerrar la cubierta del polarmetro.
Descripcin del teclado:

a) La tecla R de color azul indica el primer campo.
b) La tecla L de color azul indica el segundo campo.
c) La tecla de color rojo indica la velocidad para ubicar cualquiera de los dos
campos.
Proceder a buscar los campos a travs de las teclas anteriormente descritas teniendo en
cuenta que la tecla roja debe mantenerse siempre oprimida al mismo tiempo en que se
manejan ya sean la tecla R o L para una mayor velocidad, visualizndolos de la
siguiente forma:
Rotacin Derecha (Primer Campo).
Rotacin Izquierda (Segundo Campo).
79
Despus de ubicar el primer y segundo campo se procede a ubicar el tercer campo
devolvindose con una leve rotacin de tal manera que quede ubicado en la mitad de R
yL
Esperar hasta que se ilumine un botn de color verde que se encuentra ubicado debajo
de la tecla ZERO y se oprime inmediatamente esta tecla.
En la pantalla del polarmetro debe aparecer la lectura 0.00 indicando que el equipo ya
se encuentra calibrado.
Nota: Despus de calibrar el equipo es indispensable retirar el tubo polarimtrico desocuparlo

y lavarlo con agua destilada para continuar con el anlisis de la muestra.
5.4.2 Determinacin de la rotacin especfica:
Para la determinacin de la rotacin especfica, se toman las distintas muestras de sustancias

pticamente activas que se desean analizar y se procede de la siguiente manera:
Tomar el tubo polarimtrico de 200 mm el cual es el indicado para lquidos claros, se

desecha el agua destilada utilizada en la calibracin del equipo y se procede a llenarlo
con la muestra a analizar hasta rebosar y deslizar el lente de vidrio que trae la tapa del
tubo de manera horizontal evitando que queden burbujas de aire dentro del tubo y
finalmente colocar la tapa del tubo.
Abrir la cubierta del polarmetro y colocar el tubo polarimtrico en el porta tubo del
equipo. Cerrar la cubierta del polarmetro.
Proceder a buscar los campos a travs de la teclas anteriormente descritas (R o L),

teniendo en cuenta que la tecla roja debe mantenerse siempre oprimida al mismo
tiempo en que se manejan ya sea la tecla R o L para una mayor velocidad,
visualizndose los diferentes campos.
Campo uno Campo dos
80
Despus de ubicar el primer y segundo campo se procede a ubicar el tercer campo
devolvindose con una leve rotacin de tal manera que quede ubicado en la mitad de R
y L, en este campo se identifica si la muestra es dextrgira o levgira dependiendo de
la tecla que se haya utilizado para ubicar este campo: si utilizo la tecla R la sustancia es
dextrgira, si utilizo la tecla L la sustancia es levgira.
Inmediatamente ubicado el tercer campo se procede a tomar la lectura de la sustancia.
5.4.3 CLCULOS:
La prctica Polarimetra (Rotacin especfica de sustancias pticamente activas), se realiz

en el equipo Polarmetro POLAX-2L.
5.5.1 Preparacin de soluciones:
Se prepararon soluciones de glucosa, sacarosa y maltosa, la glucosa se prepar en el

laboratorio para comenzar la prctica, las soluciones de sacarosa y maltosa se prepararon
con la finalidad de utilizarlas como muestras problema.
81
Solucin de Glucosa: se pes en la balanza analtica 10,02 gramos de glucosa, y se
adiciono en un vaso de precipitado de 500 mL, se adiciona un poco de agua
destilada hasta dilucin agitando vigorosamente por unos minutos. Una vez diluida
la solucin de glucosa se transfiere a un baln de 100 mL y se afora con agua
destilada. Se rotula (como se observa en la figura 16); Teniendo en cuenta que la
concentracin se expresa en (g/100 mL).
Figura 16. Solucin de glucosa 10.02 %
Las siguientes soluciones fueron preparadas con la finalidad de ser utilizadas como
solucin problema.
Solucin de Maltosa: se pes en la balanza analtica 1,497 gramos de Maltosa, y se

la solucin de Maltosa se transfiere a un baln de 100 mL y se afora con agua
destilada.
Solucin de Sacarosa: se pes en la balanza analtica 1,57 gramos de sacarosa, y se

la solucin de se transfiere a un baln de 100 mL y se afora con agua destilada.
5.5.2 Determinacin de la rotacin especfica:
Una vez preparadas las soluciones, se procede a comenzar con la realizacin de la prctica.
El equipo Polarmetro POLAX-2L se encendi con una anterioridad de 15 minutos antes de
comenzar con el desarrollo de la prctica.
82
Se realiz la calibracin del Polarmetro POLAX-2L, como se indica en el apartado
4.4.1; en el cual se ubicaron los tres campos polarimtricos y se procedi a oprimir la tecla
Zero una vez se ilumine el botn de color verde.
Figura 17. Tercer campo polarimtrico ubicado.
Figura 18. Polarmetro POLAX-2L calibrado.
Con el polarmetro calibrado se procede a determinar la rotacin especfica de las diferentes

muestras para las cuales se sigue el apartado 4.4.2 (Procedimiento para el anlisis de la
muestra). Los datos obtenidos por las distintas muestras se registraron en la (tabla 7).
Sustancia Concentracin Rotacin observada en Rotacin

g/100 ml el polarmetro Especfica
Solucin de glucosa 10,02 % 12,20 (+) 60,88
Solucin de maltosa 3,65 % 4,10 (+) 137
Solucin de sacarosa 1,497 % 4,85 (+) 66,37
Tabla 7. Datos obtenidos por las diferentes muestras pticamente activas.
83
Con los datos obtenidos por parte del polarmetro se procede a realizar los diferentes
clculos para determinar la rotacin especfica de la solucin de glucosa y los clculos
necesarios para determinar las concentraciones de las muestras problema (solucin de
maltosa y solucin de sacarosa). Los clculos se realizaron de la siguiente manera:
Solucin de glucosa: el tercer campo se ubic oprimiendo la tecla R, por lo que

podemos concluir que la muestra es dextrgira, la rotacin reportada por el polarmetro
POLAX-2L fue de 12,20 como se puede observar en la (figura 19).
Figura 19. Rotacin reportada para la solucin de glucosa.
Con este dato se puede determinar la rotacin especfica de la muestra aplicando la

frmula de la rotacin especfica:
Teniendo en cuenta la frmula de la rotacin especfica se procede a realizar los

clculos
Longitud del tubo polarimtrico POLAX-2L = 200 mm

Longitud del tubo polarimtrico en decmetros = 200 mm * 1dm /100 mm
Longitud del tubo polarimtrico en decmetros = 2 dm
84
[] = 12,20 * 100 = 60,88
10,02g/ 100ml * 2 dm
La rotacin especfica de la solucin de glucosa es de (+) 60,88 por lo que podemos decir
que la glucosa es dextrgira.
Las siguientes dos soluciones fueron las utilizadas como muestras problema dentro del
desarrollo de la prctica:
Solucin de sacarosa: el tercer campo se ubic oprimiendo la tecla R, por lo que se

pudo concluir que la muestra de sacarosa es dextrgira, la rotacin reportada por el
polarmetro POLAX-2L fue de 4,85 como se puede observar en la figura 20.
Figura 20. Rotacin reportada para la solucin de sacarosa.
Se conoce tericamente que la rotacin especfica de la sacarosa a 25 C es de (+)

66,37. Con base en la frmula de la rotacin especfica se puede determinar la
concentracin de sacarosa en la muestra, para la cual se procedi as:
C= * 100
[] * L(dm)
La longitud del tubo polarimtrico en decmetros es de: 2 dm
C = 4,85 * 100 = 3,65 g / 100 ml

(+) 66,37 * 2 dm
85
La concentracin de la solucin de sacarosa es de 3,65 g / 100 ml.
Solucin de Maltosa: el tercer campo se ubic oprimiendo la tecla R, por lo que se

pudo concluir que la muestra de maltosa es dextrgira, la rotacin reportada por el
polarmetro POLAX-2L fue de 4,10 como se puede observar en la (figura 21).
Figura 21. Determinacin de la rotacin especfica de la solucin de maltosa.
Se conoce tericamente que la rotacin especfica de la sacarosa a 25 C es de (+) 137.

Con base en la frmula de la rotacin especfica se puede determinar la concentracin
de sacarosa en la muestra, para la cual se procedi as:
C= * 100
[] * L(dm)
La longitud del tubo polarimtrico en decmetros es de: 2 dm
C = 4,10 * 100 = 1,497 g / 100 ml

(+) 137 * 2 dm
La concentracin de la solucin de maltosa es de 1,497 g / 100 ml.
86
5.6 CUESTIONARIO
1. En qu consiste la polarimetra?
R/ La polarimetra permite la medida de la rotacin del plano de polarizacin de la luz

cuando esta atraviesa una capa de una sustancia pticamente activa, la medida puede ser
detectada por medio de un polarmetro.
2. Qu se entiende por una sustancia pticamente activa?
R/ Una sustancia pticamente activa es la que rota el plano de la luz polarizada.
3. A qu se le llama sustancias dextrgiras y a cules levgiras?
R/ Se entiende por sustancia dextrgira (+) cuando su ngulo de rotacin se orienta hacia la
derecha o en sentido de las manecillas del reloj, son sustancias levgiras (-) si su ngulo de
rotacin se orienta en sentido contrario a las manecillas del reloj o hacia la izquierda.
4. Una solucin de 2 g de (+) - gliceraldehido HOCH2-CHOH-CHO en 10 mL de

agua, se coloca en un tubo polarimtrico de 100 mm, con el polarmetro se encontr
una rotacin de + 1,74 a 25C. calcular la rotacin especifica del (+)
gliceraldehido?
R/ 2 g /10 mL --------------- 0,2 g/mL concentracin de la solucin de gliceraldehido
Luego se transforma la longitud del tubo polarimtrico en dm
100 m x 1dm / 100mm ---------------------- 1 dm
Luego se determina la rotacin especfica.
[] = 1,74 * 100 = 8,7

0,2 g /mL * 1 dm
La rotacin especfica del gliceraldehido es de 8,7
87
5. Una solucin de 0,5 gramos de (-) epinefrina disueltos en 10 mL de HCL diluido se
coloc en un tubo polarimtrico de 20 cm. Con el polarmetro, se encontr que la
rotacin era de - 5,0 a 25C. Calcular la rotacin especifica de la epinefrina?
R/ 0,5 g/mL ----------------- 5g/100 mL concentracin de la solucin de epinefrina
Luego se transforma la longitud del tubo polarimtrico en dm
20 cm x 1dm / 10 cm---------------------- 2 dm
Luego se determina la rotacin especfica.
[] = 5 * 100 = 50,0
5g / 100 mL * 2 dm
La rotacin especfica de la epinefrina es de 50
HOBART Willard H., MERRITT Lynne L., DEAN John A. Mtodos

Instrumentales de Anlisis. 4 a ed., Editorial Continental S.A., 1972.
a
PICKERING William F. Qumica analtica moderna. 2 ed. Editorial Revert
S.A, 1980.
ORIA Solano E., PARDO Prez E., ALONSO Toms F. Prcticas de Laboratorio
de Qumica Orgnica. Prctica # 7 Polarimetra, Universidad de Murcia,
Secretariado de publicaciones e intercambio cientfico 1991.
WADE L. G. Qumica Orgnica. 5 a ed. Editorial Pearson Prentice Hall., Captulo

5, Tema 5.4 Actividad ptica., Madrid 2004.
88
PRCTICA N 6
DETERMINACIN DE HIERRO (Fe), POR EL MTODO

COLORIMTRICO DE LA FENANTROLINA
6.1 OBJETIVOS
Conocer los trminos y conceptos sobre la absorcin de radiacin en la regin

visible del espectro electromagntico.
Aplicar la Ley de Beer en el anlisis de muestras de concentracin desconocidas.
Adquirir destrezas en el manejo del espectrofotmetro UV/Visible.
Determinar la cantidad de hierro total presente en una muestra de agua por el
mtodo colorimtrico de la fenantrolina.
7 Balones aforados de 100 mL Solucin estndar de hierro 10 ppm

Balones aforados de 25, 250 mL Solucin acuosa de clorhidrato de
Probeta de 250 mL hidroxilamina al 10 % P/V
Vaso de precipitado 250 y 500 mL Solucin acuosa de 1,10-
Pipetas aforadas de 5, 10, 25 mL fenantrolina al 0,10 % P/V
Pipeta graduada de 10 mL Solucin acuosa de acetato de sodio
Frasco lavador 1,20 M
Pera
Espectrofotmetro UV/Visible
Cuando un haz de radiacin electromagntica pasa a travs de una muestra (solida, liquida
o gaseosa), ciertas frecuencias pueden eliminarse selectivamente por absorcin. La
absorcin es un proceso en el que la energa electromagntica, se transfiere a los tomos,
iones o molculas que componen la muestra. La absorcin provoca que estas partculas
pasen de su estado normal a la temperatura ambiente (estado fundamental), a uno o ms
estados excitados de energa superior.
89
La espectroscopia de absorcin molecular UV/Visible comprende la absorcin de la
radiacin entre 160 nm a 780 nm (aproximadamente). La espectroscopia de absorcin
molecular se basa en la medida de la transmitancia (T), o de la Absorbancia (A), de
disoluciones que se encuentran en cubetas transparentes que tienen un camino ptico de b
cm. Normalmente la concentracin (C) de un analito absorbente est relacionada
linealmente con la absorbancia.
En solucin, el hierro se encuentra como fe+3 por lo tanto es reducido al estado ferroso
(Fe+2) con hidroxilamina, en medio cido y luego se trata con 1,10 fenantrolina (C12H8N2)
a pH de 3,2 a 3,3. Tres molculas de 1,10 fenantrolina acomplejan cada ion ferroso para
formar un complejo rojo-naranjado.
Para asegurarnos de que todo el hierro presente en la muestra se encuentra en forma de Fe+2
aadimos, antes de la formacin del complejo, un agente reductor como es el clorhidrato de
hidroxilamina, el cual reduce el Fe+3 a Fe+2 segn la reaccin :
Fe+3 + 2NH2OH ---------------- Fe+2 + N2O + H+ + H2O
Fe+2 + 3FenH+ ================

Fe (Fen)3+2 + 3H+
La solucin coloreada cumple con la ley de Beer; su intensidad es independiente del pH

desde 3,00 a 9,00, un pH entre 2,90 y 3,50 asegura el rpido desarrollo del color en
presencia de un exceso de fanantrolina. El anlisis de hierro por ste mtodo se puede
llevar a cabo con un espectrofotmetro ajustado a 508 nm, que es la longitud de onda
mxima a la que absorbe el complejo coloreado.
90
6.4 PROCEDIMIENTO
e) Solucin estndar de hierro 0,01 mg/ml (10 ppm)
f) Solucin acuosa de clorhidrato de hidroxilamina al 10% P/V: disolver 5,000 gramos

de H2NOH-HCL en 50,0 mL de agua destilada.
g) Solucin acuosa de 1,10 fenantrolina al 0,10% P/V: disolver 0,5000 gramos de

monohidrato de 1,10 fenantrolina en 500 mL de agua destilada. Calentar ligeramente
si es necesario. Cada mL es suficiente para no ms de 0,90 mg de fe. No preparar ms
reactivo que el necesario; se oscurece por reposo y debe desecharse.
h) Solucin acuosa de acetato de sodio 1,20 M: disolver 41,50 gramos de

CH3COONa.3H2O en 250 mL de agua destilada.
6.4.2 Preparacin de patrones:
Preparar las soluciones patrn de calibracin de fe+2 de 0 (blanco), 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 ppm
a partir de la solucin patrn concentrada 10 ppm. Teniendo en cuenta las indicaciones de la
tabla 8:
No. Patrn V V solucin V s/ln V solucin Volumen Concentracin

solucin hidroxilamina acetato 1,10- final final (ppm)
patrn de sodio fenantrolina
0 (blanco) 0,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 ml 100,0 mL 0.0
1 5,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 0.5
2 10,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 1.0
3 15,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 1.5
4 20,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 2.0
5 25,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 2.5
Tabla 8. Indicaciones para preparar los patrones de fe+2.
91
6.4.3 Determinacin:
A cada baln aforado de 100 mL se transfiere en su orden el volumen de solucin patrn de

hierro (en el del blanco se adiciona agua destilada), ver tabla 8; luego la hidroxilamina
(reductor), seguido por el acetato de sodio y finalmente la 1,10 fenantrolina, se deja que
las mezclas reposen durante 15 minutos, luego se aforan con agua destilada y se mezclan
bien.
Para preparar la muestra problema, se transfieren 10 mL del problema (o el volumen que

sea necesario para que la muestra est en el intervalo de concentraciones de la curva de
calibracin) a un baln aforado de 100 mL y se trata en la misma forma que los patrones de
calibracin. Nota: al reportar la concentracin de la muestra problema se tiene que tener en
cuenta el factor de dilucin aplicado.
Una vez se tengan preparadas las muestras se realizan las siguientes mediciones:
Realizar un barrido espectral entre 400 750 nm sobre una de las soluciones
patrn, para obtener el espectro de absorcin y determinar la longitud de onda ( )de
mxima absorcin ( mxima).
Fijar la mxima en el equipo y cuadrar el cero de absorbancia con el blanco.
Medir la absorbancia de los patrones a la mxima y hacer una curva de calibracin

entre ABS vs concentracin. Verificar la regresin lineal de los datos (r 0,999) y
asegurarse que el intervalo lineal est conformado por cinco patrones. Nota: cada
vez que se va a hacer una medicin, la celda que contiene la muestra se debe
enjuagar con cada solucin.
Medir la absorbancia de la muestra problema a la mxima y verificar que est en el

intervalo lineal de la curva de calibracin. Si no lo est, hacer las diluciones
necesarias y los clculos respectivos.
Determinar la concentracin de hierro en la muestra problema y reportarla en ppm.
92
El siguiente anlisis de hierro se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer

DINKO UV 2300 )
Figura 22. spectrophotometer DINKO UV 2300
Se prepararon las siguientes soluciones para el desarrollo de la prctica:
Solucin estndar de hierro (10 ppm): para poder preparar la anterior reaccin se
utiliz una solucin patrn de hierro 200 ppm. Se toman con una pipeta aforada 50
mL de la solucin patrn de 200 ppm y se transfiri a un baln aforado de un litro,
el cual se aforo con agua destilada.
Nota: la solucin estndar de hierro de 200 ppm se preparo agregando 50 mL de agua

destilada en un vaso de precipitado, lentamente adicionar 20 mL de cido sulfrico
concentrado (98%) y se disolvi 1,494 gramos de sulfato ferroso amnico hexa-hidratado
(Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O). Se adiciono solucin de permanganato de potasio (KMnO4) gota
a gota hasta que persisti un color rosado plido. Se transfiri cuantitativamente a un baln
aforado de un litro y se enraso con agua destilada, se etiqueto y almaceno.
Solucin acuosa de clorhidrato de hidroxilamina al 10% P/V: se disolvi 2,500

gramos de H2NOH-HCL en 25,0 mL de agua destilada.
Solucin acuosa de 1,10 fenantrolina al 0,10% P/V: se disolvi 0,250 gramos de

monohidrato de 1,10 fenantrolina en 250 mL de agua destilada.
Solucin acuosa de acetato de sodio 1,20 M: se disolvi 41,50 gramos de

CH3COONa.3H2O en 250 mL de agua destilada.
93
Una vez preparadas las anteriores soluciones, se dio inicio a la preparacin de los patrones
de calibracin del hierro, de 0 (blanco), 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 a partir de la solucin patrn
de 10 ppm de hierro. La preparacin de los patrones se desarrolla de tal forma como se
observa en la tabla 9 Indicaciones para preparar los patrones de Fe+2.
No. Patrn V solucin V s/ln V s/ln V solucin Volumen Concentraci

patrn hidroxila acetato 1,10- final n final (ppm)
mina de sodio fenantrolina
0 (blanco) 0,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 0.0
1 5,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 0.5
2 10,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 1.0
3 15,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 1.5
4 20,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 2.0
5 25,0 mL 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL 2.5
6 M. problema 1,0 mL 10,0 mL 10,0 mL 100,0 mL X
Tabla 9. Indicaciones para preparar los patrones de Fe+2.
La muestra problema para el desarrollo de nuestra prctica fue tomada directamente de la

llave del agua del laboratorio de qumica (se tomaron 10 mL) tenemos que tener en cuenta
que la universidad maneja aguas subterrneas por lo cual esta muestra puede contener
hierro.
Figura 23. Preparacin de los Figura 24. Patrones para la

patrones de calibracin del hierro. calibracin del hierro preparados.
94
Cuando se tienen los patrones preparados y las muestras problema, se realizaron las
siguientes mediciones:
Nota: para realizar las mediciones fotomtricas en el espectrofotmetro se debe primero

realizar una consulta exhaustiva del manual de funcionamiento del espectrofotmetro
DINKO UV 2300 (Ver Anexo uno), y antes de utilizarlo se debe contar con la presencia
y autorizacin del docente de turno.
Se realiz un barrido espectral entre 400 -750 nm en el espectrofotmetro. Primero se

limpia la celda de plstico y se introduce la solucin patrn N1 (puede ser cualquiera de
los patrones), y se utiliz como blanco (agua destilada). Cerramos la tapa del
espectrofotmetro y se cuadra el equipo dependiendo del anlisis, en nuestro caso seguimos
los siguientes pasos:
Se enciende la lmpara de wolframio y se apaga la de deuterio, teniendo en

cuenta que nuestro anlisis es en el rango visible. Opcin 5 (sistema).
Nos dirigimos a la opcin 2 (Wavelength scan) y realizamos un barrido
comprendido entre 750 nm - 400 nm.
Se oprime forward y se mide la longitud de onda ( )de mxima absorcin
El resultado obtenido como pico mximo de absorcin fue de 508 nm
Una vez identificado el pico mximo de absorcin se procedi a cuadrar el

espectrofotmetro, para nuestro anlisis se realizaron los siguientes ajustes:
La longitud de onda se ajust en ( = )508 nm

Los resultados de los datos se ajustan en ABS (absorbancia)
Una vez ajustado el espectrofotmetro se procedi a realizar las siguientes mediciones:
Primero se ajusta el cero de absorbancia, se coloca el blanco en el

espectrofotmetro y se le da la opcin Auto Zero.
Se realizan las mediciones de Absorbancia de las soluciones patrn y la

muestra problema. Se coloca en la celda de plstico la solucin patrn y se
introduce en el espectrofotmetro, se le da Forward y se mide la
absorbancia del patrn.
95
Una vez reportada la absorbancia se retira la celda y se enjuaga con
abundante agua destilada, de ser posible para la siguiente medicin se
utiliza otra celda. Las siguientes mediciones se realizan de la misma
manera.
Los resultados del anlisis se reportan en la siguiente tabla.
CONCENTRACIN (ppm) ABSORBANCIA

0 0
0,5 0,041
1 0,081
1,5 0,123
2 O,164
2,5 0,202
X (Muestra Problema) 0,014
Tabla 10. Mediciones de absorbancia de los patrones reportados por el

espectrofotmetro.
Se le busco la regresin lineal de los datos obtenidos anteriormente y se pudo

establecer que la regresin lineal fue de r = 0,999921431, tambin se determin a =
3,333x10-4 y b = 0,0812. Con estos datos se busc la concentracin de la muestra
problema.
La absorbancia de la muestra problema fue de A = 0,014, se calcul la

concentracin as:
A = bC + a
C = A- a
b
C = 0,014 - 3,333x10-4 = 0,168 ppm de Fe+2

0,0812
Luego aplicamos el factor de dilucin en la preparacin de la muestra problema:
C = 0,168 ppm de Fe+2 x 100 mL = 1,68 ppm de Fe+2

10 mL
96
6.6 CUESTIONARIO
1. Realizar la curva de calibracin entre A vs concentracin de los patrones.
R/ los resultados finales obtenidos son:
CONCENTRACIN (ppm) ABSORBANCIA

0 0
0,5 0,041
1 0,081
1,5 0,123
2 O,164
2,5 0,202
GRAFICO ABSORBANCIA VS CONCENTRACION (ppm)
0,25
0,2
y = 0,0812x + 0,0003 (2,5-0,202)
ABSORBANCIA
R = 0,9998
0,15 (2-0,164)
(1,5-0,123)
0,1
(1-0,081)
0,05
0
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
CONCENTRACIN (ppm)
Figura 25. Curva de calibracin Absorbancia vs Concentracin (ppm) de Fe+2
97
2. Determinar el valor de la absortividad y la absortividad molar para la muestra
problema a la estudiada.
R/ para determinar la absortividad y la absortividad molar se debe tener en cuenta que:
a= A
b.C
Dnde:
a = absortividad
b = paso ptico de la cubeta en cm
C = concentracin en g/L
= A
b.C
Dnde:
= absortividad molar
C = concentracin en mol/L
Tenemos que la concentracin de Fe+2 en la muestra problema fue de 1,68 ppm. Se

realizaron los clculos de la siguiente manera:
Absortividad:
a= 0,014 X 1000 mg = 8,33 L/g.cm

1cm x 1,68 mg/L 1g
Absortividad Molar:
= 0,014 X 1000 mg X 56 g de Fe = 466,66 L/mol.cm

1cm x 1,68 mg/L 1g 1 mol de Fe
3. Una solucin cuya concentracin es 5,0x10-4 M en un analito X, se introduce en una

celda de muestra cuya longitud de paso es de 1 cm, cuando se mide a una =490
nm, la absorbancia fue de 0,388, Cul es la absortividad molar a esta. Si la misma
solucin se mide a = 520 nm su absorbancia es de A= 0,495. Cul es la
absortividad molar ()?
98
R/ = A / B.C ------------ = 0,388
1,00cm x 5,00x10-4 mol/L
= 766 L/mol.cm
= 520 nm A = 0,495
(520 nm) = 0,495

1,00cm x 5,00x10-4 mol/L
(520 nm) = = 990 L/mol.cm
La absortividad molar () de la muestra fue de 990 L/mol.cm

RUBINSON Kenneth A., RUBINSON Judith F. Anlisis Instrumental. Editorial

Prentice Hall, 2000.
PREZ Pino F., PREZ D. Bendito. Anlisis de elementos-traza por

espectrofotometra de absorcin molecular UV/Visible. Captulo 6
Espectrofotometra UV/Visible, Instrumentacin. publicaciones de la Universidad
de Sevilla.
SMITH Brian C., Quantitative Spectroscopy, Theory and practice. Unit 1,

Fundamentals of Molecular Absorption Spectroscopy. Elsevier Science USA
Academic Press 2002.
KENKEL John, Analytical Chemistry for Technicians, Visible and Ultraviolet

Spectroscopy. Lewis Publishers US 1994.
Artculo en Pdf, Basic UV-Vis Theory, Concepts and Applications, Thermo

Spectronic. [En lnea], Citada (25 junio de 2012), disponible en <URL:
http://www.plant.uoguelph.ca/research/homepages/raizada/Equipment/RaizadaWeb
%20Equipment%20PDFs/5B.%20UV%20VIS%20theory%20ThermoSpectric.pdf
99
PRCTICA N 7
ANLISIS DE SUELOS AGRCOLAS Y DETERMINACIN

ESPECTROFOTOMTRICA DE FOSFORO DISPONIBLE
7.1 OBJETIVOS
Conocer la importancia de realizar anlisis fsico-qumicos a los suelos agrcolas.

Diferenciar los requerimientos esenciales de los diferentes tipos de suelos agrcolas
(monte, csped y jardn).
Comprender los rangos de pH estipulados, par cada tipo de suelo, en el que se
denotar un mejor aprovechamiento del mismo.
Identificar que elementos qumicos (nutrientes), son importantes para el crecimiento
vegetal en los suelos agrcolas.
Determinar la cantidad de fosforo disponible en una muestra de suelo agrcola por el
mtodo espectrofotomtrico.
4 Balones aforados de 100 mL H3PO4 85% grado analtico

Balones aforados de 25, 200 mL K2Cr2O7 1N
Probeta de 250 mL HCL (concentrado)
Erlenmeyer250 mL,
varilla agitadora.
Vaso de precipitado de 500 mL FeSO4 (sulfato ferroso)
Pipetas aforadas de 1, 5, 10, 25 mL H2SO4
Pipeta graduada de 10, 25 mL Solucin extractora
Frasco lavador, pera de succin Solucin coloreadora
Potencimetro, provisto de electrodo
El suelo es un sistema muy complejo que sirve como soporte de las plantas, adems de
servir de despensa de agua y de otros elementos necesarios para el desarrollo de los
vegetales.
100
El suelo es conocido como un ente vivo en el que habitan gran cantidad de seres vivos
como pequeos animales, insectos, microrganismos (hongos y bacterias) que influyen en la
vida y desarrollo de las plantas de una forma u otra. Las propiedades fsicas de un suelo
dependen fundamentalmente de su textura y de su estructura. La importancia de estas
propiedades es muy grande, ya que de ellas depende el comportamiento del aire y del agua
en el suelo, y por lo tanto condicionan los fenmenos de aireacin, permeabilidad. Las
propiedades fsicas son ms difciles de corregir que las propiedades qumicas, de ah su
inters desde el punto de vista de la fertilidad del suelo.
Entre las pequeas partculas minerales de los suelos se incluyen la arena, el limo y la
arcilla. Algunos suelos presentan adems otras partculas de mayor tamao denominadas
piedras, guijarros o gravillas. Los suelos pueden ser de textura fina, suelos formados por
partculas de arcilla; textura mediana: suelos de naturaleza limosa y suelos de textura
gruesa, suelos con un alto contenido de arcilla. Por tanto, la textura del suelo define la
cantidad y el tamao de los espacios que existen entre las partculas del suelo. Estos
espacios determinan la facilidad que tiene el agua para circular a travs del suelo y la
cantidad de agua que el suelo puede retener.
La estructura de un suelo es el modo que tienen los elementos constituyentes del suelo de
unirse entre s, de tal forma que le confieren una arquitectura caracterstica. Se entiende
por estabilidad estructural la resistencia de los agregados a modificar su forma o su tamao
por la accin de factores externos. Son numerosos los factores degradadores de la
estructura, pero el ms importante es el agua, ya que ocasiona los efectos de dispersin,
estallido, golpeteo, entre otras. Generalmente no se puede modificar mucho la textura del
suelo, pero si puede influir beneficiosamente sobre su estructura realizando labores como:
Suministrando materia orgnica al suelo, para aumentar su contenido de complejo

arcillo-hmico.
Aplicando enmiendas calizas en suelos que reporten gran cantidad de acidez.
Restringiendo la aplicacin de abonos que contienen sodio sobre el suelo.
Restringiendo la cantidad de agua aplicada al suelo, ya que demasiada cantidad de
agua puede actuar como agente destructor de la estructura, por dislocacin de los
agregados, dispersando los coloides y formando costra en la superficie del suelo.
La composicin qumica del suelo incluye la medida de la reaccin de un suelo (pH) y de

sus elementos qumicos (nutrientes). Su anlisis es necesario para una mejor gestin de la
fertilizacin, cultivo y para elegir las plantas ms adecuadas para obtener los mejores
rendimientos de cosecha.
101
La reaccin del suelo o pH hace referencia al grado de acidez o basicidad del mismo y
generalmente se expresa por medio de un valor de pH del sistema suelo-agua. El pH es la
medida de la concentracin de iones de hidrogeno [H+]. Segn este valor un suelo puede
presentar acidez, neutralizacin o alcalinidad, por medio de estas propiedades se puede
condicionar el suelo para su uso agronmico. En los suelos agrcolas la mayora de las
plantas prefieren rangos de pH de 5,5 a 7,5 pero algunas especies prefieren suelos cidos o
alcalinos. Sin embargo, cada planta necesita un rango especfico de pH, en el que pueda
expresar mejor su potencialidad de crecimiento. Del pH tambin dependen los procesos de
humificacin, en funcin del pH se producen distintos tipos de materia orgnica del suelo y
propiedades que influyen directamente sobre el crecimiento vegetal como el movimiento y
disponibilidad de los nutrientes.
La materia orgnica de los suelos agrcolas representa un sistema complejo y heterogneo,

con una dinmica propia e integrada por numerosos componentes; puede definirse como la
totalidad de las sustancias orgnicas presentes en el suelo que proceden de: restos de
plantas y animales, en diferentes estados de transformacin, aportes orgnicos externos,
materia en descomposicin, biomasa, entre otros.
Imagen 26. Transformacin de la materia orgnica en el suelo.
102
Solo una proporcin limitada de la materia orgnica del suelo se encuentra en forma de
restos animales, vegetales y microbianos, ya que estos residuos suelen ser rpidamente
biodegradados y se encuentran asociados con la fraccin mineral mediante enlaces
naturales. Aproximadamente la mitad de la materia orgnica de los suelos est constituida
por las denominadas sustancias hmicas, que no son estructuralmente comparables a los
constituyentes de la biomasa y que se forman en el propio suelo a partir de productos
provenientes de la alteracin y biodegradacin de los residuos orgnicos.
La cantidad de materia orgnica en el suelo le proporciona nutrientes vegetales que en

mayor o menor proporcin son necesarios para el desarrollo de las plantas, y que en general
estas toman del suelo por las races y del aire por intermedio de las hojas. Aunque se han
identificado veinte elementos qumicos en la mayor parte de las plantas, se ha visto que
solamente diecisis son realmente necesarios para un adecuado crecimiento y una completa
maduracin de las plantas; a estos 16 elementos se les considera como los nutrientes
esenciales. Carbono, oxigeno e hidrogeno, constituyen la mayor parte del peso seco de las
plantas, estos elementos provienen del CO2 atmosfrico y del agua. Le siguen en
importancia cuantitativa el nitrgeno, potasio, calcio, magnesio, fosforo y azufre que son
absorbidos del suelo. Lo elementos ms importantes para el crecimiento de las plantas son
los macronutrientes nitrgeno, fosforo y potasio.
El fosforo es un elemento de vital importancia para la planta ya que forma parte en la

composicin de cidos nucleicos, as como las sustancias de reserva en semillas y bulbos.
Contribuyen a la formacin de yemas, races y a la floracin. Una falta de fosforo provoca
un ahogo de la planta, crecimiento lento, una reduccin de la produccin, frutos ms
pequeos y una menor expansin de las races. Por tanto el correcto desarrollo de una
planta o cultivo depender del contenido nutricional de este elemento en el suelo.
Para detectar posibles deficiencias nutricionales en el suelo, se deben realizar una serie de
anlisis que permitan mejorar la calidad de produccin y crecimiento de cultivos agrcolas.
Es importante realizar anlisis de los suelos para determinar la cantidad de cada nutriente
que est disponible para el crecimiento de la planta.
A partir de los resultados de estos anlisis, se pueden tomar decisiones sobre la cantidad de
nutrientes necesarios para alcanzar el nivel ptimo de produccin. Generalmente en el
anlisis de un suelo se realizan ensayos sobre: la determinacin de la textura del suelo, la
determinacin de los niveles de pH, la determinacin de la materia orgnica y la
determinacin de fosforo disponible (cantidad de fosforo libre para el crecimiento de la
planta).
103
7.4 PROCEDIMIENTO
7.4.1 Determinacin de pH en Suelos Agrcolas
Para determinar el pH del suelo, se pesan 25 gramos de suelo (seco y preparado) en un vaso
de precipitado de 100 mL, luego adicionar 25 mL de agua destilada y agitar con la ayuda de
la varilla aproximadamente cada 15 minutos durante una hora.
Se debe calibrar el potencimetro para medir el pH de la muestra, se deben seguir los

siguientes pasos:
Encender el potencimetro o pH-metro

el vaso con la solucin buffer
Al paso de una hora de preparada la solucin (suelo-agua) y de haber calibrado el

potencimetro (pH-metro), leer el pH de la muestra y reportar los datos para realizar las
diferentes conclusiones.
7.4.2 Determinacin de la Materia Orgnica Mtodo de Wakley y Black
La muestra de suelo se trata con un volumen de K2Cr2O7, la cual acta como oxidante, en
un medio fuertemente concentrado de H2SO4, el calor desprendido por la reaccin del
H2SO4 favorece la accin del K2Cr2O7, para que oxide la materia orgnica, el exceso de
oxidante se determina titulando con FeSO4 (que acta como reductor). Cuando el
contenido de cloruros del suelo es considerable, es necesario precipitar con anterioridad en
forma de AgCl mediante adicin de AgSO4. [Wakley y Black]
104
Para determinar la materia orgnica de la muestra de suelo, se deben realizar los siguientes
pasos:
Pesar 0,15 gramos de suelo, pasarlo por un tamiz N 30 y adicionarlo en un

Erlenmeyer de 250 mL.
Adicionar 5 mL de K2Cr2O7.
Aadir 10 mL de H2SO4, agitar fuertemente por 1 minuto.
Dejar reposar la solucin por hora y luego aadir 75 mL de H2O destilada.
Agregar 5 mL de H3PO4 al 85% y adicionar 0,5 mL de indicador (Difenil-amina).
Titular la solucin con nuestra muestra de suelo.
El punto final de la valoracin est dado por el viraje del color marrn a verde
esmeralda. Este gasto en ml (volumen de FeSO4) se calcula como B
Realizar los anteriores pasos pero en un Erlenmeyer sin muestra de suelo el cual nos
sirve como blanco (Blanco de Landa). El volumen consumido en la titulacin del
blanco de landa se calcula como M.
La frmula para determinar la materia orgnica se describe as:
% MO = 0,6708 (B-M) x N
Pm
Dnde:
B = Volumen solucin ferrosa gastada en la valoracin del Blanco de Landa (mL)

M = Volumen solucin ferrosa gastada en la valoracin de la muestra de suelo (mL)
N = Normalidad del sulfato ferroso (FeSO4)
Pm = Peso de la muestra de suelo en gramos
7.4.3 Determinacin de Fosforo Disponible en Suelos Agrcolas
Para determinar el fosforo disponible en suelos agrcolas se utiliza el mtodo de Bray y

Kurtz, la muestra se debe preparar as:
Pesar 1,425 gramos de suelo seco y transferir en un tubo de ensayo.

Adicionar lentamente 10 mL de solucin extractora y agitar vigorosamente durante
1 minuto.
Filtrar la suspensin inmediatamente y recibir el filtrado en un frasco de plstico de
50 mL (el frasco de plstico evita interferencias).
105
Se deja reposar el filtrado por 10 minutos.
Extraer con una micro-pipeta 1 mL del filtrado y transferirlo en un Erlenmeyer.
Agregar 9 mL de solucin coloreadora y dejar reposar por 15 minutos.
7.4.3.1 Medida de la Absorbancia
La solucin extractora en una muestra del suelo, remueve las distintas formas de fsforo
fcilmente solubles en cidos (fosfatos de calcio, hierro y aluminio). Los iones fosfatos al
reaccionar con una solucin acida que contiene iones molibdato y antimonio forman una
molcula compleja acida de fosfato-molibdato-antimonio, que en presencia de cido
ascrbico se reduce y desarrolla un color azul de intensidad proporcional a la concentracin
de iones fosfato.
Para determinar el fosforo disponible se preparan los patrones de fosforo, el blanco de

patrones y el blanco de landa.
Solucin estndar de fosforo 50 ppm: disolver 0,2195 gramos de fosfato di-cido

de potasio cristalizado (KH2PO4) y llevar con agua destilada hasta aforo de 1 litro.
Solucin estndar de fosforo 10 ppm: tomar 40 mL de la solucin estndar de 50

ppm y la llevamos hasta aforo de 200 mL.
Solucin estndar de fosforo 20 ppm: tomar 80 mL de la solucin estndar de 50

ppm y la llevamos hasta aforo de 200 mL.
Una vez se tengan preparados los patrones y la muestra de suelo se realizan las siguientes
mediciones:
Fijar la = 660 nm (longitud de mxima absorcin para el fosforo) en el equipo y

cuadrar el cero de absorbancia con el blanco de patrones.
Medir la absorbancia de los patrones de 10 y 20 ppm de fosforo
Retirar la muestra de suelo y cuadrar nuevamente el cero de absorbancia en el

equipo pero esta vez utilizando el blanco de landa.
Medir la absorbancia de la muestra de suelo agrcola a la mxima.
106
El siguiente anlisis de fosforo se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer

DINKO UV 2300 )
Solucin de K2Cr2O7 1N: disolver 4,904 gramos de dicromato de potasio estndar

primario y aforar hasta 1 litro con agua destilada.
Solucin extractora de fosforo: esta solucin ya se encontraba preparada por los

asistentes del laboratorio de suelos de la UFPS y se realiz disolviendo en 9 litros
de agua destilada 11,11 gramos de fluoruro de amonio, luego se aadi 250 mL de
HCL 1 M previamente estandarizado, se llev hasta 10 litros con agua destilada y se
mezcl bien. El pH de la solucin debe ser de 2,6. Los ajustes de pH se hacen
utilizando HCL o Hidrxido de amonio (NH4OH).
Solucin Coloreadora: esta solucin ya se encontraba preparada por los asistentes

del laboratorio de suelos de la UFPS y se realiz agregando 2,5 mL de la solucin A
y se llev a un baln de 100 mL con 25 mL de agua destilada. Luego se agreg 1
mL de solucin B y se llev hasta aforo con agua destilada.
Solucin A: se pes 4,3 gramos de molibdato de amonio y agregar en un baln de 1

litro, con 500 mL de agua destilada, posteriormente se agreg 0,1 gramos de tartrato
de antimonio y potasio, se adiciono 48 mL de cido sulfrico y se llev hasta aforo
con agua destilada.
Solucin B: se debe pesar 0,2 gramos de cido ascrbico en 100 mL de agua
destilada y se adiciona 50 mL de la solucin A, posteriormente se llev hasta aforo
con agua destilada en un baln de 200 mL.
107
Se tomaron tres muestras de suelo diferentes (Jardn, Csped y Monte) y se realizaron los
siguientes anlisis:
Determinacin de pH
Primero que todo se tamizaron las muestras de suelo para eliminar impurezas, se colocaron
en tres vasos de precipitado 25 gramos de cada muestra, luego se adiciono 25 mL de agua
destilada, posteriormente se agito vigorosamente cada 15 minutos durante 1 hora.
Se debe calibrar el potencimetro para medir el pH de las muestras, se deben seguir los
siguientes pasos:
Encender el potencimetro o pH-metro

el vaso con la solucin buffer
Una vez calibrado el potencimetro se realizan las medidas de pH para las tres muestras de
suelo. Nota: despus de cada medicin, se debe lavar con agua destilada los electrodos del
potencimetro.
MUESTRA pH
Jardn 6,9
Csped 7,8
Monte 8,4
La muestra de suelo (jardn), se encuentra dentro del rango ptimo de pH, este resultado nos
indica que el suelo presenta una ptima disponibilidad de nutrientes necesarios para la
formacin y crecimiento de las plantas.
108
Las muestras de suelo (csped y monte), presentan una alta alcalinidad. Estos suelos pueden
presentar una escasez de algunos elementos como hierro, magnesio, zinc, cobre y bario, los
cuales pueden afectar el crecimiento de las plantas. Para mejorar estos suelos se pueden
realizar algunas tareas como:
Aportar fertilizantes que contengan los anteriores nutrientes los cuales son escasos en
estos suelos.
Bajar el pH de estos suelos por medio de turba rubia (posee un pH de 3,5 y se agrega
en proporcin 50 % de suelo 50 % de turba rubia), adicionando azufre en polvo o
adicionando sulfato de hierro el cual acidifica el suelo y aporta gran cantidad de hierro.
Determinacin de Materia Orgnica
Se pesaron las muestras de suelo (previamente tamizado) y se coloc en un Erlenmeyer de 250

mL. Luego se tom otro Erlenmeyer pero a este no le adicionamos la muestra de suelo (nos
sirve como blanco de landa).
Se adiciono a cada Erlenmeyer 5 mL de K2Cr2O7 y luego le adicionamos 10 mL de cido

sulfrico concentrado, lo agitamos vigorosamente durante 1 minuto y lo dejamos reposar
por hora. Luego le agregamos 75 mL de agua destilada y aadimos 5 mL de cido
fosfrico al 85 % con 0,5 mL de difenil-amina el cual sirve como indicador. Se puede
observar como las muestras toman una coloracin parda oscura.
Se procedi a realizar la titulacin con FeSO4 y se percibi el viraje de color pardo oscuro a
verde esmeralda, indicador final de la titulacin. Los resultados se representan a
continuacin:
Muestra Peso de la muestra en gramos Volumen consumido de FeSO4 en ml
Blanco No tiene muestra 13,8

Jardn 0,1506 10,8
Csped 0,1510 11,4
Monte 0,1509 11,9
Se determin la materia orgnica por medio de la frmula:
% MO = 0,6708 (B-M) x N
Pm
109
Jardn:
% MO = 0,6708 (B-M) x N = 0,6708 (13,8 10,8) x 0,5 = 6,68%

Pm 0,1506
Csped:
% MO = 0,6708 (B-M) x N = 0,6708 (13,8 11,4) x 0,5 = 5,33%

Pm 0,1510
Monte:
% MO = 0,6708 (B-M) x N = 0,6708 (13,8 11,9) x 0,5 = 4,22%

Pm 0,1509
Determinacin de fosforo disponible Mtodo de Bray y Kurtz
El anlisis de fosforo se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer DINKO UV

2300 ), con celdas de plstico de paso ptico de 1 cm y en el rango visible.
Se pesaron las muestras de suelo (tamizadas y preparadas con anterioridad), y se colocaron en

un tubo de ensayo; luego le aadimos 10 mL de solucin extractora y agitamos vigorosamente
durante 1 minuto; luego se llev a un filtro y procedimos a filtrar la muestra, el filtrado se
recogi en un vasito de plstico (con la finalidad de evitar interferencias) y se deja reposar por
10 minutos.
Mientras reposa el filtrado de suelo se prepararon los diferentes patrones de fosforo as como
tambin se prepararon el blanco de patrones y el blanco de landa. Para realizar nuestro anlisis
se prepararon las siguientes soluciones:
Solucin estndar de fosforo 50 ppm: se disolvi 0,2195 gramos de fosfato di-

cido de potasio cristalizado (KH2PO4) y se llev con agua destilada hasta aforo de
1 litro.
Solucin estndar de fosforo 10 ppm: se tomaron 20 mL de la solucin estndar
de 50 ppm y luego se llev hasta aforo de 100 mL.
110
Solucin estndar de fosforo 20 ppm: se tomaron 40 mL de la solucin estndar
de 50 ppm y luego se llev hasta aforo de 100 mL.
Blanco de patrones: se tom 1 mL de agua destilada y adicionamos 9 mL de

solucin coloreadora.
Blanco de Landa: se tom 1 mL de agua destilada y le adicionamos 9 mL de

solucin coloreadora y 1 mL de solucin extractora.
Despus de obtener el filtrado y dejarlo reposar alrededor de 10 minutos, se tom con una
micro-pipeta 1 mL y se transfiri a un Erlenmeyer y luego se aadi a cada muestra 9 mL
de solucin coloreadora, las muestras tomaron una coloracin azulosa, pero unas con mayor
intensidad que otras.
Muestra Peso muestra en gramos Intensidad de color
Jardn 1,4259 g. Alto

Csped 1,4256 g. Bajo
Monte 1,4251 g. Intermedio
Con las muestras preparadas y los patrones listos se procedi a realizar las mediciones de
absorbancia. Nota: para realizar las mediciones espectrofotomtricas se debe primero
realizar una consulta exhaustiva del manual de funcionamiento del espectrofotmetro
DINKO UV 2300 (Ver Anexo uno), y antes de utilizarlo se debe contar con la presencia
y autorizacin del docente de turno.
Para nuestro anlisis se realizaron los siguientes ajustes en el espectrofotmetro:
Se enciende la lmpara de wolframio y se apaga la de deuterio, teniendo en

cuenta que nuestro anlisis es en el rango visible. Opcin 5 (sistema).
La longitud de onda se ajust en ( = )660 nm
Los resultados de los datos se ajustan en ABS (absorbancia)
Primero se ajusta el cero de absorbancia, se coloca el blanco de patrones en

el espectrofotmetro y se le da la opcin Auto Zero.
111
Se realizan las mediciones de Absorbancia de las soluciones patrn de 10 y
20 ppm de fosforo teniendo como referencia el blanco de patrones. Se
coloca en la celda de plstico la solucin patrn y se introduce en el porta-
cubeta del espectrofotmetro, se le da Forward y se mide la absorbancia del
patrn. Luego de medir la absorbancia del primer patrn se debe lavar la
celda con agua destilada y se debe purgar la celda de plstico con la
segunda solucin patrn, se llena la celda y se introduce en el
espectrofotmetro, posteriormente medir la absorbancia, los resultados
obtenidos fueron:
Solucin Patrn de fosforo Absorbancia
10 ppm 0,296
20 ppm 0,562
Luego de medir la absorbancia de los patrones de fosforo se ajusta

nuevamente el cero de absorbancia, se coloca el blanco de landa en el
Se realizan las mediciones de Absorbancia de las muestras de suelo (jardn,

csped, monte), teniendo como referencia el blanco de landa. Se coloca en
la celda de plstico la muestra de suelo y se introduce en el porta-cubeta del
espectrofotmetro, se le da Forward y se mide la absorbancia. Luego de
medir la absorbancia de la primera muestra de suelo se debe lavar la celda
con agua destilada y se debe purgar la celda de plstico con la segunda
muestra de suelo, se llena la celda y se introduce en el espectrofotmetro,
posteriormente medir la absorbancia, este procedimiento se realiza de la
misma manera con la tercera muestra de suelo los resultados obtenidos
fueron:
Muestra de suelo Absorbancia
Jardn 0,510
Csped 0,112
Monte 0,361
112
7.6 CUESTIONARIO
1. Determinar la concentracin de fosforo (P) en la muestra de suelo y reportarla en

ppm.
R/ Se le busco la regresin lineal a los patrones de fosforo y se pudo establecer que la

regresin lineal fue de r = 0,99952542, tambin se determin a = 5x10-3 y b = 0,0281. Con
estos datos se busc la concentracin de las muestras de suelo.
Muestra de suelo Absorbancia
Jardn 0,510
Csped 0,112
Monte 0,361
Se calcul la concentracin por medio de la siguiente formula:
A = bC + a
C = A- a
b
Jardn:
C = 0,510 - 5x10-3 = 17,97 ppm de fosforo

0,0281
Csped:
C = 0,112 - 5x10-3 = 3,81 ppm de fosforo

0,0281
Monte:
C = 0,361 - 5x10-3 = 12,67 ppm de fosforo

0,0281
113
2. Teniendo en cuenta los rangos de pH, Qu se debe hacer cuando se tienen suelos
cidos o suelos bsicos?
R/ hay varios factores que influyen sobre la acidez de los suelos. El calcio, el magnesio y
el potasio, se eliminan del suelo a travs de la erosin, la lixiviacin y la recoleccin del
cultivo, incrementndose la acidez de los suelos. Adems, la utilizacin de fertilizantes
acidificantes incrementa los niveles de acidez de los suelos. Por ejemplo, la conversin de
los fertilizantes amnicos a nitratos ocasiona la formacin de suelos cidos. Por ello, es
importante emplear fertilizantes que no aumenten la acidez (urea, nitrato de calcio, nitrato
de amonio y superfosfato). Sin embargo, el pH del suelo puede ajustarse mediante la
aplicacin de enmiendas. En suelos cidos se pueden emplear sustancias correctoras como
cal, piedra caliza, entre otras.
Los niveles altos de pH en los suelos pueden depender de diferentes elementos, por lo que
hay diversos mtodos para su correccin. En suelos ricos en piedra caliza se recomienda
aadir sustancias orgnicas y en los suelos alcalino-salinos la alcalinidad se debe a la
presencia de sales, en particular a una alta concentracin de sodio. Si la alcalinidad esta
causada por sodio, se recomienda aadir sustancias como el yeso (sulfato de calcio), sulfuro
u otros sulfricos.
3. Cules son las funciones de los principales nutrientes en las plantas y cules son
los sntomas de deficiencia?
R/
Nutriente Funcin Sntomas de Deficiencia
Nitrgeno (N) Estimula el crecimiento Crecimiento atrofiado; color

rpido, favorece la sntesis de amarillo en las hojas inferiores;
clorofila, de aminocidos y tronco dbil; color verde claro.
protenas
Fsforo (P) Estimula el crecimiento de la Color purpura en las hojas inferiores
raz; favorece la formacin de y tallos, manchas muertas en hojas y
la semilla; participa en la frutos.
fotosntesis y respiracin.
Potasio (K) Acenta el vigor de la planta; Oscurecimiento del margen de los
aporta resistencia a las bordes de las hojas inferiores; tallos
enfermedades; fuerza al tallo dbiles.
y calidad a la semilla.
Calcio (Ca) Constituyente de las paredes Hojas terminales deformadas o
celulares; colabora en la muertas, color verde claro.
divisin celular.
114
Magnesio (Mg) Componente de la clorofila, Amarilleo entre los nervios de las
de las enzimas y de las hojas inferiores (clorosis)
vitaminas; colabora en la
incorporacin de nutrientes.
Azufre (S) Esencial para la formacin de Hojas superiores amarillas,
aminocidos y vitaminas; crecimiento atrofiado.
aporta el color verde a las
hojas.
Cobre (Cu) Componente de las enzimas; Yemas terminales y hojas muertas;
colabora en la sntesis de color verde-azulado.
clorofila y la respiracin.
Hierro (Fe) Catalizador en la formacin Clorosis entre los nervios de las
de clorofila; componente de hojas.
las enzimas.
Molibdeno (Mo) Colabora con la fijacin de Crecimiento atrofiado de la planta;
nitrgeno y con la sntesis de color amarillo en las hojas
protenas. inferiores.


LABRADOR Moreno Juana. La Materia Orgnica en los Agrosistemas. 1a ed.

Ediciones Mundi-Prensa. Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentacin de
Madrid, 1996.
MARN Luisa Mara., ARAGN Pilar., BENITO Gmez Carmen. Manual de

laboratorio. Editorial Universidad Politcnica de Valencia 2002.
Artculo en linea, Soil and Plant Analysis Laboratory Manual, Capitulo 5 (Soil
Chemical Analysis) [En lnea], Citada (3 marzo de 2012), disponible en <URL:
http:// www. icarda.org/publications/lab_manual/read.htm
Artculo en Pdf, Soil Analysis Method 1 (SA 01), Pre-treatment of samples. [En
lnea], Citada (10 marzo de 2012), disponible en <URL: http:// www.icp-
forests.org/pdf/Chapt_3a_2006(2).pdf.
115
PRCTICA N 8
ADITIVIDAD DE ABSORBANCIAS, DETERMINACIN

ESPECTROFOTOMTRICA SIMULTNEA DE CROMO Y MANGANESO
8.1 OBJETIVOS
Conocer los trminos y conceptos sobre la aditividad de absorbancias y la absorcin

de radiacin en la regin visible del espectro electromagntico.
Aplicar la Ley de Beer, en la determinacin de un anlisis multicomponente.
Identificar los picos de mxima absorcin para Cr y Mn.
Determinar la concentracin de Cr y Mn en una mezcla de sustancias absorbentes.
Balones aforados de 100 y 500 mL H2SO4 [concentrado]

Vaso de precipitado de 250, 500 mL Solucin de KMnO4 (1 x 10-3 N)
Pipetas aforadas de 5, 10, 25 mL Solucin de K2Cr2O7 (2,5 x 10-3 N)
Pipeta graduada de 10 mL Solucin de H2SO4 [1.9]
Esptula, varilla de vidrio Agua destilada
Frasco lavador, pera de succin
Balanza analtica
Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias
qumicas; al remplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin, se puede estudiar la
absorcin de sustancias, no solamente en el rango del espectro visible, sino tambin en el
rango ultravioleta e infrarrojo del espectro electromagntico. La espectrometra de
absorcin molecular consiste en la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe
un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a
una determinada longitud de onda.
116
Las medidas espectromtricas se basan en la ley de Lambert-Beer, que es una de las
ecuaciones que ms se utilizan en los anlisis instrumentales, ya que relaciona la absorcin
de la radiacin con la concentracin de un compuesto en disolucin. La espectroscopia de
absorcin molecular se basa en la medida de la transmitancia (T), o de la Absorbancia (A),
de disoluciones que se encuentran en cubetas transparentes que tienen un camino ptico de
b cm. Normalmente la concentracin (C) de un analito absorbente est relacionada
linealmente con la absorbancia.
Es posible el anlisis de varias especies absorbentes presentes en una muestra sin llevar a
cabo separaciones previas de cada uno de los analitos, aprovechando el hecho de que cada
sustancia posee caractersticas espectrales diferentes. En el anlisis simultneo o
multicomponente se aplica el principio de aditividad de las absorbancias o propiedad
aditiva de la absorbancia:
En la anterior ecuacin, se indica que la absorbancia total medida a una longitud de onda,
es igual a la suma de las absorbancias de los componentes individuales y que el aporte de
cada componente a la absorbancia total es funcin del valor del coeficiente de absortividad
molar de cada especie absorbente (y de la concentracin) para una longitud de onda dada.
Es decir, en un sistema con varias especies absorbentes de la misma concentracin si se
mide la absorbancia a una longitud de onda determinada, la especie que presentara una
mayor contribucin a la absorbancia total ser la que presente mayor valor del coeficiente
de absortividad molar ().
Para una mezcla con componentes absorbentes es posible establecer la concentracin de

ellos si se plantean, mnimo ecuaciones de aditividad para longitudes de onda. Para el
caso de una solucin que contiene dos especies absorbentes a y b, se escogern como
mnimo dos longitudes de onda 1 y 2, para la medida de la absorbancia total de la mezcla y
se plantearan las ecuaciones:
Nota: la seleccin de estas longitudes de onda deben hacerse de manera que a una de ellas
el componente a absorba claramente ms que el otro, mientras que en la otra longitud de
onda ocurra lo contrario.
117
Cuando se lleva a cabo un anlisis multicomponente o simultneo se deben tener en cuenta
algunas condiciones como:
Los componentes no deben presentar interacciones qumicas entre s ni con el

solvente, es decir, las absorbancias deben ser aditivas si cada especie en la mezcla
se comporta en forma independiente.
Si los espectros de los componentes tienen una gran similitud, el anlisis ser ms
difcil e inexacto.
La seleccin de las longitudes de onda analticas ptimas es el parmetro crtico

para obtener buenos resultados. Generalmente se escogen longitudes de onda donde
un componente presente absorcin alta, mientras el otro componente, a dicha
longitud de onda, presente una absorcin mnima o no presente absorcin.
El anlisis multicomponente o simultneo se puede resolver por medio de la determinacin

de las asertividades molares () de los componentes absorbentes, a las diferentes longitudes
de onda y resolviendo el sistema de ecuaciones podemos identificar las concentraciones de
los componentes absorbentes contenidos en la muestra problema.
8.4 PROCEDIMIENTO
i) Solucin patrn de KMnO4 (1 x 10-3 N): pesar 0,0032 gramos de KMnO4 en un

vaso de precipitado, diluir con un poco de agua destilada y llevar hasta 100 mL con
H2SO4 diluido [1,9].
j) Solucin patrn de K2Cr2O7 (2,998 x 10-3 N): pesar 0,0147 gramos de K2Cr2O7 en
un vaso de precipitado, diluir con un poco de agua destilada y llevar hasta 100 mL
con H2SO4 diluido [1,9].
k) Solucin diluida de H2SO4 [1.9]: transferir 50 mL de H2SO4 concentrado a un

baln aforado de 500 mL y llevar hasta aforo con agua destilada.
l) Muestra problema: ser una mezcla de las soluciones a y b, se le entregara a cada

grupo al inicio de la prctica por parte del docente de turno.
118
8.4.2 Determinacin:
Cuando se tengan las soluciones y la muestra problema ya preparadas se deben realizar las
siguientes mediciones espectrofotomtricas:
Realizar un barrido espectral entre 400 750 nm sobre la muestra de KMnO4,

utilizando como blanco H2SO4 [1:9], para obtener el espectro de absorcin y
determinar la longitud de onda de mxima absorcin ( mxima KMnO4).
Realizar un barrido espectral entre 400 750 nm sobre la muestra de K2Cr2O7,

utilizando como blanco H2SO4 [1:9], para obtener el espectro de absorcin y
determinar la longitud de onda de mxima absorcin ( mxima K2Cr2O7). Nota:
cuando se realiza una medicin espectrofotomtrica la celda que contiene la
muestra, se debe enjuagar previamente con agua destilada y se debe purgar con la
muestra que se desea analizar.
Fijar la mxima KMnO4 en el equipo y cuadrar el cero de absorbancia con el

blanco (H2SO4 1:9). Para cuadrar el cero de absorbancia se introduce en el porta-
cubeta la solucin diluida de H2SO4 y se oprime la opcin Auto Zero.
Medir la absorbancia de los patrones a la mxima KMnO4 y determinar la

absortividad molar ().
Fijar la mxima K2Cr2O7 en el equipo y cuadrar el cero de absorbancia con el

blanco (H2SO4 1:9). Para cuadrar el cero de absorbancia se introduce en el porta-
cubeta la solucin diluida de H2SO4 y se oprime la opcin Auto Zero.
Medir la absorbancia de los patrones a la mxima K2Cr2O7 y determinar la

Medir la absorbancia de la muestra problema a las dos longitudes de onda de

mxima absorcin ( mxima KMnO4 y mxima K2Cr2O7) y determinar la
Determinar la concentracin de Cr y Mn en la muestra problema.
119
El siguiente anlisis de aditividad de absorbancias se realiz en el espectrofotmetro

(spectrophotometer DINKO UV 2300 )
Figura 28. Espectrofotmetro spectrophotometer DINKO UV 2300
Se prepararon las siguientes soluciones para el desarrollo de la prctica Aditividad de

Absorbancias:
Antes de preparar las soluciones se debe realizar la ecuacin balanceada para la reaccin de
los patrones con el H2SO4 y la obtencin de iones Mn+2 y el Cr+3:
MnO4- + 8 H+ + 5 e- Mn+2 + 4 H2O
Cr2O7- + 14 H+ + 6 e- 2 Cr+3 + 7 H2 O
Solucin patrn de KMnO4 (1 x 10-3 N): para preparar esta solucin se utiliz una
solucin de KMnO4 que se encontraba prepara en el laboratorio de qumica de la
UFPS y su concentracin era de 0,02 M. Los clculos utilizados se presentan a
continuacin:
120
Se transforma la concentracin del KMnO4 en Normalidad:
N = Equivalente soluto
Litros de solucin
0,02 mol KMnO4 x 5 equivalentes de Mn+2 = 0,1 N

1L 1 mol de KMnO4
Con la Normalidad de la solucin de KMnO4 (0,1 N), se determina el volumen necesario

para preparar 100 mL de una solucin de KMnO4 (1 x 10-3 N):
V1C1=V2C2
V1 = V2C2
C1
V1 = 100 mL x 1 x 10-3 N = 1 ml de la solucin de KMnO4 (0,1 N)

0,1 N
La Solucin patrn de KMnO4 (1 x 10-3 N): se prepar transfiriendo a un baln aforado

de 100 mL, con una pipeta aforada, 1 mL de la solucin de KMnO4 (0,1 N) y llevando hasta
aforo con agua destilada.
Solucin patrn de K2Cr2O7 (2,998 x 10-3 N): se pes en la balanza analtica

0,0147 gramos de K2Cr2O7 en un vaso de precipitado, se diluy con un poco de
agua destilada y se llev hasta 100 mL en un baln aforado con H2SO4 diluido [1,9].
Se realizaron los siguientes clculos para determinar la N de la solucin de K2Cr2O7:
0,0147 g de K2Cr2O7 = 0,1 L solucin K2Cr2O7 x N equiv. x 294,188 g K2Cr2O7

1L 6 equivalentes
N = 0,0147 g K2Cr2O7 / 49,03 g K2Cr2O7 = 0,1 L solucin K2Cr2O7 x N
N = 2,998 x 10- 4 / 0,1 L solucin K2Cr2O7 = 2,998 x 10-3 N
La Solucin patrn de K2Cr2O7 preparada posee una concentracin de 2,998 x 10-3 N
121
Solucin diluida de H2SO4 [1:9]: se transfiri 50 mL de H2SO4 concentrado (95 %)
a un baln aforado de 500 mL y se llev hasta aforo con agua destilada.
Muestra problema: esta solucin se prepar con la finalidad de utilizarla como la

mezcla problema para el anlisis de Cr y Mn. Es una mezcla de las soluciones
patrones de KMnO4 (1 x 10-3 N) y K2Cr2O7 (2,998 x 10-3 N). La mezcla problema
utilizada en nuestro anlisis se prepar adicionando en un baln aforado de 100 mL,
40 mL de la solucin patrn de KMnO4 (1 x 10-3 N) y 60 mL de la solucin patrn
de K2Cr2O7 (2,998 x 10-3 N).
Figura 29. Preparacin de los patrones y la muestra problema para el anlisis de aditividad
de absorbancias
Cuando se tienen los patrones preparados y la muestra problema, se procedi a realizar las
mediciones respectivas.
El anlisis de aditividad de absorbancias se realiz en el espectrofotmetro

(spectrophotometer DINKO UV 2300 ), con celdas de plstico de paso ptico de 1 cm y
en el rango visible. Nota: para realizar las mediciones espectrofotomtricas se debe
primero realizar una consulta exhaustiva del manual de funcionamiento del
espectrofotmetro DINKO UV 2300 (Ver Anexo: uno), y antes de utilizarlo se debe
contar con la presencia y autorizacin del docente de turno.
122
limpia la celda de plstico y se introduce una muestra de la solucin patrn de KMnO4, en
nuestro caso seguimos los siguientes pasos:
Se enciende la lmpara de wolframio, teniendo en cuenta que nuestro

anlisis es en el rango visible. Opcin 5, W1 lamp [on] (sistema).
Se introduce como blanco H2SO4 [1:9] y en la porta-cubeta de muestra se
coloca la solucin de KMnO4.
Se oprime forward y se mide la longitud de onda ( )de mxima absorci.n
El resultado obtenido como pico mximo de absorcin fue de 546,5 nm.

Iniciamos el espectrofotmetro en men de inicio, photometry, parameter

setup, data mode [Modo de los datos ABS, %T, C], WL (nm) [longitud de
onda].
La longitud de onda se ajust en ( = )546,5 nm.
El modo de los datos se ajusta en ABS (absorbancia).
Con el espectrofotmetro ajustado se procedi a cuadrar el cero de absorbancia, para el cual

se utiliz como blanco H2SO4 [1:9], y se coloc en el porta-cubeta una muestra de H2SO4
[1:9], se le da la opcin Auto Zero.
Se realizaron las mediciones de Absorbancia, a la longitud de onda ( = 546,5 nm)

de las soluciones patrn y la muestra problema. Se coloc la celda de plstico en el
porta-cubetas con la solucin patrn de KMnO4 y se cierra la cubierta del
espectrofotmetro, se le dio Forward y se mide la absorbancia del patrn. Este
procedimiento se realiza tambin para la solucin patrn de K2Cr2O7 y la muestra
problema. Nota: antes de realizar la medicin, purgar con el patrn correspondiente
la celda de plstico.
123
MUESTRA CONCENTRACIN Longitud de onda ABSORBANCIA
Sln. patrn de KMnO4 1 x 10-3 N 546,5 nm 0,127

Sln. patrn de K2Cr2O7 2,998 x 10-3 N 546,5 nm 0,005
Muestra problema Desconocida 546,5 nm 0,147
Tabla 11. Absorbancias obtenidas a la longitud de onda de 546,5 nm
Figura 30. Soluciones patrones analizadas a la longitud de onda de 546,5 nm
Posteriormente se realiz un nuevo anlisis espectrofotomtrico, en el cual se realiz un

barrido espectral entre 400 -700 nm en el espectrofotmetro. Primero se limpia la celda de
plstico y se introduce una muestra de la solucin patrn de K2Cr2O7, en nuestro caso
seguimos los siguientes pasos:
Se enciende la lmpara de wolframio, teniendo en cuenta que nuestro

anlisis es en el rango visible. Opcin 5, W1 lamp [on] (sistema).
Se introduce como blanco H2SO4 [1:9] y en la porta-cubeta de muestra se
coloca la solucin de K2Cr2O7.
Se oprime forward y se mide la longitud de onda ( )de mxima absorcin.
El resultado obtenido como pico mximo de absorcin fue de 436,5 nm.
124

onda].
La longitud de onda se ajust en ( = )436,5 nm.
El modo de los datos se ajusta en ABS (absorbancia).
Con el espectrofotmetro cuadrado con la nueva longitud de onda se realizan los siguientes
pasos:
Primero se ajusta el cero de absorbancia, se coloca el blanco en el espectrofotmetro

y en la cubeta de muestra se introduce H2SO4 [1:9], se le da la opcin Auto Zero.
Se realizaron las mediciones de Absorbancia, a la longitud de onda ( = 436,5 nm)

de las soluciones patrn y la muestra problema. Se coloc en la celda de plstico la
solucin patrn de K2Cr2O7 y se introduce en el espectrofotmetro, se le dio
Forward y se mide la absorbancia del patrn. Este procedimiento se realiza tambin
para la solucin patrn de KMnO4 y la muestra problema. Los datos obtenidos se
muestran en la siguiente tabla:

Muestra problema Desconocida 436,5 nm 0,049
Tabla 12. Absorbancias obtenidas a la longitud de onda de 436,5 nm
125
8.6 CUESTIONARIO
1. Determinar las absortividades molares (), de los patrones de KMnO4 y K2Cr2O7 a

las longitudes de onda de mxima absorcin.
R/ Primero se identificaron en la prctica los picos de mxima absorcin para las especies
de KMnO4 y K2Cr2O7, con base en estos resultados se realizaron los clculos necesarios
para determinar la absortividad molar () de cada especie.
a) Longitud de onda de mxima absorcin ( mxima KMnO4) = 546,5 nm

Para determinar la absortividad molar se debe tener en cuenta que:
Dnde:
A = absorbancia de la muestra
b = paso ptico de la cubeta en cm (para el espectrofotmetro DINKO UV 2300 II = 1 cm)
Solucin patrn de KMnO4 (546,5 nm): Tenemos que la concentracin de la

Solucin patrn de KMnO4 es de 1 x 10-3 N. Se realizaron los clculos para
determinar la absortividad molar () de la siguiente manera:
Lo primero que se debe hacer es transformar la concentracin en mol/L:
N = Equivalente soluto M = moles de soluto

Litros de solucin Litros de solucin
1 x 10-3 equiv. KMnO4 x 1 mol de KMnO4 = 2 x 10-4 M KMnO4

1 L solucin 5 equivalentes de Mn+2
126
Con la concentracin identificada se procedi a determina la absortividad molar para el
patrn de KMnO4 a la longitud de mxima absorcin ( mxima KMnO4) = 546,5 nm
= ( )(
( ) )
Solucin patrn de K2Cr2O7 (546,5 nm): Tenemos que la concentracin de la

Solucin patrn de K2Cr2O7 es de 2,998 x 10-3 N. Se realizaron los clculos para
Lo primero que se debe hacer es transformar la concentracin en mol/L:
N = Equivalente soluto M = moles de soluto

Litros de solucin Litros de solucin
2,998 x 10-3 equiv. K2Cr2O7 x 1 mol de K2Cr2O7 = 4,997 x 10-4 M K2Cr2O7

+3
1 L solucin 6 equivalentes de Cr
Con la concentracin identificada se procedi a determina la absortividad molar para el

patrn de K2Cr2O7 a la longitud de mxima absorcin ( mxima KMnO4) = 546,5 nm
= ( )(
( ) )
b) Longitud de onda de mxima absorcin ( mxima K2Cr2O7) = 436,5 nm
Sln. patrn de KMnO4 2 x 10-4 M 436,5 nm 0,002

Sln. patrn de K2Cr2O7 4,997 x 10-4 M 436,5 nm 0,110
127
Se determina la absortividad molar () de las soluciones patrn:
Dnde:
A = absorbancia de la muestra
b = paso ptico de la cubeta en cm (para el espectrofotmetro DINKO UV 2300 II = 1 cm)
Solucin patrn de KMnO4 (436,5 nm): Tenemos que la concentracin de la

Solucin patrn de KMnO4 es de 2 x 10-4 M. Se realizaron los clculos para
= ( )(
( ) )
Solucin patrn de K2Cr2O7 (436,5 nm): Tenemos que la concentracin de la

Solucin patrn de K2Cr2O7 es de 4,997 x 10-4 M. Se realizaron los clculos para
= ( )(
( ) )
Con los datos obtenidos anteriormente se puede establecer:
Muestra mxima Absorbancia Absortividad Molar
Sln. patrn de KMnO4 546,5 nm 0,127 635 L/mol.cm

Sln. patrn de KMnO4 436,5 nm 0,002 10 L/mol.cm
Sln. patrn de K2Cr2O7 546,5 nm 0,005 10,01 L/mol.cm
Sln. patrn de K2Cr2O7 436,5 nm 0,110 220,13 L/mol.cm
Tabla 13. Absortividad molar (), de las soluciones patrn a las diferentes
longitudes de onda mxima.
128
2. Determinar la concentracin (N), de Cr y Mn en la muestra problema.
R/ Para determinar la concentracin de Cr y Mn en la muestra problema, se deben tener en

cuenta los resultados de las absortividades molares () de las soluciones patrn a las
diferentes longitudes de onda mxima. Los clculos utilizados se presentan a continuacin:
Para la muestra problema se obtiene una ecuacin a cada longitud de onda mxima,
obtenindose el siguiente sistema de ecuaciones.
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
MUESTRA LONGITUD DE ONDA ABSORBANCIA

Muestra problema 546,5 0,147
Muestra problema 536,5 0,049
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,147 = 635 L/mol.cm x 1cm x C (KMnO4) + 10,01 L/mol.cm x 1cm x C (K2Cr2O7) 1
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,049 = 10 L/mol.cm x 1cm x C (KMnO4) + 220,13 L/mol.com x 1cm x C (K2Cr2O7) 2
Despejo Concentracin (KMnO4) en la ecuacin 2:
C (KMnO4) = 0,049 - 220,13 L/mol.com C (K2Cr2O7)

10 L/mol.cm
C (KMnO4) = 4,9 x 10-3 - 22,013 C (K2Cr2O7) 3
129
Remplazamos la ecuacin 3, en la ecuacin 1:
0,147 = 635 L/mol.cm x (4,9 x 10-3 - 22,013 C (K2Cr2O7)) + 10,01 L/mol.cm C (K2Cr2O7)
0,147 = 3,1115 - 13978,25 C (K2Cr2O7) + 10,01 C (K2Cr2O7)
13978,25 C (K2Cr2O7) - 10,01 C (K2Cr2O7) = 3,1115 - 0,147
13968,24 C (K2Cr2O7) = 2,9645
C (K2Cr2O7) = 2,9645
13968,24
C (K2Cr2O7) = 2,122 x 10-4 M 4
Remplazo la ecuacin 4, en la ecuacin 3:
C (KMnO4) = 4,9 x 10-3 - 22,013 C (K2Cr2O7)
C (KMnO4) = 4,9 x 10-3 - 22,013 (2,122 x 10-4 M)
C (KMnO4) = 4,9 x 10-3 - 4,671 x 10-3
C (KMnO4) = 2,29 x 10-4 M
Con las concentraciones de los patrones de KMnO4 y K2Cr2O7 en la muestra problema, se

procedi a determinar la Normalidad de Mn+2 y Cr+3:
2,29 x 10-4 mol KMnO4 x 5 equivalentes de Mn+2 = 1,145 x 10-3 N Mn+2

1 L sln 1 mol de KMnO4
2,122 x 10-4 mol K2Cr2O7 x 6 equivalentes de Cr+3 = 1,273 x 10-3 N Cr+3

1 L sln 1 mol de K2Cr2O7
130
3. Se realiz un anlisis de aditividad de absorbancias sobre dos complejos qumicos
que contienen Co y Ni. El anlisis arrojo los siguientes datos:
Muestra Absortividad molar () a 365 nm Absortividad molar () a 700 nm

Co 3529 L/mol.cm 428,9 L/mol.cm
Ni 3228 L/mol.cm 10,2 L/mol.cm
Posteriormente se analizaron dos soluciones a y b, para las cuales se obtuvieron las

siguientes absorbancias a las diferentes longitudes de onda de mxima absorcin:
Solucin Absorbancia a 365 nm Absorbancia a 700 nm

a 0,598 0,039
b 0,902 0,072
Cul es la concentracin de Co y Ni en cada una de las anteriores soluciones?

Nota: para realizar el anlisis se utilizaron cubetas de plstico de paso ptico de 1
cm.
R/ Se realizaron los siguientes clculos para determinar la concentracin de Co y Ni:
Primero se trabaj con la solucin a:
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,598 = 3529 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 3228 L/mol.cm x 1cm x C (Ni) 1
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,039 = 428,9 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 10,2 L/mol.com x 1cm x C (Ni) 2
Despejo Concentracin (Co) en la ecuacin 2:
C (Co) = 0,039 - 10,2 L/mol.com C (Ni)

428,9 L/mol.cm
C (Co) = 9,09 x 10-5 - 0,0237 C (Ni) 3
131
0,598 = 3529 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 3228 L/mol.cm x 1cm x C (Ni)

0,598 = 3529 (9,09 x 10-5 - 0,0237 C (Ni)) + 3228 C (Ni)
0,598 = 0,3208 - 83,63 C (Ni) + 3228 C (Ni)
0,598 0,3208 = 3228 C (Ni) - 83,63 C (Ni)
0,2772 = 3144,37 C (Ni)
C (Ni) = 0,2772
3144,37
C (Ni) = 8,82 x 10-5 M 4
C (Co) = 9,09 x 10-5 - 0,0237 C (Ni)

C (Co) = 9,09 x 10-5 - 0,0237 (8,82 x 10-5 M)
C (Co) = 9,09 x 10-5 - 2,09 x 10-6
C (Co) = 8,89 x 10-5 M
Luego se trabaj con la solucin b:
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,902 = 3529 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 3228 L/mol.cm x 1cm x C (Ni) 1
( ) ( ) ( ) ( ) ( )
0,072 = 428,9 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 10,2 L/mol.com x 1cm x C (Ni) 2
132
Despejo Concentracin (Co) en la ecuacin 2:
C (Co) = 0,072 - 10,2 L/mol.com C (Ni)

428,9 L/mol.cm
C (Co) = 1,68 x 10-4 - 0,0237 C (Ni) 3
0,902 = 3529 L/mol.cm x 1cm x C (Co) + 3228 L/mol.cm x 1cm x C (Ni)

0,902 = 3529 (1,68 x 10-4 - 0,0237 C (Ni)) + 3228 C (Ni)
0,902 = 0,593 - 83,63 C (Ni) + 3228 C (Ni)
0,902 0,593 = 3228 C (Ni) - 83,63 C (Ni)
0,309 = 3144,37 C (Ni)
C (Ni) = 0,309
3144,37
C (Ni) = 9,83 x 10-5 M 4
C (Co) = 1,68 x 10-4 - 0,0237 C (Ni)

C (Co) = 1,68 x 10-4 - 0,0237 (9,83 x 10-5 M)
C (Co) = 1,68 x 10-4 - 2,33 x 10-6
C (Co) = 1,66 x 10-4 M
4. Qu interferencias se pueden presentar en el desarrollo del anlisis por aditividad

de absorbancias?
R/ se pueden presentar diferentes interferencias, la ms comn de procedimiento, en la

cual el analista omite alguna precaucin que se debe tener en cuenta tras el desarrollo del
anlisis y los resultados se vern alterados. Si los componentes de la muestra analizada
(mezcla) absorben a la misma longitud de onda, o a una muy cercana, los espectros se
sobreponen y la intensidad de la banda aumenta, ya que las absorbancias son aditivas.
133


ALONSO Sierra I., QUINTANILLA Damin., RUIZ Santiago., ZARCERO

Morante Sonia. Anlisis Instrumental, captulo 2 Ley de Lambert-Beer,
Aplicaciones Cuantitativas. Editorial Netbiblo, Espaa 2010.
VZQUEZ Salas Pedro. Laboratorio de Anlisis Instrumental, Prctica N 8

Aditividad de la ley de Beer. Morelia, Mich, 21 noviembre de 2008.
DINKO Instruments, Manual de Instrucciones UV- VIS Espectrofotmetro UV

2300 II. DINTER S.A. 1a edicin 2011.
UNAL, Universidad Nacional de Colombia, sede Bogot. Direccin Nacional de

Servicios Acadmicos Virtuales. Contenidos en lnea, Qumica Analtica II,
Determinaciones Simultneas o Anlisis Multicomponente, disponible en <URL:
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap13/03_01_01.
htm.
134
PRCTICA N 9
DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE CAFENA EN UNA BEBIDA

ENERGIZANTE, MTODO DE LA CURVA DE CALIBRACIN
9.1 OBJETIVOS
Conocer la importancia de la absorcin de radiacin en la regin ultravioleta del

espectro electromagntico.
Aplicar el mtodo de la curva de calibracin para determinar la concentracin de
una muestra desconocida.
Determinar la cantidad de cafena en una bebida energizante.
6 Balones aforados de 50 mL Solucin acuosa de cafena 100 ppm

2 Balones aforados de 100 mL Bebida Energizante (RED BULL, O
Vasos de precipitado de 50 y 100 PEAK, entre otra bebida de gusto
mL del alumno)
Pipetas aforadas de 1, 5, 10 mL
Pipeta graduada de 10 y 25 mL
Frasco lavador
Pera de succin, varilla agitadora
La cafena es un alcaloide natural que se encuentra en las hojas, semillas o frutos de ms de

63 especies de plantas en todo el mundo. La mayor fuente de cafena y las ms comunes
son el caf, cacao en grano, las nueces y hojas de t.
135
Ficha tcnica:
Cafena 1,3,7 trimetilxantina
Estado: solido
Densidad: 1,230 g/mL
Masa Molar: 194,19 g/mol
Punto de fusin: 510 K (237 C)
Alrededor del mundo el consumo de productos derivados de estas especies suministra una
alta tasa de cafena, por tal razn se conoce como la droga ms comn consumida por miles
de personas alrededor de todo el mundo. La popularidad de la cafena se deriva
principalmente del hecho que es una sustancia farmacolgicamente activa y estimula
levemente el sistema nervioso central. En general se acepta que hay poco riesgo de dao si
una persona consume menos de 300 mg de cafena al da o dos. Sin embargo, a veces si se
consume cafena por parte de mujeres en estado de embarazo puede ocasionar ansiedad o
estrs, por lo tanto se recomienda reducir el consumo en menos de 200 mg de cafena al
da.
Si bien no hay una reglamentacin clara o requisitos para controlar la cantidad de cafena
en los productos alimenticios, en especial las bebidas energizantes, se debe implementar
tcnicas de anlisis que permitan identificar la cantidad de cafena presente en los
diferentes productos alimenticios. La tcnica analtica ms utilizada por los grandes
laboratorios de todo el mundo para identificar la cantidad de cafena es la cromatografa
liquida o (HPLC), esta tcnica representa para los laboratorios una herramienta confiable,
debido a que se elimina considerablemente los errores representados por interferencias que
pueden afectar el desarrollo de un anlisis, por tal razn esta tcnica instrumental es ms
confiable en comparacin con otros mtodos. El HPLC es un recurso costoso y altamente
tcnico que no se encuentra tpicamente en laboratorios pequeos y de enseanza por parte
de las universidades, por tanto este problema debe ser solucionado por dichos laboratorios
implementando la utilizacin de otra tcnica de anlisis instrumental.
El mtodo de anlisis alternativo al HPLC para identificar la cantidad de cafena en un

producto alimenticio es por medio de la espectroscopia ultravioleta, por la cual se puede
cuantificar el contenido de cafena principalmente en bebidas gaseosas y bebidas
energizantes. La cafena puede ser extrada por disolventes clorados tales como el
diclorometano y cloroformo, tcnicas comnmente empleadas por diferentes industrias.
Despus de que la cafena es extrada puede ser analizada directamente por disolucin y
medicin de la absorbancia de patrones a la longitud de onda de 270 nm.
136
9.4 PROCEDIMIENTO
5. Solucin acuosa de cafena 100 mg/L (100 ppm): pesar 0,0251 gramos de cafena y
adicionarlo en un vaso de precipitado con 50 mL de agua destilada, agitar
vigorosamente hasta disolucin, posteriormente transferir la solucin en un baln de
250 mL y llevar hasta aforo con agua destilada.
6. Preparacin de la Bebida Energizante: se toman 50 mL de la bebida y se transfiere

a un vaso de precipitado, agitar hasta eliminar las burbujas y dejar reposar por 15
minutos.
9.4.2 Preparacin de patrones para la curva de calibracin:
Preparar las soluciones patrn de cafena 0, 4, 8, 12, 16, 20 ppm a partir de la solucin acuosa
de 100 ppm.
N Patrn V solucin patrn de Volumen final en mL Concentracin final

cafena 100 ppm (ppm)
1 0 (blanco) 50 0
2 2 50 4
3 4 50 8
4 6 50 12
5 8 50 16
6 10 50 20
Tabla 14. Preparacin de patrones para realizar la curva de calibracin.
9.4.3 Determinacin:
Cuando se tengan preparadas todas las muestras y patrones se realizan las siguientes
mediciones en es espectrofotmetro:
Antes de comenzar las mediciones se debe leer el manual de funcionamiento del

espectrofotmetro, para tener una idea clara de los procedimientos a realizar.
137
Realizar un barrido espectral entre 200 700 nm sobre una muestra de la solucin
acuosa de cafena, para obtener el espectro de absorcin y determinar la longitud de
onda ( )de mxima absorcin ( mxima).
Introducir en la celda de plstico el patrn N 1 y medir la absorbancia a la

mxima, repetir este procedimiento con los dems patrones. Nota: despus de
terminar cada medicin se debe limpiar la celda con agua destilada y purgarla con
la solucin patrn siguiente; este procedimiento se debe repetir hasta finalizar las
mediciones de todos los patrones.
Realizar una curva de calibracin entre ABS vs concentracin de cafena. Verificar

la regresin lineal de los datos (r 0,999) y asegurarse que el intervalo lineal est
conformado por cinco patrones.
Medir la absorbancia de la muestra problema (bebida energizante) a la mxima y

verificar que se encuentre en el intervalo lineal de la curva de calibracin. Si no lo
est, realizar las diluciones necesarias y los clculos respectivos.
Determinar la concentracin de cafena en la bebida energizante y reportarla en

ppm.
9.5 RECOLECCIN DE DATOS Y RESULTADOS:
El siguiente anlisis de cafena se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer

DINKO UV 2300 )
138
Solucin acuosa de cafena (100 ppm): se pesaron 0,0251 gramos de cafena

(99.5% de pureza) y se adiciono en un vaso de precipitado con 50 mL de agua
destilada, luego se agito vigorosamente hasta disolucin, posteriormente se transfiri
hacia un baln de 250 mL y se llev hasta aforo con agua destilada.
Figura 32. Solucin acuosa de cafena 100 ppm preparada en el laboratorio.
Preparacin de la Bebida Energizante: para realizar nuestro anlisis se trabaj con

la bebida energizante RED BULL el cual viene en presentacin de 250 mL y
posee un porcentaje de cafena = 32 mg de cafena / 100 ml.
Se destapo el RED BULL y se adicionaron cerca de 50 mL en un vaso de precipitado,

luego se agito con la varilla de vidrio por 15 minutos con la finalidad de eliminar las
burbujas, luego se dej reposar la muestra de RED BULL por 10 minutos.
Solucin problema RED BULL: para la realizacin de este anlisis se prepar una
muestra problema, esta muestra problema es manipulada de tal manera que la
concentracin de cafena presentada por la misma, se encuentre en el intervalo lineal
de la curva de calibracin. Para efectos de la prctica en el laboratorio esta muestra la
prepara el asistente de la prctica con anterioridad al desarrollo de la misma. La
muestra problema se determin de la siguiente manera:
RED BULL presentacin 250 mL. Contenido de cafena 32 mg/100 mL
139
Primero se deben convertir los 250 mL a litros = 0,25 Litros
Segundo se debe aplicar la frmula de partes por milln ppm = mg/L
ppm cafena en RED BULL = 32 mg / 0,25 L ------------------- 128 ppm de cafena
La lata de RED BULL contiene en la presentacin de 250 mL una cantidad de cafena

considerable, hablamos de 128 ppm. A partir de esta concentracin se calcula una
concentracin de cafena, la cual se encuentre dentro del rango de la curva de calibracin
obtenida por los patrones de cafena preparados previamente.
Tercero, al identificar la cantidad de cafena presente en el RED BULL se procedi a preparar

la muestra problema:
Se tomaron 8 mL de RED BULL desgasificada y se adiciono en un baln de 100 mL el cual se

llev hasta el aforo con agua destilada.
8 mL de RED BULL x 128 ppm cafena = 10,24 ppm de cafena Muestra Problema
100 mL de solucin problema
Con la muestra problema ya preparada se procedi a preparar los patrones para nuestro
anlisis:
Figura 33. Preparacin de los patrones de cafena y la muestra de RED BULL.
140
Cuando se tienen los patrones preparados y la muestra problema, se procedi a realizar las
El anlisis de cafena se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer DINKO UV

2300 ), con celdas de plstico de paso ptico de 1 cm y en el rango ultravioleta. Nota:
para realizar las mediciones espectrofotomtricas se debe primero realizar una consulta
exhaustiva del manual de funcionamiento del espectrofotmetro DINKO UV 2300 (Ver
Anexo: uno), y antes de utilizarlo se debe contar con la presencia y autorizacin del
docente de turno.

limpia la celda de plstico y se introduce una muestra de la solucin acuosa de cafeina 100
ppm, en nuestro caso seguimos los siguientes pasos:
Se enciende la lmpara de deuterio, teniendo en cuenta que nuestro anlisis

es en el rango ultravioleta. Opcin 5, D2 lamp [on] (sistema).
Se introduce como blanco agua destilada y en la porta-cubeta de muestra se
coloca la solucin de cafena.
El resultado obtenido como pico mximo de absorcin fue de 271,5 nm
Figura 34. Barrido espectral comprendido entre 200 700 nm, muestra de cafena.
141

onda].
La longitud de onda se ajust en ( = )271,5 nm
El modo de los datos se ajusta en ABS (absorbancia)
Primero se ajust el cero de absorbancia. Se coloc el blanco (agua

destilada) en el espectrofotmetro y se le dio la opcin Auto Zero.
Se realizaron las mediciones de Absorbancia de las soluciones patrn y la

muestra problema. Se coloc la celda de plstico en el porta-cubetas con la
solucin patrn N 1 y se cierra la cubierta del espectrofotmetro, se le dio
Forward y se mide la absorbancia del patrn. Nota: antes de realizar la
medicin, purgar con el patrn correspondiente la celda de plstico.

utiliza otra celda. Las siguientes mediciones se realizaron de la misma
manera.
Los resultados obtenidos en nuestro anlisis se reportan a continuacin:
Patrn (ppm) Absorbancia
0 0
4 0,106
8 0,156
12 0,242
16 0,339
20 0,404
Muestra 0,225
problema
142
Figura 35. Resultado de la Absorbancia obtenida por medio del mtodo de la curva de
calibracin.
Luego se procedi a buscar la regresin lineal de los datos obtenidos anteriormente y se

pudo establecer que la regresin lineal fue de r = 0,99688, tambin se determin a = 7,476
x10-3 y b = 0,020036.
9.6 CUESTIONARIO:
1. Realizar la curva de calibracin entre ABS vs concentracin de los patrones de cafena.
R/ los resultados arrojados por el espectrofotmetro fueron los siguientes:
Concentracin Absorbancia
(ppm)Patrn de cafena (ABS)
0 0
4 0,106
8 0,156
12 0,242
16 0,339
20 0,404
143
GRFICO ABSORBANCIA VS CONCENTRACIN CAFENA (ppm)
0,45
0,4
R = 0,9938
0,35
0,3
ABSORBANCIA
0,25
0,2 (10.846- 0.225) muestra

problema de cafena.
0,15
0,1
0,05
0
0 5 10 15 20 25
CONCENTRACION CAFEINA ppm
2. Cul es la concentracin de cafena en la bebida energizante?
R/ se utiliz como muestra problema la solucin preparada en el laboratorio:
La absorbancia determinada en el espectrofotmetro a la ( )271,5 nm fue de: 0,225
Con los datos de la regresin lineal se determina la concentracin de la muestra de cafena

por medio de la siguiente formula:
A = bC + a
C = A- a
b
144
Mtodo curva de calibracin: la regresin lineal fue de r = 0,99688, tambin se
determin a = 7,476 x10-3 y b = 0,020036.
C= 0,225 7,476x10-3 = 10,86 ppm de cafena

0,020036
C = 10,86 ppm de cafena x 100 mL = 135,75 ppm de cafena en la Bebida.

8 mL
Con el resultado obtenido se pudo establecer que la concentracin de cafena identificada

en el laboratorio se aleja un poco del resultado real, es decir de la cantidad de cafena real
presente en la bebida energizante RED BULL, la cual es de 128 ppm de cafena.
3. Se realiz un anlisis de cafena en el espectrofotmetro, donde se prepararon patrones

de 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 ppm de cafena, para las cuales se obtuvieron absorbancias
respectivamente de (ABS: 0 [Blanco]/ 0,234/ 0,276/ 0,312/ 0,346/ 0,396/ 0,432).
Posteriormente se analiz una muestra problema de cafena y su absorbancia fue de
0,372. Cul es la concentracin de la muestra desconocida de cafena? Cul es la
absortividad y la absortividad molar de la muestra?
R/ El anlisis realizado en el espectrofotmetro arrojo los siguientes resultados:
Concentracin de cafena (ppm) Absorbancia

0 0
2 0,234
4 0,276
6 0,312
8 0,346
10 0,396
12 0,432
Muestra problema de cafena 0,372
Lo primero que se debe hacer es identificar la regresin lineal de los datos.
145
Se busc la regresin lineal de los datos obtenidos anteriormente y se pudo establecer que
la regresin lineal fue de r = 0,99880, tambin se determin a = 0,19426 y b = 0,01977
Hallamos la concentracin de cafena en la muestra problema, teniendo en cuenta que su

absorbancia fue de 0,372:
C= 0,372 0,19426 = 8,99 ppm de cafena en la muestra problema

0,01977
Luego de conocer la concentracin de la muestra problema, se puede determinar la

absortividad y la absortividad molar se debe tener en cuenta que:
a= A
b.C
Dnde:
a = absortividad, A= absorbancia
C = concentracin en g/L
= A
b.C
Dnde:
Tenemos que la concentracin de cafena en la nuestra problema fue de 8,99 ppm.

Se realizaron los clculos de la siguiente manera:
Absortividad:
a= 0,372 X 1000 mg = 41,38 L/g.cm

1cm x 8,99 mg/L 1g
Absortividad Molar:
= 0,372 X 1000 mg X 194,19 g de cafena = 8035.4 L/mol.cm

1cm x 8,99 mg/L 1g 1 mol de cafena
146
9.7 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

PREEDY Victor R., Caffeine Chemistry, Analysis, Function and Effects, RSC
Publishing, the Royal Society of Chemistry 2012.

KENKEL John. Analytical Chemistry for Technicians, Visible and Ultraviolet

PASTO Daniel J., JOHNSON Carl R., Determinacin de Estructuras Orgnicas.

Editorial reverte S.A 1981. Reimpreso mayo de 2003 Espaa.
JENWAY, Bibby Scientific, the quantitative determination of caffeine in beverages

and soft drinks using UV wavelength spectroscopy. [En lnea], Citada (14 junio de
2012), disponible en <URL: http://www.jenway.com/adminimages
/A09_010A_Determination_of_Caffeine_in_Beverages_using_UV_Wavelength_Sp
ectroscopy(1).pdf
147
PRCTICA N 10
DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE CAFENA EN UNA BEBIDA

ENERGIZANTE, MTODO ADICIN DE UN ESTNDAR
10.1 OBJETIVOS
Conocer los trminos y conceptos sobre la adicin de un estndar en muestras de

anlisis.
Aplicar el mtodo de la adicin de un estndar para determinar la concentracin de
una muestra desconocida.
Determinar la cantidad de cafena en una bebida energizante.
6 Balones aforados de 50 mL Solucin acuosa de cafena 100

2 Balones aforados de 100 mL ppm
Vasos de precipitado de 50 y 100 mL Bebida Energizante (RED BULL,
Pipetas aforadas de 1, 5, 10 mL O PEAK, Vive 100, entre otra
Pipeta graduada de 10 y 25 mL bebida de gusto del alumno)
Frasco lavador
Pera de succin, varilla agitadora
En la actualidad la utilizacin de los mtodos instrumentales de anlisis dentro de la

qumica y otros campos de la ciencia aplicada, permiten identificar y recolectar
informacin requerida para resolver un problema. Los anlisis de efluentes industriales,
emisiones de gases, aceites para motores y aeronaves, potabilizacin del agua, anlisis de
medicamentos, entre otros; son algunos ejemplos de la cantidad de problemas que requieren
tcnicas instrumentales de anlisis.
148
Estas tcnicas instrumentales de anlisis requieren de una calibracin previa de los equipos
utilizados. Estos equipos instrumentales relacionan la seal analtica medida con la
concentracin del analito. Los tres mtodos ms utilizados para la calibracin son: la
realizacin de la curva de calibracin, el mtodo de la adicin estndar y el mtodo del
patrn interno.
El mtodo de la adicin estndar es til para analizar muestras complejas en las que la
probabilidad de que ocurran efectos adversos debido a la matriz1 es considerable. Este
mtodo puede aplicarse de diferentes formas; una de las ms habituales implica la adicin
de volmenes diferentes de una solucin patrn a varias alcuotas de la muestra del mismo
tamao; este proceso es conocido como adicin de muestra. Despus, cada disolucin se
lleva a un volumen fijo, antes de ejecutar la medida hay que tener en cuenta que cuando la
cantidad de muestra es limitada, las adiciones estndar se pueden llevar a cabo por
adiciones sucesivas de volmenes del patrn a un nico volumen del problema exactamente
medido. Las medidas se van haciendo en la muestra original y despus de cada adicin del
patrn en la muestra. En la mayora de las versiones del mtodo de la adicin estndar, se
espera que, despus de la adicin de un patrn del analito, solo cambie su concentracin y
que la matriz se conserve casi idntica.
Las bebidas energizantes, son bebidas a base de agua sin alcohol y con algunas virtudes
estimulantes, que le ofrecen al consumidor virtudes regeneradoras de la fatiga y el
agotamiento, adems de aumentar la habilidad mental y desintoxicar el cuerpo. Las
bebidas enrgizantes estn compuestas principalmente por cafena, vitaminas, carbohidratos
y sustancias naturales orgnicas, que eliminan la sensacin de agotamiento por parte de la
persona que las consume.
Estas bebidas deberan denominarse estimulantes, debido a que incorporan mayores

cantidades de cafena que otras bebidas de similar efecto como el caf y l te. Estas
bebidas pueden alcanzar dentro de su composicin cantidades de hasta 150 mg/L de
cafena, lo cual puede llegar a ser perjudicial para personas con problemas cardiacos. En la
siguiente prctica de laboratorio se determinara la cantidad de cafena presente en una
bebida energizante, por medio de la adicion de un estndar y la lectura de absorbancia de
las muestras a una longitud de onda de 270 nm.
1
El trmino matriz, hace referencia al conjunto de los distintos componentes que constituyen una muestra
analtica.
149
10.4 PROCEDIMIENTO
7. Solucin acuosa de cafena 100 mg/L (100 ppm): pesar 0,0251 gramos de cafena y
adicionarlo en un vaso de precipitado con 50 mL de agua destilada, agitar
vigorosamente hasta disolucin, posteriormente transferir la solucin en un baln de
250 mL y llevar hasta aforo con agua destilada.
8. Preparacin de la Bebida Energizante: se toman 50 mL de la bebida y se transfiere

a un vaso de precipitado, agitar hasta eliminar las burbujas y dejar reposar por 15
minutos.
10.4.2 Preparacin de patrones:
Preparar las soluciones patrn de cafena 0, 4, 8, 12, 16, 20 ppm a partir de la solucin acuosa
de cafena (100 ppm) y aadir la cantidad necesaria de estndar; teniendo en cuenta las
indicaciones de la siguiente tabla:
N V Bebida V solucin patrn Volumen Concentracin final

Patrn Energizante en mL de cafena 100 ppm final mL (ppm)
1 1 0 (blanco) 50 0
2 1 2 50 4
3 1 4 50 8
4 1 6 50 12
5 1 8 50 16
6 1 10 50 20
Tabla 15. Preparacin de patrones Adicin de un estndar
10.4.3 Determinacin:
Una vez se tengan preparadas las muestras se realizan las siguientes mediciones:
Antes de comenzar las mediciones se debe leer el manual de funcionamiento del

espectrofotmetro, para tener una idea clara de los procedimientos a realizar.
150
Realizar un barrido espectral entre 200 700 nm sobre una muestra de la solucin
acuosa de cafena, para obtener el espectro de absorcin y determinar la longitud de
onda ( )de mxima absorcin ( mxima).
Introducir en la celda de plstico el patrn de 4 ppm y medir la absorbancia a la

mxima, repetir este procedimiento con los dems patrones. Nota: despus de
terminar cada medicin se debe limpiar la celda con agua destilada y purgarla con
la solucin patrn siguiente; este procedimiento se debe repetir hasta finalizar las
mediciones de todos los patrones.
Realizar una curva de calibracin entre ABS vs concentracin. Verificar la

regresin lineal de los datos (r 0,999) y asegurarse que el intervalo lineal est
conformado por cinco patrones.
Medir la absorbancia de la muestra problema (bebida energizante) a la mxima y

verificar que se encuentre en el intervalo lineal de la curva de calibracin. Si no lo
est, realizar las diluciones necesarias y los clculos respectivos.
Determinar la concentracin de cafena en la bebida energizante y reportarla en

ppm.
El siguiente anlisis de cafena se realiz en el espectrofotmetro (spectrophotometer

DINKO UV 2300 )
151
Solucin acuosa de cafena (100 ppm): se peso 0,0251 gramos de cafena 99.5 % de
pureza y se adiciono en un vaso de precipitado con 50 mL de agua destilada, luego se
agito vigorosamente hasta disolucin, posteriormente se llev hasta aforo con agua
destilada en un baln de 250 mL.
Figura 37. Solucin acuosa de cafena 100 ppm.
Preparacin de la Bebida Energizante: para nuestro anlisis se utiliz como bebida

energizante el RED BULL el cual viene en presentacin de 250 mL y posee un
porcentaje de cafena = 32 mg de cafena / 100 mL. Nota: se utiliz la misma bebida
analizada en la prctica anterior (PRCTICA N 7), con la finalidad de comparar la
calidad de los dos mtodos [mtodo curva de calibracin y adicin de un estndar].
Se destapo el RED BULL y se adicionaron cerca de 50 mL en un vaso de precipitado,

luego se agito con la varilla de vidrio por 15 minutos con la finalidad de eliminar las
burbujas (representa interferencias para la muestra), luego se dej reposar la muestra
de RED BULL por 10 minutos.
Solucin problema RED BULL: se prepar una muestra problema para el anlisis,
esta muestra problema es manipulada de tal manera que la concentracin de cafena
presentada por la misma, se encuentre en el intervalo lineal de la curva de calibracin.
La cual se determin de la siguiente manera:
RED BULL presentacin 250 mL. Contenido de cafena 32 mg/100 mL
152
Primero se deben convertir los 250 mL a litros = 0,25 Litros
Segundo se debe aplicar la frmula de partes por milln ppm = mg/L
ppm cafena en RED BULL = 32 mg / 0,25 L ------------------- 128 ppm de cafena
La lata de RED BULL contiene en la presentacin de 250 mL una cantidad de cafena

considerable, hablamos de 128 ppm. A partir de esta concentracin se calcula una
concentracin de cafena, la cual se encuentre dentro del rango de los patrones de cafena que
se deben preparar para el anlisis.
Tercero, al identificar la cantidad de cafena presente en el RED BULL se procedi a preparar

la muestra problema:
Se tomaron 12 mL de RED BULL desgasificada y se adiciono en un baln de 100 mL el cual

se llev hasta el aforo con agua destilada.
Luego se prepararon los patrones de cafena, y se le adiciono a cada patrn el estndar para la
realizacin de nuestro anlisis:
Figura 38. Preparacin de los patrones de cafena y la adicion del estndar (RED BULL) a
cada muestra.
153
Cuando se tienen los patrones preparados y la muestra problema, se realizaron las
El anlisis de cafena por adicin de un estndar se realiz en el espectrofotmetro

(spectrophotometer DINKO UV 2300 ), con celdas de plstico de paso ptico de 1 cm y
en el rango ultravioleta. Nota: para realizar las mediciones espectrofotomtricas se debe
primero realizar una consulta exhaustiva del manual de funcionamiento del
espectrofotmetro DINKO UV 2300 (Ver Anexo uno), y antes de utilizarlo se debe
contar con la presencia y autorizacin del docente de turno.

limpia la celda de plstico y se introduce una muestra de la solucin acuosa de cafena 100
ppm, en nuestro caso seguimos los siguientes pasos:
Se enciende la lmpara de deuterio, teniendo en cuenta que nuestro anlisis

es en el rango ultravioleta. Opcin 5, D2 lamp [on] (sistema).
Se introduce como blanco agua destilada y en la porta-cubeta de muestra se

coloca la solucin de cafena.

El resultado obtenido como pico mximo de absorcin fue de 271,5 nm


onda].
La longitud de onda se ajust en ( = )271,5 nm
El modo de los datos se ajusta en ABS (absorbancia)
154
Primero se ajusta el cero de absorbancia, se coloca el blanco en el

Se realizaron las mediciones de Absorbancia de las soluciones patrn y la

muestra problema. Se coloc la celda de plstico en el porta-cubetas con la
solucin patrn N 1 y se cierra la cubierta del espectrofotmetro, se le dio
Forward y se mide la absorbancia del patrn. Nota: antes de realizar la
medicin, purgar con el patrn correspondiente la celda de plstico.

utiliza otra celda. Las siguientes mediciones se realizaron de la misma
manera.
Los resultados obtenidos por el mtodo adicin de un estndar se reportan a

continuacin:
0 0
4 0,083
8 0,131
12 0,211
16 0,303
20 0,382
Muestra problema 0,294
Luego se procedi a buscar la regresin lineal de los datos obtenidos anteriormente

y se pudo establecer que la regresin lineal fue de r = 0,99686, tambin se
determin a = - 4,286 x10-3 y b = 0,0189.
155
10.6 CUESTIONARIO
1. Realizar la curva de calibracin entre ABS vs concentracin de los patrones adicin

de un estndar.
R/ El anlisis de cafena por adicin de un estndar arrojo los siguientes resultados:
0 0
4 0,083
8 0,131
12 0,211
16 0,303
20 0,382
GRFICO ABSORBANCIA VS CONCENTRACIN CAFENA (ppm)
0,45
0,4
y = 0,0189x - 0,0043
0,35 R = 0,9937
0,3
ABSORBANCIA
0,25
0,2
(14,30 - 0,289)
0,15 muestra
problema de
0,1 cafena
0,05
0
0 5 10 15 20 25
-0,05
CONCENTRACIN DE CAFENA ppm
156
2. Cul es la concentracin de cafena en la bebida energizante?
R/ se utiliz como muestra problema la solucin preparada en el laboratorio:
La absorbancia determinada en el espectrofotmetro a la ( )271,5 nm fue de: 0,294
Con los datos de la regresin lineal se determina la concentracin de la muestra de cafena

por medio de la frmula:
A = bC + a
C = A- a
b
Mtodo Adicin de un Estndar: la regresin lineal fue de r = 0,99686, tambin se
determin a = - 4,286 x10-3 y b = 0,0189.
C = 0,294 + 4,286x10-3 = 15,78 ppm de cafena

0,0189
C = 15,78 ppm de cafena x 100 ml = 131,5 ppm de cafena en la Bebida

12 ml
La cantidad de cafena contenida en la bebida energizantes es de 131,5 ppm
3. Qu diferencias existen entre la utilizacin del mtodo de la curva de calibracin y

el mtodo de la adicin de un estndar?
R/ Entre los dos mtodos no existen muchas diferencias, debido a que la naturaleza del
analito en ambos mtodos debe conservarse siempre igual, solo se ve afectada su
concentracin dependiendo de los patrones utilizados y el estndar adicionado a los
patrones. La nica diferencia de consideracin se centra en la adicin del estndar, el cual
debe aplicarse a todos los patrones que conformaran la curva de calibracin. Los grficos
deben ser parecidos en donde la regresin lineal igual o superior a (r 0,999) y por medio
de la cual se puedan identificar las muestras problema.
157
4. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en la anterior prctica (PRCTICA N
7), Cul fue el resultado ms acertado sobre la concentracin de cafena en la
bebida energizante, al realizarse el anlisis por los mtodos de la curva de
calibracin y la adicin de un estndar?
R/ Si se comparan los dos mtodos se puede establecer que el mtodo de la adicin de un

estndar es un poco ms acertado al real, debido a que segn las indicaciones de la muestra
analizada RED BULL, la concentracin de cafena real es de 128 ppm, pero las dos
tcnicas de anlisis instrumental son muy factibles a la hora de estudiar y generar un
resultado apropiado para identificar la cantidad de cafena presente en distintos productos
alimenticios, en este caso en las bebidas energizantes. Estos resultados obtenidos pueden
ser valorados por analistas que en un informe final determinaran la calidad del producto,
por tal razn la utilizacin de los mtodos instrumentales de anlisis son de gran
importancia por parte de las industrias, para cuantificar la calidad de sus productos, y as
poder brindarle a sus clientes un producto sano, que cumpla con las normas de salud
establecidas por los entes del gobierno que regulan los productos alimenticios.


KENKEL John. Analytical Chemistry for Technicians, Visible and Ultraviolet

MOLINA V. Daniel Ricardo. Laboratorio de Instrumentacin Qumica .

Universidad Industrial De Santander (UIS). Prcticas de laboratorio 2008.
RODRGUEZ Rivera Vctor Manuel., MAGRO Edurne Simn. Bases de la

Alimentacin Humana. 1a ed. Editorial Netbiblo, Espaa 2008.
DINKO Instruments, Manual de Instrucciones UV- VIS Espectrofotmetro UV

2300 II. DINTER S.A. 1a edicin 2011.
158
PRCTICA N 11
ESPECTROSCOPIA INFRARROJA, APLICACIN DEL TUTOR IR PARA

LA IMPLEMENTACIN DE CONCEPTOS TERICOS
11.1 OBJETIVOS
Comprender los conceptos bsicos de la espectroscopia infrarroja.

Conocer el funcionamiento, la aplicacin e importancia de los equipos utilizados en
el anlisis infrarrojo.
Facilitar el estudio de los anlisis espectrales en la espectroscopia infrarroja
mediante la aplicacin del Tutor IR.
11.2 MATERIALES
El material utilizado para el desarrollo de la prctica ser entregado por el docente a cargo
del grupo y constara de un programa conocido como TUTOR IR, el cual se encuentra en
lengua extranjera (Ingles) y donde se encontrara toda la informacin referente a la
espectroscopia infrarroja. (Ver Anexo Dos. Programa de instalacin Tutor IR).
11.3 DESARROLLO DE LA PRCTICA
Las preguntas que se presentan a continuacin tienen como objetivo hacer ms fructfero el
estudio de la espectroscopia infrarroja mediante el trabajo con el Tutor IR.
11.3.1 Introduccin a la Espectroscopia:
1. De donde nace la idea de Espectroscopia Infrarroja?

2. Quin es Frederic William Herschel, cul fue su experimento y como demostr la
absorcin de la luz IR?
3. Qu descubri Isaac Newton de la luz y quien comprob su teora?
4. Cul es el orden de las bandas en el espectro electromagntico?
5. A que se le llama luz polarizada?
159
6. Defina los siguientes conceptos: Longitud de onda, Frecuencia, Numero de onda
7. Que significa la frmula C= v
8. A qu es igual la energa segn la longitud de onda y el nmero de onda?
9. Si el nmero de onda de una radiacin es de 20 cm-1 a que es igual la longitud de
onda y la energa?
10. Que explica la teora de la vibracin molecular y en que numero de onda se
encuentra el infrarrojo medio?
11.3.2 Equipos para Anlisis Infrarrojo:
1. Nombre dos tipos de espectrofotmetros IR diferentes en su sistema ptico.

2. Cul es la fuente de IR en un espectrofotmetro clsico y en que rango trabaja?
3. Como llega la radiacin IR a la muestra, por qu utiliza espejos y no otro material?
4. Por qu es importante del espejo divisor (Choppin Mirror)?
5. Cul es la funcin de la rejilla de difraccin?
6. Por qu se conoce el espectrmetro clsico como dispersivo?
7. Qu elemento constituye un detector de radiacin IR, que seal mide y como la
transforma en medida de absorcin?
8. Qu es un espectro IR?
9. De qu partes consta un interfermetro de Michelson?
10. Cul es la funcin de la transformada de Fourier en el espectrmetro?
11. Qu ventajas presenta un espectrofotmetro con interfermetro y transformada de
Fourier sobre un equipo dispersivo?
11.3.3 Teora sobre el Anlisis Infrarroja:
1. Qu es un oscilador armnico clsico?

2. Cmo se presenta una curva de potencial armnico?
3. Cmo varia la energa potencial en un oscilador armnico?
4. Cmo se relacionan la frecuencia de vibracin v con la constante de fuerza y la
masa en un oscilador armnico?
5. Escriba una expresin matemtica que exprese la relacin entre la energa total de
un oscilador y el desplazamiento X de las masas?
6. Por qu la relacin anterior que es correcta para un oscilador armnico no se puede
aplicar a las molculas?
7. Que predice la mecnica cuntica sobre la energa de vibracin de las molculas?
8. Por qu se dice que la energa est cuantizada?
160
9. Que indica la regla de seleccin?
10. Que radiacin puede absorber una molcula segn la regla de seleccin, como se
aprecia en el espectro IR?
11. Qu es un modelo anarmnico?
12. Qu es un sobretono?, cmo es su frecuencia comparada con la de la banda
fundamental?
13. Cmo aparece el sobretono en el espectro IR?
14. Por qu una molcula de H2 no absorbe radiacin IR?
15. Con cul de los campos que constituye la radiacin se debe alinear el dipolo
molecular para que se produzca la radiacin IR?, qu es un dipolo oscilante?
11.3.4 Anlisis Espectral IR:
1. Qu tipos de vibraciones se presentan en las molculas de agua?

2. Qu significan modos normales de vibracin?
3. Cuntos modos de vibracin presenta una molcula no lineal de N tomos?
4. Por qu aparecen tres picos de absorcin en la molcula en el espectro IR?
5. Cuntos modos de vibracin presenta el CO2, y por qu presenta solo 2 picos de
absorcin en el IR?
6. Cuntos modos de vibracin presenta el pentano C5H12?
7. Cuntos modos de vibracin presenta el grupo metilo CH3?
8. Cuntos modos de vibracin presenta el metileno CH2?
9. Qu significa la regin de las huellas digitales?
10. Indique el nmero de onda correspondiente a dos picos caractersticos de los
espectros IR de los siguientes compuestos: Hexano; 2,3-dimetilbutano; 1-hexino; 1-
heptino, cianuro de heptilo, tolueno, hexanol, hexilamina.
Se desarroll el Tutor IR, con la finalidad de identificar los puntos claves en el anlisis
infrarrojo y construir bases slidas para el desarrollo de futuras prcticas en el infrarrojo.
161
11.4.1 Introduccin a la Espectroscopia:
1. La idea naci de Frederic William Herschel, quien imagin la existencia de otros

componentes de la luz blanca fuera de la regin visible, diferentes a las que haba
descubierto Newton.
2. Frederic William Herschel, fue un cientfico y astrnomo alemn, quien descubri

otro componente de la luz fuera de la regin visible, llamada regin infrarroja.
Debido a que esta regin es invisible al ojo humano Herschel necesito de un
experimento para detectarlo, el cual haciendo pasar la luz solar por un prisma y
colocando un termmetro de frente, el termmetro se calent por encima de la
temperatura de la habitacin. Herschel coloco una muestra de agua en el sendero de
la luz, las diferencias de temperatura demostraron la absorcin de la luz infrarroja
por parte de la muestra con agua; cambiando la parte del espectro que brilla a travs
de la muestra, Herschel mostraba que la absorcin variaba con la longitud de onda
(o el color) de la luz infrarroja.
3. Isaac Newton descubri que la luz estaba compuesta por diferentes colores, adems
de colores invisibles como el infrarrojo, y ms tarde Frederic Herschel comprob su
teora.
4. El orden de las bandas en el espectro electromagntico son las siguientes:
5. Se llama luz polarizada a la luz plana cuyo campo elctrico oscila siempre en un
mismo plano determinado, denominado plano de polarizacin.
162
6. Longitud de onda ( = ) Es la distancia entre dos puntos idnticos adyacentes en una
onda, y se utilizan las unidades de m, cm, nm.
Frecuencia ( = )Es el nmero de ondas que pasan por un punto particular en 1

segundo.
Nmero de onda ( ) = Es el inverso de la longitud de onda en cm =
= _____1____ = cm -1
cm
7. La frmula C = hace referencia que la velocidad de la luz est dada por su

frecuencia y su longitud de onda.
8. La energa es igual a la constante de Planck (h) = 6,63 x 10-34 j/s, por la velocidad de
la luz, sobre la longitud de onda:
o E = hc x
9. Si el numero de onda de una radiacin es de 20 cm-1, a que es igual la longitud de

onda y la energa, la solucin a continuacion,
163
10. El infrarrojo medio se encuentra aproximadamente entre (4000 a 400) cm-1, y es
utilizado para estudiar las vibraciones fundamentales, la cual es explicada por la
teora de la vibracin molecular, que se basa en el hecho de que las molculas tienen
frecuencias a las cuales rotan y vibran, es decir los movimientos de rotacin y
vibracin moleculares tienen niveles de energa discretos (modos normales de
vibracin). Las frecuencias resonantes o frecuencias vibracionales, son
determinadas por la forma de las superficies de energa potencial molecular, las
masas de los tomos y eventualmente, por el acoplamiento vibracional asociado.
11.4.2 Equipos para Anlisis Infrarrojo:
1. Hay dos tipos de espectrofotmetros IR, El clsico (Dispersivo), y El moderno

(Trasformada de Fourier).
2. La fuente de infrarrojo en un espectrofotmetro clsico es un tubo de cermica

calentado a 1200 C y trabaja en un rango de 4000 200 cm-1.
3. La luz del origen es reflejada por un espejo plano y produce los rayos de muestra y
de referencia enfocados que pasan a la cmara de muestra; utilizan espejos porque
los lentes de otro material absorberan la luz IR.
4. El espejo divisor es importante porque al girar alterna el paso de la muestra y las

vigas de referencia al resto de la ptica, esta alternancia es importante para la
deteccin correcta de la absorcin.
5. La funcin de la rejilla de difraccin es renfocar el rayo a otro espejo toroidal o de

enfoque a la longitud de onda deseada.
6. Se conoce al espectrmetro clsico como dispersivo porque permite renfocar los

rayos de luz a distintas longitudes de onda similar al movimiento de un prisma.
7. El elemento que constituye un detector de radiacin IR es la Termocupla, que

genera una seal elctrica proporcional a la cantidad de la luz que brilla sobre este,
alternando la referencia y los rayos que llegan a la muestra, una corriente oscilante
es generada. La amplitud de la seal oscilante demuestra la cantidad de la
absorbancia IR recibida por la muestra.
164
8. Es el grafico de la muestra generada por el detector vs el nmero de onda ( ), la
amplitud es cambiada por el porcentaje de luz transmitida por la muestra, relativa a
la referencia o porcentaje de trasmitancia %T.
9. El interfermetro de Michelson consta de tres partes: Viga divisora, Espejo movible

y Espejo fijo.
10. Las funciones de la transformada de Fourier en el espectrmetro es la de obtener el

espectro por un clculo matemtico de los datos, una vez que todas las frecuencias
alcanzan al detector, en vez de una sola a la vez.
11. Las ventajas de un espectrmetro con transformada de Fourier sobre un equipo

dispersivo son: Multiplex, los espectros pueden ser obtenidos muy rpidamente
porque todos los ( ) son medidos simultneamente por lo tanto la proporcin de
seal para el ruido puede ser incrementada determinando el promedio de los
exmenes multiplex. Caudal de proceso y transferencia, las seales dbiles pueden
ser medidas porque ms luz alcanza al detector. Precisin, la escala de ( ) es muy
precisa porque es calibrada interiormente con un rayo lser.
11.4.3 Teora sobre el Anlisis Infrarroja:
1. Es un modelo de una molcula diatmica donde se representa un resorte de fuerza

constante (k) atado a dos balones de masas (M).
2. La curva de potencial armnico representa la energa potencial del resorte la cual es

cero en un desplazamiento de equilibrio (d) y aumenta a lo largo de la parbola a
medida que el resorte es estirado o comprimido.
3. La energa potencial en un oscilador armnico varia a medida que hay un

desplazamiento del resorte el cual al ser estirado o comprimido aumenta la energa
potencial.
4. La frecuencia de vibracin (V), est relacionada con la fuerza constante (K) y la
masa (M) por la ecuacin: , por lo tanto una gran constante de
165
fuerza (resorte ms fuerte) resulta en una ms alta frecuencia y una pequea
constante de fuerza resulta en una baja frecuencia.
5. La energa total de la molcula vibrante es igual a: E= K mxima
6. No se puede aplicar a las molculas por que el modelo de oscilador armnico

predice que una molcula puede vibrar en cualquier energa total, lo cual es
incorrecto para una molcula, pero aplicable a un baln y resorte real.
7. La mecnica cuntica predice que las molculas solamente pueden vibrar en niveles
de energa lo cual corresponde con la frmula:
En= (n + 1/2) h x v n= 0, 1, 2, 3
8. Se dice que la energa esta cuantizada, cuando la molcula puede vibrar solamente
en los niveles de energa convenientes para la frmula:
En = (n + 1/2) h x v n= 0, 1, 2, 3 Donde h es la constante de Planck= 6,626x10-

34
j/s
9. La regla de seleccin indica que una molcula puede absorber o emitir luz a una
energa igual al espacio entre dos niveles. Estas transiciones pueden ocurrir de un
nivel ms alto o ms bajo, hasta el prximo nivel cercano y las diferencias es igual a
n = +-1
10. Segn la regla de seleccin una molcula solamente puede absorber luz con la
energa igual a h x V por lo tanto el espectro infrarrojo de esta molcula debe tener
un mximo apogeo solo en la frecuencia que corresponde a esa energa.
11. Cuando los tomos son empujados muy cerca entre si se repelan ms
enrgicamente, pero si al repelarse lo suficientemente lejos, el enlace se rompe,
dando consecuencia a un modelo anarmnico.
12. Un sobretono es cuando la transicin de energa de un nivel a otro (de uno ms alto
a uno ms bajo o viceversa) es igual a n= +2 y corresponde la E
aproximadamente a 2hV.
166
La frecuencia del sobretono es menor que la banda fundamental, ya que la banda del
sobretono es un poco menor que dos veces la frecuencia y dos veces el nmero de
onda.
13. El sobretono o la banda del sobretono es tan pequeo o limitado que no puede ser
detectado en el espectro IR.
14. Una molcula de H2 no absorbe lun IR, debido a que siempre tiene un dipolo de
cero, y para absorber luz IR, el dipolo molecular debe cambiar cuando ocurre una
transicin.
15. Para que se pueda producir la radiacin infrarroja el campo elctrico se debe alinear
con el dipolo molecular y as poder formar un dipolo oscilante los cuales se crean
cuando la capa ms externa, en un momento dado genera una alta probabilidad de
que haya ms carga elctrica en un extremo que en otro, dado que la distribucin
electrnica es por lo general asimtrica. Esta distribucin asimtrica cambia con el
tiempo y por ello forman dipolos oscilantes.
11.4.4 Anlisis Espectral IR:
1. En las molculas de agua se presentan tres movimientos o vibraciones llamadas,

Modos normales:
2. Los modos normales de vibracin, son movimientos vibracionales sencillos dentro

de una molcula. Los modos de vibracin se calculan con: 3N-6, donde N es el
nmero de tomos en la molcula.
3. Una molcula no lineal de N tomos, presenta 3N-6 modos de vibracin.
167
4. Aparecen tres picos de absorcin en la molcula del espectro, porque cada modo
normal de movimiento produce o tiene un cambio en el momento di-polar de la
molcula esto influye en que tanto absorbe la radiacin IR.
5. La molcula de CO2, presenta 4 modos normales de vibracin:
Presenta slo dos picos de absorcin en el IR, debido a la simetra que presenta las
vibraciones en la molcula, algunas no producen un cambio en el momento di-polar y otras
tienen frecuencias iguales (son degenerativas).
6. El pentano, C5H12, tiene 17 tomos: 3(17) 6 = 45 ----------- modos de vibracin.
7. El grupo Metilo, CH3, tiene 4 tomos: 3(4) 6 = 6 ----------- modos de vibracin.
8. El metileno, C2H2, tiene 4 tomos: 3(4) 6 = 6 ----------- modos de vibracin.

El grupo funcional CH3, tiene ms solapados sus picos, en el espectro debido a la
caracterstica simtrica de sus modos de vibracin.
9. La regin de las huellas digitales, contiene los picos por debajo de 1400 cm-1. El
modelo en esta regin es muy especfico para una molcula y una comparacin con
otro modelo espectral, posibilita la identificacin de un compuesto.
10. Los numero de onda:
168
169
11.5 CUESTIONARIO
1. Adquirir e instalar el programa Tutor IR en su computador o equipo de trabajo.

2. Desarrollar las anteriores preguntas con la ayuda del Tutor IR, anexar las respuestas
en una carpeta y presentarlas al docente del curso.


SIERRA Isabel., PREZ Damin., GMEZ Santiago., MORANTE Sonia.

Anlisis Instrumental, Algunas herramientas de enseanza-aprendizaje adaptadas
al Espacio Europeo de Educacin Superior. Ed netbiblo, S. L. 2010.
University of Colorado, Boulder, Chemistry and Biochemistry Department, (2011).

CU Boulder Organic Chemistry Undergraduate Courses, IR Spectroscopy
Tutorial.
170
PRCTICA N 12
DETERMINACIN DE HIERRO Y MAGNESIO POR ESPECTROSCOPIA

DE ABSORCIN ATMICA
12.1 OBJETIVOS
Entender el funcionamiento del espectrofotmetro de absorcin atmica.

Evaluar la importancia de la seleccin del ancho de banda y la longitud de onda en
un anlisis por espectroscopia de absorcin atmica.
Adquirir destrezas en el manejo del espectrmetro de absorcin atmica.
Identificar la curva de calibracin para las soluciones patrn de Fe y Mg.
Determinar la concentracin de Fe y Mg en dos muestras problema.
Matraces aforados de 100 y 50 mL Solucin madre de Fe (200 ppm)

Vaso de precipitado de 250 mL Solucin madre de Mg (1000 ppm)
Pipetas aforadas de 10 mL Solucin patrn de Fe (100 ppm)
Micro-pipeta de 1000 y 100 L Solucin patrn de Mg (100 ppm)
Lmpara de ctodo hueco para Fe HCL (diluido)
Lmpara de ctodo hueco para Mg Agua destilada
Esptula, varilla de vidrio
Frasco lavador, pera de succin
Balanza analtica
Espectrofotmetro de absorcin
atmica.
La espectroscopia de absorcin atmica es un mtodo para la deteccin y la determinacin

de elementos qumicos, particularmente de elementos metlicos. Uno de los pioneros en la
espectroscopia fue Isaac Newton, quien a principios de 1600 observ y estudi el
comportamiento de la luz solar cuando esta atraviesa por un prisma.
171
En 1831, J.F. Herschel demostr, que las sales de diferentes metales producen distintas
coloraciones a la flama cuando las sales disueltas o en forma directa son puestas en
contacto con sta. As por ejemplo las sales de calcio dan al contacto con la flama un color
naranja, las de sodio un color amarillo, las de potasio violeta, etc. Estas observaciones
fueron corroboradas posteriormente por otros cientficos sugiriendo que de esta forma
podra identificarse el metal formador de la sal en un compuesto qumico especfico. En
1859 los cientficos Kirschoff y Bunsen en 1859 ampliaron el conocimiento de la
naturaleza de este fenmeno, cuando la luz colorida emitida por el metal en la flama la
hicieron incidir en un depsito ptico que separa la radiacin emitida por el metal, de la luz
solar.
En este instrumento denominado espectroscopio (observacin del espectro) se observa que

cada metal que emite radiacin de diferente color, presenta lneas que aparecen en
diferentes posiciones en la pantalla o campo de observacin, y esto es independientemente
de las condiciones en que se realiza el experimento as como de la naturaleza de la sal
metlica y nicamente depende del metal. Adicionalmente, la intensidad de la lnea est
directamente relacionada a la concentracin del elemento en solucin. De esta manera se
tiene una forma de identificar el elemento (por la posicin de sus lneas), as como de una
manera de identificar ste (por la intensidad de las lneas producidas).
La espectroscopia de absorcin atmica (EAA), se fundamenta en la absorcin de radiacin

de una determinada longitud de onda. Esta radiacin es absorbida selectivamente por
tomos que tienen niveles energticos cuya diferencia en energa corresponde al valor de la
energa de los fotones incidentes. La cantidad de fotones absorbidos, se determina por
medio de la ley de Beer, que relaciona la prdida de poder radiante, con la concentracin de
la especie absorbente y con el espesor de la celda o recipiente que contiene los tomos
absorbentes. Los componentes de un espectrofotmetro de absorcin atmica son:
1) Una fuente de radiacin que emita una lnea especfica correspondiente a la

necesaria para efectuar una transicin en los tomos del elemento analizado.
2) Un nebulizador, que por aspiracin de la muestra liquida, transforma la muestra en

pequeas gotas para una atomizacin ms eficiente.
3) Un quemador, en el cual por efecto de la temperatura alcanzada en la combustin y

por la reaccin de combustin misma, se favorezca la formacin de tomos a partir
de componentes en solucin.
172
4) Un sistema ptico que separe la radiacin de longitud de onda de inters, de todas
las dems radiaciones que entran en el sistema.
5) Un detector o transductor, que sea capaz de transformar en relacin proporcional,

las seales de intensidad de radiacin electromagntica, en seales elctricas o de
intensidad de corrientes.
6) Un amplificador o sistema electrnico, que amplifica la seal elctrica producida,

para que pueda ser procesada con circuitos y sistemas electrnicos comunes.
7) Un sistema de lectura en el cual la seal de intensidad de corriente, sea convertida a

una seal que el operario pueda interpretar. Este sistema de lectura puede ser una
escala de aguja, una escala de dgitos, un graficador, una serie de datos que pueden
ser procesados a su vez por una computadora, entre otros.
Figura 39. Componentes de un Espectrofotmetro de Absorcin Atmica
FUENTES DE RADIACIN
Una vez que han sido formados los tomos, absorben radiacin de acuerdo a la ley de Beer
si esta corresponde a la diferencia en energa entre los niveles energticos de algunos de los
tomos presentes, de lo contrario, la radiacin pasa por la flama sin disminuir la potencia de
haz como efecto de los tomos contenidos en ella.
Los tomos de los diferentes elementos tienen lneas bien definidas que corresponden a
transiciones entre diferentes niveles atmicos. Estas transiciones tienen anchos espectrales
de decimas o hasta centsimas de nanmetro.
173
Cada elemento va a responder a la excitacin de una radiacin de longitud de onda muy
especfica ya que solo este elemento absorbe o emite tal tipo de radiacin, porque esta
corresponde a la diferencia entre dos niveles particulares de ese tomo. La idea de Alan
Walsh en la cual los tomos absorben y emiten radiacin al pasar del estado basal a un
estado excitado y tericamente emiten la misma frecuencia de radiacin en el proceso
inverso; por lo tanto si se tiene una fuente de excitacin en donde el elemento excitado es el
mismo que se va analizar, la radiacin emitida va a ser captada nicamente por el elemento
que es idntico al de la fuente luminosa. Las fuentes de excitacin utilizadas en los anlisis
por (EAA), son las lmparas de ctodo hueco.
Las lmpara des ctodo hueco (LCH o HCL [Hollow Cathode Lamp]) consisten de un
cilindro de vidrio sellado al vaco y con un gas inerte en su interior, en el extremo terminal
esta soldada una ventana de cuarzo fundido; esta ventana tiene que ser de cuarzo debido a
que casi todas las lneas espectrales tiles se hallan en el ultravioleta. Dentro de este
mismo cilindro se encuentran dos filamentos; uno de ellos es el ctodo y el otro el nodo.
El nodo generalmente es un alambre grueso hecho de nquel o tungsteno, el ctodo es en
forma de un cilindro hueco, en el interior del cual se encuentra depositado en forma de una
capa el elemento metlico que se va a excitar.
Figura 40. Lmpara de ctodo hueco.
174
NEBULIZADOR
Cuando una solucin acuosa de sales inorgnicas disueltas es aspirada y dirigida hacia una
flama, en esta ocurre una serie de eventos que conducen a la formacin de tomos en la
misma. El quemador-nebulizador de premezclado o de flujo laminar tiene la siguiente
secuencia de pasos en su operacin: inicialmente la muestra liquida (en la cual estn
disueltos los componentes en forma de iones positivos y negativos) debe ser conducidas al
nebulizador.
Para esto se hace uso del efecto Venturi, este efecto se crea cuando el oxidante se
introduce a travs de un tubo diseado de manera tal que se genera un vaco lo cual produce
la succin de la muestra liquida a travs del tubo capilar. Este mismo efecto Venturi
favorece la formacin de pequeas gotas en forma de roco, cuando la solucin se hace
impactar sobre un cuerpo slido de diseo y geometra adecuada. El combustible
necesario, (generalmente acetileno) se introduce directamente a la cmara del nebulizador
por medio de un conducto adicional.
Debido a que el oxidante que se introduce a travs del nebulizador para el efecto Venturi no
es suficiente para una adecuada combustin, el resto requerido se introduce tambin a la
cmara del nebulizador por medio de un conducto adicional. El resultado es que el
quemador lleva finalmente una mezcla oxidante (aire) y combustible (acetileno) que
transportan pequeas gotas de roco de la muestra aspirada.
Las pequeas gotas formadas, son arrastradas por el flujo de gases (oxidante y combustible)
que tambin entran a la cmara de mezclado del nebulizador que sustentan la reaccin de
combustin en el quemador. nicamente las partculas que tienen tamaos menores de 10
mm, lo que representa solo una pequea fraccin del volumen de muestra aspirada llegan
finalmente al quemador, ms del 90 % de la solucin es desechada a travs de un tubo de
drenaje que el nebulizador tiene para este fin.
La intencin del drenaje es la de evitar que partculas demasiado grandes alcancen el

quemador. Cuando esto ocurre, debido a que el tiempo de residencia de la gota en la parte
ms caliente de la flama es de nicamente milsimas de segundo, si la gota es demasiado
grande, no se alcanzan a formar tomos a partir de esta, y es muy probable que se originen
falsas absorbancias.
175
Figura 41. Quemador-Nebulizador de premezclado o flujo laminar
QUEMADOR
Cuando la muestra pasa por el nebulizador y se forman las gotas de muestra, estas llegan al
quemador donde ocurren los siguientes eventos:
El solvente es vaporizado y se forman los cristales de las sales metlicas que

originalmente se encontraban en solucin como iones positivos y negativos. La
naturaleza de las sales formadas dependen principalmente de la constante del
producto de la solubilidad del compuesto que cristaliza.
Una vez formadas las sales, estas son descompuestas por efecto de la temperatura, y
el elemento es reducido al estado metlico slido.
Posteriormente el metal pasa del estado lquido al estado gaseoso y finalmente se

tiene en un vapor atmico que es capaz de absorber radiacin de longitudes de onda
bien definidas.
Si la temperatura es lo suficientemente alta y el elemento metlico es de bajo

potencial de ionizacin, parte de los tomos del elemento pierden uno o ms de sus
electrones y se ioniza parcialmente.
176
Cuando el vapor atmico absorbe la radiacin de la longitud de onda definida para
dicho vapor, se obtiene una medida gracias al detector, que transforma en relacin
proporcional las seales de intensidad de radiacin electromagntica y las enva al
sistema de lectura, pasando primeramente por un amplificador.
Cuando la seal del detector pasa por el amplificador llega al sistema de lectura
donde la seal se convierte de tal manera que el analista la pueda interpretar
(ejemplo: transmitancia o absorbancia).
La temperatura de la llama es un factor importante para la determinacin de una muestra, y

se utilizan varias mezclas para poder manejar el poder calorfico de la llama a la necesidad
de la muestra. Hay que destacar que cuando se utiliza el aire como oxidante se obtienen
temperaturas de 1700 a 2400 C con varios combustibles. A estas temperaturas slo las
muestras que se descomponen fcilmente, se atomizan; para la mayora de las muestras
refractarias, se debe emplear oxigeno u xido nitroso como oxidante. Estos oxidantes
producen temperaturas de 2500 a 3100 C con los combustibles habituales.
Las velocidades de combustin son de considerable importancia, porque las llamas slo son
estables en ciertos intervalos de caudal. Si el caudal no sobrepasa la velocidad de
combustin, la llama se propaga hacia el interior del quemador dando un fogonazo.
Cuando el caudal aumenta, la llama sube hasta alcanzar un punto por encima del quemador
donde el caudal y la velocidad de combustin son iguales; en esta regin es donde la llama
es estable. A caudales ms elevados, la llama sube y al final alcanza un punto donde se
aparta del mechero y se apaga. Estas consideraciones demuestran la importancia de
controlar el caudal de la mezcla combustible-oxidante. Las propiedades de los
combustibles y oxidantes utilizados en los anlisis por EAA son:
COMBUSTIBLE OXIDANTE TEMPERATURAS VEL. COMBUSTIN

(C) (CM/S)
Gas natural Aire 1700 - 1900 39 43
Gas natural Oxigeno 2700 - 2800 370 390
Hidrogeno Aire 2000 - 2100 300 440
Hidrogeno Oxigeno 2550 - 2700 900 1400
Acetileno Aire 2100 2400 158 266
Acetileno Oxigeno 3050 3150 1100 2480
Acetileno xido nitroso 2600 2800 285
Tabla 16. Propiedades de la llama en Absorcin Atmica.
177
En los anlisis por EAA se utilizan diferentes combinaciones de gases para producir la
reaccin de combustin en el quemador, la llama producida por el mechero presenta una
estructura en la cual se pueden identificar diferentes zonas (zona de combustin primaria, la
regin interconal y la zona de combustin secundaria). El aspecto y el tamao de estas
regiones varan considerablemente con la relacin combustible-oxidante, as como con el
tipo de combustible y oxidante. La zona de combustin primaria en una llama de
hidrocarburos se reconoce por su coloracin azul que proviene de los espectros de bandas
de C2, CH y otros radicales. En general, en esta zona no se alcanza el equilibrio trmico y
por ello, esta zona rara vez se utiliza en la espectroscopia de llama.
La regin interconal, que es relativamente estrecha en llamas de hidrocarburo

estequiomtricas, puede alcanzar varios centmetros de altura con fuentes ricas en
combustible de acetileno/oxigeno o acetileno/xido nitroso. La zona es fuertemente rica en
tomos libres y es la parte de la llama ms ampliamente utilizada en espectroscopia. En la
zona de combustin secundaria, los productos formados en la regin interior se convierten
en xidos moleculares estables que se dispersan por los alrededores.
Figura 42. Regiones de la llama en un quemador de premezclado o flujo laminar.
178
INSTRUMENTOS UTILIZADOS EN ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIN
ATMICA
El equipo utilizado para realizar el anlisis por espectroscopia por absorcin atmica es el
Espectrofotmetro de Absorcin Atmica. Existen equipos de un solo haz y otros de doble
haz. Los equipos ms utilizados actualmente son los de doble haz que logran aumentar la
estabilidad en el anlisis. En este equipo de doble haz, la radiacin emitida por una fuente
es dividida por un modulador con espejos; este consiste de una pieza circular con secciones
alternadas de espejo y partes huecas; esta pieza est girando, de manera que el haz de la
fuente pasa alternadamente por el hueco del modulador y llega a la flama o choca con una
seccin del espejo del mismo y es reflejado.
Estos dos haces son recombinados en un espejo especial (half-silvered mirror) pasan a
travs de un monocromador y finalmente la seal es enviada por medio de un
fotomultiplicador. Esta seal recibida por el sistema de lectura es la relacin entre la seal
de referencia y la seal de la muestra misma.
Figura 43. Diagrama esquemtico de un espectrofotmetro de absorcin atmica de doble

haz.
179
ANALISIS CUANTITATIVO POR (EAA)
Los anlisis cuantitativos realizados en espectroscopia de absorcin atmica son muy

semejantes a los realizados por espectroscopia UV/Visible. Para esto se prepara una serie
de estndares y se hace una curva de calibracin, con base a esta grfica se determina la
concentracin de las soluciones problema. Otras tcnicas aplicadas son:
Tcnica de Adicin de Estndar. Las propiedades fsicas de la solucin que se

aspira al quemador-nebulizador debern ser similares entre muestras problema y
soluciones estndar, ya que de lo contrario la eficiencia en atomizacin de la
solucin ser diferente y esto conducir a resultados errneos. Para evitar este
posible efecto se utiliza la tcnica de adicin de estndar la cual consiste en agregar
volmenes iguales de solucin problema a muestras estndar de concentracin
conocida, pero de diferente concentracin al elemento a determinar.
Aplicaciones Tpicas. La espectroscopia de absorcin atmica es muy til en la

identificacin de ms de 70 elementos. Tambin se pueden identificar metales en
petrleos, fluidos biolgicos, en el agua y en el aire.
INTERFERENCIAS
En los anlisis por espectroscopia de absorcin atmica se presentan interferencias

espectrales como no espectrales, las ms conocidas son:
Interferencia por dispersin de partculas. Cuando la solucin aspirada hacia el

quemador tiene un gran nmero de solidos disueltos, es probable que se tenga
interferencia por dispersin de partculas.
Interferencia por traslapamiento de bandas moleculares. Ocurre cuando la matriz
tiene cantidades grandes de compuestos moleculares sumamente complejos.
Interferencia por Ionizacin. Cuando la temperatura de la flama es muy alta y el
elemento pierde fcilmente uno o ms de sus electrones ms exteriores ocurre la
ionizacin.
Interferencias por volatilizacin del soluto. Cuando las sales formadas en el
quemador son de carcter refractario, estas resisten la descomposicin a tomos y
entidades ms simples si la temperatura no es lo suficientemente alta. La formacin
de entidades qumicas de resistencia a la volatilizacin en flamas comunes originan
interferencias, ya que no permiten que el analito sea atomizado eficientemente.
180
12.4 PROCEDIMIENTO
5. Solucin patrn de Fe (200 ppm): pesar 1,494 gramos de sulfato ferroso amnico
hexa-hidratado (Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O). Adicionar en un vaso de precipitado con
50 mL de agua destilada, adicionar lentamente 20 ml de cido sulfrico concentrado
(98%). Adicionar solucin de permanganato de potasio (KMnO4) gota a gota hasta
que persisti un color rosado plido. Se transfiri cuantitativamente a un baln
aforado de un litro y se enraso con agua destilada, se etiqueto y almaceno.
6. Solucin patrn de Mg (1000 ppm): pesar 1,000 gramos de magnesio en cinta

(que no est oxidada en la superficie), adicionar en un vaso de precipitado con 50
mL de agua destilada, adicionar 1 mL de HCL [1:1], y transferir la solucin a un
matraz aforado de 1 litro, llevar hasta aforo con agua destilada, enrasar y etiquetar.
7. Solucin patrn de Fe (200 ppm): transferir 50 mL de la solucin madre de Fe

(200 ppm) a un matraz de 250 mL, llevar hasta aforo con agua destilada, enrasar y
etiquetar.
8. Solucin patrn de Mg (100 ppm): transferir 10 mL de la solucin madre de Mg

(1000 ppm) a un matraz de 250 mL, llevar hasta aforo con agua destilada, enrasar y
etiquetar.
12.4.2 Preparacin de Patrones:
Para el anlisis de muestras por absorcin atmica, se deben preparar los patrones para realizar
la curva de calibracin teniendo en cuenta el rango de trabajo para cada elemento. Para el
anlisis de Fe y Mg se trabaja con los siguientes rangos:
Muestra Rango de trabajo

Fe 0,5 a 5 ppm
Mg 0,1 a 0,5 ppm
Teniendo en cuenta el rango de trabajo, preparar cinco patrones a partir de la solucin patrn
de cada muestra (Fe y Mg) en matraces aforados de 50 mL, utilizando las siguientes
indicaciones:
181
Patrones de hierro (Fe)
Patrn (ppm) Sol. Patrn de Fe Sol. Patrn de Fe Volumen final (mL)
100 ppm (mL) 100 ppm (L)
0,0 0,0 0,0 50
0,5 0,25 250 50
1,5 0,75 750 50
2,5 1,25 1250 50
3,5 1,75 1750 50
5,0 2,5 2500 50
Patrones de magnesio (Mg)

Patrn (ppm) Sol. Patrn de Mg Sol. Patrn de Mg Volumen final (mL)
100 ppm (mL) 100 ppm (L)
0,0 0,0 0,0 50
0,1 0,05 50 50
0,2 0,10 100 50
0,3 0,15 150 50
0,4 0,20 200 50
0,5 0,25 250 50
12.4.3 Determinacin:
Nota: antes de iniciar las determinaciones, se debe consultar el manual de funcionamiento del
Espectrofotmetro de Absorcin Atmica utilizado en el anlisis. Este manual consta de una
gua prctica que le permite al analista ajustar el equipo de acuerdo a las necesidades
requeridas para el anlisis.
Teniendo en cuenta el manual de funcionamiento del Espectrofotmetro de Absorcin

Atmica, cuadrar en el equipo para las muestras de Fe y Mg, la lmpara de ctodo hueco que
se debe utilizar, la longitud de onda de trabajo, el ancho de banda, la llama utilizada, entre
otros ajustes.
182
Figura 44. Diagrama de flujo para un anlisis por Absorcin Atmica.
Ajustes del espectrmetro de Absorcin Atmica para la muestra de Fe:
Lmpara de ctodo hueco: lmpara de Fe

Longitud de onda de trabajo (): 248,3
Ancho de banda: 0,2 nm
Llama utilizada: Aire / Acetileno
Llama oxidante
Unidades de concentracin: mg/L (ppm Fe)
Reporte de los Datos: Absorbancia
Ajustes del espectrmetro de Absorcin Atmica para la muestra de Mg:
Lmpara de ctodo hueco: lmpara de Mg

Longitud de onda de trabajo (): 285,2
Ancho de banda: 0,2 nm
Llama utilizada: Aire / Acetileno
Llama oxidante
Unidades de concentracin: mg/L (ppm Mg)
Reporte de los Datos: Absorbancia
183
Cuando se tengan preparados los patrones de Fe y Mg, y cuando el espectrmetro de
Absorcin Atmica se encuentre ajustado de acuerdo a las necesidades de cada muestra, medir
las absorbancias de cada patrn y construir la curva de calibracin. Identificar el coeficiente
de correlacin y realizar la curva de calibracin entre la concentracin de los patrones y la
absorbancia medida por el equipo. Con los resultados obtenidos, calcular la concentracin de
Fe y Mg en las muestras desconocidas.
Esta prctica no se realiz debido a que en el laboratorio de qumica de la UFPS, no

contamos con un equipo de Espectroscopia de Absorcin Atmica. Esta prctica se
introdujo en el presente manual debido a su importancia en la materia Anlisis
Instrumental, ya que conforma una de las cinco tcnicas ms utilizadas en los anlisis
instrumentales (Espectroscopia UV/Visible, Absorcin Atmica, Anlisis Infrarrojo,
Cromatografa de Gases y Cromatografa Liquida).
Como esta prctica no se pudo realizar, se muestra a continuacin una serie de imgenes de
un equipo utilizado para el anlisis de muestras por espectroscopia de Absorcin Atmica
(SOLAAR 969 AA SPECTROMETER):
1.
184
2.
3.
185
4.
5.
186
6.
Figura 45. Partes del Espectrofotmetro de Absorcin Atmica Solaar 969 AA

Spectrometer.
1) Combustible y oxidante utilizados en un anlisis por EAA.

2) Llaves reguladoras de presin y velocidad con la cual se inyectan en el equipo.
3) Compartimiento donde interactan los gases y el compartimiento de la lmpara de
ctodo hueco.
4) Compartimiento del quemador-nebulizador, en l se genera la llama que entra en
contacto con el analito previamente transformado en una nube de finas gotas
(Nebulizador), y genera un color caracterstico para cada elemento analizado.
5) Mechero del quemador, en el cual se genera la llama con tres partes, la zona de
combustin primaria, la zona de combustin secundaria y la regin interconal.
6) Espectrofotmetro de Absorcin Atmica listo para ejecutar un anlisis qumico.
Fuente:
Imgenes tomadas de la Universidad de Murcia, Espaa, Departamento de qumica,

proyecto de investigacin Aplicaciones Docentes de la Absorcin Atmica. Disponible
en <URL: http://www.doredin.mec.es/documentos/01820091005583.pdf.
187
El espectrofotmetro de absorcin atmica (SOLAAR 969 AA SPECTROMETER), trabaja
con un programa computacional denominado (SOLAR AA), este programa le ordena al
equipo que se prepare para el anlisis, y luego nos indica los pasos que debemos seguir
dependiendo del anlisis que se desea realizar, se tom una hoja de informe (resultado
arrojado por el equipo al realizar un anlisis de Fe en una muestra desconocida), y se anexa
a continuacin para conocer los resultados que puede llegar a generar el espectrofotmetro
de absorcin atmica:
Figura 46. Reporte final de un anlisis de Fe por (EAA) utilizando el software Solar AA.
188
12.6 CUESTIONARIO
1. Realizar la curva de calibracin entre la Absorbancia vs Concentracin de los

patrones.
2. Determinar la concentracin de hierro (Fe) en la muestra problema y expresar el

resultado en ppm.
3. Determinar la concentracin de Magnesio (Mg) en la muestra problema y expresar

el resultado en ppm.
4. Cul es la importancia de la espectroscopia de absorcin atmica en los diferentes

campos de la qumica?
R/ la espectroscopia de absorcin atmica es muy importante no solo en el campo de la

qumica, sino tambin muy recomendado para anlisis en sectores farmacuticos,
ambientales, mdicos, entre otros. Algunas aplicaciones de los anlisis por absorcin
atmica en los diferentes campos de la ciencia son:
Ambiental: permite la medicin exacta de los metales en el aire y suelo.

Alimentos: permite la identificacin del contenido nutricional de productos para el
consumo humano.
Farmacutico: permite conocer la calidad de los productos farmacuticos.
Agricultura: permite identificar la cantidad de sustancias esenciales para el
crecimiento de las plantas.
5. Qu entiende por Nebulizador?
R/ el nebulizador es la parte del espectrofotmetro de absorcin atmica, que transforma la

muestra liquida en un aerosol fino (pequea nube de vapor), y se introduce en la llama para
alimentar el quemador.
189
6. Qu interferencias se pueden presentar en un anlisis por espectroscopia de
absorcin atmica?
R/ Interferencia es el efecto de un contaminante presente en una muestra sobre la seal

generado por el analito. La presencia de una interferencia conduce en todos los casos a un
error sistemtico. En la espectroscopia de absorcin atmica suelen presentarse algunas
interferencias como:
Espectrales, incluyendo efectos de absorcin de fondo.
Fsicas, asociadas con el transporte y dispersin de la muestra en la llama.
Qumicas, relacionadas con la vaporizacin del soluto.
De ionizacin, relacionadas con la variacin de la concentracin de tomos neutros
o absorbentes en la llama.
7. El cobre se asla de las muestras de tejido mediante digestin, tras la extraccin de

todo el tejido graso la concentracin de Cu en el sobrenadante se determina por
EAA, utilizando una llama aire acetileno. Una muestra de tejido seco y sin grasa,
se digiere a 68 C, durante 24 horas con 2 mL de HNO3 (0,75 M). El sobrenadante
se pasa a un baln de 5 mL y se lleva hasta aforo con HNO3 (0,75 M), el cobre se
analiz en un EAA a una =324,8 nm. Calcular la concentracin de Cu expresada
en g Cu/g de tssg (tejido seco sin grasa), si se analiza una muestra de 0,01123 g de
tssg cuya absorbancia es de A= 0,023?
Concentracin ppm de Cu Absorbancia

0,000 0,000
0,100 0,006
0,200 0,013
0,300 0,020
0,400 0,026
0,500 0,033
0,600 0,039
0,700 0,046
1,000 0,066
R/ Lo primero que se debe realizar es la identificacin del coeficiente de correlacin, para

determinar si los patrones cumplen con la curva de calibracin, y se identifica la
concentracin de Cu a la longitud de onda analizada:
190
Los datos obtenidos son:
r = 0,9999
b = 0,06607
a = -2,318 x 10- 4
A = bC + a
C = A- a
b
C = 0,023 + 2,318 x 10- 4 = 0,3516 ppm de Cu

0,06607
CCu= 0,3616 mg Cu x 1 g x 1 L solucin x 5 mL solucin

L solucin 10-3 mg 1000 ml 0,01123 g (tssg)
CCu= 160,99 g Cu / g (tssg)
12.7 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Instrumental. 5 ed. Editorial McGraw Hill, 2001. P 219.
WALTON Harold F., REYES Jorge. Anlisis Qumico e Instrumental Moderno.

Captulo 8, Espectroscopia de Absorcin Atmica. 1a ed. Editorial Revert, S. A.,
Espaa 1983. P 243.
ROCHA Castro E. Principios Bsicos de Espectroscopia. 1 ed. Editorial UACh,

Mxico (2000). P 140.

Prentice Hall, 2000. P 303.
191
Fundamentos de Qumica Analtica 8a ed. Editorial Revert 1997. P 853.
PRUSHAN M. J. Instrumental Analysis Manual, LA SALLE UNIVERSITY.

Atomic Absorption Analysis of Calcium in Milk. P 45.
Universidad de Alicante, Servicios Tcnicos de Investigacin, Espectroscopa de

Absorcin Atmica, disponible en <URL: http://www.ua.es/es/investigacion/sti/
servicios/analisis_instrumental/analisis/aas.html
UNAL, Universidad Nacional de Colombia, sede Bogot. Direccin Nacional de

Servicios Acadmicos Virtuales. Contenidos en lnea, Qumica Analtica II,
Funcionamiento de un Espectrofotmetro de Absorcin Atmica, disponible en
<URL:http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap05/ani
macion6.htm
192

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MANUAL DE PRCTICAS

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1.2 FUNDAMENTOS TERICOS

Para poder trabajar dentro del laboratorio de anlisis instrumental es necesario el

1.3.1 NORMAS GENERALES PARA EL LABORATORIO DE ANLISIS

Es condicin indispensable para entrar en una prctica, vestir la bata de laboratorio.

1.3.3 IDENTIFICACIN DE SUSTANCIAS PELIGROSAS

Cualquier producto qumico presente en un laboratorio de trabajo debe contener

La identificacin de la sustancia: el trmino empleado para la identificacin de la

Composicin: la informacin aportada debe permitir al destinatario conocer sin

- Riesgo de inflamabilidad: el riesgo ms comn dentro de un laboratorio es un

- Riesgo de explosin: las explosiones pueden ocurrir fcilmente en un

Primeros auxilios: debe especificarse en primer lugar si se precisa asistencia mdica

Manipulacin y almacenamiento: especificar las precauciones necesarias para

Propiedades fsicas y qumicas: para permitir la adopcin de las medidas adecuadas

Informaciones toxicolgicas: las sustancias o algunos preparados que por algn

1.3.4 PRIMEROS AUXILIOS EN EL LABORATORIO DE ANLISIS

Cuando se trabaja en un laboratorio los estudiantes se encuentran expuestos a diversos

Quemaduras o corrosiones: Por fuego u objetos calientes, no lavar la lesin con

Inhalacin de sustancias qumicas: Llevar al paciente al aire fresco inmediatamente

Ingestin de sustancias qumicas: antes de cualquier actuacin concreta es de vital

- cidos corrosivos, no provocar jams el vmito. Administrar lechada de

- lcalis corrosivos, no provocar jams el vmito, administrar abundantes tragos

- Sustancias toxicas, cuando se haya ingerido una sustancia toxica o venenosa,

En cada laboratorio se debe tener un botiqun de primeros auxilios, que proporcione

Algodn Alcohol etlico

1.3.6 ORGANIZACIN EN EL LABORATORIO DE ANLISIS

La organizacin en el laboratorio debe estar debidamente respaldada por una serie de

Preparacin de la prctica: antes de realizar la prctica en el laboratorio, se debe

Limpieza: al inicio de cada prctica de laboratorio se debe contar con materiales y

1.3.7 LA BITCORA O CUADERNO DE LABORATORIO

Durante el desarrollo de las diferentes prcticas de laboratorio se proporcionan diversos

Es aconsejable el uso de un cuaderno cuadriculado, ya que la cuadrcula facilita la

1.3.8 EL INFORME DE LABORATORIO

Al finalizar cada prctica de laboratorio, el estudiante deber presentar ante su docente un

Ttulo de la prctica: En l se coloca el nombre completo de la prctica realizada.

1. Antes de manipular una sustancia qumica Qu se debe conocer de ella?

2. Qu se entiende por ficha de seguridad de una sustancia qumica?

3. Estructurar la ficha de seguridad para el etanol al 96%.

R/ A continuacin se muestra la ficha de seguridad tomada de la MERCK

Sinnimos Alcohol etlico

4. Qu se entiende por un emtico, antdoto y como se prepara el antdoto universal?

R/ A continuacin se puede observar la informacin de cmo se debe almacenar

1.5 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

RODRGUEZ Mencas Emilio., FRANCO Luis Manuel., Manual de Toxicologa

VALCRCEL M., ROS A. La Calidad en los Laboratorios Analticos. 1 a ed. Ed.

CALVO Verde J. R., EESCANILLA Hurtado Mara de Lourdes., DORANTES R.

ESTANDARIZACIN DE HIDRXIDO DE SODIO (NaOH)

Conocer la importancia de las valoraciones cidobase y sus propiedades analticas.

2.2 MATERIALES Y REACTIVOS

6 Matraces Erlenmeyer de 250 mL Solucin hidrxido de sodio

2.3 FUNDAMENTOS TERICOS

Las valoraciones o titulaciones qumicas son todos aquellos mtodos de anlisis

En el anlisis volumtrico se utiliza una solucin patrn o estndar, de concentracin

Directo: Cuando se disuelve una cantidad exactamente pesada de la sustancia

Indirecto: Muchos compuestos no se consideran patrones primarios, por lo cual el