MICROBIOLOGA AMBIENTAL

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

INFORME COMPONENTE PRCTICO

CURSO DE MICROBIOLOGA AMBIENTAL

INFORME COMPONENTE PRCTICO

PRESENTADO POR:

CRISTIAN CAMILO ACOSTA

TUTORA:

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (UNAD)

IBAGUE TOLIMA
NOVIEMBRE - 2017

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INFORME COMPONENTE PRCTICO

INTRODUCCIN

LA MICROBIOLOGA AMBIENTAL Permite dar a conocer diferentes aspectos del

funcionamiento e interaccin y aplicacin de los microorganismos en la biosfera
(suelo, agua y aire) y entender la importancia de su intervencin, ya sea perjudicial
o benfica. Conocer los tipos de relaciones existentes entre los diferentes grupos
de microorganismos, clulas eucariota, procariotas, hongos Entender los
mecanismos que utilizan los microorganismos en el ciclaje de elementos

Dentro de las tcnicas de laboratorio que implementamos en este componente

practico de la (unad) est la de conseguir destreza en el manejo del microscopio,
conseguir una correcta siembra de microorganismos, hacer la correcta valoracin
de las muestras a travs, del poder de resolucin del microscopio, el cual se define
como la capacidad que posee un objetivo para distinguir las formas de determinados
organismos que permiten su clasificacin; junto con la ayuda del microscopio existe
una gran variedad de tinciones que pueden ser aplicadas dentro del campo de la
microbiologa como son la tincin de Gram que es til en la clasificacin de bacterias
Gram positivas y gran negativas las cuales requieren de diferentes tratamientos
mdicos. Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra
se tie del mismo color y se utiliza un slo colorante (azul de lactofenol o tinta china);
tincin diferencial, cuando se visualiza ms de un color porque se utiliza ms de un
colorante (Gram o Ziehl-Neelsen); es este caso no se utiliz; El control de calidad
de los mtodos tintoriales es importante, ya que as se asegura que la preparacin
de la muestra haya sido adecuada, por lo que se recomienda realizar al mismo
tiempo de la evaluacin de la muestra. Las tinciones en microbiologa son las
primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnstico de las
enfermedades infecciosas, e identificacin de microorganismos.este tipo de
tcnicas Desde hace ms de un siglo han ayudado a resolver problemas de etiologa
microbiana. Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para
la deteccin de los diferentes agentes infecciosos en los que se incluyen bacterias,
parsitos y hongos. La tincin de Gram se considera bsica en la valoracin inicial
de muestras para anlisis bacteriolgico, Hay tcnicas tintoriales especficas de
gran utilidad, como la tincin de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el diagnstico de
enfermedades crnicas como la tuberculosis o la actinomicosis, o la tincin de azul
de lactofenol, que preserva e identifica a los componentes estructurales de los
hongos. Las diferentes tinciones en el laboratorio microbiolgico tienen una utilidad
fundamental para el diagnstico y tratamiento oportuno de mltiples patologas de
etiologa infecciosa y diagnstico de problemas ambientales.

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ANALISIS DE MICROSCOPIA ESCAMAS DE MARIPOSA

MATERIALES:

Microscopio.
Escamas de Mariposa.
Porta Objeto
PROCEDIMIENTO:

Se ubica en el porta objetos muestras de escamas de Mariposa y se procede a

observar por medio del Microscopio al 4x y 10x.

ANALISIS DE MICROSCOPIA SULFATO DE COBRE

MATERIALES:

Microscopio.
Sulfato de Cobre
Porta Objeto

PROCEDIMIENTO:

Se ubica en el porta objetos muestras de Sulfato de Cobre y se procede a observar

por medio del Microscopio al 4x y 10x.

SIEMBRA DE BACTERIAS E-COLI Y STAPHYLO COCO

MATERIALES:

Microscopio.
Caja de Petri.
Porta Objeto
Bacterias Ecoli y Staphylococo.
Agar Nutritivo.
Asa Redonda

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PROCEDIMIENTO:

1. Se esteriliza el asa redonda.

2. Se deja Enfriar.
3. Se toma la muestra de bacterias Ecoli.
4. Se siembra en el Agar Nutritivo por medio de agotamiento.
5. Se esteriliza el Aza, se deja enfriar y se toma la muestra del microorganismo
Staphylococo.
6. Se siembra la muestra por medio de zigzag o estras en agar nutritivo.
7. Se tapan y voltean las cajas boca abajo para su incubacin durante 24 horas.
8. Se procede a tomar muestras de los organismos sembrados en las cajas y
se proceden a observarlas en el microscopio.

PROCEDINMIENTO CON HONGO PROCEDENTE DEL PAN

MATERIALES:

Microscopio.
Caja de Petri.
Porta Objeto
Pan en descomposicin
PDA.
Asa Redonda

PROCEDIMIENTO:

1. Se esteriliza el aza recta.

2. Se deja enfriar y se procede a tomar muestras del hongo en el pan.
3. Se siembran las muestras en el medio de cultivo PDA por puncin.
4. Se deja encubando, para su posterior tincin.
5. Se toma una muestra, se coloca en el porta objetos y se procede a
observarse por el microscopio
6. Se observan presencia en el pan de Aspergillus al 10x

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TINCION SIMPLE STAPHYLOCOCO

1. Se aplica agua en una placa.

2. Se esteriliza el aza redonda y se deja enfriar.
3. Se toma muestras de Staphylococo.
4. Colocar la muestra en la placa.
5. Se fija con el mechero.
6. Se adiciona una gota de azul de metileno.
7. Se remueve el exceso de colorante.
8. Lavar la parte posterior de la placa.
9. Dejar secar.
10. Observar por el microscopio en 10x y 40x.

TINCION TINTA CHINA ECOLI

PROCEDIMIENTO.

1. Se aplica una gota de agua en la placa.

2. Se esteriliza el aza redonda y se deja enfriar.
3. Se toman muestras de Ecoli.
4. Se esparce la muestra en la placa o porta objetos.
5. Se fija la muestra con el mechero.
6. Se adiciona una gota de tinta china en una esquina de la placa.
7. Se esparce la tinta en la muestra con el cubre objetos.
8. Se fija con el mechero.
9. Se deja enfriar para proceder a observarlo por el microscopio.

TINCION DE GRAN + Y GRAN

PROCEDIMIENTO:

1. Se aplica una gota de agua en la porta objetos.

2. Se esteriliza el aza redonda y se deja enfriar.
3. Se toman muestras de las bacterias.
4. Se esparce la muestra en la porta objetos.
5. Se fija la muestra con el mechero.
6. Se esteriliza el aza.
7. Se realiza el mismo procedimiento para las otras dos bacterias.
8. Se dejan secar.

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9. Se adiciona cristal violeta y se espera durante 1 minuto para remover el

sobrante del colorante con agua.
10. Se adiciona solucin fijadora lugol se espera durante 1 minuto para remover
el sobrante de la solucin con agua.
11. Se adiciona alcohol cetona (decolorante) se espera durante 1 minuto para
remover el sobrante del alcohol con agua.
12. Se adiciona safranina se espera durante 1 minuto para remover el sobrante
del colorante con agua.
13. Se realiza el mismo procedimiento con la siguiente muestra se dejan secar y
se procede a observar por el microscopio.
14. Se observan que los microorganismos de Staphylococo son gran + y la Ecoli
son gran -

TINCION CON HONGOS DEL TOMATE

PROCEDIMIENTO

1. Se esteriliza el aza recta.

2. Se adiciona una gota de azul de lactofenol en la porta objetos.
3. Se toma una muestra del hongo del tomate y se aplica en la porta objetos.
4. Se coloca el cubre objetos con cinta de enmascarar y se procede a
llevarlo al microscopio
5. Se observan presencia del hongo penicilium.
6. Cuando se coloca la muestra y se procede a verlo sin cinta no se identifica
muy bien el microorganismo.

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CONCLUSIONES

La gran versatilidad metablica de los microorganismos hace que los podamos

encontrar prcticamente en cualquier entorno. Los alimentos son fcilmente
colonizados (contaminados), ya sea de forma natural, en origen o durante el
procesamiento y la manipulacin.
Un laboratorio de Microbiologa es un lugar convenientemente habilitado donde se
pueden manejar y examinar microorganismos. Este tipo de trabajo debe ser llevado
a cabo con una buena tcnica asptica, y por tanto se requiere un ambiente limpio
y ordenado y trabajar siempre en condiciones de esterilidad (en campanas de
esterilidad biolgica o en la proximidad de la llama de un mechero de alcohol o de
gas).
Aunque los microorganismos que se manipulen no sean considerados patgenos,
todos los cultivos de todos los microorganismos deben ser manejados con
precaucin por su potencial patogenicidad.
Las tinciones utilizadas en el laboratorio de microbiologa permiten el diagnstico
oportuno y sugerente de los agentes infecciosos, por lo que juegan un papel
importante en la decisin del tratamiento inicial de las enfermedades infecciosas.
Se debe practicar la tincin adecuada de acuerdo con el agente infeccioso en
sospecha y el tipo de muestra clnica. Las tinciones son herramientas elementales,
vigentes y de uso universal que coadyuvan al diagnstico microbiolgico.
Esta tincin es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios
donde se manejan pruebas microbiolgicas. Es definida como una tincin
diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes
grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas
La pared celular de las bacterias Gram negativas est constituida por una capa fina
de peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram
positivas poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano, pero no
cuentan con membrana celular externa; as pues, la composicin qumica y el
contenido de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y
Gram positivas explica y determina las caractersticas tintoriales
Para la correcta identificacin de hongos de inters clnico, ya sea confines de
diagnstico o estudios taxonmicos, es necesario observar las estructuras fngicas
con una alta calidad y contraste; para ello se utilizan diversos compuestos qumicos
que permitan la tincin entre la pared y el citoplasma de las clulas fngicas. Para
esto se utiliza el lactofenol

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BIBLIOGRAFIA

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