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MTODO PARA LA DETERMINACIN DE SALMONELLA SPP.

EN
ALIMENTOS (HUEVO CRUDO).
MARTNEZ CASTRO, J. A.
UNIVERSIDAD AUTNOMA DE NAYARIT, UNIDAD ACADMICA DE CIENCIAS
QUMICO-BIOLGICAS Y FARMACUTICAS.

RESUMEN
En este trabajo se realiz un anlisis microbiolgico de una muestra slida (Huevo
crudo) para la identificacin y determinacin de Salmonella (prenriquecimiento,
enriquecimiento selectivo, seleccin en medios slidos e identificacin bioqumica) de
acuerdo a la NOM-114-SSA1-1994, donde los resultados obtenidos se pueden
observarse ms adelante (vase tabla 1 y 2).

PALABRAS CLAVES: Huevo crudo, Salmonella spp, inoculacin, caldo malonato,


caldo manitol, Agar XLD, Agar VB, Agar HK, Agar SB, Agar SS, Agar Mac Conkey,
RMVP, LIA, KIA, SIM, Urea, Citrato de Simmons y Asa bacteriolgica.

INTRODUCCIN son oxidasa negativos y catalasa


Al inicio del siglo XIX, patlogos negativos, crecen en citrato como
clnicos en Francia documentaron la nica fuente de carbono, generalmente
asociacin de la ulceracin intestinal producen cido sulfhdrico,
humana con un agente contagioso; la descarboxilan la lisina y ornitina, y no
enfermedad fue denominada como hidrolizan la urea. La mayora de estas
fiebre tifoidea y posteriormente caractersticas se utilizan para la
investigadores Europeos aislaron y identificacin bioqumica de cepas
caracterizaron al bacilo tifoideo aisladas de Salmonella.3
responsable de sta, mientras que en
los Estados Unidos, Salmon y Smith De acuerdo con la definicin
en 1885, aislaron de carne de puerco a contempornea, una cepa de
Bacillus cholerae-suis, ahora conocido Salmonella tpica produce cido y gas
como Salmonella entrica serovar a partir de la glucosa en el agar hierro
Cholaraesius. Salmonella spp. es un tres azcares, pero no es capaz de
bacilo Gram-negativo anaerobio utilizar lactosa y sacarosa en ste
facultativo perteneciente a la familia medio, o en medios slidos selectivos
Enterobacteriaceae. Aunque los tales como verde brillante, xilosa lisina
miembros de este gnero son capaces desoxicolato y/o entrico de Hekten.
de moverse por medio de flagelos Las especies tpicas de Salmonella
pertricos, existen variantes no producen en agar hierro lisina, una
mviles, S. entrica serovar Pullorum y rpida reaccin alcalina por la
S. enterica serovar Gallinarum, as descarboxilacin de la lisina y generan
como cepas no mviles debido a la cadaverina. La variabilidad gentica
presencia de flagelos disfuncionales. observada en este microorganismo ha
Las especies de Salmonella son originado mutaciones, e intercambio
quimioorgantrofas, con habilidad para intra e intergenrico de plsmidos lo
metabolizar nutrientes por las vas cual ha reducido los biotipos tpicos de
fermentativa y respiratoria. Las Salmonella. En muestras clnicas y de
bacterias crecen ptimamente a 37C alimentos se han encontrado biotipos
y pueden catabolizar la D-glucosa y lac+ y/o sac+; biotipos que no
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otros carbohidratos con produccin de descarboxilan la lisina, que incluso


cido y gas. Estos microorganismos hidrolizan la urea, que producen indol y

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que crecen rpidamente en KCN. Esta contaminacin ambiental de especies y
situacin ha llevado a reevaluar el condimentos durante el secado y la
esquema de identificacin del gnero, resistencia del microorganismo a
e incluso a utilizar tecnologas valores de pH bajos. El desarrollo
moleculares para establecer loci incompleto del sistema inmune en
genticos y/o productos nicos para el recin nacidos e infantes, el
gnero Salmonella. La identificacin abatimiento en la respuesta
bioqumica de Salmonella se realiza inmunolgica en individuos de la
generalmente junto con una tercera edad, y la baja produccin de
confirmacin serolgica. Esta tcnica cidos gstricos en estos sectores de
laboriosa implica la aglutinacin de los la poblacin facilita la colonizacin
antgenos superficiales bacterianos intestinal y distribucin sistmica del
con anticuerpos especficos para el microorganismo. Se ha demostrado
gnero. Estos incluyen los que la ingesta de solamente algunas
lipopolisacridos (LPS) somticos (O) clulas de Salmonella pueden ser
en la superficie externa de la infecciosas. La dosis infectiva en
membrana externa, los antgenos humanos flucta entre 1 a 10 clulas.
asociados con los flagelos pertricos La composicin qumica del alimento
(H) y el antgeno capsular (Vi), este es otro factor determinante en la
ltimo presente solamente en salmonelosis adems de la
Salmonella serovar Typhi, Paratyphi C heterogeneidad inmunolgica en la
y Dubln.2 poblacin humana y la virulencia de las
cepas infectivas. Un denominador
La amplia distribucin de Salmonella comn de los alimentos involucrados,
spp. en el medio ambiente, aunada a es la presencia de un alto contenido de
las prcticas agrcolas utilizadas en la grasa en alimentos como el chocolate,
industria crnica, pesquera, de el queso y la carne. Se ha sugerido
moluscos, lctea y el reciclaje de la que las clulas de Salmonella
materia prima como alimento para englobadas en las micelas lipdicas
ganado, ha favorecido la continua pueden resistir el efecto ltico de los
permanencia de este patgeno cidos gstricos. Las infecciones por
humano en la cadena alimenticia. El Salmonella en humanos pueden
sector avcola se sita como la originar varias condiciones clnicas,
principal fuente de Salmonella spp. y incluyendo fiebre entrica (tifoidea),
enmascara la importancia como enterocolitis e infecciones sistmicas
vehculos de infeccin de las carnes de por microorganismos no tifoides. La
puerco, de res, de cordero, leche y sus fiebre entrica es una infeccin grave
derivados. Las frutas y verduras han asociada con las cepas tifoidea y
ganado notoriedad en aos recientes paratifoidea, las cuales estn
como fuentes de salmonelosis particularmente bien adaptadas para
humana. Esto se presenta como una invadir y sobrevivir en los tejidos del
consecuencia de diversos factores husped. Las manifestaciones clnicas
como: la fertilizacin de sembrados de la fiebre entrica aparecen despus
con lodos sin tratamiento o efluentes de un periodo de incubacin de 7 a 28
de drenajes potencialmente das y pueden incluir diarrea, fiebre
contaminados con Salmonella spp. prolongada con variaciones en la
resistente a antibiticos, la irrigacin misma, dolor abdominal, dolor de
de los campos y el lavado de frutas y cabeza, y debilitamiento. El
verduras con aguas contaminadas, la diagnstico de la enfermedad radica
2

manipulacin excesiva por los en la deteccin del agente infectivo en


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trabajadores, la exposicin a la etapas tempranas en la sangre o en

2
heces al inicio de la sintomatologa
clnica. El tratamiento incluye el uso de
cloranfenicol, ampicilina, o trimetroprim OBJETIVO GENERAL
con sulfametoxasol para eliminar la Aplicar adecuadamente la
infeccin sistmica. En pases tcnica descrita en la Norma
subdesarrollados como el nuestro, el Oficial Mexicana para la
uso indiscriminado de estos
deteccin del gnero
antibiticos ha originado la existencia
Salmonella.
de cepas resistentes que causan altas
tasas de mortalidad cuando se Explicar el fundamento de todas
presenta un brote de este tipo. La las etapas del mtodo de
infeccin en humanos con Salmonella deteccin de Salmonella en
spp. no tifoide provoca enterocolitis, alimentos.
sta aparece de 8 a 72 h despus de
tener contacto con el patgeno FUNDAMENTO
invasivo. La condicin clnica es auto La presente tcnica para la deteccin
limitante y la evacuacin de heces de Salmonella en alimentos, describe
tpicas diarreicas no sanguinolentas y un esquema general que consiste de 5
dolor abdominal se presentan a los 5 pasos bsicos:
das. El tratamiento solo implica Preenriquecimiento, es el paso en
reemplazo de fluidos o electrolitos. El
donde la muestra es enriquecida en un
uso de antibiticos est contraindicado
ya que prolonga la sobrevivencia y la medio nutritivo no selectivo, que
excrecin intermitente del permite restaurar las clulas de
microorganismo. Este microorganismo Salmonella daadas, logrando de esta
se identific originalmente en manera una condicin fisiolgica
hospitales y laboratorios clnicos y los estable.
mtodos empleados para su deteccin, Enriquecimiento selectivo, se logra a
se adaptaron posteriormente al anlisis partir de un medio de cultivo que
de alimentos. Las modificaciones a los conjunte dos condiciones, por un lado
mtodos, consideraron dos aspectos debe incrementar las poblaciones de
principales, el primero es el Salmonella y por otro inhibir otros
debilitamiento o dao a las clulas microorganismos presentes en la
bacterianas presentes, debido al
muestra.
proceso al que se somete el alimento
Seleccin en medios slidos, este
(por ejemplo: tratamiento trmico,
secado, etc.) y segundo, la variabilidad punto se deriva directamente del
inherente a la naturaleza del producto anterior y se utilizan medios selectivos,
bajo estudio.3 que restringen el crecimiento de otros
gneros diferentes a Salmonella y que
Para diferentes tipos de alimentos, permitan el reconocimiento visual
existen distintos protocolos para el caracterstico de colonias
aislamiento de Salmonella, todos ellos sospechosas.
son esencialmente similares en Identificacin bioqumica, este paso
principio y emplean las etapas de permite la identificacin genrica de
preenriquecimiento, enriquecimiento los cultivos de Salmonella y la
selectivo, aislamiento en medios de eliminacin de cultivos sospechosos
cultivos selectivos y diferenciales,
falsos.
identificacin bioqumica y
3

confirmacin serolgica de los Serotipificacin, es una tcnica


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microorganismos.2 inmunolgica (antgeno-anticuerpo)

3
que permite la identificacin especfica yoduro de potasio y 0.1 mL de solucin
de un microorganismo.4 de verde brillante al 0.1 %)
Caldo selenito cistina
MATERIALES Y MTODOS1 Caldo Vassiliadis-Rappaport (en
Aislamiento selectivo. sustitucin del caldo tetrationato)
El siguiente mtodo se bas en el Se incubaron los tubos inoculados en
anlisis de 25.0 g de la muestra, que caldo selenito-cistina, caldo
se considera como una unidad tetrationato y/o caldo Vassiliadis-
analtica, en una proporcin de 1:9 de Rappaport a 351C durante 24 h.
muestra/caldo. Esta cantidad pudo ser Para alimentos altamente
variada cuando se mantenga la misma contaminados se incubaron los medios
proporcin de 1:9 en el medio de de enriquecimiento a 42C por el
preenriquecimiento. La mnima mismo periodo.
muestra recomendada es de 25.0 g, es
decir, una unidad analtica. Aislamiento diferencial
Se homogeniz cada tubo con caldo
Preenriquecimiento. de enriquecimiento ya incubado y se
Se pes en una bolsa de Stomacher tom una muestra del cultivo anterior
estril, en rea asptica 25.0 g de con asa microbiolgica estril para su
muestra a analizar. Se vertieron 225.0 posterior siembra en estra por
mL de caldo lactosado estril en la agotamiento en cuadrantes en cajas
bolsa. Seguido de esto la muestra se de Petri, en cada uno de los siguientes
homogeniz con el diluyente durante medios selectivos:
30.0 segundos a velocidad media en el Agar XLD
Stomacher. Se prosigui con la Agar VB
transferencia asptica de la mezcla Agar HK
homogeneizada a un recipiente estril Agar SB
de boca ancha con tapn de rosca y se Agar SS
dej reposar por 60.0 min. a Agar Mac Conkey
temperatura ambiente con la tapa Cada caja ya sembrada se incub en
perfectamente cerrada. Posteriormente posicin invertida a 352C durante
se mezcl bien y se determin el pH 242 h. Posteriormente se observaron
de la muestra con tiras reactivas. las caractersticas macroscpicas de
Enseguida se mezcl y cerr las colonias en los medios slidos
suavemente la tapa del matraz. Se selectivos. Despus se seleccionaron
incub la muestra homognea a 2 colonias sospechosas de cada medio
352C durante 24 h. selectivo, de acuerdo con las
caractersticas especficas de
Enriquecimiento selectivo desarrollo en cada uno de los medios
Para esta parte del procedimiento se (Consultar el Cuadro 1). Se
cerr firmemente el tapn de rosca de almacenaron en refrigeracin de 5 a
los matraces con los cultivos de 8C, las placas con medios selectivos
preenriquecimiento y agitar por si era necesario tomar ms
suavemente. Seguido de esto se colonias.
transfirieron 1.0 mL del cultivo de Se realiz una tincin de Gram a las
preenriquecimiento (con una pipeta de colonias sospechosas y se registraron
vidrio de 1 mL, estril) a un tubo con las caractersticas morfolgicas tanto
10.0 mL de cada uno de los siguientes macroscpicas como microscpicas;
anotando la forma de la colonia, su
4

medios de enriquecimiento:
color, color del medio circundante,
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Caldo tetrationato (previamente


activado con 0.2 mL de solucin yodo- morfologa al Gram, etc. Por ltimo se

4
realiz una purificacin de las colonias tubo con caldo urea o caldo Surraco.
seleccionadas, sembrando Posteriormente se incub a 352C
nuevamente en estra por agotamiento durante 24 2 h. Por ltimo se
en cuadrantes en cajas de Petri descartaron todos los cultivos que
conteniendo un medio idntico del que resultaron ureasa positiva y se
se tom la colonia. conservaron los cultivos que resultaron
la prueba negativa.
Pruebas bioqumicas preliminares
Agar triple azcar hierro o agar Caldo urea (rpida). Con un asa
Kligler hierro. Se registraron las bacteriolgica estril, se tomaron dos
caractersticas del medio TSI o KIA asadas de crecimiento del cultivo
antes de la inoculacin (color del presumiblemente positivo de cada tubo
medio). Por duplicado se tom de medio TSI/KIA o LIA y se inocularon
suavemente una porcin del centro de tubos de caldo urea (rpida).
la colonia con un asa bacteriolgica Enseguida se incubaron a 370.5C
recta, calibrada y estril y se inocul durante 2 h en bao de agua. Por
por picadura y estra en un tubo con ltimo se descartaron todos los cultivos
agar triple azcar hierro (TSI) o agar que resultaron ureasa positiva y se
de Kligler (KIA) inclinado. Por ltimo se conservaron los cultivos que den la
incub el medio TSI o KIA a 352C prueba negativa.
durante 24 h.
Agar citrato de Simmons. Con un
Agar lisina hierro. Se sigui la misma asa bacteriolgica recta y estril se
operacin que se hizo para KIA o TSI, tom una asada del crecimiento del
tomando la asada de la misma colonia tubo de TSI/KIA o LIA y se inocul por
con la que se sembr en estos medios, estra en el tubo con agar citrato de
pero sembrando ahora en el agar lisina Simmons. Por ltimo se incub a
hierro (LIA) Se retuvieron todos los 352C durante 962h.
cultivos que mostraron las reacciones
caractersticas de Salmonella en los Medio SIM (Sulfuro-indol-movilidad).
medios TSI (o KIA) y LIA para realizar Con un asa bacteriolgica recta y
las pruebas bioqumicas estril se tom una asada del
complementarias. crecimiento del tubo TSI/KIA o LIA y se
Los cultivos desarrollados en TSI o KIA inocul por puncin vertical en el tubo
que no parecen de Salmonella pero con medio de SIM. Enseguida se
que presentan reacciones en LIA incub a 352C durante 24 h. Por
tpicos se trabajaron como cultivos ltimo para verificar la produccin de
presuntivos positivos, ya que en estos indol, se adicionaron al tubo con medio
casos, el medio LIA permite detectar S. SIM que present crecimiento de 0.2 a
arizonae y cepas atpicas de 0.3 mL de reactivo de Kovacs.
Salmonella que utilizan lactosa o
sacarosa. Sin embargo se descartaron Caldo RM-VP (Rojo de metilo-Voges
los cultivos que mostraron reacciones Proskauer). Con asa bacteriolgica
atpicas en ambos medios. recta, estril y calibrada se tom una
asada del crecimiento del tubo TSI/KIA
Pruebas bioqumicas o LIA y se inocul el tubo con caldo
complementarias RM-VP.
Caldo urea (convencional). Con un Prueba de Voges-Proskauer (VP).
asa bacteriolgica recta, calibrada y Para la prueba de Voges-Proskauer se
5

estril, se tom del crecimiento del incub a 352C durante 48 2 h.


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tubo TSI/KIA o LIA y se inocul en el Despus se transfiri a un tubo de 13 x

5
100 mm estril un mililitro de cultivo. una asada del crecimiento del medio
Seguido de esto se adicionaron a este TSI/KIA o LIA y se inocul en el tubo
cultivo, 0.6 mL de reactivo de VP1 que contiene caldo malonato. Despus
(alfa-naftol etanlico al 5 %), se agit y de esto se incub a 352C durante
se agregaron 0.2 mL del reactivo VP2 402 h.
(hidrxido de potasio al 40%). Por
ltimo se agit nuevamente y se dej Caldo manitol. Con asa bacteriolgica
reposar el tubo en forma inclinada, con recta y estril, se tom una asada del
el objetivo que la reaccin se llevara a crecimiento del tubo TSI/KIA o LIA y se
cabo en presencia de oxgeno. inocul en el tubo que contiene caldo
Prueba de Rojo de Metilo. Para la manitol. Por ltimo se incub a 352C
prueba de rojo de metilo (RM) se durante 24 2 h.
incub a 352C el resto del medio
RMVP durante 48 h ms (96 h. de RESULTADOS
incubacin en total a partir de la Los resultados obtenidos de la
inoculacin del medio RMVP). Se obtencin de colonias tpicas de
adicionaron al medio de cultivo dos a Salmonella se muestran en la tabla 1,
tres gotas de solucin indicadora de mientras que los resultados obtenidos
rojo de metilo. en las pruebas bioqumicas se
muestran en la tabla 2:
Caldo malonato (para confirmar la
presencia de S. arizonae). Con asa
bacteriolgica recta y estril, se tom

TABLA 1. Resultados de colonias tpicas de salmonella spp.


MEDIO SLIDO FOTOGRAFA OBSERVACIONES
Solo se observaron
colonias
caractersticas de
salmonella en la serie
3 (caldo selenito
cistina). En el Ctrl (+)
no hubo crecimiento
de colonias
caractersticas de
salmonella. En la
serie 1 (caldo de
tetrationato) si hubo
AGAR VB (VERDE
crecimiento de
BRILLANTE)
colonias, pero no
hubo evidencia
suficiente para decir
que eran
caractersticas de
salmonella, sin
embargo las colonias
mostraron un
precipitado rojo. En la
6

serie 2 (Caldo
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Vassiliadis) no hubo
crecimiento de ningn

6
tipo de colonias.
En la serie 3 (caldo
Selenito-cistina) se
observaron colonias
caractersticas de
salmonella
completamente
aisladas. La serie 2
(caldo Vassiliadis) se
AGAR HK
contamin y no hubo
(ENTRICO
crecimiento de
HEKTEN)
colonias
caractersticas. En la
serie 1 y Ctrl (+) si
hubo crecimiento de
colonias, pero stas
no eran
caractersticas de
Salmonella.

En ninguna de las
series hubo
crecimiento de
colonias
AGAR SS
caractersticas de
(SALMONELLA-
Salmonella, debido a
SHIGELLA)
que no es un medio
especfico y
exclusivamente para
Salmonella.

Solamente en el Ctrl
(+) hubo crecimiento
de colonias, sin
embargo no se puede
AGAR XLD decir que sean
(XILOSA, LISINA, caractersticas de
DESOXICOLATO) Salmonella. En las
dems series, no
hubo crecimiento de
colonias
caractersticas.
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7
Solamente se observ
crecimiento de
colonias
caractersticas de
Salmonella en la serie
3 (caldo selenito-
AGAR SB (SULFITO
cistina) y serie 1
BISMUTO)
(caldo tetrationato).
En la serie 2 (caldo
Vassiliadis) y Ctrl (+)
no hubo crecimiento
de colonias
caractersticas.

TABLA 2. Pruebas bioqumicas para la identificacin de Salmonella


PRUEBA BIOQUMICA OBSERVACIONES
La muestra problema (huevo crudo),
despus de la inoculacin mostr un
CITRATO
color azul en el pico de la flauta, lo que
indica que hubo crecimiento (prueba +).
El tubo que contena el inculo qued del
mismo color que tena antes de la
UREA
inoculacin, por lo que result una
prueba (-)
La prueba de TSI result positiva para la
fermentacin de glucosa, debido a que el
tubo mostr un color amarillo en el
TSI fondo, lo que indica que hubo
crecimiento. Sin embargo result una
prueba negativa para fermentacin de
lactosa.
La prueba de LIA result ser positiva
para la fermentacin de glucosa, porque
mostr un color amarillo en el fondo del
LIA tubo despus de la inoculacin. Sin
embargo result negativa para la prueba
de lisin descarboxilasa y produccin de
H2S.
RM. La prueba result negativa, porque
no hubo presencia del color rojo en el
tubo despus de agregarle el reactivo
RM-VP VP. La prueba result ser negativa,
debido a que el tubo no present el anillo
color rojo despus de agregarle los
reactivos correspondientes.
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8
DISCUSIN
Los resultados obtenidos en esta Para la prueba de urea result una
prctica (vase tabla 1 y 2), se prueba (-), que coincide con lo
comparan con las tablas 3 y 4 sealado en la bibliografa.
estndar que se muestran ms En cuanto a la prueba de TSI, solo
adelante. se coincidi con la bibliografa en la
En cuanto a las colonias tpicas de prueba de fermentacin de glucosa y
Salmonella, se puede decir que la lactosa (+) y (-) respectivamente,
mayora de los resultados que se pero en la prueba de produccin de
obtuvieron fueron correctos, ya que H2S, en la muestra de huevo result
en el medio VB, se obtuvieron ser negativa, cuando la bibliografa
colonias rosas o rojas y algunas indica una prueba positiva.
otras amarillas, tal y como lo marca Para la prueba de LIA, solo se
la bibliografa. En el medio HK, las coincidi con la bibliografa en la
colonias observadas en la serie 3, prueba de fermentacin de la
eran colonias verdes con centro glucosa, resultando (+), sin embargo
negro, tal y como se menciona en la la prueba de lisin descarboxilasa y
tabla 3. En el medio SS, no hubo produccin de H2S resultaron
crecimiento de ninguna colonia diferentes a lo mencionado en la
caracterstica. Esto se explica en la tabla 4. Por ltimo la prueba de RM-
tabla 3, donde indica que las colonias VP, result ser una prueba (-) para
tpicas de salmonella deben ser VP, que coincide con la bibliografa y
translcidas u opacas, o incluso con una prueba (-) para RM, que no
centro negro o rojas.2 coincide con la bibliografa.
En el medio XLD se discute que los
resultados que se obtuvieron si CONCLUSIONES
coinciden con lo sealado en la De acuerdo a todo lo expuesto
bibliografa, ya que en el CTRL (+) si anteriormente se concluye que se
hubo crecimiento de colonias, pero logr el objetivo planteado para la
no mostraban la caracterstica de ser realizacin de este anlisis
rojas o rosas, con centro negro. microbiolgico en una muestra slida
Para el medio SB, se discute que los (huevo crudo), debido a que se
aprendi la tcnica para identificar
resultados obtenidos coinciden con lo
Salmonella. Sin embargo no se
sealado en la bibliografa, debido a puede concluir a ciencia la presencia
que las colonias identificadas eran de Salmonella en 25gr de muestra,
cafs, grises o negras, y presentaban debido a que varias pruebas
un brillo metlico. bioqumicas no resultaron similares a
lo sealado en la bibliografa.
En cuanto a las pruebas bioqumicas,
se discute que la mayora de stas BIBLIOGRAFA
coinciden con lo sealado en la 1. Norma Oficial Mexicana.
bibliografa (vase tabla 4). Los NOM-114-SSA1-1994. Bienes
resultados obtenidos para la prueba y Servicios. Mtodo para la
de citrato de Simmons fueron determinacin de Salmonella
positivos, por lo que en la tabla 4 se en alimentos.
9

menciona que deben ser positivos. 2. DAoust J., Maurer J. & Bailey
Pgina

J.S. (2001). Salmonella

9
Species. In: Food Ito K. (Eds.) APHA.
Microbiology. Fundamentals Washington: 357-380.
and Frontiers. Doyle M., 4. Marshall, R. T. (1992)
Beuchat L.R. & Montville T.J. Standard methods for the
(Eds.) 2d. ed. ASM Press examination of Dairy Products.
USA: 141-157. American Public Health
3. Andrews W.H., Flowers R.S., Association. Copyright,
Silliker J., & Bailey S. (2001) Washington, D. C.
Salmonella. In: Compendium
of Methods for the
Microbiological Examination of
Foods. 4th ed. Downs F.P. &

ANEXOS
TABLA 3. Colonias tpicas de Salmonella spp. en medios slidos selectivos.
10
Pgina

10
TABLA 4. Reacciones bioqumicas de Salmonella

a+, 90% o ms positivos en 1 2 das;- 90% o ms negativos en 1 2 das; v,


variable.
b La mayora de los cultivos de S. arizonae son negativos.
c La mayora de los cultivos de S. arizonae son positivos.
11

d Excepto S. entrica serovar Pullorum y S. entrica serovar Gallinarum y cepas con


flagelos disfuncionales.
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