UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS

DEPARTAMENTO DE QUMICA
Laboratorio de Instrumentacin Qumica
Docente: Dora C. Rodrguez, Qumica, M. Sc.

ABSORCION DE RADIACIN ULTRAVIOLETA: Determinacin de cafena por UV

I. OBJETIVOS

Conocer los trminos y conceptos sobre la absorcin de radiacin en la regin ultravioleta

del espectro electromagntico.
Aplicar la ley de Beer al anlisis de compuestos que absorben en la regin UV.
Realizar el control de calidad a una bebida energizante, la cual dentro de sus ingredientes
activos contiene cafena.
Determinar la concentracin de cafena en una muestra problema.

II. INTRODUCCIN

La porcin del espectro electromagntico ultravioleta cubre desde 10 nm hasta 380 nm. La
regin del ultravioleta cercano - o de cuarzo- se extiende de 200 a 380 nm y es accesible con
ptica de cuarzo; los componentes atmosfricos O2, H2O, CO2 son transparentes a esta regin del
espectro. La absorcin de radiacin ultravioleta por los componentes atmosfricos comienza
cerca de los 200 nm y se extiende hasta la regin de longitudes de onda ms cortas, razn por la
que entre 10 y 200 nm se conoce esta regin como ultravioleta al vaco, ya que los instrumentos
requieren que se haga vaco y purga con nitrgeno para realizar las medidas de absorcin.

NOTA: CONSULTAR LOS ASPECTOS TERICOS RELACIONADOS CON EL ANLISIS

DE ESPECIES ABSORBENTES EN LA REGIN UV. Frmula estructural de la cafena.

III. MATERIALES Y REACTIVOS

Espectrofotmetro de doble haz Perkin Elmer ________________

Balones aforados de 50,00 mL

Pipetas aforadas de 5.00, 10.00, 20.00 mL

Buretas

Patrn de cafena de 100 ppm

Agua destilada

Muestra problema con contenido de cafena

Bebida energizante que contenga cafena

IV. PROCEDIMIENTO

1. PREPARACIN DE LA SOLUCION DE 100ppm DE CAFENA

Disolver 0,0500 gramos de cafena en suficiente agua destilada hasta completar 500 mL de
solucin. Calentar ligeramente si es necesario.

2. PREPARACIN DE PATRONES PARA ELABORAR LA CURVA DE CALIBRACIN

 Realizar los clculos para determinar qu volumen de solucin patrn de cafena de 100
ppm se necesitan para preparar por dilucin 5 soluciones patrn de concentracin 2, 5, 10,
15 y 20 ppm en balones aforados de 50,00 mL.

Preparar las 5 soluciones patrn de concentracin 2, 5, 10, 15 y 20 ppm en balones

aforados de 50,00 mL, a partir de la solucin patrn de cafena de 100 ppm, utilizando
agua destilada como disolvente.
Para analizar la bebida energizante se debe observar en la etiqueta cual es el contenido de
cafena que reporta el fabricante. Teniendo en cuenta este valor se debe(n) realizar la(s)
dilucin(es) que sea(n) necesaria(s) para que la concentracin de la solucin diluida se
encuentre dentro del rango de trabajo de la curva de calibracin (2 20 ppm). Nota: Al
reportar la concentracin de cafena en la bebida energizante se debe tener en cuenta el
factor de dilucin aplicado.

Para analizar la muestra problema, sta se puede pasar directamente al equipo, si la

absorbancia no est dentro del rango de trabajo de la curva de calibracin (2 20 ppm),
ser necesario realizar la dilucin adecuada para poderla analizar. Nota: Al reportar la
concentracin de la muestra problema se tiene que tener en cuenta el factor de dilucin
aplicado.

3. MEDICIONES EN EL ESPECTROFOTOMETRO UV/VIS

Realizar el barrido espectral de A vs. con uno de los patrones preparados en un rango de
200 a 350 nm, con el fin de determinar la longitud de onda de mxima absorcin para la
cafena.

Fijar la max (272 nm) en el equipo y cuadrar el cero de absorbancia con el blanco que es
agua destilada.

Medir la Absorbancia de cada una de las soluciones patrn a la longitud de onda de

mxima absorcin y hacer una curva de calibracin A vs. concentracin. Verificar la
regresin lineal de los datos (r 0,999) y asegurarse que el intervalo lineal est
conformado por cinco patrones. NOTA: Traer calculadora con funciones para determinar
regresin lineal.

Medir la absorbancia de la muestra problema y de la bebida energizante a la max y

verificar que est en el intervalo lineal de la curva de calibracin. Si no lo est, hacer las
diluciones necesarias y los clculos respectivos.

Determinar la concentracin de cafena de la muestra problema y de la bebida energizante

y reportarla en partes por milln.

NOTA: Cada vez que se va a hacer una medicin, la celda que contiene la muestra se debe
enjuagar con cada solucin, con al menos tres porciones de la solucin que va a contener

V. PREGUNTAS

1. Determinar el valor de la absortividad y de la absortividad molar para la cafena a la

estudiada.

2. Qu tipo de transiciones ocurren en la regin UV.

3. Qu tipo de sustancias absorben en la regin UV, d ejemplos.

4. Por qu se debe determinar la concentracin de cafena por UV?