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MORFOLOGIA MACROSCOPICA DE COLONIAS 1

INSTITUTO TECNOLGICO DE CELAYA

INGENIERA BIOQUMICA.

MICROBIOLOGA

INFORME DE PRCTICA #4:

MORFOLOGIA MACROSCOPICA DE COLONIAS

ALUMNA:

PROFESOR:

GABRIEL MARQUEZ

A MIRCOLES 8 DE NOVIEMBRE DEL 2017, CELAYA GTO


MORFOLOGIA MACROSCOPICA DE COLONIAS 2

PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MEDIOS DE CULTIVO

Introduccin

Una colonia es una agrupacin de bacterias formada a partir de la reproduccin de una Unidad
Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio slido; aunque vara de tamao generalmente es
visible a simple vista.
Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una misma
especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a permanecer unidas como los
estafilococos o los estreptococos.
Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura y en algunos casos color
caractersticos, que aunque puede variar de acuerdo al medio en que se encuentren, es constante
bajo condiciones controladas y depende de la especie bacteriana que la forme.
Cuando las bacterias crecen en la superficie de un medio de cultivo slido, las clulas en divisin
permanecen aproximadamente fijas en su posicin y forman masas de muchos millones de
clulas visibles a simple vista. Las colonias as formadas varan desde un tamao diminuto,
apenas visible, hasta masas de varios milmetros de dimetro.
Su tamao, forma, textura, olor y en algunos casos color son, a veces, muy orientativos para la
identificacin de las bacterias que la componen. Aunque estas caractersticas dependen a menudo
de la naturaleza del medio de cultivo y de las condiciones de incubacin, cuando stas se
controlan cuidadosamente, son muy constantes y, en muchas ocasiones, tienen un valor
diferencial considerable.
La morfologa de las colonias es una de las caractersticas bsicas de las bacterias y es
indispensable su estudio para comenzar correctamente una identificacin preliminar. Las
caractersticas morfolgicas ms importantes de una colonia bacteriana aislada sobre un medio de
cultivo slido son:
Tamao:
El tamao de las colonias bacterianas es, en condiciones de cultivo favorables, bastante uniforme
para cada especie o tipo. La visualizacin del tamao se suele hacer a simple vista, aunque a
veces es preferible utilizar lupas o estereoscopios para poder discernir con mayor claridad las
caractersticas morfolgicas a observar.
El tamao de las colonias bacterianas podemos expresarlo en las siguientes categoras:
Pequeas o puntiformes: 1 mm de dimetro o menor
Medianas: hasta 4 mm de dimetro
Grandes: mayores de 4 mm de dimetro
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El tamao de las colonias debe ser considerado y medido en la parte final de la zona de
aislamiento, que es donde presentan su mximo tamao. No deben valorarse ms que colonias
bien aisladas.
Morfologa:
La morfologa de una colonia viene dada por su borde y forma de elevarse sobre el medio de
cultivo.
El borde puede ser liso (redondeado u ovalado) o irregular (aserrado, lobulado o espiculado).
Si pudisemos hacer un corte en un plano perpendicular a la base de la colonia podramos
encontrar las siguientes posibilidades:
semiesfrica o convexa
plana o en disco
acuminada
cerebroide
plana con bordes elevados (en crter).
plana con centro elevado (en huevo frito)

Superficie:
La superficie de la colonia, examinada mediante luz reflejada, puede mostrar un aspecto liso y
brillante a la luz o, por el contrario, una textura irregular, rugosa y mate, sin brillo. Puede mostrar
un aspecto filamentoso o cerebroide.
Consistencia:
Las colonias bacterianas pueden tener una consistencia variable, desde seca y frgil a grasienta y
cremosa o viscosa y pegajosa. Esta caracterstica slo se aprecia cuando tocamos las colonias con
el asa de siembra.
Podremos observar colonias "duras" que se deslizan fcilmente por la superficie del medio,
siendo difcil manipularlas con el asa. A menudo estas colonias se fragmentan al intentar
cogerlas.
Otras colonias tienen apariencia cremosa, con superficie brillante generalmente y fciles de
manipular con el asa. La mayora de las colonias tienes consistencia mantecosa, siendo muy fcil
obtener pequeas porciones de la misma, que quedan bien adheridas al asa de siembra.
En algunas ocasiones las colonias son extremadamente viscosas y tienden a formar filamentos
mucosos cuando intentamos retirarlas con el asa.
Pigmentacin:
Es caracterstico slo de unas pocas especies bacterianas. La pigmentacin slo se observa en
colonias, y nunca en clulas individuales. Dentro de las bacterias patgenas, una de las formas
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pigmentadas ms importantes es Staphilococcus aureus, cuyas colonias son normalmente de color


amarillo dorado. En ocasiones, el pigmento difunde al medio, dando a ste una tonalidad
caracterstica en algunas especies. Pseudomonas, por ejemplo, produce un pigmento verdoso que
puede ser fcilmente reconocido en medios incoloros como el Mueller-Hinton.
Hay que tener especial precaucin para no atribuir una falsa pigmentacin a colonias que se han
desarrollado en medios con determinadas sustancias nutritivas (azcares) e indicadores de cambio
de pH. Por ejemplo, los grmenes que utilizan la lactosa para su metabolismo darn colonias de
color amarillo en un medio que contenga este azcar y un indicador de pH adecuado.
Hemlisis:
Algunas bacterias, fundamentalmente los cocos, pueden ser capaces de hemolizar los hemates de
un medio nutritivo slido como el agar sangre. Esto es debido a la liberacin de unas sustancias
denominadas hemolisinas. La hemlisis de los hematies adyacentes a la colonia puede ser intensa
o ligera y se observa como un halo verdoso ms o menos claro alrededor de la colonia. La
hemlisis intensa se denomina eta hemlisis; la hemlisis parcial se conoce como alfa hemlisis
y la ausencia de sta se define como gamma hemlisis. La produccin de hemlisis en una placa
de agar sangre es una de las caractersticas que ayudan a diferenciar los diferentes tipos de
estreptococos.
Olor:
Ciertos tipos de bacterias descomponen los sustratos que utilizan para su metabolismo
desprendiendo sustancias voltiles que proporcionan un olor caracterstico a los cultivos puros de
dichas bacterias. Como intentar definir un olor es tan difcil como subjetivo, slo os dir que ser
nicamente la prctica diaria la que os permita un reconocimiento adecuado de esta caracterstica.
Puesto que estas caractersticas aparecen en grados y combinaciones variables de unas bacterias a
otras, el aspecto de las colonias es a menudo bastante caracterstico, permitiendo distinguir
distintas clases de bacterias en cultivos mixtos o contaminados. La diferenciacin en base a un
criterio morfolgico de las colonias es slo orientativa, y para poder identificar una bacteria se
necesita un estudio detallado de sus caractersticas fisiolgicas e inmunolgicas.
Marco terico.

Formas De Las Bacterias

Las bacterias pueden ser observadas individualmente a travs de un microscopio o a simple vista si estas
estn en conjunto al formar colonias. Vistas al microscopio, por lo general, las bacterias presentan tres
formas bsicas: las bacterias esfricas se denominarn cocos, las alargadas sern bacilos, las bacterias
curvadas y las que tienen forma de espiral sern los espirilos, espiroquetas, comas o vibriones; cada una
de ellas presentarn distintas caractersticas.
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Cocos

Estas bacterias presentan formas casi esfricas y sus agrupaciones son homogneas. El tamao de los
cocos oscila entre los 0,8 a 1,0 m. y pueden presentar y tomar diversas formas, producto de dos factores
importantes como son la tendencia de las clulas a mantenerse unidas, una vez sucedida la divisin y el o
los planos de divisin celular. Estas agrupaciones pueden ser:

Diplococos: Estos, despus de su divisin, permanecen en pares, por ejemplo la Neisseria


(Meningococo).
Ttradas: Estos cocos se dividen en dos direcciones perpendiculares, formando una agrupacin
de cocos en una disposicin cuadrada.
Sarcinas: Producto de la divisin de los cocos en tres direcciones perpendiculares, formando una
agrupacin de cocos con una disposicin cbica.
Estreptococos: Estos cocos se dividen en un solo plano, formando una secuencia de cuatro o ms
clulas como si se tratase de una cadena.
Estafilococos: Formados por la agrupacin irregular de cuatro o ms cocos, en ocasiones se
asemejan a racimos de uvas. Algunas veces la forma de estas bacterias presenta variaciones,
pudiendo observarse cocos de forma lanceolada, en forma de granos de caf o achatados, estos
ltimos suelen denominarse cocobacilos.

BACILOS

Estas bacterias forman agrupaciones bastante heterogneas por su variedad de subtipos morfolgicos,
que pueden ser cilndricos, en forma de bastn, largos y delgados, pequeos y gruesos, tambin pueden
presentar variaciones en sus extremos pudiendo ser rectos, afilados o redondeados. Al igual que los
cocos, pueden presentar varias formas segn la tendencia que tengan clulas hijas para mantenerse
unidas, estas agrupaciones pueden ser:

Diplobacilos: Formados por bacilos agrupados en pares.


Estreptobacilos: Agrupacin semejante a una cadena formada por cuatro o ms bacilos.
Empalizado: Son bacilos agrupados lado a lado como palitos de fsforo.
Formas filamentosas: Son bacilos que crecen en forma de fibras y toman distintas disposiciones
por lo que esta formacin se denomina tambin letras chinas.

ESPIRILOS

Dentro de este tipo de bacterias se encuentran aquellas que en su forma presentan una o ms
curvaturas, algunas pueden presentar forma de hlices. Dentro de este grupo se encuentran:

Vibriones: Son espirilos bastante cortos, por lo general presenta la forma de una coma.
Espirilos: Estas bacterias, relativamente rgidas, presentan una forma helicoidal; se mueven a
travs de flagelos externos dando una o ms vueltas alrededor de su propio eje.
Espiroquetas: Presentan una forma helicoidal, pero a diferencia de los espirilos, poseen un
cuerpo flexible, se mueven con la ayuda de filamentos axiales que son flagelos periplasmticos,
lo que les permite dar varias vueltas completas alrededor de su propio eje.

OTRAS FORMAS
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Las bacterias pueden presentar una serie de variaciones y entre estas se pueden presentar bacterias en
forma de estrella conocidas como gnero Stella, tambin se presentan bacterias de forma rectangular y
planas pertenecientes al gnero Haloarcula, ciertas clulas alargadas en forma de pera pertenecen al
gnero Hyphomicrobium y por ltimo se hace mencin de bacterias que forman pednculos no
celulares.

FORMA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS

Las colonias son la manera macroscpica de observar la morfologa que constituye una agrupacin de
bacterias, que se constituyen en agrupaciones formadas por reproduccin de las bacterias en un medio
en el cual son incubadas por espacio de 24 horas aproximadamente; algunas bacterias requieren
semanas de incubacin para su desarrollo y pueden estar formadas por millones de bacterias, de esta
manera el tamao de las colonias puede variar desde 0,5 a 4,0 mm de dimetro. 1,9 La morfologa de
una colonia depender del borde y la forma en que se eleva sobre el medio de cultivo. As, se menciona
que la forma de una colonia puede ser:

Circular: Pueden medir hasta 4,0 mm.


Puntiforme: Denominados tambin en cabeza de alfiler.
Irregular: No representan una forma geomtrica.
Rizoide: Presentan una forma helicoidal.
Fusiforme: En forma de husos.

En cuanto a los bordes estos pueden ser:

Enteros: Son homogneos en todo su recorrido.


Ondulados: Presentan pequeas fenestraciones.
Lobulados: Sus bordes son curveados de manera irregular.
Filamentosos: Presentan finos filamentos alrededor de toda la colonia.

La elevacin de la colonia puede ser:

Plana
Convexa
Elevada

Las colonias pueden presentar diferentes texturas, estas pueden ser:

Lisas: Presentan una superficie homognea.


Concntricas: Su textura se extiende de manera circular, por lo general de afuera hacia adentro.
Arrugadas: Su superficie presenta pequeas reas sobresalientes y leves depresiones.
Con curvas: Llamadas tambin sinuosas, presenta una textura similar a la concntrica, la
diferencia radica en que este presenta un contorno ms irregular.

Las bacterias en conjunto, presentan tambin otras caractersticas como:

Pigmentacin: Que puede ser verde, amarillo o grisceo.


Olor: frutal o putrefacto.
Consistencia: mucoide, liso o rugoso.
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Comportamiento ptico: frente a luz transmitida estos pueden ser opacos, translcidos o
transparentes; frente a la luz reflejada estos pueden ser brillantes u opacos.

Como ya se mencion, las bacterias pueden observarse a simple vista cuando estas se encuentran en
colonias o pueden ser vistas a travs de un microscopio ptico o electrnico; en el ltimo caso las
bacterias pueden ser observadas con tincin puesto que son incoloras y una correcta tincin mejora la
visibilidad, pero tambin pueden ser vistas sin tincin si son colocadas en soluciones no acuosas
aumentando de esta manera el ndice de refraccin. En algunos casos en que las bacterias son difciles de
teir, estas pueden ser observadas a travs de un microscopio de campo oscuro, donde estos
microorganismos aparecen brillantes en un fondo oscuro, este es el caso del Treponema Pallidum.

Materiales
Mecheros
Asas bacteriolgicas
Cajas sembradas previamente
Tubos con caldo nutritivo y caldo tioglicolato inoculados previamente
Metodologa

Observar y reportar
1- Crecimiento en medio liquido
2- Describir la morfologa
1- Caldos inoculados a) Homogneo
de tres colonias diferentes
previamente a 37C b) Floculento (produccin de tomando en cuenta:
por 48 hrs. gas) a) Tamao
c) Formacin de anillo b) Olor
d) Aparicin de pelcula o nata c) Forma
2- Olor d) Pigmentacion
a) Imperceptible
b) Aminas o frutas
c) ptrido

Bordes de las colonias. Elevacin de la colonia 3- Describa la elevacin


Enteras, onduladas, rizoide o Plana, elevada, convexa, aplastada, de la colonia y los tipos
arborescente, festonada, acumbinada, umbilical, convexa baja, papilada, de bordes que se
espinosa o dentada, estirada Elevada con borde, Elevada con cabos, presentan en las
radialmente con bordes Convexa cupuliforme, mamelonada. diferentes colonias.
lobulados, fimbrinada, lobada.

Superficie Consistencia
4- Identificar las superficies o Con la punta de un asa tocar la Mantecosa, viscosa, butirosa,
consistencia de las colonias superficie de las colonias y reportar seca, membranosa,
su consistencia como: rugosa o lisa quebradiza, etc.
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Resultados y anlisis

Tipo de caldo Tipo de crecimiento Olor


Caldo nutritivo Nata blanca Quemado
Caldo Tioglicolato Formacin de anillo Olor dulce

El caldo nutritivo su uso est descrito en muchos


procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros
materiales de importancia sanitaria podemos observar que a
una temperatura de 35 a 37C durante 4 horas obtenemos
un crecimiento en forma de nata blanca alrededor del tubo.
En el caldo tioglicolato es principalmente para el cultivo de
microorganismos de difcil crecimiento y microorganismos de
crecimiento rpido entre los que se incluyen bacterias
aerobias, anaerobias y micro aerofilos que pueden estar
presentes en una amplia variedad de muestras en este tipo de caldo podemos observar
la formacin de un anillo lo que nos da entender que si tuvimos crecimiento microbiano.

Agar Nutritivo (AN).


Tamao No se puede medir
Color Blanco amarillento
Forma Irregular- fusiforme
Pigmentacin No presenta
#colonias 1
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Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el cultivo de


microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales .No contiene
inhibidores del desarrollo bacteriano.
Gracias a la forma y estructura de su crecimiento podemos decir que se encuentran en
este medio cocos y bacilos ya que las caractersticas de este tipo de medio permita
ampliamente su crecimiento adems un bacilo es una especie de bacteria que tiene
forma de varillitas, esta es su principal caracterstica.
Los bordes que podemos observar son lobulado

Agar Staphylococcus110
Color Blanco
Forma Irregular puntiforme
Pigmentacin No presenta
#colonias 3
tamao
Colonia 1 2mm de dimetro
Colonia 2 No se puede medir
Colonia 3 No se puede medir

El medio de taphylococcus N 110 es un


medio selectivo para el aislamiento y
diferenciacin de estafilococos patgenos, y
como el nombre lo dice podemos observar y
encontrar a los cocos y a los estafilococos
con 3 diferentes colonias adems podemos
sus tipos de borde van a ser:
Col1: raizado
Col2: ondulado
Col3: redondeado
Adems tienen forma ms o menos esfrica
u ovoide y generalmente son aerobios
estrictos. (Ninguna de sus dimensiones
predomina claramente sobre las otras).
Agar Eosina Azul de Metileno (EMB)
Tamao 1 a 2mm
Color Vino
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Forma Puntiforme
Pigmentacin Verde
#colonias 1
Este medio combina las frmulas de Holt-Harris
y Teague con la de Levine, para obtener un
mejor rendimiento en el aislamiento selectivo
de enterobacterias y otras especies de bacilos
Gram negativos, se pudo observar que la forma
es puntiforme lo que nos hace pensar que lo
que observamos en este medio son cocos y
algunos bacilos, observando detalladamente
pudimos encontrar que se observa un brillo
metlico color verde, adems este medio
permite el crecimiento de Cndida spp. Como
colonias rosadas y puntiformes;
El tipo de borde que presentaba era:
filamentado

Base Agar Sangre (AS)


Tamao No se puede medir
Color Rojo
Forma Puntiforme
Pigmentacin Amarilla
#colonias 1

Medio para propsitos generales, para el aislamiento y cultivo de numerosos


microorganismos.
Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento y cultivo de
microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran
variedad de muestras, como para la observacin de reacciones de hemlisis.
Los estafilococos crecen fcilmente sobre casi todos los medios bacteriolgicos, en
cultivos su crecimiento es mejor en el medio sal manitol y agar sangre,por eso y su
forma podemos decir que en este medio lo que tenemos presente son estafilococos
El tipo de borde que presenta seria rizoide
Tipo de agar superficie Consistencia olor
Rugosa Lisa mantecosa butirosa seca membranosa quebradiza
Agar x x Papa
Staphylococcus110
Agar Nutritivo x X Masa
(AN).col 1 Hmeda
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Agar Nutritivo X X
(AN).col 2
Agar Nutritivo x x
(AN).col 3
Agar Eosina Azul X X Frutas
de Metileno (EMB) medicinales
Base Agar Sangre x x Putrefacto
(AS)

DIS
CONCLUS
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CUESTIONARIO
1. Qu importancia tiene hacer la descripcin de la morfologa colonial?
Siempre es relevante la morfologa colonial (colonias aisladas) de la cepa bacteriana
para facilitar la identificacin, as se puede conocer de manera cualitativa directo del
cultivo que genero bacteriano puede ser
Los esquemas tradicionales de identificacin fenotpica bacteriana se basan en las
caractersticas observables de las bacterias, como su morfologa, desarrollo, y
propiedades bioqumicas y metablicas. El cultivo, cuando es factible, contina
siendo el mtodo diagnstico de eleccin
2. Es especifica la morfologa colonial de cada especie o genero bacteriano?

3. Describa la morfologa de las 3 colonias


a) F
b) N
c) N
d) o

Referencias

https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/s
eimc-procedimientomicrobiologia37.pdf
Metabase.uaem.mx. (2017). Citar un sitio web - Cite This For Me. [online] Available at:

http://metabase.uaem.mx/bitstream/handle/123456789/1466/280_2.pdf?sequence=1

[Accessed 8 Nov. 2017].

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