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Microscopía
El uso de microscopios es una de las técnicas más difundidas para el estudio de las células.
Son, en líneas generales, instrumentos que permiten amplificar la imagen de un objeto muy
pequeño para ser observado a simple vista. Los objetos de escala microscópica son medidos
con unidades de longitud que no son las habituales. Dichas unidades son:
-3
mm (1 mm equivale a 10 metros)
-6
µm o micrones (1 µm equivale a 10 metros)
-9
nm o nanometros (1 nm equivale a 10 metros)
-10
A o Ángstrom (1 A equivale a 10 metros)
Los distintos instrumentos ópticos se diferencian entre sí por la capacidad que tienen de
amplificar la imagen o el nivel de detalle con el que va a ser observado un objeto. Dicho de otro
modo, se distinguen por su límite de resolución.
Límite de resolución: mínima distancia entre dos puntos que puede distinguir o resolver un
sistema óptico. Por ejemplo, el ojo humano no consigue distinguir dos líneas que estén
separadas por una distancia menor a 100 micrones (es decir, las ve como una sola línea).
Un microscopio con un gran limite de resolución permitirá observar detalles que otro de menor
limite no llega a resolver.
MICROSCOPIO OPTICO: las células observadas pueden estar vivas o muertas. Se puede
observar la presencia o ausencia de núcleo, la forma celular, las mitocondrias y cloroplastos
(sin detalle).
MET: las células observadas deben estar muertas después de haber sido tratadas con iones
de metales pesados. Permite la observación de detalles a escala macromolecular.
MEB: para observar células muertas, después de haber sido tratadas con iones de metales
pesados. Permite obtener imágenes tridimensionales.
Antes de observar una muestra al microscopio la misma debe ser tratada y preparada. Al
conjunto de técnicas de preparación de la muestra previas a su observación, se la denomina
técnica histológica. Esta técnica consiste en una serie sucesiva de etapas que difieren para
los microscopios ópticos y los electrónicos.
Fraccionamiento celular
Esta técnica permite aislar los distintos componentes celulares para, de este modo, poder
estudiarlos separadamente. Se basa principalmente en que los componentes celulares tienen
distintas densidades lo que posibilita separarlos por medio de la centrifugación (decanta lo más
denso y lo menos denso queda en solución).
En un esquema:
2) Al centrifugar el homogenato
centrifugado sobrenadante se obtienen 2 fracciones: el
sobrenadante y el pellet o
homogenato sedimento. El sobrenadante
pellet puede centrifugarse
nuevamente.
.
Qué componentes celulares van al pellet o quedan en el sobrenadante dependen de la
velocidad y tiempo de centrifugación. Lo más denso sedimenta primero y lo menos denso
sedimenta luego de varias centrifugaciones.
Consisten en la extracción de las células de interés de su medio natural para luego colocarlos
en recipientes especiales y adecuados. Se debe tener especial cuidado en mantener la
nutrición, oxigenación, la temperatura y asegurar el cierre hermético del recipiente para evitar
contaminaciones. Los pasos a seguir son:
.
ORGANIZACIÓN GENERAL DE LAS
CELULAS
Todos los seres vivos están formados por células (una en el caso de los unicelulares o muchas
en los pluricelulares). Podemos decir entonces que la célula es la unidad estructural y
funcional de los seres vivos. Esto es lo que enuncia la Teoría celular moderna, junto con los
siguientes postulados:
Todos los seres vivos están formados por células y productos celulares.
El funcionamiento de un organismo es resultado de la interacción entre las células que
lo componen.
Toda célula proviene de otra preexistente.
Las células contienen material hereditario.
VEGETAL ANIMAL
Estos agentes no son considerados células ya que no pueden realizar dos funciones básicas
características de la materia viva: metabolismo y reproducción. Para ello deben infectar a una
célula y utilizar de la misma toda la maquinaria de síntesis. Los definimos entonces como
parásitos intracelulares obligados. Esta es la característica común a virus, viroides y priones.
Se diferencian, entre otras cosas, por el tipo de molécula/s que los constituyen.
Virus: características generales
VIROIDES
Son agentes infecciosos constituidos exclusivamente por una molécula de ARN. Infectan
fundamentalmente a plantas. Pertenecen al nivel de organización macromolecular por estar
formados por tan solo una molécula de ARN.
PRIONES
Son proteínas infecciosas. Agentes responsables de encefalopatías espongiformes
transmisibles, que afectan al sistema nervioso central. Pertenecen al nivel de organización
macromolecular por estar formados por una proteína.