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Instituto Superior de
CinciasdaSadeEgas
Moni z
Prof. Doutora
Madalena Oom
A gua
o Estrutura / polaridade, ligaes de hidrognio
o Outras interaces fracas crticas para a estrutura e reactividade das molculas
biolgicas
o Equilbrio cido-base e solues tampo
Aminocidos e pptidos
o Estrutura dos aminocidos
o Ligao peptdica e formao de pptidos
Estrutura e funo das protenas
o Diversidade e funes biolgicas
o Organizao estrutural das protenas e relao com a sua funo
Estrutura e funo dos hidratos de carbono
Estrutura e funo dos lpidos
Mdulo 2 Enzimologia
Catlise enzimtica
o Modo de aco enzimtica
o Estrutura, cofactores e localizao subcelular
o Especificao e classificao
o Cintica enzimtica, inibio enzimtica
o Regulao da actividade enzimtica
Introduo ao metabolismo
o Propsitos do metabolismo
o Ciclo do ATP
o Estratgias gerais de organizao e regulao do metabolismo
Metabolismo dos hidratos de carbono gliclise
o Gliclise, destinos do piruvato, fermentao
o Formao de acetilCoA
Ciclo do cido ctrico
Fosforilao oxidativa
Metabolismo dos hidratos de carbono outras vias
o Interconverso dos hidratos de carbono
o Via das pentoses fosfato
o Metabolismo do glicognio
o Neoglucognese
Metabolismo dos lpidos
o Catabolismo dos cidos gordos, cetognese
o Sntese dos cidos gordos
Catabolismo dos aminocidos e ciclo da ureia
Integrao das vias metablica
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Arquitectura Molecular da Vida
A gua
Matria Viva
Para alm disto, tm aptido para retirar energia do meio envolvente e transform-la
em compostos necessrios sua sobrevivncia: os animais dos compostos orgnicos
(alimentos) e as plantas da energia solar. O carbono retirado directamente do meio
ambiente. A complexidade dos organismos vivos pode ser traduzida sumariamente nos
seguintes pontos:
Tpicos
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Distribuio das Biomolculas na Clula
Carbono
Organismo um ser vivo. Pode ser uni ou Macromolcula Obtidas pela ligao de
pluricelular. subunidades simples
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Molculas e Ligao Qumica
Ligaes covalentes
Ligaes no covalentes
Pontes de Hidrognio
Interaces Inicas
(interaces hidrofbicas)
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Distribuio das vrias macromolculas na clula
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Os solutos afectam as propriedades coligativas da gua: a presso do vapor, os pontos
de fuso e ebulio e a presso osmtica; e das solues, uma vez que diminuem a
concentrao efectiva de gua. Quanto maior o ponto de ebulio, menor o ponto de fuso.
Tpicos
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Cadeias CH sem grupos funcionais. A gua no interfere com as ceras
nem com o grupo funcional. Mesmo que haja um ponto hidrfilo no
faz efeito, pois a fora no suficiente.
o Molculas anfipticas Organizam-se de forma a evitar a gua.
Tm uma cabea hidrfila e uma cauda hidrfoba. A cauda vira-se para
o interior expondo a cabea.
Exemplos de molculas:
o Polares Glicose, glicina, aspartato, lactato, glicerol
o No polares Cera
o Anfipticas Fenilalanina, fosfatodil-colina
Propriedades coligativas da gua
o Presso, vapor
o Ponto de ebulio
o Ponto de fuso
o Presso osmtica
A gua tem maior tendncia a deslocar-se de uma zona de maior
concentrao de gua (menor concentrao de sais hipotnica) para
uma zona de menor concentrao de gua (maior concentrao de
sais hipertnica).
Num meio hipertnico, a clula encolhe.
Num meio hipotnico, a clula incha, podendo inclusive ocorrer lise.
o Os solutos afectam as propriedades coligativas das solues porque diminuem
a concentrao efectiva de gua.
Ionizao da gua
Kw = [H+][OH-] = 1 x 10-14 M2
pH = -log[H+]
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De forma anloga,
pKa = -log[Ka]
O pKa outra medida da fora de um cido, sendo que quanto maior a fora do cido,
menor o valor do pKa e maior o valor de Ka. Um cido mais forte dissocia-se mais
facilmente.
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Solues Tampo
Uma soluo tampo consiste numa mistura de um cido ou base fracos com os seus
conjugados e tem a capacidade de resistir variao de pH quando lhe adicionada uma
quantidade moderada de cidos ou bases fortes. A capacidade tampo determinada pelo pK
e pela concentrao do cido fraco e da sua base conjugada.
O principal tampo das clulas o tampo fosfato, sendo que no sangue o mais
importante o tampo bicarbonato.
Uma zona tampo uma zona que resiste variao de pH com a adio de um cido
ou base. definida inferiormente pelo pKa 1 e superiormente pelo pKa + 1.
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A fora de um cido depende da sua estrutura molecular. O tomo de cloro
fortemente electronegativo e atrai electres. O efeito cresce quando se aumenta o nmero de
tomos de cloro. Alm disso, os pKs dos cidos clorobutricos mostram que o efeito
electronegativo diminui com a distncia do cloro ao grupo que se dissocia.
Sistema Bicarbonato
Sistema Fosfato
Sistema Proteico
O sistema tampo do bicarbonato um sistema aberto, com ajuda dos sistemas renal
e respiratrio, permitindo a remoo do CO2 pela expirao ou a substituio do CO2 pelo
metabolismo, de especial importncia a nvel extracelular. Neutraliza os cidos do
metabolismo celular e repe as quantidades iniciais de HCO 3- e H 2CO3 . Existem em grande
quantidade no organismo.
O CO2 produzido nos tecidos difunde-se atravs das membranas celulares e dissolve-se
no plasma sanguneo, sendo abundante nos alvolos pulmonares e nas clulas epiteliais dos
tbulos renais. O tampo bicarbonato tem um pH de 6,1.
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Sistema Tampo Fosfato
Aminocidos e Pptidos
Biomolculas
Aminocidos
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Aminocidos essenciais so obtidos atravs da dieta, pois no so sintetizados pelo
organismo. Aminocidos no essenciais so sintetizados pelo organismo.
Os aminocidos distinguem-se pela sua cadeia lateral, que pode ser aliftica (ou
acclica ou aberta), na qual os tomos de carbono so ligados em forma recta ou ramificada,
formando cadeias com extremidades livres; hidroxiladas ou contendo enxofre, aromticas,
cadeias carbnicas que apresentam na sua estrutura pelo menos um anel ou ncleo
benznico, cidas, bsicas ou amidas, compostos orgnicos obtidos normalmente a partir da
reaco de um cido carboxlico e uma amina. As propriedades do radical determinam o
carcter hidrfilo ou hidrfobo dos aminocidos.
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o Aromticos
o Bsicos, cidos ou amidas
Isomeria Enantimeros
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Todos os aminocidos das protenas so L. Um enantimero de um composto est
para este como um objecto para a sua imagem no espelho.
Ionizao
Os aminocidos possuem, pelo menos, dois grupos ionizveis. Molculas como estas,
que possuem grupos com cargas de sinal oposto so chamadas de zwitteries ou ies
dipolares. So anflitos, uma vez que possuem um grupo cido e um grupo bsico. Um
zwitterio uma molcula com carga positiva e negativa.
Conclui-se assim que um aminocido pode comportar-se tanto como cido como base.
Os aminocidos, tal como outros compostos inicos, so mais solveis em solventes polares do
que em solventes apolares. Estas propriedades inicas dos aminocidos vo influenciar as
propriedades qumicas e fsicas de um aminocido livre e dos aminocidos em complexos
proteicos.
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Aminocido na forma aninica (valores elevados de pH)
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Ligao Peptdica
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Protenas
Protenas Globulares
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Protenas Fibrosas (ou escleroprotenas)
Protenas pries so protenas que podem assumir mais do que uma conformao: a
conformao nativa e outras, que so ricas em configurao de folha e que levam
formao de agregados. Principal componente das fibrilhas amilides extracelulares presentes
em encefalopatias causadas por pries. A propagao da protena prio infecciosa ocorre pela
converso da protena prio normal (PrP) numa forma que causa doena (PrPsc).
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solues de ureia, detergentes como o SDS e solventes orgnicos) e fsica (temperatura,
radiaes e agitao mecnica). O papel das ligaes dissulfureto na desnaturao trmica da
protena inibidora da tripsina pancretica de bovino (BPTI) reflecte-se, por exemplo, na
diminuio da temperatura de desnaturao quando existe quebra de uma ligao
dissulfureto.
Estrutura Primria
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Exemplo: modificaes ps-traducionais da insulina. A insulina sintetizada como pr-
pro-insulina, que tem uma sequncia leader. Uma protease especfica cliva a sequncia leader
originando proinsulina que adquire a sua conformao 3D e forma as ligaes dissulfureto.
Outra protease especfica corta a cadeia originando insulina com duas cadeias polipeptdicas. A
conformao determinante para a actividade biolgica.
Depois de uma protena ser removida do seu ambiente natural, fica exposta a diversos
factores, tais como pH, temperatura, enzimas degradantes e adsoro a superfcies.
Estrutura Secundria
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Estrutura Supersecundria
Estrutura Terciria
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estrutura, enquanto que as hidrfilas se expem em contacto com o meio aquoso. A estrutura
terciria estabilizada por ligaes de diversos tipos: inicas, electroestticas, pontes de
hidrognio, interaces hidrfobas, covalentes, interaces Van der Walls e pontes de enxofre.
Estrutura Quaternria
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Glcidos ou Hidratos de Carbono
Oses
Estrutura
Isomeria
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Estrutura Cclica
Por outro lado, a juno de uma cetona e um lcool formam um hemiacetal, que por
sua vez, d origem a um cetal e uma molcula de gua.
Ligao Glicosdica
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Dissacridos / Diholsidos
Os sidos podem ser holsidos (glicanas) cuja hidrlise origina apenas oses, ou
hetersidos (glicsidos) cuja hidrlise origina oses ou ligao de uma ose com um composto
de natureza no glucdica (aglcona).
Polissacridos / Polisidos
So oses ou derivados das oses que os constituem ligadas por uma ligao glicosdica e
que podem apresentar ramificaes. exemplo o amido e as dextrinas.
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Estrutura Secundria
Glicognio Cadeias formadas apenas por molculas de glucose ligadas por ligaes -
1,4 e -1,6, predominando as ltimas e como consequncia h muitas ramificaes.
Homopolissacridos / Homoglicanos
Amido Constitudo por amilose e amilopectina, unidas por ligaes -1,4 ou -1,6.
Hetersidos
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Lpidos
Compostos com uma cadeia aliftica (CH2) com pelo menos oito tomos de carbono.
Classe heterognea de molculas, que tm em comum o facto de serem relativamente
insolveis em solues aquosas, mas solveis em solventes apolares.
Constituem steres de cidos gordos com lcoois, que podem conter grupos
adicionais. Constituem uma fonte de energia Gorduras e leos, sendo elementos estruturais
das membranas biolgicas. Existem fosfolpidos, glicolpidos e colesterol e podem actuar como
cofactores enzimticos, transportadores e electres, ncoras na membrana, agentes de
emulsificao, hormonas, mensageiros intracelulares ou pigmentos.
Classificao
Os lpidos podem ser classificados em simples, que por hidrlise originam um lcool e
um ou mais cidos gordos ou complexos, que por hidrlise originam um lcool, cidos gordos,
cido fosfrico, oses
Dos simples fazem parte as gorduras steres dos cidos gordos com glicerol -, os
leos gorduras lquidas e as ceras steres de cidos gordos com lcoois monodricos com
peso molecular mais elevado.
Dos complexos fazem parte os fosfolpidos lpidos que contm, alm dos cidos
gordos e do lcool, um grupo fosfrico glicolpidos lpidos com cido gordo, esfingosina e
glcidos lipoprotenas, etc.
cidos Gordos
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Constitudos por um grupo carboxil e uma cadeia hidrocarbonatada, possuem uma
parte hidrfila (carboxil) e outra hidrfoba (cadeia hidrocarbonatada). So compostos com um
elevado estado de reduo que libertam muita energia por oxidao a CO2 e H2O, constituindo,
portanto, uma importante fonte de energia.
Classificao
Ex. 18:2 (9, 12) Tem 18 carbonos e duas ligaes duplas, entre C9 e C10 e C12 e C13.
Triglicerol ou triglicrido
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Elementos estruturais das membranas biolgicas
As membranas biolgicas so constitudas por uma dupla camada lipdica, que separa e
individualiza as clulas e organitos celulares e contm glicerofosfolpidos, esfingolpidos e
esteris. A dupla camada devida ao carcter anfiptico destes lpidos: as cabeas hidrfilas
polares, por serem solveis na gua encontram-se na poro exterior da membrana, enquanto
que as caudas apolares ou hidrfobas se encontram no seu interior, em relao umas s
outras.
Glicerofosfolpidos / Fosfoglicridos
Esfingolpidos
Vitaminas Lipossolveis
Esteris e esterides
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Os esterides so esterides hidroxilados.
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Enzimologia
Enzimas
Cofactores e Coenzimas
As designaes NAD e NADP destas coenzimas decorrem das suas estruturas serem
constitudas a partir de dois nucletidos que possuem como bases azotadas a nicotidamida e a
adenina, respectivamente. O NADP apenas se diferencia do NAD por possuir mais um grupo
fosfato na sua extremidade. Derivam do cido nicotnico ou da vitamina PP.
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Derivam da riboflavina ou da vitamina B12. Rigorosamente, o FAD no integra na sua
estrutura dois nucletidos, j que associado base azotada flavina no temos um acar como
a ribose, mas um lcool derivado daquela ose o ribitol. Quando reduzidos originam FMNH2.
As reaces catalisadas por enzimas so aceleradas por factores que podem ir de 106 a
1012. Estes factores so algumas ordens de grandeza superiores aos de outro catalisador
qumico. As reaces enzimticas ocorrem em condies moderadas, compatveis com a vida
celular e possuem alta especificidade em relao aos substratos e aos produtos, sendo dotadas
de uma capacidade de regulao.
Cintica enzimtica
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O que determina a velocidade da reaco?
Velocidade da reaco
O catalisador baixa a barreira de energia para a reaco permitindo que uma fraco
maior de molculas tenha energia suficiente para atingir o estado de transio e
consequentemente aumenta a velocidade da reaco, em ambos os sentidos.
Temperatura
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pH
Concentrao do Substrato
Paragem das reaces a tempo fixo (ensaios com dois pontos) e medio da
concentrao do substrato ou produto em dois tempos diferentes.
Ensaios em contnuo onde h medio das velocidades em funo do tempo
(cinticas).
Sim, basta aumentar RNA e a transcrio aumenta. As enzimas so, na sua maioria,
protenas. um mecanismo fisiolgico de adaptao da clula.
Catlise Enzimtica
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A reaco inicia-se com a ligao da enzima ao substrato formando o complexo
enzima-substrato. O centro activo a regio da enzima que liga os substratos e contm os
resduos de aminocidos e outros grupos qumicos que participam directamente na catlise.
uma pequena parte da molcula, normalmente uma fenda, que contm um micro-ambiente
prprio. O arranjo espacial do centro activo, contendo todos os grupos qumicos importantes
para a ligao do substrato confere especificidade enzima, que possui uma forma
complementar com o substrato. Os substratos ligam-se enzima por mltiplas ligaes no
covalentes s cadeias laterais dos aminocidos que formam o centro da ligao.
O centro activo tem normalmente uma tolerncia muito pequena que determina a sua
especificidade, podendo mesmo aceitar apenas um dos ismeros do substrato
estereoespecificidade. Compreende o local de fixao, que se combina com o substrato por
ligaes fracas, e o centro cataltico, que actua sobre o substrato levando-o a sofrer a reaco
qumica. Nas enzimas que actuam atravs de um cofactor que a estrutura responsvel pela
transformao estrutural do substrato, este encontra-se ligado enzima num local muito
prximo do centro cataltico. Molculas que diferem do substrato pelo formato ou grupos
funcionais no conseguem ligar-se enzima de uma forma produtiva.
- Estereoespecfica.
Actividade Enzimtica
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Cintica das reaces catalisadas por enzimas Modelo de Michaelis-Menten
Determinao do Kw
Equao de Michaelis-Menten
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O KM uma medida da afinidade da enzima para o substrato, sendo que o valor de K M
igual concentrao de substrato para a qual a velocidade metade da velocidade mxima.
Se o KM for elevado, a afinidade da enzima para o substrato baixa, uma vez que precisa
grande quantidade de substrato para atingir uma velocidade igual velocidade mxima. O KM
mede o valor de concentrao de substrato que corresponde ao momento em que se atinge
metade da velocidade mxima.
Inibio Enzimtica
Inibidores Reversveis
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Inibidores Competitivos
Anlogos estruturais do substrato que competem com este para ligao ao centro
activo. possvel superar a inibio aumentando a concentrao de substrato. Qualquer
anlogo estrutural do substrato pode intervir como inibidor competitivo.
O inibidor promove a dissociao de E-S, aumentando o KM, uma vez que preciso
maior quantidade de substrato para que metade da velocidade mxima seja atingida. Na
presena de excesso de S (substrato), o equilbrio deslocado tambm para E-S, mas como a
inibio anulada pelo excesso de substrato, a Vmx no modificada.
Inibidores No Competitivos
Inibidores Irreversveis
Exemplos:
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Inibidores Suicidas
Enzimas Alostricas
So enzimas cuja actividade pode ser modulada pela ligao reversvel de efectores
alostricos funcionando como enzimas reguladoras das vias metablicas. Contm um local
alostrico especfico para a ligao de efectores. Estruturalmente, so enzimas com duas ou
mais subunidades idnticas (protmeros), formadas por vrias cadeias polipeptdicas, numa
estrutura quaternria, que por induo dos efectores (ou do prprio substrato) podem
alternar em mais do que uma conformao. Cada protmero possui trs locais de fixao para
o inibidor, para o activador e outro para o substrato.
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Existem dois estados conformacionais para as enzimas que esto em equilbrio: um
estado cataltico (activo), no qual a conformao da enzima permite-lhe combinar-se ao
substrato e ao activador, e um estado inibido, onde apenas o inibidor se consegue ligar
enzima. A transio entre os dois estados designada transio
alostrica.
A eficincia com que cada enzima deve operar deve ser controlada em funo da
disponibilidade de substrato, da utilizao dos produtos e das necessidades gerais da clula e
do organismo. A regulao da actividade enzimtica essencial para a coordenao e
integrao dos processos metablicos em resposta a alteraes ambientais, para o
crescimento e diferenciao.
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A regulao da actividade enzimtica muito importante para que possa haver
poupana de energia, mas tambm como forma de segurana, regulando a quantidade de
produtos que em excesso se podem tornar txicos (actuando como inibidores noutros locais,
por exemplo).
Inibio Retroactiva
Modificao Covalente
A situao mais frequente de regulao covalente ocorre em enzimas que podem ser
fosforiladas, reversivelmente a partir do ATP sobre um ou mais resduos de serina (e tambm
tirosina, embora com menor frequncia). Assim, algumas enzimas so activadas sob a forma
fosforilada, enquanto que outras so inactivadas sob esta forma. As fosforilaes so
catalisadas por protenas cinases e a remoo, por hidrlise do grupo fosfato por protena-
fosfatases.
Clivagem Proteoltica
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Activao por Proteco da Enzima
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Metabolismo Intermedirio
Metabolismo
Vias Metablicas
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As vias metablicas so reversveis
O que permite maior controlo dos processos nos organitos e em diferentes tecidos.
O controlo do fluxo na via passa por controlar a actividade das vias reguladoras por um
dos vrios mecanismos, que fazem com que o estado metablico celular esteja
profundamente relacionado com o estado metablico do organismo.
- Modificao covalente;
Termodinmica
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A Segunda Lei da Termodinmica enuncia que todos os processos tendem a
prosseguir no sentido do aumento da entropia do universo. A entropia (S) uma medida do
grau de desordem do sistema. Uma variao positiva da entropia (S<0) favorece a reaco.
G Caracterizao do Processo
Negativo Favorvel Irreversvel
Zero Equilbrio Reversvel
Positivo Desfavorvel O processo inverso favorvel
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A energia contida nos nutrientes, contidos na dieta, libertada de forma controlada
atravs de reaces redox.
O fluxo de electres ser do par redox com o potencial mais negativo par ao par com o
potencial mais positivo. A energia livre da reaco redox pode ser calculada pela equao:
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As coenzimas so muitas vezes utilizadas, no laboratrio, para seguir as reaces e
determinar actividades enzimticas. O NAD+ e o FAD existem em quantidade limitada e tm de
ser recicladas. Tm um papel de intermedirios redox. A energia das coenzimas reduzidas
recuperada usando o O2 como aceitador final de electres.
A energia livre contida nos nutrientes libertada atravs das reaces redox que
ocorrem na cadeia de transporte de electres e conservada como ATP.
Formao do ATP
O ATP formado nos organismos vivos por fosforilao do ADP conjugada com
reaces de oxidao-reduo que fornecem a energia necessria. Essas fosforilaes ocorrem
nas transferncias de electres pela cadeia respiratria das clulas aerbias, onde o oxignio
o aceitador final de electres, isto , o oxidante. A fosforilao do ADP em ATP ocorre tambm
nas clulas em anaerobiose, embora com muito menor rendimento.
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- Uma ligao ster, cuja hidrlise acompanhada de uma variao de energia livre
padro de Go -2,5 kcal/mol, correspondente reaco AMP + H2O Adenosina + Pi
A energia livre contida nos nutrientes que foi libertada atravs das reaces redox e
conservada como ATP, pode ser utilizada para levar a cabo biossnteses ou outros processos
endergnicos.
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Modelo Mecnico do Acoplamento Energtico
Etapas do Catabolismo
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Etapa 3 Oxidao completa de Acetil-CoA at formao de CO2 e H2O
Gliclise
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Entrada de Glucose nas Clulas
Gliclise
A gliclise requer um investimento em ATP (energia) antes de ser produzido mais ATP
e NADH, o que divide a gliclise em duas fases a fase de investimento e a fase de gerao de
energia. Para se dar incio gliclise necessrio o consumo de 2 ATP.
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1 Transformao de glucose a glucose 6-fosfato por aco da hexocinase numa
reaco praticamente irreversvel.
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6 O gliceraldedo 3-fosfato oxidado a 3-fosfoglicerato, que por sua vez fosforilado
a 1,3-bifosfoglicerato pelo fosfato inorgnico pela enzima gliceraldedo 3-fosfato
desidrogenase.
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Reciclagem do NAD+
Fermentao Lctica
Podem existir outros glcidos que so catabolisados pela gliclise, dando origem a
produtos que posteriormente vo entrar nessa via. Como exemplos so a sacarose, a lactose
ou o glicognio.
Metabolismo da Frutose
Fosforilao da frutose
Fgado
pela enzima frutocinase
Fosforilao da frutose
pela enzima hexocinase,
Msculo
sendo necessria a
e Rins
interveno do Mg2+
como cofactor
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Metabolismo da Galactose (Lactose)
Metabolismo do Glicognio
A converso da glicose 6-fosfato para a glicose, que ocorre no fgado, rim e intestinos,
pela aco da glicose 6-fosfatase, no ocorre no msculo-esqueltico devido falta desta
enzima. No fgado, a aco desta enzima conduz a glicogenlise para a gerao de glicose livre
e a manuteno da concentrao desta no sangue.
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Regulao da Gliclise
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Destinos do Piruvato
- Transaminado a alanina
- Carboxilado a oxaloacetato
- Reduzido a lactato
- Descarboxilado a Acetil-CoA
Oxidao Anaerbia
Oxidao do Piruvato
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Ocorre na matriz mitocondrial. Antes de entrar no ciclo de Krebs, o piruvato sofre uma
srie de reaces:
- Activao, por ligao CoA transferncia do grupo acetilo para CoA, com
formao de Acetil coenzima-A.
- Reoxidao do cido lipico pelo FAD e NAD+. O NADH formado reoxidado pela
cadeia transportadora de electres.
Ciclo de Krebs
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1 Reaco de condensao catalisada pela citrato sintetase, onde h transferncia do
grupo acetil da acetil-CoA para o cido oxaloactico, formando cido ctrico.
4 Sntese de ATP por fosforilao do succinil CoA a succinato, pela succinil CoA
sintetase.
61
Reaces anaplerticas
- Regulao alostrica
Fosforilao Oxidativa
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A transferncia de electres processa-se por etapas sucessivas atravs de uma srie de
transportadores, o que se revela muito mais favorvel do ponto de vista energtico. Um
sistema deste tipo compreende, de uma forma geral, complexos proteicos de ferro e enxofre,
desidrogenases, tendo como coenzima um nucletido piridnico como o NAD ou o NADP,
flavoprotenas, coenzima Q e vrios citocromos, que funcionam do lado do espao
intermembranrio, com um certo grau de liberdade no que respeita sua ligao com a
membrana. So estes os transportadores de electres. Estes transportadores so grupos
prostticos de protenas e encontram-se, partida, no seu estado oxidado, sendo reduzidos
pelo hidrognio ou pelos electres provenientes do substrato ou do transportador precedente
para serem re-oxidados pelo transportador seguinte. A sua funo , portanto, promover a
oxidao de diferentes compostos com reduo do oxignio a gua e produo de ATP.
Teoria Quimiosmtica
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Agentes que intervm na fosforilao oxidativa
A regulao ao nvel da Fosforilao Oxidativa feita com base nos nveis de ADP que
reflectem a razo ATP/ADP da clula.
Processo de oxidao da glucose por uma via biossinttica. Produz NADPH necessrio
nas vias anablicas, sntese de cidos gordos e esterides, e pentoses para a sntese de
nucletidos, ocorrendo no citosol. Permite o metabolismo dos acares (pentoses)
provenientes da dieta.
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Fase Oxidativa
Fase No-Oxidativa
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Ocorrem transferncias de grupos com trs tomos de carbono transaldolisao e com
dois tomos de carbono transcetolizao.
Utilizao do NADPH
Gluconeognese
Tecidos como crebro e tecido nervoso, medula renal, testculos e eritrcitos usam
glucose como principal ou nica fonte de energia, sendo esta uma fonte de energia universal e
o principal precursor de todos os glcidos, incluindo acares aminados, polissacridos e os
glcidos componentes das glicoprotenas e glicolpidos.
Sendo uma via biossinttica, sai cara clula, gastando na formao de uma molcula
de glucose livre 4 ATP, 2 GTP e 2 NADH.
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fosforilao da frutose 6-fosfato a frutose 1,6-difosfato pela fosfofrutocinase e a fosforilao
da glucose a glucose 6-fosfato pela hexocinase. Assim, a estes nveis a gluconeognese utiliza
reaces catalisadas por enzimas diferentes.
Gliclise Gluconeognese
Hexocinase Glucose 6-fosfatase
Fosfofrutocinase Frutose 1,6-difosfatase
Piruvato cinase Piruvato carboxilase/ Fosfoenolpiruvato-carboxicinase
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A piruvato carboxilase uma enzima mitocondrial, ao passo que as restantes enzimas
so citoplasmticas. Sendo a membrana mitocondrial impermevel ao oxaloacetato, esta
reaco s ocorre porque o oxaloacetato atravessa a membrana mitocondrial na forma de
malato a que foi reduzido pela enzima malato-desidrogenase de NADH ligado enzima.
As oses s podem passar atravs da membrana celular para o meio exterior depois de
fosforiladas. No caso da glucose-6-fosfato a hidrlise da ligao ster catalisada pela enzima
glucose 6-fosfatase, presente nas clulas hepticas.
Precursores
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Glicerol
Aminocidos Glucognicos
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Regulao da neoglucognese
O piruvato mitocondrial tem dois destinos possveis, regulados pelos nveis de acetil-
CoA pode ser carboxilado a oxaloacetato ou descarboxilado a acetil-CoA.
O cido ctrico tem um efeito inibidor sobre a fosfofrutocinase. Temos de atender que
a gliclise fornece cadeias carbonatadas para as biossnteses, logo, a enzima fosfofrutocinase
recebe informaes sobre o teor de macromolculas. Um teor elevado de citrato significa que
abundamos compostos precursores para estas biossnteses e no vale a pena degradar mais
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glicose. Por isso, este composto, quando existe em elevadas concentraes vai inibir a
fosfofrutocinase, ampliando o efeito inibidor do ATP.
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Metabolismo dos Lpidos
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Destino do Glicerol
Activao
Antes de serem oxidados, os cidos gordos tm de ser activados, o que requer energia
fornecida pelo ATP e ocorre na membrana mitocondrial por aco da acetilCoA-sintetase.
Transporte Mitocondrial
Oxidao
O acilCoA pode entrar na via da -oxidao que conduz a um novo acilCoA com menos
dois carbonos que o anterior.
A oxidao dos cidos gordos ocorre em ciclos de 4 reaces. Cada ciclo produz 1
NADH, FADH2, 1 acetilCoA e 1 acilCoA com uma cadeia encurtada em 2C. No ltimo ciclo
formam-se 2 acetilCoA.
Os cidos gordos, por se encontrarem num estado de reduo muito elevado, podem
ser sujeitos a um maior nmero de etapas de oxidao que os glcidos. De facto, a oxidao de
uma molcula de palmitol-CoA gera, no total, 108 ATP.
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A designao -oxidao decorre da entrada de oxignio, introduzido pela molcula de
gua, na segunda oxidao, que ocorre ao nvel do carbono .
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O crebro no efectua -oxidao porque os cidos gordos no conseguem atravessar
a barreira hemato-enceflica. No entanto, as molculas de acetilCoA so muito solveis e j
so utilizadas por aquele rgo.
Cetognese
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Utilizao de Corpos Cetnicos pelos tecidos Extra-Hepticos
Nos animais, o cido palmtico o precursor de todos os outros cidos gordos atravs
de reaces de elongao, dessaturao e hidroxilao.
O acetilCoA tem de passar das mitocndrias para o citosol, mas como a mitocndria
no lhe permevel, o transporte de grupos acetilo atravs da membrana mitocondrial
interna realizado pelo citrato, custa de ATP, e no citosol por aco de uma lipase de acordo
com a reaco:
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Activao do AcetilCoA com formao de MalonilCoA
A sintase de cidos gordos dos mamferos contm duas subunidades iguais, estando
cada unidade desdobrada em trs domnios que, no seu conjunto, apresentam sete centros
catalticos.
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a unidade de reduo que contm a ACP, a -cetoacil-redutase, a -hidroxiacil-desidratase e a
enoil-redutase. O domnio 3 a unidade de libertao do palmitato e contm a tioesterase.
Outros cidos gordos podem ser obtidos a partir do palmitato. Os cidos gordos de
cadeia mais curta podem ser obtidos por aco de tioesterases adicionais.
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Responde a diferentes necessidades energticas e dietas alimentares. A acetilCoA
carboxilase a enzima reguladora.
Regulao Alostrica
Modificao Covalente
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Metabolismo dos Aminocidos
Digesto de Protenas
Aminotransferases
Estas enzimas diferem na sua especificidade para o aminocido dador mas aceitam
apenas o -cetoglutarato, ou em menor extenso, o oxaloacetato. Tm como grupo prosttico
o piridoxal fosfato (derivado da vitamina B6) que funciona como transportador temporrio de
grupos amina.
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Libertao de Amnia
A amnia produzida no msculo pode ser transportada pela alanina (ciclo glucose-
alanina).
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Ciclo da Ureia
3 Hidrlise do pirofosfato
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Regulao do Ciclo da Ureia
Outra forma de regulao a expresso dos genes das 4 enzimas do ciclo adaptao
a longo prazo dieta.
O ciclo da ureia liga-se ao ciclo de Krebs. O oxaloacetato pode seguir trs vias: pode ser
transaminado a aspartato, convertido em glucose na neoglucognese ou condensar-se com o
acetilCoA para formar citrato.
- Gluconeognese
- Cetognese
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visto que os tomos de carbono de isoleucina, lisina, fenilalanina, triptofano e tirosina vo
surgir como precursores da glucose.
Doenas Metablicas
Leucinose
H vrias formas, a mais grave manifesta-se nos primeiros 3 a 5 dias de vida, com
alterao do estado de conscincia, recusa alimentar e sinais neurolgicos de intoxicao. O
desenvolvimento da doena caracterizado por um agravamento progressivo at ao coma
profundo. A urina toma um cheiro caramelizado caracterstico. A forma sub-aguda, com incio
mais tardio, apresenta-se como uma encefalopatia com atraso metal, hipotonia grave,
posicionamento da cabea para trs (em opisttono) e atrofia cerebral de evoluo muito
grave.
O tratamento desta doena consiste numa dieta hipoproteica restrita nos aminocidos
leucina, isoleucina e valina, suplementada com carnitina.
Citrulinemia
Fenilcetonria
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Acumula-se fenilalanina em todos os fluidos corporais.
A enzima carnitina palmitoil transferase I responsvel pela entrada dos cidos gordos
na mitocndria. Quando esta enzima est deficiente, os cidos gordos no entram e no vo
sofrer -oxidao. Como consequncia h menor produo de acetilCoA e menos
disponibilidade energtica.
Galactosemia
O tratamento passa por restringir a dieta para a galactose e lactose, o que no grave
pois h um mecanismo metablico para converso da glicose em galactose. H que ter em
conta um contnuo acompanhamento mdico para a evoluo dos sintomas.
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