Universidad Industrial de Santander

Facultad de Salud
Escuela de Microbiologa
Micologa-I semestre 2016

Candida dublinensis y Tricophyton rubrum en agar PDA1

Gua Prctica #3
Cmo puedo cultivar y caracterizar el crecimiento de hongos en el
laboratorio?

1. Identificacin:

1.1 Consideraciones generales

Los hongos son unicelulares o pluricelulares, los primeros se reconocen con el nombre de levaduras u hongos
levaduriformes y los segundos como mohos u hongos filamentosos en los que se incluyen los macroscpicos, es
decir las setas. Los hongos en la naturaleza pueden interactuar con otros organismos, la relacin ms
importante es la que cumplen como saprfitos, es decir como degradadores de materia orgnica. No obstante,
pueden ser simbiontes de las cuales las ms conocidas son sus relaciones con las plantas (micorrizas) o con las
algas (lquenes), las dos resultan en beneficio, directo o indirecto, para el ser humano. Igualmente, existen
relaciones parasticas que pueden resultar en procesos infecciosos y patolgicos. De las ltimas las ms
estudiadas por su importancia son las que producen en las plantas y en los animales (Saldarriaga y Pineda,
2001; Atlas y Bartha, 2002).

No todos los hongos pueden ser cultivados en el laboratorio, sin embargo, las tcnicas convencionales de
cultivo han sido usadas como aporte a la clasificacin e identificacin y en los procesos de investigacin y
diagnstico. Es necesario considerar que un crecimiento negativo en un medio de cultivo debe analizarse
despus de un tiempo considerado de incubacin dado que vara desde 48 horas hasta 6 semanas. Algunos
macromicetos pueden ser cultivados en el laboratorio (Kuar et al., 2013).

El crecimiento sobre medios de cultivo depender de su comportamiento en la naturaleza, por ello al momento
de estudiar un hongo es necesario considerar los grados de dependencia con el hospedador, el tipo de
nutricin y las caractersticas econutricionales. En el caso de los patgenos pueden ser parsitos estrictos, es
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Fotografa tomada por Clara Ins Snchez Surez en 2013. Cepario Micologa Escuela de Bacteriologa y Laboratorio Clnico
Universidad Industrial de Santander.
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Laura Viviana Herrera Sandoval- Clara Ines Sanchez Suarez- Docentes Micologa EMBA
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decir que son altamente dependientes del hospedador, o parsitos facultativos que tienen dependencia
reducida. En cuanto al tipo de nutricin los biotrficos, se alimenta a expensas de las clulas del hospedero; los
necrotficos, matan a la clula de su hospedero y viven nutrindose de sus restos; y los hemibiotrficos se
comportan inicialmente como biotficos pero luego son necrotficos. En cuanto a las caractersticas
econutricionales son diferentes y de tipos distintos de combinacin: biotrofos obligados, hemibiotrofos,
hemibiotrofos saprotrofos facultativos, necrtrofos obligados, necrtrofos saprtrofos facultativos, saprtrofos
necrtrofos facultativos, saprtrofos obligados, saprtrofos biotrfos facultativos y biotrfos saprtrofos
facultativos (Agrios, 2005). Es as que en el laboratorio no es posible lograr que un hongo biotrofo obligado
crezca en un medio de cultivo convencional.

A partir, de la informacin disponible en la bibliografa describa los tipos de medios de cultivo y las
tcnicas de siembra que se podran utilizar para cada uno de los siguientes propsitos:

1. Aislamiento.
2. Identificacin.
3. Conservacin.
4. Pruebas bioqumicas.
5. Obtencin de biomasa.

2. Experimentacin:
2.1 Revise atentamente con el docente el material audiovisual de apoyo, para identificar una de las tcnicas de
siembra mas frecuentes para hongos filamentosos y levaduriformes.

2.2 Como parte de su actividad experimental, usted recibir una cepa fngica que a la fecha es desconocida en
su origen, gnero y especie. Realice inicialmente la recuperacin de la misma, seleccionando y aplicando las
tcnicas que previa discusin con los docentes considere pertinentes.

2.3 Teniendo en cuenta los siguientes parmetros realice la caracterizacin del crecimiento fngico a nivel
macroscpico en cada uno de los medios de cultivo (puede incluir otras caractersticas que encuentre en la
literatura).

Caractersticas macroscpicas
Forma: Se refiere a si el hongo es filamentoso o levaduriforme
Tamao: Se mide el dimetro de la colonia
Color en la superficie y en el reverso (blanca, rosada, gris, anaranjada, verde, rojiza, negra)
Produccin y difusin de pigmentos: se observa por el cambio en la tonalidad del medio de cultivo
original
Textura: Yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, lanosa, crea, cremosa
Aspecto: Plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme.
Consistencia. Se obtiene con la ayuda de un asa. Dura, suave, firme, membranosa.
Tiempo de crecimiento: 24 h, 48 h, 1, 2, 3 semanas.
Para el caso de cultivo lquido tener cuidado de no disturbar el medio y observar produccin de micelio
areo y sustrato.

3. Formulacin:

La tcnica de siembra utilizada cumpli el objetivo propuesto? Justifique su respuesta.

Se presentaron diferencias en el crecimiento fngico en los diversos medios utilizados? justifique a lo menos
tres diferencias observadas segn la literatura.
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4. Aplicaciones:

Se desea disminuir la variabilidad de los resultados de un experimento sobre produccin enzimtica de una
cepa fngica aislada de material vegetal. Uno de los integrantes del grupo de trabajo propone el cultivo
monosprico para solucionar el inconveniente, pues segn l, lo ha escuchado de otros investigadores del rea.
Usted como microbilogo es indagado sobre esta tcnica y si es conveniente implementarla en los
experimentos. Cal sera su respuesta y que argumentos dara al respecto?.

5. Referencias bibliogrficas:
1. Agrios, G. 2005. Plant Pathology. Elseiver Academy Press. ISBN 0120445654. 922 p.
2. Atlas, R., y Bartha, R. 2002. Ecologa microbiana y Microbiologa ambiental. Pearson Education, Madrid.
677 p. ISBN 84-7829-039-7.Carrillo, L. 2003. Estructuras de los hongos. En: Microbiologa Agrcola.
Captulo 4. p. 1-6.
3. Kuhar, F., Castiglia, V., y Papinutti, L. 2013. Los hongos en el laboratorio: De la naturaleza al cultivo
axnico. Revista Boletin Biolgico N27; Ao 7.
4. Moore-Landecker, E. 1996. Fundamentals of the Fungi. 4 ed. Prentince Hall. New Jersey. 574 p. ISBN.
0-13-376864-3.
5. Saldarriaga, Y. y Pineda, F. 2001. Manual De Micologa aplicada. Editorial Universidad de Antioquia. 96
p.

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Laura Viviana Herrera Sandoval- Clara Ines Sanchez Suarez- Docentes Micologa EMBA