INSTITUTO POLITCNICO

NACIONAL
ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERA
QUMICA E INDUSTRIAS EXTRACTIVAS

Laboratorio de Optativa II: Espectroscopa

Molecular y Atmica

Reporte Prctica 2: Anlisis cuantitativo de un

solo componente. Determinacin de cafena
en refrescos
Prctica 8: EQUILIBIO de cola
QUIMICO HETEROGENEO SOLIDO
GAS

ANALISIS DE LA CONSTANTE DE REACCION A TRAVES

DE Profesor:
DIFERENTESJemima TamaraEXPERIMENTALES
CONDICIONES Vzquez
Rodrguez

Alumno: Tania Robles Figueroa

Grupo: 3IM69 Seccin: A

Prctica 2: Determinacin de cafena.

Objetivos:

Manejar con mayor seguridad un espectrofotmetro UV-Vis.

Determinar la concentracin de sustancias orgnicas en muestras problema por
medio de una curva de calibracin.

Consideraciones Tericas:

La Espectroscopa o Espectrofotometra UV-Vis es hoy en da, una de las tcnicas de

anlisis ms populares debido a su sencillez, accesibilidad y amplio campo de
utilizacin.

La Espectroscopa o Espectrofotometra UV-Vis es una tcnica de anlisis instrumental

que nos permite determinar la concentracin de sustancias orgnicas en solucin. sta
tcnica est fundamentada en la capacidad de las molculas de absorber radiacin
electromagntica dentro del espectro Ultravioleta-Visible, y en que la cantidad de luz
absorbida es directamente proporcional a la concentracin.

Cuando la energa electromagntica (en forma de luz) es absorbida por una sustancia
genera un salto desde un estado energtico basal, a un estado de mayor energa
(excitado). Cuando esto sucede, la molcula slo va a absorber la energa necesaria
para que se produzca este estado excitado.

Cada molcula tiene una serie de estados excitados que las distingue del resto de las
molculas. Como consecuencia, su espectro de absorcin, es decir, la absorcin que
presenta a diferentes longitudes de onda, es una seal de identidad de sta.

La regin Ultravioleta corresponde al rango de longitudes de onda de 195 a 400 nm. Los
compuestos que contienen en su estructura dobles enlaces aislados, triples enlaces,
enlaces peptdicos, sistemas aromticos, grupos carbonilo, etc. Tienen su mximo de
absorcin en sta regin, por lo que sta tcnica es ideal para la determinacin
cualitativa y cuantitativa de compuestos orgnicos.

La regin visible permite la apreciacin del color visible de una solucin, y que
corresponde a la cantidad de energa que transmite, no que absorbe.

Longitud de onda Color de luz que se Color de luz que se refleja

aproximada absorbe
390 435 Violeta Amarillo verdoso
435 490 Azul Amarillo
490 580 Verde Rojo
580 595 Amarillo Azul
595 650 Naranja Azul verdoso
650 780 Rojo Verde azulado
La transmitancia de una solucin es la relacin entre la cantidad de luz transmitida que
llega al detector una vez que atraves la muestra (I t), y la cantidad de energa que
incidii sobre ella: %T=(It/Io)x100.

La absorbancia es la cantidad de luz absorbida por la muestra: A= log (1/T) = -log(T) =

-log (It/I0).

Ley de Lambert-Beer. Si se hace incidir radiacin monocromtica sobre una muestra

con una concentracin C de una sustancia que absorbe a esa longitud de onda , la
intensidad de la radiacin que la atraviesa, I, est relacionada con la intensidad incidente
I0 y con el espesor de la muestra,l , por la expresin:

Segn estas definiciones, queda finalmente la siguiente expresin que se conoce con el
nombre de la ley de Lambert-Beer:

Donde es la absortividad molar, que es un valor constante para cada sustancia a cada
longitud de onda. Si se opera, por tanto, a una longitud de onda dada y con una cubeta
de un determinado espesor, l, la absorbancia A, medible directamente, es proporcional a
la concentracin molar de la muestra, c, lo que constituye el fundamento del anlisis
espectrofotomtrico cuantitativo.
Clculos previos:

Preparacin de estndares de 10, 15 y 20 ppm a partir de una solucin madre de 100 ppm
de cafena.

= =
10 = 10
105
5 1 = = 0.5
100
1010
10 1 = = 1.0
100
1015
15 1 = = 1.5
100
1020
20 1 = = 2.0
100
Preparacin de muestras de cafena

Las muestras se prepararon bajo las indicaciones de la profesora:

Muestra de Coca-Cola: = 0.3 ml de coca-cola sin gas, se llevaron a aforo de 10 ml con etanol al
10%

Muestra de Te: 0.5 ml de Te se llevaron a aforo de 10 ml con etanol al 10%

Desarrollo de la prctica:
1. Encendido del equipo. Como se aprendi en la prctica de Rutinas de diagnstico, el
encendido del equipo tiene una secuencia y es la siguiente: Regulador Equipo
computadora. As se hizo, y procedimos a abrir el programa Lambda 25.

2. Preparacin de estndares. Se procede a la preparacin de los estndares 5, 10, 15 y 20

ppm de cafena y de la muestra diluda.

Nota: Este paso se tuvo que repetir, pues hubo un error en la preparacin de los estndares
que ocasion que los espectrogramas salieran repetidos.
3. Establcer las condiciones de barrido. Se establecieron las siguientes condiciones en el
software para el equipo:
- Lmpara UV
- Modo ABS
- Ordenada lmite de 0-1.5
- Intervalo de longitud de onda: 300 a 200 nm
- Velocidad de barrido: 120nm/seg
4. Obtencin del espectrograma. Se introdujeron uno por uno los estndares y las muestras
para obtener el espectrograma, siempre en presencia de un blanco de etanol.
Resultados

Construir curva de calibracin para la cafena

Nota: Los datos obtenidos del espectrograma son aproximados.

Curva Cafena
C (ppm) Absorbancia Curva Cafena
5 0.21
10 0.47 1.2
15 0.8
1
20 0.95
0.8 Curva Cafena
Absorbancia

0.6

0.4 Linear (Curva

Cafena)
0.2
y = 0.051x - 0.03
0 R = 0.9814
0 10 20 30
concentracin (ppm)
Observacin: Se puede percibir en la grfica una pequea desviacin en el estndar de 15
ppm, esto puede deberse a una lectura incorrecta de los valores de Absorcin en el
espectrograma. Aun as, se puede observar una tendencia lineal.

Calculo de la concentracin de cafena en muestras a partir de la curva de calibracin

+ 0.03 + 0.03
= + = 0.051 0.03 = =
0.051 0.051
Donde

y= Absorbancia

x= concentracin

= 0.4
0.4+0.03
= = 8.43137
0.051

= 0.3
0.3+0.03
= = 6.47059
0.051

Calculo de la absortividad promedio

= =
Donde:
A= absorbancia [adimensional]
a= absortividad [L/mg cm]
b= longitud de celda = 1cm
c= concentracin [mg/L]

0.21
1 = (1)(5) = 0.042
0.47
1 = (1)(10) = 0.047
0.8
1 = (1)(15) = 0.053333
0.95
1 = (1)(20) = 0.0475
0.042+0.047+0.053333+0.0475
= = 0.04745833
4
 Calculo de la concentracin de cafena en muestras a partir de la absortividad

= =


= 0.04745833

= 0.4
0.4
= = 8.42845
(0.0474583 )(1 )

= 0.3
0.3
= = 6.32133
(47.4583 )(1 )

Clculo de la concentracin real de la muestra

=

10
= 8.4313 0.3 = 281.04575

10
= 6.470588 0.5 = 129.41176

Tablas de datos experimentales y resultados

Muestra C (ppm) Absorbancia a (L/g cm)

std1 5 0.21 0.042
std2 10 0.47 0.047
std3 15 0.8 0.05333333
std4 20 0.95 0.0475
a prom 0.04745833

C calc C curva
Muestra Absorbancia (ppm) (ppm) C real
Coca 0.4 8.42844601 8.43137255 281.045752
Te 0.3 6.3213345 6.47058824 129.411765

Conclusiones:
- Se analizaron y comprendieron conceptos como Absorbancia, transmitancia,
absortividad, ley de Labert-Beer.
- Se aterriz el aprendizaje sobre el correcto uso del espectrofotmetro.
 - Se comprendi cmo se relaciona la espectroscopa de UV-Vis con la Ley
de Labert-Beer, y se utiliz esta relacin para realizar clculos de
concentraciones.
- Se realiz la curva de calibracin del espectrofotmetro para la cafena.
- Se determinaron las concentraciones de cafena en las muestras problema
- De esta manera, se puede concluir que los objetivos de la prctica se
cumplieron satisfactoriamente

Cuestionario:

1. Explique la Ley de Labert-Beer. Es una ecuacin emprica que da la relacin

entre la absorbancia de una solucin y la concentracin de la misma, y
establece que son directamente proporcionales.
2. Diga cuales son las principales limitaciones de esta ley. Es una ley lmite ya
que solo se lleva a cabo con concentraciones entre 10-6 10-2 M. Puede
haber interacciones entre el soluto y la radiacin diferentes a la absorcin,
que son detectadas como tal, generando errores. Las muestras deben ser
rectangulares. Desviaciones qumicas e instrumentales.
3. En la ecuacin de Lart-Beer, explique que es el coeficiente de absorcin
Molar. Es una unidad que mide la capacidad de las sustancias de absorber
radiacin.
4. Explique en qu consiste el mtodo de cuantificacin por curva de
calibracin. A partir de los espectrogramas de los estndares de cafena, se
obtiene el valor de la Absorbancia. Se grafica Absorbancia vs Concentracin
(en las unidades que se requieran), y se realiza una regresin lineal para
obtener la ecuacin de la curva (y=mx+b, en la que y es la absorbancia y x
es la concentracin). De sta ecuacin, se va a despejar a la x, que es el
valor que buscamos, y de esta manera obtenemos una ecuacin para
obtener la concentracin a partir de la absorbancia.
5. Qu otro mtodo de cuantificacin existe y en qu casos puede ser
utilizado? Volumetra, se utiliza cuando tenemos dos sustancias
reaccionantes en fase lquida, y debemos conocer la concentracin de la
solucin que deseemos valorar.
6. Defina los siguientes trminos:
-Absorbancia: Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una
parte de esta luz es absorbida por el cuerpo. A ste fenmeno se le conoce
como absorbancia.
-Transmitancia: Cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en
determinada longitud de onda.
7. Cules son los factores que influyen en los mximos de la absorbancia?
Concentracin, ancho de celda, transiciones electrnicas
 8. Mencione los factores que influyen en los corriemientos de la longitud de
onda. pH, temperatura y tipo de solvente
9. Qu caractersticas deben tener los disolventes empleados en la tcnica
UV-Vis? Deben disolver la sustancia que se va a analizar, y deben ser
transparentes en la regin del espectro examinada.

Bibliografa:
- Determinacin de cafena por UV-Vis FarmUpibi
http://farmupibi.blogspot.mx/2015/03/determinacion-de-cafeina-por-uv-vis.html
- http://navarrof.orgfree.com/Docencia/AnalisisInstrumental/UT2/UV2.htm
- Escuela Superior de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas. Manual de
prcticas de laboratorio de Espectroscopa Molecular y Atmica.