ndice

Resumen... 2

Palabras claves......2

Introduccin......3

Objetivo general y Especifico . 4

Definicin de aflatoxina5

Estructura qumica ...6

Mecanismo de accin 7

Tipo de alimentos en el que puede estar presente ...8

Toxicidad.....9

Metodologa analtica ...10

Incidencia en Honduras ...12

Conclusiones...13

Bibliografa.................................14

Anexos.15

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Resumen
La importancia de investigar la micotoxina Aflatoxina crece cada ao debido a su incidencia cada vez mayor
dado por el consumo masivo de alimentos que pueden tener o estar contaminado por Aflatoxina.

En el informe se revisan aspectos que de muestran alimentos en los cuales estn presente esta toxina, el
mtodo utilizado para la identificacin de estas sustancias que se pueden aislar de alimentos que han tenido
un mal manejo postcosecha sobre las frutas y granos almacenados como maz, arroz entre otros.

La micotoxina puede entrar a estos alimentos directamente a la cadena alimenticia humanos y animales por
contaminacin directo e indirecto, en la directa el hongo toxcogeno crece sobre el material alimenticio, y en
la indirecta se presenta cuando el alimento es contaminado por una micotoxina. Por lo tanto, es relevante
implementar medidas para evitar el crecimiento de hongos producto de la Aflatoxinas en proceso de cultivo,
cosecha, recoleccin, almacenamiento y transporte disminuyendo su presencia en alimentos.

Palabras claves
Aflatoxinas, Aflatoxicosis, Aspergillus flavus y parasiticus, Carcingeno, Micotoxinas, toxignicas
mutagnicos, hepatotxicos.

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INTRODUCCIN

En el trabajo de investigacin que se presenta acontinuacin se pretende dar a conocer, explicar y comprender
diferentes aspectos y cualidades de la micotoxina aflatoxina desde el punto de vista que los describe, como
metabolitos secundarios producidos por CEPAS toxignicas de hongos, principalmente Aspergillus Flavus y
Aspergillus parasiticus. Estas sustancias pueden causar enfermedades e incluso la muerte tanto en animales
como en seres humanos, ya que las ingestas de estas sustancias pueden producir Aflatoxicosis especialmente
la Aflatoxina B1que es la ms txica.

Todo este conjunto de datos permitir un entendimiento ms a fondo sobre la micotoxina Aflatoxina

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Objetivos

Objetivo general
Describir los aspectos ms importantes de las aflatoxinas

Objetivos especficos

Describir la aflatoxina, su estructura qumica y tipos de alimentos en las que estn presentes.

Identificar los mecanismos de accin, toxicidad y efectos provocados tanto a la salud humana como
animal.

Describir uno de los mtodos analticos ( HPLC) el cual es adoptado como oficial por la AOAC
para la correcta identificacin y cuantificacin de las Aflotoxina

Mapear la incidencia que las Aflotoxina tienen en Honduras.

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Definicin

Las aflatoxinas son metablitos txicos secundarios que qumicamente corresponden a derivados
isocumarinicos, producida por los hongos aspegillus flavus y aspergillus parasiticus principalmente. El
nombre de aflatoxinas se deriva de la siguiente manera: A, por el gnero aspergillus principal moho
productor, FLA, por las especie flavo y finalmente toxina porque se refiere al efecto toxico que producen.
Algunos autores dicen que existen 12, 13 y hasta 18 especies de aflatoxinas producidas por el gnero
aspergillus pero los ms importantes y ms conocidas son las aflatoxinas: B1, B2, G1,G2 de los cuales se
derivan dos hidrolizados M1( derivada de la B1) y M2( derivada de la B2). Son muy abundantes en la
naturaleza que se encuentran comnmente en suelos, vegetaciones podridas, semillas, granos, cereales etc.
(Mirocha C, Pathre S, Christensen, C.)

Las aflatoxinas suelen designarse con letras, que se refieren a una caracterstica fsica o de otro tipo del
compuesto, por ejemplo, las B1 y B2 presentan fluorescencia azul y las G1 y G2, fluorescencia verde cuando
se exponen a radiacin ultravioleta de onda larga.

Las aflatoxinas son inodoras, inspidas e incoloras. Qumicamente, son estables en los alimentos y resistentes
a la degradacin bajo procedimientos de coccin normales. Es difcil eliminarlas una vez que se producen.

Factores o condiciones que influyen en la generacin de las aflatoxinas.

Las aflatoxinas pueden proliferarse en cualquier zona siempre y cuando tengan las condiciones necesarias
que son principalmente humedad relativa alta y temperatura alta , tambin de ven favorecidas por sequias ,
daos a la semilla por golpes , ataques de insectos otros factores son la cantidad de esporas inoculadas, la
tensin durante el crecimiento de las plantas, daos causados por hongos, las variedades susceptibles o
resistentes de las plantas, dao mecnico, dao por tormenta, dao por aves, la nutricin mineral de la planta
y el almacenamiento del producto.

El rango de temperatura de crecimiento de los hongos productores de aflatoxinas oscila de 4C a 45C,

mientras que la temperatura de produccin de las aflatoxinas es de 11C a 35C, con una temperatura ptima
de 22C y una humedad relativa del 80-90%.

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 ESTRUCTURA QUMICA

Estructura qumica de las principales aflatoxinas (Palmgren y Hayes, 1987).

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MECANISMO DE ACCIN

Las aflatoxinas son inmunosupresoras que inhiben la fagocitosis y la sntesis proteica interrumpiendo la
formacin del ADN, ARN y protenas en el ribosoma. (Smith, 1982; Sharma, 1993)

El mecanismo de accin de las micotoxinas sobre el sistema inmunitario es diferente, dependiendo de la

toxina en cuestin. As, la aflatoxina B1, provoca una hipoplasia del timo y una deplecin de los timocitos.
La inmunosupresin se manifiesta de diversas formas, como una disminucin de los linfocitos T B, una
supresin de los anticuerpos o un retraso en la actividad de los macrfagos/neutrfilos, tambin puede
disminuir la actividad del complemento. La dosis diaria mnima de aflatoxina B1 que induce
inmunosupresin es de 0.25 mg/kg de peso vivo (Carrillo, 2003)

Sobre el metabolismo Las micotoxinas pueden actuar sobre el metabolismo de los glcidos, y producen
alteraciones en este metabolismo, Sobre determinados rganos diana Estos suelen ser el SNC, sistema
gastrointestinal, hgado, rin y piel. (Carillo, 2003)

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Tipos de alimentos en las que pueden estar presentes las Aflatoxinas

Arroz Maz

Trigo

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TOXICIDAD

Entre las principales manifestaciones asociadas a la exposicin de aflatoxinas, estn el dao heptico
(cirrosis) y renal, mutagnesis (por la mutacin en el codn 249 de hepatoclulas humanas), teratognesis
(ya que pueden cruzar la placenta humana y crean malformaciones fetales), inmunosupresin (ya que suprime
la respuesta mediada por clulas, altera la funcionalidad del sistema del complemento y enmudece la accin
de la IgA y la IgG ), genotoxicidad (por la formacin de aductos con el ADN y con la albmina que induce
a la mutacin de genes y alteraciones cromosmicas como intercambio entre cromtidas hermanas y
recombinacin) (R. Eley, 1992).

Grupo B y G: La AFB1 se considera la ms toxica al ser cancergena y genotoxica, esta se encuentra en la

categora del tipo 1. Las AFB2 y AFG2 no se han clasificado como cancergenas ya que no existen datos o
estudios que afirmen al igual que la AFG1.

Grupo M: La AFM1 se la considera la segunda ms toxica luego de la AFB1, ya que, produce efectos muy
similares a la B1. La AFM2 tiene una toxicidad mucho ms baja lo cual no la hace tan toxica para los seres
humanos y animales. (Smith J, Hacking A. Fungal toxicity.).

Los lmites obligatorios para el contenido de aflatoxinas en los alimentos vulnerables a ellas se han fijado
muy cerca del lmite de deteccin de la metodologa analtica, con base en el principio de que no existe
ningn nivel inocuo conocido para el ser humano; la norma dictada por la "Food and Drug Administration"
(FDA) de los EEUU para los alimentos agrcolas primarios y sus derivados, es de 20 g/kg de aflatoxinas
totales.

La toxicidad aguda de las aflatoxinas se manifiesta principalmente como lesiones hepticas. En la forma
subaguda, los animales jvenes pueden presentar retardo en el crecimiento, prdida del apetito, se
compromete el sistema inmunitario por su accin degenerativa sobre el timo y la Bursa de Fabricio, aumento
de la fragilidad capilar afectando el tiempo de coagulacin sangunea y de all, la presencia de hematomas,
postracin y muerte (Rivero et al., 1998).

En cuanto a la toxicidad crnica, la Agencia Internacional de Investigacin sobre el Cncer (IARC;

Internacional Agency for Research on Cancer) clasifica varias micotoxinas como carcingenas o
potencialmente carcingenas para el hombre, de acuerdo a los siguientes grupos:

Grupo 1. El agente es carcingeno en humanos.

Grupo 2A: Agente probablemente carcingeno en humanos; existe limitada evidencia sobre humanos pero
suficiente con animales.
Grupo 2B: Agente posiblemente carcingeno; la evidencia en humanos es limitada y tampoco hay suficiente
evidencia con animales de experimentacin
Grupo 3: El agente no es clasificable como carcingeno para humanos y no puede incluirse en otro grupo.
Grupo 4: El agente probablemente no es carcingeno en humanos; la evidencia disponible, tanto de humanos
como de experimentacin animal as lo sugiere.

La aflatoxina B1 est en el grupo 1 y la M1 est en el grupo 2B

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Metodologas analticas
La estructura cumarnica de la aflatoxina, las instauraciones y la presencia de grupos cetnicos en la
molcula, le confieren dos propiedades importantes para la deteccin cromatogrfica: la polaridad y la
fluorescencia bajo la luz ultravioleta (Moreno, 1990). Para los anlisis del presente estudio se utiliz una
tcnica adoptada como oficial por la AOAC despus de realizar un estudio colaborativo a nivel internacional
(Trucksess et al., 1994). Mediante esta tcnica las aflatoxinas son extradas con una mezcla de acetonitrilo:
agua (84:16) y purificadas con una columna Micotox 2006 segn el mtodo descrito por Wilson y Romer
(1991). Luego de adicionar al extracto un reactivo de derivatizacin, se llev a bao termosttico (65 C) por
10 minutos y de esta forma, las AFB1 y AFG1 son derivatizadas a sus correspondientes hemiacetales (AFB2a
y AFG2a). La separacin de las cuatro aflatoxinas [B1 (B2a), B2, G1 (G2a) y G2] se hace en una columna
cromatogrfica de fase reversa (RP18). Las aflatoxinas son finalmente detectadas y cuantificadas mediante
un espectrofotmetro de fluorescencia acoplado a un integrador- graficador.

Extraccin. En un recipiente de vidrio se mezclaron 50 g de muestra con 100 mL de acetonitrilo: agua (84:16)
se homogenizaron durante 3 minutos en una licuadora. Posteriormente, se filtraron a travs de papel filtro y
se colectaron 5 mL de filtrado en un tubo de ensayo de 10 mL.

Purificacin del extracto. Se insert el extremo con el tapn de caucho de una columna Micotox 2006 en
el tubo de ensayo, presionando lentamente hasta obtener cerca de 250 L de extracto purificado.

Concentracin y derivatizacin. Se transfirieron cuantitativamente 200 L de extracto purificado a un vial

de 4 mL de capacidad con tapa de tefln; posteriormente se adicionaron 700 L de reactivo de derivatizacin
(cido trifluoroactico/cido actico/agua; 2:1:7). El contenido se calent a 65 C (derivatizacin) durante
10 minutos en bao termostatado y se dej enfriar a temperatura ambiente.

Separacin y cuantificacin. El derivatizado se filtr a travs de membrana Millipore de 0.45 m de dimetro

de poro y se inyectan 50 L en el cromatgrafo de lquidos. Los extractos derivatizados AFB2a y AFG2a
son estables en congelacin durante 8 a 14 das sin prdida significativa de fluorescencia

Condiciones cromatogrficas.
Cromatgrafo Shimadzu LC 9A

Bomba cromatogrfica LC 9A

Horno CTO GA 50 C

Detector de fluorescencia FLD GA de longitudes de onda fijas.

Longitud de onda de excitacin: pico a 350 nm, banda espectral 330 370 nm.

Longitud de onda de emisin: 450 800 nm.

Integrador CR4 4 (Attn: 0; speed: 2 mm/min; run time: 18 min). File AFLA

Fase mvil: Agua: MeOH (60:40), flujo: 0.6 ml/min.

Columna analtica: Merck LiChroCART 125 4 HPLC Cartridge LiChrospher 100

RP 18 (5 m).

Temperatura: 30 C.

Precolumna: Merck LiChroCART 4 4 HPLC Guard columna LiChrospher 100

RP 18 (5 m).

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Temperatura: 30 C.

Presin: 76 kg/cm2 con columna y pre columnas nuevas.

Orden de elusin: AFG1 (AFG2a), AFB1 (AFB2a), AFG2, AFB2

Tiempos de retencin aproximados: AFG1 4.2 min.

AFB1 5.9 min.

AFG2 8.4 min.

AFB213.2min.

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Incidencia de Aflatoxinas en Honduras

Se realiz un estudio sobre la incidencia de aflatoxinas en las variedades de maz Guayape y HB-10-l en
Zamorano, Honduras esto debido a que el maz representa la mayor fuente de carbohidratos en su dieta y
estas variedades son ampliamente cultivadas en el pas.

El estudio se realiz en el periodo de agosto de 1993 a enero de 1999. Se Realizaron tres muestreos en
diferentes etapas (cosecha, secado y almacenamiento) durante el ensayo para determinar la incidencia de
aflatoxinas en cada una de ellas.
Las variables que se evaluaron fueron el contenido de humedad del grano, dureza del grano, densidad
aparente, dao mecnico, dao por insectos y dao por hongos. De lo cual se demostr que hubo mayor
incidencia en la produccin de aflatoxinas fueron la humedad, la dureza, dao por insectos y hongos.
Se lleg a la conclusin que el manejo postcosecha del grano (seleccin, desgrane, secado, almacenamiento,
etc.) fue el ms influyente en la reduccin de aflatoxinas.
Por el peligro que representan estas toxinas, se determin que es muy importante que se establezca en el pas
un organismo oficial que regule la contaminacin de este y otros granos alimenticios.

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Conclusiones

Las aflatoxinas al ser metabolitos que provocan efectos negativos al ser humano como ser
carcinogenicidad, es necesario realizar investigaciones concretas y as comprender de la mejor
manera su accin y su incidencia en los alimentos.

Para evitar la proliferacin de estos hongos en los alimentos desde su cultivo, cosecha y recoleccin,
as como su almacenamiento, se tiene que contar con un plan de contingencia y as disminuir o evitar
su crecimiento.

Especficamente se tiene que tener estudios cuidadoso y minucioso con la aflatoxina B1 la cual es
la ms abundante y posee cualidades carcingenas mutagnicas y teratognicas perjudiciales para
los seres humanos y los animales.

Se tiene que contar con metodologas analticas especficas para el correcto anlisis de estos
metabolitos y as obtener resultados confiables y seguros.

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Bibliografa

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Pilar Bogantes- Ledezma, D. B.-L.-L. (2004). Aflatoxinas. Scielo Acta Mdica Costarricense,
2210-2200.

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ANEXOS

Micotoxinas Aflatoxinas

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