09-04-2015

Bacilos Gram
positivos
2015

monica.pavez@ufrontera.cl

2 Edicin de Manual de Bergey

o 1984, BASADO EN ANALISIS FILOGENETICO

1
 09-04-2015

Bacterias gram positivas

bajo contenido de G+C
Filo: Firmicutes
incluye importantes bacterias formadores de esporas
ordenes de alta importancia medica:
CLOSTRIDIALES,BACILLALES( staphylococcus),
LACTOBACILLALES (streptococcus, listeria, enterococcus)
MYCOPLASMATALES

Bacterias gram positivas

alto contenido de G+C
Filo: Actinobacteria
Muchas bacterias son altamente pleomorfas
(Corynebcaterium, Gardenella)
Mycobacterium
Actinomicetos ( informal) : Streptomyces, Farnkia, Nocardia,
Actinomyces

2
 09-04-2015

Gram positivo

cocos bacilos

Bacilos Bacilos no
Stahpylococcus Streptococcus esporulados esporulados

.
Enetrococcus
Listeria spp.
Bacillus spp.
Erisiphelotrix spp.
Clostridium spp.
Corynobacterium spp
Nocardia spp.
Rhodococcus spp.

Bacillus spp.
Familia Bacillaceae
Bacilos Gram positivos facultativos
Formadores de esporas.
Generalmente mviles
No exigentes metablicamente
Ampliamente distribuidos en la naturaleza (saprofitos)
34 especies (Bergey)
Implicancia industrial: produccin antibiticos (polimixina,
bacitracina), enzimas, solventes, vitaminas, etc.
Implicancia medica: Bacillus anthracis, Bacillus cereus

3
 09-04-2015

Bacillus anthracis
Bacilo recto (1 x 8 u) extremos
cuadrado
Disposicin en pares, aislados o
cadenas largas
Inmvil
Endospora central elptica sin
deformidad (2- 3 das),
altamente resistente
Capsulado (in vivo)

Aerobio facultativo
No exigente metablicamente
Colonias grandes, blanca-grisacea
Opacas de borde irregular
Consistencia membranosa
Sin hemolisis

4
 09-04-2015

B. anthracis: factores de
virulencia
mediada por plsmidos:

- Capsula

- Toxina de edema

- Toxina letal

Capsula:
- Polipeptido formado por acido D-glutmico

- Evasin de mecanismos de defensa: Antifagocitario

- Sintetizada por tres genes presentes en plasmido pOX2 ( capA,

capB y capC)

5
 09-04-2015

Toxinas:
- Tres componentes proteicos codificadas en plsmido pOX1
- Antgeno protector (83kDa): se fusiona al receptor y permite el
ingreso a la clula
- Factor edema: Adenil-ciclasa dependiente de calmodulina,
origina acumulacin de liquido caracterstico del carbunco.
- Factor letal: proteasa dependiente del cinc (escinde cinasa).
Estimula liberacin de TNF- , IL1 Y citocinas proinflamatorias.
Muerte celular
- Ambos factores inhiben sistema inmune

6
 09-04-2015

B. anthracis: clnica
Zoonosis
Distribucin mundial (zonas clidas)
Reservorio: suelos contaminados,
productos animales infectados (
piel, pelo, lana, sangre, cadveres,
excretas)
Germinacin de la espora en tejidos
vivos ( T)
Formas clnicas:
-Carbunco cutneo (95%)
-Carbunco digestivo
(herbvoros)
-Carbunco respiratorio
( bioterrorismo)

Cutneo:
Entrada: lesin cutnea
Incubacin:
1-2dias
Sintomatologa; ppula
indolora, ulcera. Escara
necrtica.
Puede aparecer signos
sistmicos.
Mortalidad 20%

7
 09-04-2015

Carbunco digestivo:
Poco frecuente
Incubacion1-7 das
Ulceras en el punto de invasin
Nauseas, vmitos y malestar
Adenopatas regionales
Mortalidad casi 100%

Carbunco respiratorio
Dosis infectiva: 800-50000 esporas
Signos inespecficos iniciales (ERA)
seguida de sepsis y shock de
aparicin rpida (3 das).
Edema y adenopatas (mediastino)
Sntomas menngeos (50%)
Incubacin prolongada

8
 09-04-2015

B. anthracis: Diagnostico
Tincin de Gram sangre perifrica (morfologa)

Tincin de esporas (verde de malaquita) incubacin con

atmosfera pobre de CO2.

Tincin de capsula (azul de metileno)

Cultivo en cualquier medio de cultivo

Reaccin en cadena polimerasa

Diferencial respiratorio

Diferencial cutneo:

9
 09-04-2015

B. anthracis: tratamiento
Susceptible: Prevencin:
- Penicilina - Control enfermedad
- Doxicilina
- Ciprofloxacino
animal

- Abordaje alternativos
para inactivar toxina
Resistentes:
(anticuerpos del AP,
-sulfonamidas
-Cefalosporinas amplio espectro
complejos petidicos
antagonistas del receptor)

Bacillus cereus
Bacilo Gram positivos mviles, saprofitos y formadores de esporas
Reservorio: suelo, agua, vegetacin, aire.
Morfologa similar a B. anthracis
Espora puede deformar la pared

10
 09-04-2015

B. Cereus : virulencia
Enterotoxinas:
- Enterotoxina termoestable , resistente a protelisis ( forma
emtica).

- Enterotoxina termolbil: similar E. coli, estimula sistema adenil

ciclasa-AMPc, produciendo diarrea acuosa

Infecciones oculares:
- Toxina necrtica ( enterotoxina termolbil)

- Cereolisina ( hemolisina)

- Fosfolipasa C (lecitinasa)

- Flagelos

11
 09-04-2015

B. cereus: clnica
Intoxicacin emtica Intoxicacin diarreica
-Ingesta de enterotoxina -Consumo carne y vegetales
-Comn en consumo de arroz contaminados
-Incuabcion:1-6 horas -Incubacin mas larga 1 da
- Sntomas: vmitos, nauseas y -M.O. se multiplica y produce
espasmos abdominales toxina termolbil.
auto limitada
Infeccin ocular
Posterior a lesin penetrante
Panolftalmitis, con perdida total de percepcin de luz
Otras infecciones: catteres, endocarditis, oportunistas a
inmunodeprimidos

Diagnostico:
cultivo alimentos en sospecha de intoxicacin
Tincin de Gram
Crecimiento cualquier medio de cultivo en aerobiosis

B. cereus: tratamiento
Gastroenteritis: tto. sintomatico
Susceptible:
- Vancomicina
- Clindamicina
- Ciprofloxacino
- Gentamicina
Resistente
- -lactmicos

Prevencin: Consumo rpido y refrigeracin de los alimentos

12
 09-04-2015

Listeria monocytogenes
BGP cortos (0,5 x 2 u), facultativo
Crecimiento en amplio rango de T (1-45C)
Disposicin aislada o cadenas cortas
Mviles a 20 e inmviles a 37
-hemolisis dbil
Ampliamente distribuida en la naturaleza
Infecciones limitadas a poblaciones definidas
( neonatos, ancianos, embarazadas y pacientes con deficiencia de
inmunidad celular)

13
 09-04-2015

L. monocytogenes: virulencia
Patgeno intracelular (macrfagos, clulas epiteliales y
fibroblastos)
Genes de respuesta al estrs ( resistente a enzimas
proteolticas, acido gstrico y sales biliares)
Protena de superficie, Internalina A, B: adherencia superficie
celular .
Listeriolisina O: toxina bacteriana activada en fagolisosoma
(ph acido)
Fosfolipasa C: liberacin bacteria en citosol
ActA: protena de superficie que se ensambla a la actina.
Gen prfA: regulador de genes de lisis y desplazamiento

Afectan solo inmunidad celular

inicio de infeccin en enterocitos o clulas M de placas de Peyer.

14
 09-04-2015

L. monocytogenes: clnica
Exposicin y colonizacin transitoria frecuente
Crecimiento bacteriano durante refrigeracin
Mortalidad de 20-30%

15
 09-04-2015

Enfermedad neonatal de comienzo precoz

(va transplacentaria)
- Granulomatosis infantoseptica- abscesos y granulomas
diseminados en mltiples rganos.
- Aborto, mortinatos o parto prematuro.
- El recin nacido presenta signos de sepsis con lesiones cutneas
generalizadas (ppulas, pstulas, prpura, vesculas y/o lceras)
antes de los 3 das de vida
- Mortalidad alta
- Embarazada: estado gripal
leve con bacteremia
(escalofros y fiebre),
sin riesgo de muerte.

Enfermedad neonatal de comienzo tardo

- 2 3 semanas despus del nacimiento
- Meningitis o meningoencefalitis con septicemia.
- signos similares a enfermada producida por streptococcus grupo B

Enfermedad en adultos sanos

- Estado gripal leve, mayora asintomticos
- Pacientes con deficiencia de inmunidad celular, meningitis,
bacteremia, con secuelas neurolgicas importantes.

16
 09-04-2015

L. monocytogenes: diagnstico
Beta-hemolisis dbil , en agar sangre
Test de camp
Mviles en forma de paragua a 25C
Catalasa positivo
Oxidasa negativo
Hidroliza esculina
Aerobios, poco exigentes
Incubacion1-2 das

L. monocytogenes: tratamiento
Susceptibilidad:
- Gentamicina + penicilina
- Sulfametoxasol-trimetropim
- Linezolida, daptomicina, tigeciclina
Resistente
- Cefalosporinas
- Macrolidos
- tetraciclina

17
 09-04-2015

Erisipelothrix rhusiopathiae
BGP esporulado, delgado, con decoloracin fcil
Pleomorfos, tendencia formar filamentos largos (pelo)
Aerobio facultativo, microaerofilia
Colonias grisceas, -hemolticas (2-3 das)
Distribucin universal en animales (cerdo y pavo)

E. rhusiopathiae: virulencia
Neuroaminidasa: unin y penetracin a la clula.

Capsula: inhibicin fagocitosis

18
 09-04-2015

E. rhusiopathiae: clnica
Zoonosis
Enfermedad ocupacional (manipuladores de carne)
Infeccin cutnea localizada: erisipeloide
- Incubacin 3-7 das
- Inoculacin subcutnea, posterior a herida
- Lesin dolorosa y pruriginosa. Supuracin infrecuente

septicemia asociada a endocarditis

E. rhusiopathiae: diagnstico
bacilos se aslan del profundo de la lesin (biopsia)

Crecimiento lento sin requerimientos nutricionales (3 das)

Atmosfera CO2 5-10%

ausencia motilidad

Catalasa negativo

19
 09-04-2015

E. rhusiopathiae: tratamiento
Sensible
- -lactmicos
- Eritromicina y clindamicina

Resistente
-vancomicina

Corynebacterium spp.
BGP forma irregular de bastn dispuestos en forma V o Y
Genero + 100 especies
Pared celular: arabinosa, galactosa, acido diaminopimelico y
cadenas cortas de cidos micolicos (frecuente)
Tincin de Gram, presencia grnulos metacromaticos (azul de
metileno)
Ubicuas: plantas, animales, piel, aparato respiratorio, digestivo
y genitourinario
Patgenos oportunistas ( C. diphtheriae)

20
 09-04-2015

C. diphtheriae: virulencia
Neuroaminidasa
Toxina diftrica
- exotoxina: se produce en lugar de infeccin y se disemina va
hematgena
- tox: introducido por fago lisognico (-fago)
- Producto activo:1. escisin proteoltica de secuencia de tox 2,
escisin molecular en dos unidades AB
- Tres regiones funcionales: unin receptor, regin de
translocacin (B), regin cataltica (A)inhibe factor de
elongacin EF-2
- Regulacin: represor toxina diftrica , se activa en
concentracin altas de hierro

21
 09-04-2015

Receptor celular: factor de crecimiento epidrmico de unin a la heparina: presente en

variada clulas, principalmente corazon y clulas nerviosas.

C. diphtheriae: clnica
Alta prevalencia de difteria en hacinamientos
Portador asintomtico en bucofaringe o piel de personas
inmunizadas
transmisin persona a persona ( gotas o contacto)
ser humano nico reservorio
Presentacin clnica depende:
- Lugar de infeccin
- Estado inmunitario
- virulencia

22
 09-04-2015

Difteria respiratoria:
-incubacin 2- 4 das
-Dao localizado en clulas epiteliales de la faringe
-Malestar general, dolor de garganta, faringitis exudativa y
febrcula
-Pseudomembrana fuertemente adherida al tejido respiratorio (1
semana despus de recuperado, se desprende y es expectorada)
-Complicaciones sistmicas corazn y SN. Miocarditis 1-2
semanas de la enfermedad. Neurotoxicidad primaria en paladar
blando seguido de parlisis oculomotora

23
 09-04-2015

Difteria cutnea

- Contacto piel con persona infectadas

- M.O. Llega l tejido subcutneo por interrupciones de la piel

- Ppula ulcera crnica recubierta por membrana griscea

C. diphtheriae: Diagnostico
Crecimiento en agar sangre o agar telurito (cisteina- telurito)
Agar Tinsdale
Medio CNA
Suero loeffler( creciemitno sobre otros M.O.)
4 biotipos: mitis, gravis, belfanti e intermedius

24
 09-04-2015

Identificacin:
Cepas no toxgenas:
- Cisteinasa
- Ausencia de piracinamidasa
endocarditis, artritis
- Test de elek ( toxgena)
sptica, osteomielitis
- Catalasa positivo y abscesos
- Resistentes a la luz

C. diphtheriae: tratamiento
Administracin antitoxina diftrica
muerte celular inevitable tras internalizacin

Sensible
- Penicilina
- Eritromicina

Prevencin: vacunacin con toxoide diftrico (DPT)

25
 09-04-2015

Otros Corynebacterium
C. jeikeium:
- Patgeno oportunista

- Necesita lpidos para su crecimiento

- Factores de riesgo: neutropenia, hospitalizacin prolongada

tratamiento previo con antibiticos

- Septicemia endocarditis, infecciones de heridas

C. urealyticum
- Patgeno importante de ITU
- Necesita lipidos para crecimiento (Tween 80)
- Produccin de ureasa ( alcaliniza orina y ayuda formacin
clculos renales)

C. amyculatum
- Resistente a antibiticos
- Patgeno vas respiratorias bajas e ITU

26
 09-04-2015

C. pseudotuberculosis y ulcerans:

- Relacionados a C. diphtheriae

TRATAMIENTO

VANCOMICINA

Nocardia spp.
BGP, con ticnion debil de acidoresistencia

27
09-04-2015

28
09-04-2015

29
09-04-2015

30
09-04-2015

31
 09-04-2015

TRATAMIENTO
Antibiticos con intervencin quirrgicas
Sensible:
- Sulfa-trimetropim (localizadas)
- Amikacina + carbapenem (graves)
- TTO. 6 semanas

32
 09-04-2015

Rhodococcus equi
BGP al iniciar cultivo, , posteriormente forma cocoide
Colonia color salmn despus de 4 das de incubacin
Patgeno frecuente en inmunodeprimidos
Intracelular facultativo en macrfagos
Inflamacin granulomatosa con formacin de abscesos
Enfermedad pulmonar invasiva, indicios de diseminacin
hematgena
Infecciones oportunista en inmunocompetentes ( cutneas,
peritonitis)
No son exigentes nutricionalmente

33