Pg.

La parte superior del matraz est equipada con cuatro puntos de penetracin estndar.
Compararon la ms alta produccin de cinamoyl puttrescine, resistencia a la
pflurofenilalamina tx-4 o n. xanthi con una baja produccin de cinco enzimas de la va
biosinttica. Como resultado, las actividades de estas enzimas, la fenilalamina-amoniaco-
liasa, trans -cinnamato -4-hidroxilasa, 4-cumarato: Coa ligasa, ornitina descarboxilasa y
arginina descarboxilasa se encontraron 3 a 10 veces ms alto en clulas tx4.

Reconocieron que la adicin de oxalato al medio de suspensin de gossypiumhirsutum el

cultivo podra reducir la cantidad de verticillium dahlia elicitor para ser empleado para
estimular sntesis de metabolitos. Adicin de un elictor de hongos a menudo inhibe el
crecimiento de las clulas vegetales, pero la combinacin del elictor y el oxalato no reduce
la masa de clulas de la planta, por lo tanto la sntesis de metabolitos secundarios se
increment hasta 10 veces.

Dunlop y Curtis informaron que una combinacin de limitacin de fosfato y produccin

sinrgica de productos de metabolitos secundarios. Ellos encontraron que ya sea fosfato
limitacin o elicitacin con un extracto micelial del hongo, el rhizoctoniasolani solo resulta
en aumento de la produccin del sesquiterpeno solavetivone por agrobacterium cultivos
de raz peluda transformados con rizogenes hyoscyamusmuticus. En muchas especies, los
embriones son morfolgicamente similares a los embriones zigticos, aunque algunos
factores bioqumicos, fisiolgicos y las diferencias anatmicas han sido la auxina sinttica,
el 2,4-d es comnmente utilizados para la induccin de embriones. Angiosperma, por
ejemplo, subcultura de zanahoria y alfalfa de clulas de 2,4-d conteniendo medio a auxina
libre medio es suficiente para inducir somticas embriognesis

Etapas del proceso de cultivo de tejidos:

1. Preparacin del medio nutritivo:

Un medio semi-slido se prepara en agua destilada doble macroelementos,

microelementos, aminocidos cidos, vitaminas, fuente del hierro, fuente de carbn como
sacarosa y fitohormonas. El medio es calentado para disolver el agar y 25 a 50 ml es
dispensado en cada boca de botella ancha. Los recipientes que contienen medios de
cultivo se sellan y esterilizado por autoclave.

2. Establecimiento de la cultura asptica:

Material para el proceso es normalmente un brote de la punta axilar o terminal del brote
de lanzamiento de una planta. El proceso del tejido comienza de la seleccin de las plantas
madre teniendo las caractersticas deseadas. Un explante preferiblemente el tejido
meristemtico esta asilado del tejido seleccionado de la plata madre. El tejido / explante
extirpado se lava con agua y a continuacin se enjuaga con una desinfectante tal como
solucin de savlon o detol seguido de un lavado con agua estril. El tejido es entonces
sumergido en solucin de cloro al 10% durante diez minutos para la desinfeccin del
material de tejido vegetal, la mayora de los organismos fngicos y bacterianos. El proceso
de esterilizacin de los explantes depende de especies de plantas y tipos de explantes.

3. Inoculacin:

La inoculacin se lleva a cabo bajo condiciones aspticas. En este proceso de explantes los
brotes son transferidos al nutriente esterilizado del medio.

4. Desarrollo de plantas en sala de crecimiento:

Despus de la inoculacin del tejido vegetal, sellado de botellas y transferido al cuarto de

crecimiento para activar proceso de desarrollo bajo luz difusa (luz fluorescente de 1000-
2000) a 25 2 C y 50 a 60% de humedad relativa. Luz y los requisitos de temperatura
varan de especie a especies y algunas veces durante las diversas etapas los cultivos se
observan diariamente durante crecimiento y cualquier signo de infeccin / contaminacin.
Las culturas, que no muestran buen crecimiento o infectadas, son desechados. Los cultivos
sanos crecen en pequeos disparos de brotes estos son subcultivados en el medio
despus de 4 semanas. El nmero de las subculturas requeridas son especficas para las
especies de plantas, que estn estandarizados. Los brotes en general despus de 4
semanas. Despus de un suficiente nmero de desarrollo en cada recipiente (10 a 15),
para una altura mnima de 2 cm se transfieren a otro medio para iniciar el proceso de
enraizamiento, las especies vegetales son especficas en el medio constituyente. Las races
son generalmente formadas de 2 a 4 semanas. Las plantas en esta etapa son delicadas y
requieren de un manejo.

5. Endurecimiento de micro plantas:

Debido a la alta humedad dentro del recipiente de cultivo y condiciones de desarrollo, las
plntulas por lo tanto, no estn preparadas para las condiciones presentadas. Las plantas
retiradas se lavan y se mantienen bajo una niebla intermitente o se cubren con plstico
transparente. Despus de 10 a 15 das bajo alta humedad, las plantas se transfieren a un
invernadero y se mantiene por otras 4 a 6 semanas. A continuacin, estn listos para ser
transferidos al campo. Normalmente, las plantas de cultivo de tejidos son vendidos como
agar o plantas endurecidas del invernadero.
A: plantas ex-agar: dependiendo de los parmetros tales como la ubicacin / el sitio de
siembra, la calidad del suelo y las condiciones climticas definidas por el cliente, ex-planta
de agar para la venta podra ser in vitro races de plantas o slo los brotes. Cuando las
plantas de cultivo de tejidos se venden en esta etapa, las plantas se lavan en agua
esterilizada para remover el medio de agar. Las plantas lavadas se clasifican en 2 a 3
grados y embalados en cajas de cartn con papel corrugado de seda esterilizado segn la
autoridad de cuarentena de la planta en India para las exportaciones. El nmero de
plantas por caja depende del requerimiento del cliente. Dependiente en el destino final y
la preferencia del cliente, las plantas son tratadas con fungicidas y antibiticos para evitar
la infeccin.