PADRO DE HEMOGLOBINA

FINALIDADE
Reagente para padronizao da dosagem de Hemoglobina. Somente para uso diagnstico in vitro.
PRINCPIO
O Fe (II) do heme da hemoglobina, oxihemoglobina e carboxihemoglobina oxidado para o estado
frrico pelo ferricianeto, formando hemiglobina (Hi), que se combina com o cianeto ionizado para
produzir cianeto de hemiglobina (HiCN), que medido em 540 nm.
PRODUTO UTILIZADO
Padro de Hemoglobina, Catlogo 47 ANVISA - 10009010028
Labtest Diagnstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000
Padro - HiCN 10 g/dL: Armazenar entre 2 - 8 C.
Contm cianeto de potssio 500 mg/dL.
Precaues e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na manipulao do reagente. Fazer
referncia ao manual ou POP de segurana.
2. Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies indicadas so estveis at a
data de expirao impressa no rtulo. Durante o manuseio, os reagentes esto sujeitos
contaminao de natureza qumica e microbiana que podem provocar reduo da
estabilidade. O laboratrio deve estabelecer a estabilidade em suas condies operacionais.
3. O reagente contm derivados de sangue humano e se mostrou negativo para HIV e HBsAg,
quando examinado por EIE. Entretanto nenhum teste conhecido, pode assegurar que
produtos derivados de sangue humano no transmitam doena. Recomenda-se portanto,
manuse-lo como sendo potencialmente infectante. O reagente foi incubado a 56 C durante 4
horas.
EQUIPAMENTOS
1. Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 540 nm ou filtro verde (520 a 550 nm).
2. Pipetas para medir amostras e reagentes.
3. Cronmetro.
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, nmero de catlogo),
instrues de preparo e frequncia da utilizao dos mesmos.
Limites de tolerncia
Descrever o procedimento para definio dos limites de tolerncia, o sistema adotado para utilizao do
mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providncias a serem tomadas diante de
valores que ultrapassem tais limites. Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao dos
materiais de controle.
Verificao de novo lote de controles e/ou reagentes
Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e de reagentes.
Gerenciamento dos dados
Definir como os dados relativos ao controle da qualidade so arquivados e gerenciados.
Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade.
PROCEDIMENTOS
Utilizar com o sistema Hemoglobina - Labtest Cat. 43.
Dosar o padro em triplicata. muito importante que as absorbncias no variem, entre si, mais que 2%
para que a mdia das mesmas possa ser utilizada no clculo do fator de calibrao .
Padro
Reagente de Cor de Uso 5,0 mL
Padro 0,02 mL
Misturar e esperar 5 minutos e determinar as absorbncias dos padres em 540 nm ou filtro verde (520
a 550), acertando o zero com gua destilada. A cor estvel vrias horas.
Precaues e cuidados especiais
1. Para manusear e descartar reagentes, aplicar as normas estabelecidas de segurana. Fazer
referncia ao manual ou POP de segurana.
2. A limpeza e secagem adequadas do material so fatores fundamentais para a estabilidade
dos reagentes e obteno de resultados corretos. Fazer referncia ao manual ou POP de
limpeza e verificao da qualidade da limpeza dos materiais.
3. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para
preparar reagentes e usar nas medies, deve ter resistividade 1 megaohm ou
condutividade 1 microsiemens e concentrao de silicatos 0,1 mg/L (gua tipo II). Para o
enxge da vidraria a gua pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou
condutividade 10 microsiemens. No enxge final utilizar gua tipo II. Quando a coluna
deionizadora est com sua capacidade saturada ocorre a produo de gua alcalina com
liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande poder de oxidao ou reduo
que deterioram os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de
modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade
da gua. Fazer referncia ao manual ou POP de gua reagente.
4. No desprezar o reagente de cor estoque, de uso ou o utilizado na dosagem em pias e
recipientes que contenham resduos de cido sulfrico.
CLCULOS

10
Fator de Calibrao =
Fator de Absorvncia do padro (mdia)

Hemoglobina (g/dL) = Absorbncia do teste x Fator

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Drabkin, D.L., Austin, J.H.: J. Biol Chem. 112:51, 1935.
2. Henry, R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W.: Clinical Chemistry, Principles and Technics, 2nd ed.
New York, Harper & Row, 1974.
3. Inmetro Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao para Avaliao, Qualitymark
ed., Rio de Janeiro, 1997.
4. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-501.
5. Reference Procedure for the Quantitative Determination of Hemoglobin in Blood: NCCLS vol. 4 N 3 .
6. International Committee for Stardardization in Hematology: J. Clin. Path. 31:139, 1978.
7. Padro de Hemoglobina, Instrues de Uso, Labtest Diagnstica.