UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL

Laboratorio 1
Microbiologa Sanitaria I

PROFESOR:
ING. TELLO CEBREROS JORGE GILBERTO

2017
DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS
MICROORGANISMOS
OBJETIVOS

Exponer el caldo nutritivo, agar nutritivo y agar sabouroud a diferentes

condiciones de contaminacin en el laboratorio.
Observar e identificar los tipos de microorganismos en diferentes medios de
cultivo y lugares de exposicin (a condiciones de temperatura y tiempo variables)
Determinar el nivel de contaminacin y los tipos de contaminantes en diferentes
zonas de la facultad.

FUNDAMENTO TERICO

Microorganismos

Los microorganismos son aquellos seres vivos ms diminutos que nicamente

pueden ser apreciados a travs de un microscopio. En este extenso grupo
podemos incluir a los virus, las bacterias, levaduras y mohos que pululan por el
planeta tierra.

Respecto de su estructura biolgica y a diferencia de lo que ocurre con las plantas

o los animales, esta es sumamente elemental ya que son unicelulares, en lo que s
coinciden con los mencionados es en la individualidad que presentan y ostentan.

Algunos microorganismos pueden ser los responsables del deterioro de algunos

alimentos, incluso ocasionando graves enfermedades a aquellos que consumieron
esos alimentos contagiados de microorganismos non sanctos, pero
paradjicamente y por otro lado hay otros microorganismos que resultan
ampliamente beneficios y que a propsito son utilizados en laelaboracin de
algunos alimentos con los objetivos de alargar sus vidas o bien de cambiar las
propiedades de los mismos, tal es el caso de la fermentacin que tiene lugar a la
hora de la fabricacin de productos como quesos, yogures y salchichas.

Medios de cultivo

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es
el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

Condiciones generales para el cultivo de microorganismos

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve

afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos,
son ajenos por completo al propio medio.

1- disponibilidad de nutrientes adecuados

2- consistencia adecuada del medio
3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases
4- condiciones adecuadas de humedad
5- Luz ambiental
6- pH
7- Temperatura
8- Esterilidad del medio

Agar nutritivo

El agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo
tipo de bacteria. Es muy til porque permanece slido incluso a relativas altas
temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la
superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas.

En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una

sustancia espesa, con colonias difcilmente observables.

Hongos

Los hongos son un reino de seres vivos unicelulares o pluricelulares que no

forman tejidos y cuyas clulas se agrupan formando un cuerpo filamentoso muy
ramificado.

El conjunto de filamentos de un hongo se llama micelio, y cada filamento se

denomina hifa. A veces las clulas que forman el micelio pueden parecer falsos
tejidos. Las clulas de los hongos tienen una pared celular de quitina, sustancia
propia de los animales artrpodos. Raramente acumulan tambin celulosa.

Los hongos tienen alimentacin hetertrofa, puesto que no pueden realizar la

fotosntesis porque no tienen clorofila. Tienen digestin externa, pues vierten al
exterior enzimas digestivas, sustancias proteicas que actan sobre los alimentos
dividindolos en molculas sencillas, que atacan a los alimentos. Los hongos
absorben los alimentos despus de digerirlos.

Segn su tipo de vida, los hongos pueden ser saprofitos, parsitos y simbiontes.
Los hongos saprofitos, como el champin o la trufa, se alimentan de sustancias
en descomposicin. Los hongos parsitos se alimentan de los lquidos internos de
otros seres vivos. Los hongos simbiontes se asocian con otros organismos y se
benefician mutuamente.

Los hongos viven en lugares hmedos, con abundante materia orgnica en

descomposicin y ocultos a la luz del sol. Tambin pueden habitar medios
acuticos o vivir en el interior de ciertos seres vivos parasitndolos.

Bacterias

Se trata de un microorganismo unicelular procarionte que puede

provocar enfermedades, fermentaciones o putrefaccin en los seres vivos o
materias orgnicas.

Por tratarse de clulas procariotas, carecen de ncleo u orgnulos internos. Por

otra parte, aunque el trmino proviene de bastn, las bacterias pueden tener forma
de barra, esfera o hlice.

Las bacterias se pueden clasificar en diversos grupos partiendo de un criterio

distinto. As, por ejemplo, si partimos de lo que es su forma nos encontramos con
el hecho de que existen cuatro tipos claramente delimitados:

Bacilos: Son las bacterias que se definen por ser alargadas y porque tienen la
posibilidad de ser curvas o rectas. De la misma forma, hay que subrayar el hecho
de que pueden contar o no con flagelos.

Leptothrix: De gran tamao son las que se enmarcan bajo esta denominacin y
tienen como principal sea de identidad que pueden presentar filamentos llamados
tabicados.
Espirilos: En este caso bajo dicha categora se incluyen las bacterias que tienen
una apariencia curva helicoidal.

Cocos: Las bacterias que reciben dicho nombre son aquellas que poseen forma
redondeada y cuentan con la posibilidad de que pueden presentarse aisladas, en
pares o bien en forma de cadena arracimada.

PROCEDIMIENTOS

Procedimiento A: (Grupo 1 y 3)
Agar nutritivo

1. Tomar cuatro tubos de agar nutritivo fundido.

2. Vaciar el tubo de agar nutritivo en cada uno de las tres petris estriles y uno
no esterilizado. Numerar las placas estriles del #1 al #3 y la placa no
estril con el nmero #4.

3. Una vez que el agar se ha solidificado, se debe destapar la placa Petri #1 y

exponer el agar durante 15 minutos al aire del bao del 2do piso de la FIA
(grupo1) y a la biblioteca de la FIA (grupo 3) por 15 minutos.
4. Dividir la placa #2 en cuatros partes, trazando lneas perpendiculares
(cuatro cuadrantes) en la base con algn marcador (sugerencia: liquid
paper).

Zona A: Pelo. A B
Zona B: Huella digital
D C
Zona C: Inoculador estril.
Zona D: Inoculador no estril.
 5. Pasar el inoculador, previamente esterilizado, por las encas o los dientes y
luego, frotar suavemente sobre la superficie de un sector.
6. Colocar un pelo o cabello sobre la superficie de un sector.
7. Pasar el inoculador no esterilizado suavemente, tres o cuatro veces por el
tercer sector. Flamear el inoculador hasta quedar al rojo vivo, luego dejar
enfriar y finalmente pasar suavemente tres o cuatro veces por el cuarto
sector.
8. Las placas #3 y #4 no se deben abrir.
9. Invertir las placas Petri e incubarlos a 37C por 48 horas.
10. Examinar las placas y dar la explicacin de lo ocurrido en cada caso

Procedimiento B: (Grupo 2 y 4)
Caldo nutritivo

1. Usando una pipeta estril, transferir el caldo nutritivo esterilizado de un tubo

a otro tubo de prueba estril y vaca, marcada con el N1.
2. Con otra pipeta no estril, transferir el caldo nutritivo del segundo tubo a
otro tubo de prueba estril, marcado con el N2.
3. Usando una pipeta estril, transferir el caldo el caldo nutritivo del tercer tubo
a otro tubo de prueba no estril, marcada con el N3.
4. Incubar por 48 horas a 37C.
Procedimiento C

En este procedimiento se utiliza el agar

sabouraud fundido y estril, el cual se vierte a
una placa Petri, esterilizada previamente. Se
lleva la placa Petri al lugar en el cual se va
estudiar los hongos y se expone al aire durante
15 minutos.
G1: Bao FIA
G2: Laboratorio Microbiologa
G3: Biblioteca FIA
G4: Laboratorio Fsico-Qumica
G5: Centro de estudiantes FIA

RESULTADOS

Procedimiento A

Grupo Placa N1 Placa N2 Placa Placa

estril estril N3 N4
estril no estril
1 Ambiente: Sector A: Sector Sector Sector No abrir No abrir
Bao FIA pelo B:huella C:inoculador D:inoculador
dactilar estril no esteril
N de
colonias
Tamao
Margen o
borde
Elevacin
Cromognesis
o
pigmentacin
Caracteres
pticos
Grupo Placa N1 Placa N2 Placa Placa
estril estril N3 N4
estril no estril
3 Ambiente: Sector A: Sector Sector Sector No abrir No abrir
Biblioteca pelo B:huella C:inoculador D:inoculador
FIA dactilar estril no esteril
N de
colonias
Tamao
Margen o
borde
Elevacin
Cromognesis
o
pigmentacin
Caracteres
pticos
Procedimiento B
Grupo N2 Tubo estril Tubo estril Tubo no estril
Pipeta estril Pipeta no estril Pipeta estril
Cantidad de
crecimiento
Distribucin de
crecimiento
Olor

Grupo N4 Tubo estril Tubo estril Tubo no estril

Pipeta estril Pipeta no estril Pipeta estril
Cantidad de
crecimiento
Distribucin de
crecimiento
Olor
Procedimiento C

Grupo 1 2 3 4 5
Ambiente Bao FIA Laboratorio Biblioteca Laboratorio Centro de
Microbiologa FIA Fsico- estudiantes
Qumica FIA
N de
colonias de
hongos
Tipo de hongo
Algunas
caractersticas
CONCLUSIONES

Procedimiento A: Colonias de bacterias desarrolladas en placas en medio

agar nutritivo:
La cantidad de colonias en el cultivo depende del tiempo que ha
transcurrido luego de haber realizado la experiencia (que en este caso fue
ms de 48 horas).
Se pudo determinar que el ambiente ms contaminado es el laboratorio de
Microbiologa.
Las bacterias con elevacin plana y de color crema son las que
predominan.

Procedimiento B: Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo:

Los microorganismos estn sujetos al estado estril o no estril del tubo y la
pipeta y como bien se puede observar en este procedimiento, no hay
mucho desarrollo.
Los cultivos aromticos fueron los que prevalecieron en las muestras de los
grupos.

Procedimiento C: Cultivos de hongos en placas con agar sabouraud:

Se puede inferir que en el ambiente de la fotocopiadora, no se hallan
levaduras debido a que no hay alimentos o al menos, no en gran cantidad.
El agar sabouraud fue puesto en todos los ambientes mencionados en el
procedimiento C, desarrollndose en todos ellos la Alternaria, mientras que
el Rhizopus Nigricans se hall en el laboratorio de microbiologa y en el
bao FIA; y la levadura se hall en CEIA y en el aula vacia de la FIA.
CUESTIONARIO

1. Indique los procesos vitales de los microorganismos.

FUNCIN DE NUTRICIN:
o NUTRICIN AUTTROFA.
Bacterias fotosintticas como las cianobacterias que utilizan el agua
para obtener los electrones y el hidrgeno y producen oxgeno,
tambin son capaces de fijar el nitrgeno atmosfrico.Las bacterias
purpureas tambin realizan la fotosntesis pero los e y H no los
obtienen del agua y no liberan oxgeno.

Las bacterias quimiosintticas utilizan como fuente de energa

reacciones qumicas para formar sus compuestos orgnicos , a partir
de molculas inorgnicas ( quimiolitotrofos) o molculas
orgnicas ( quimioorganotrofos)
Entre estas se encuentran las bacterias del azufre, bacterias del
metano, bacterias del hidrgeno, bacterias del hierro, bacterias
nitrificantes.
 o NUTRICIN HETERTROFA
Ingieren materia orgnica de otros seres vivos como fuente de
carbono y energa.
Bacterias parsitas. Viven a costa de otros seres vivos a los que
perjudican y en algunos casos producen enfermedades.
Bacterias saprofitas. Utilizan la materia orgnica y la degradan. En
este grupo se encuentran las que realizan la putrefaccin y el grupo
que realiza las fermentaciones de inters industrial.
Bacterias simbiticas. Colaboran con otros organismos como las
que viven con las leguminosas y fijan el nitrgeno o las de la flora
bacteriana intestinal que producen vitamina K

FUNCIN DE REPRODUCCIN
Se reproducen asexualmente por biparticin sin mitosis.
Tambin presentan formas de reproduccin sexual (parasexual) No
se forman nuevos individuos pero potencia la variabilidad gentica
debido al intercambio de fragmentos de ADN.

o TRANSFORMACIN
La bacteria receptora capta del medio ADN libre , procedente de otra
clula

o TRANSDUCCIN
Existe un vector, que es un virus bacterifago, que tiene ADN de una
clula husped a la que parasit y al infectar a otra clula, le
transfiere el ADN de la primera.
 o CONJUGACIN.
Se unen dos bacterias mediante unos pilis y pasa ADN de una
bacteria a otra.

FUNCIN DE RELACIN
Las bacterias son capaces de responder a estmulos del medio que
les rodea. Esta respuesta puede ser dinmica y se denomina
tactismos.
A veces la respuesta es esttica como la formacin de endosporas o
esporas de resistencia cuando las condiciones son adversas
 2. Ejemplos de estmulos del medio en el que viven los microorganismos que
modifiquen (algas)

Los Staphylococcus aeurus cuando les hechas Perxido de hidrogeno (H2O2) o agua
oxigenada o como quieras llamarlo estos reaccionan secretando Catalasa una enzima que
degrada el perxido de hidrogeno el cual es toxico para esta bacteria.

La irritabilidad es una caracterstica de todos los seres vivos, tiene que ver con nuestra
capacidad de reaccin ante los estmulos.

Cada ser vivo reacciona de diferente manera ante un mismo estmulo. No todos las
bacterias estn adaptadas al mismo medio y por ende pueden reaccionar de distinta
manera ante un mismo estmulo. Por ejemplo, hay bacterias anaerbicas para las cuales el
oxgeno es txico en cambio hay otras bacterias que son aerbicas y necesitan el oxgeno
al igual que nosotros.

Ante numeroso estmulos ambientales las bacterias responde con:

A) Cambios en su actividad metablica y/o de comportamiento:
* FORMAN ENDOSPORAS, cuya funcin es proteger el ADN bacteriano y el resto del
contenido citoplasmtico, reduciendo la actividad metablica al estado de vida latente.

- Cuando las condiciones sean favorables, germinan y dan lugar a una nueva bacteria (vida
vegetativa).

B) MOVIMIENTOS:
DENOMINADOS TACTISMOS:
* POSITIVOS SI SON DE ACERCAMIENTO
* NEGATIVOS SI SON DE ALEJAMIENTO

Distinguimos;
1. QUIMIOTAXIAS: Por concentraciones de sustancias
2. FOTOTAXIAS: Por la luz.
3. AEROTAXIAS: Por la concentracin de oxigeno.

BIBLIOGRAFA

http://enfermedadestrans.blogspot.com/p/transimison-por-via-aerea.html
http://www.paritarios.cl/especial_enfermedades_respiratorias.htm

http://www.ecured.cu/index.php/Cultivo_de_microorganismos

https://es.scribd.com/doc/202936042/DISTRIBUCION-UNIVERSAL-DE-LOS-
microorganismos