DETERMINACION DE NITRATOS

Mtodo de espectrofotometra ultravioleta

I. OBJETIVO:
Esta normativa tcnica se utiliza para una estimacin rpida de la concentracin de nitratos
en muestras con bajos contenidos de materia orgnica, como aguas naturales no contaminadas
y en agua potable
II. PRINCIPIO:
Los niveles de nitratos y nitritos en aguas naturales son un indicador importante de la calidad
del agua. Ambos se encuentran relacionados con el ciclo del nitrgeno de suelo y plantas
superiores aunque los nitratos son aadidos por medio de fertilizantes que puede ocasionar
que los niveles de estos aumenten. Los nitritos tambin se forman durante la biodegradacin
de nitratos, nitrgeno amoniacal u otros compuestos orgnicos nitrogenados y se utiliza como
indicador de contaminacin fecal en aguas naturales.
Los nitratos no se consideran en s txicos, pero la ingesta de grandes cantidades produce un
efecto diurtico. Por otra parte, los nitritos pueden producir compuestos cancergenos, las
nitrosaminas, por su reaccin con aminas secundarias o terciarias, adems de interaccionar
con los glbulos rojos de la sangre produciendo metahemoglobinemia que impide el
transporte de oxgeno al cuerpo.
Se han desarrollado una gran cantidad de mtodos para la cuantificacin de estos analitos en
aguas y en otro tipo de muestras como alimentos y fluidos biolgicos. Muchos de los mtodos
estn basados en cromatografa inica [1-6], de hecho, la EPA recomienda la determinacin
de nitratos y nitritos por este mtodo [7], aunque existen varios mtodos enfocados a la
cromatografa lquida de alta presin [8-11] o a la electroforesis capilar [12-16].
Varios mtodos analticos estn basados en la reduccin de nitratos a nitritos con deteccin
colorimtrica posterior. Se han utilizado varios agentes reductores como zinc, cadmio o
cadmio cuperizado que se han acoplado como columnas reductoras a configuraciones de flujo
continuo no segmentado para la cuantificacin simultnea de nitratos y nitritos [17-22].
En la actualidad, los laboratorios ambientales de rutina requieren mtodos rpidos, precisos
y econmicos. Estos laboratorios realizan la determinacin de nitritos en aguas de acuerdo a
la Norma Mexicana [23] que se basa en la reaccin de los nitritos con sulfanilamida y 1-
naftiletilendiamina para formar un compuesto azo que se mide espectrofotomtricamente.
III. MATERIALES Y REACTIVOS:
Espectrofotmetro ultravioleta
Balanza analtica
Matraz aforado de 100 mL y 1L.
Pipeta aforada de 10 mL.
Fiolas
Pipetas
Probeta
Vaso precipitado
Marcador de reactivos
Nitrato de potasio KNO3
cido clorhdrico 1M.
Agua destilada fresca
IV. INTERFERENCIAS:
La materia orgnica disuelta, los surfactantes, nitritos, cromo (+6) presentan
interferencias al mtodo.
Los aniones clorito y clorato afectan la medida, aunque no es comn que estn presentes
en aguas naturales.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
a. Pesamos 0,7218 g de KNO3 (s) y diluimos a 1L a una solucin de 100 ppm ,
luego preparamos una solucin 10 ppm (solucin hija) a partir de la solucin
concentrada(solucin madre)

b. Para realizar la curva patrn, se toman 5 muestras, la primera la denominaremos

el blanco, las siguientes de 0.2, 0.4, 1, 2 y 5 ppm respectivamente, luego
mediremos 1, 2, 4, 10 y 25 ml de solucin hija, completando hasta volumen de
50 ml con agua destilada.

Haciendo el clculo obtenemos

0, 2 ppm 50 mL
0, 2 ppm 1 mL
10 ppm
0, 4 ppm 50 mL
0, 4 ppm 2 mL
10 ppm
1, 0 ppm 50 mL
1, 0 ppm 5 mL
10 ppm
2, 0 ppm 50 mL
2, 0 ppm 10 mL
10 ppm
 5, 0 ppm 50 mL
5, 0 ppm 25 mL
10 ppm

c. Luego de terminar de preparar las muestras medimos las absorbancias en el

espectrofotmetro, a 220 nm y para 275nm, para esto llenamos la muestra en una
celda de cuarzo oscuro cada una de las muestras, teniendo presente que este bien
colocada.

d. Tambin medimos la absorbancia para la muestra de 50 ml agua potable.

VI. CALCULOS Y RESULTADOS

Curva de calibracin

En 5 fiolas preparamos a partir de la solucin hija muestras de agua de

concentracin de N-NO3 conocidas.

ppm ml de Llevar a 50 ml
solucin hija ml con Agua HCl
N NO3 de 10 ppm destilada 0,1M
B 0 50 1
0,2 1 49 1
0,4 2 48 1
1,0 4 45 1
2,0 10 40 1
5 25 25 1

Medir la absorbancia de los estndares a 220 y 275 nm contra un blanco de agua

destilada
Corregimos el valor de la absorbancia con:

Abs nitratos Abs220 Abs275

Debemos considerar que si el valor corregido es mayor al 10 % de la lectura realizada a

220 nm, este mtodo no debe ser aplicado.
La concentracin de nitratos se obtiene con la curva de calibracin y el valor de
absorbancia corregido.
Los resultados se expresan como mg/L de nitrato como nitrgeno (mg NO-3-N/L).

Datos para la curva de calibracin

ml de Llevar a
ppm solucin 50 ml con ml Abs
hija de 10 Agua HCl Abs Abs 275 Corregida
N NO3 ppm destilada 0,1M 220 nm nm nm
0 0 50 1 0 0 0
0,2 1 49 1 0,047 -0,008 0 0,047
0,4 2 48 1 0,097 -0,01 0 0,097
1,0 4 45 1 0,260 0,004 0,256
2,0 10 40 1 0,525 0,019 0,506
5,0 25 25 1 1,203 0,015 1,188

GRFICO DE LA ABSORBANCIA CORREGIDA VS CONCENTRACIN DE

NITRATO.
5

4.5

3.5

N-NO3,ppm 2.5
2

1.5

1
N-NO3 = 4.1972ABS - 0.0315
0.5 R = 0.9992
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
ABS, nm

Haciendo la regresin respectiva, tenemos lo siguiente:

N NO3 4.1972ABS 0.0315R 0.9992

Calculo de concentracin de nitratos en una muestra de agua potable
N NO3 4,1972 ABS 0,0315
4,1972 0,146 0,0315
0,5812 ppm

ABS 220 ABS 275 ABS corregida ppm

Muestra
nm nm nm N-NO3-
 Agua potable 0,146 0,041 0,105 0,5812
cruda

I. CUESTIONARIO

Cul es la concentracin mxima permisible de NO3 cmo NO3 y como

N NO3 , segn la normativa nacional.

Segn la normativa nacional en el agua para consumo humano debe tener 50 ppm
NO3 y 11,29 ppm de N NO3
14eq N NO3
50 ppm NO3 11,29 ppm N NO3
62 eq NO3

En que se fundamenta la OMS para establecer el mximo valor de NO3- en

fuentes de agua para consumo humano?

Nitrato (lactantes alimentados con bibern): en estudios epidemiolgicos no se

describi metahemoglobinemia en lactantes en zonas en las que el agua de
consumo contena siempre menor de 50 mg/l de nitrato.

Nitrito (lactantes alimentados con bibern): el nitrito es 10 veces ms potente que

el nitrato (en molaridad) con respecto a la formacin de metahemoglobina
Nitrito (exposicin prolongada): basado en la asignacin al agua de consumo del
10% de la IDA propuesta por el JECFA de 0,06 mg/kg de peso corporal al da,
correspondiente a las alteraciones morfolgicas en las glndulas suprarrenales, el
corazn y los pulmones inducidas por el nitrito en estudios con animales de
laboratorio.

II. BIBLIOGRAFIA

OMS, 2016. Obtenido de:

http://www.who.int/water_sanitation_health/dwq/gdwq3_es_fulll_lowsres.pdf
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0583-
76932003000100014