TEMA 5.

- Inhibidores enzimticos

Inhibidores de la Ruta del cido Flico. Inhibidores de la anhidrasa carbnica.

Inhibidores de la biosntesis de pirimidinas y purinas.
Inhibidores de polimerasas de ADN. Inhibidores de enzimas de transcripcin.
Inhibidores de las MAO. Inhibidores de la COMT.

Los inhibidores enzimticos son molculas que se unen a enzimas y disminuyen

su actividad. Las enzimas tienen como hemos visto una importancia fundamental en el
funcionamiento celular. Prcticamente todas las funciones de la clula requieren directa
o indirectamente la presencia de enzimas para que ocurran a una velocidad adecuada las
reacciones qumicas que en definitiva son las responsables de esas funciones. La
actividad enzimtica no siempre es biolgicamente til. Una actividad incontrolada, por
ejemplo de las proteasas de la coagulacin, tendra fatales consecuencias. Por este
motivo, la naturaleza ha desarrollado un gran nmero de inhibidores enzimticos que
frenan la actividad enzimtica o llegan a anularla por completo. Estos inhibidores
enzimticos naturales estn implicados en la regulacin del metabolismo de la clula.
Por ejemplo, las enzimas en una ruta metablica pueden ser inhibidas por los productos
resultantes de sus respectivas rutas (retroalimentacin negativa). La inhibicin detiene
la ruta bioqumica cuando los productos comienzan a acumularse y es una manera
importante de mantener la homeostasis1 en una clula. Otros inhibidores enzimticos
celulares son protenas que se unen especficamente e inhiben una diana enzimtica.
Esto puede ayudar a controlar enzimas que pueden ser dainas para la clula, como las
proteasas o nucleasas.

El hecho de que las enzimas catalicen prcticamente todas las reacciones

biolgicas relevantes otorga a los inhibidores naturales o sintticos un destacado valor
teraputico. De acuerdo con estos principios, es razonable esperar que si se inhibe ms
all de ciertos lmites la actividad de alguna o algunas enzimas, las clulas no puedan
sobrevivir. De acuerdo con esto, los inhibidores de enzimas pueden usarse como
agentes farmacodinmicos o quimioterpicos.

El uso de inhibidores enzimticos como agentes quimioterpicos se basa en el

principio de inhibicin de ciertas enzimas diferenciables que no se encuentren en el
organismo afectado pero s en las clulas de los agente extraos. Ejemplo de estos
inhibidores son los agentes antimicrobianos. Los agentes antimicrobianos sintticos son
frmacos capaces de matar bacterias pero que no se han obtenido o inspirados a partir
de productos naturales (no as los antibiticos). Algunos de estos agentes son
extremadamente efectivos para el tratamiento de infecciones y son ampliamente usados.
La gran mayora de los agentes antimicrobianos sintticos presentan una actividad
frente a enzimas claves en la biosntesis de cidos nucleicos. Dado que interrumpen la
sntesis de los cidos nucleicos y no producen modificacin en la secuencias de los

1
Regulacin el ambiente interno de la clula para mantener una condicin estable y constante necesaria
para la supervivencia celular.
mismos no son considerados genotxicos2 y son relativamente seguros de usar como
medicamentos.

1. Inhibidores de la Ruta del cido Flico

El cido flico pertenece al grupo de las vitaminas B y se halla ampliamente

distribuido en la naturaleza. Es necesario para la biosntesis de protenas estructurales,
hemoglobina as como es un cofactor esencial para la sntesis de purinas y en ltima
instancia de ADN. Sin embargo es su forma reducida, el cido tetrahidroflico la que
presenta la actividad, entre otros procesos, como transportador de grupos metilo en la
biosntesis de purinas y pirimidinas.

O CO2 H O CO2 H

Dieta OH N
H
CO2 H OH
H
N
H
CO2 H
N N
N N N N
H H
H2 N N N dihidrofolato H2 N N N
reductasa H cido tetrahidroflico
cido flico

Biosntesis del cido tetrahidroflico en clula de mamfero

En los mamferos, el cido tetrahidroflico proviene de la reduccin del cido flico

obtenido a partir de la dieta. Por el contrario, en las bacterias se sintetiza a partir de la
dihidropterina y del cido glutmico. Estas diferencias bioqumicas entre las clulas
bacterianas y las humanas son fundamentales para explicar la selectividad de los
inhibidores de la dihidropteroato sintetasa como frmacos antibacterianos. Por otra parte
dada la participacin del cido tetrahidroflico como cofactor en la biosntesis de bases
nitrogenadas en los mamferos, los inhibidores de la dihidrofolato reductasa pueden
considerarse inhibidores de la biosntesis del ADN con utilidad como antineoplsicos.
H 2N

OH O O CO 2H
CO2H OH
N P P OH (PABA) N
N O O N N
OH OH H
H 2N N N dihidropteorato
sintetasa H 2N N N cido dihidropteroico
H H

cido glutmico
dihihidroflato sintetasa
O CO 2H O CO 2H

OH N CO 2H OH N CO 2H
H H H
N N
N N N N
H H
H 2N N N dihidrof olato H 2N N N
H reductasa H cido dihidroflico
cido tetrahidrof lico

Biosntesis del cido tetrahidroflico en clula bacteriana

2
Txico (daino) para el ADN. Las sustancias genotxicas pueden unirse directamente al ADN o actuar
indirectamente mediante la afectacin de las enzimas involucradas en la replicacin del ADN y causando,
en consecuencia, mutaciones que pueden o no desembocar en un cncer. Las sustancias genotxicas no
son necesariamente cancergenas, pero la mayor parte de los cancergenos son genotxicos.
-

2
 Las sulfonamidas fueron descubiertas a principios de los aos 1930 a partir de
estudios con ciertos colorantes azoicos usados en la tincin de bacterias. Se pens que el
prontosil rubrum (sulfacrisoidina) presentaba selectividad frente a ciertas bacterias
patgenas y no en clulas humanas. Pero pronto se descubri que el prontosil rubrum
presentaba actividad in vivo contra infecciones por estreptococos en ratones pero no en
vitro. Posteriores estudios revelaron que la sustancia activa era la p-
aminobencenosulfonamida (sulfanilamida), el metabolito obtenido por reduccin en el
hgado del colorante.

SO2 NH2

N SO2 NH2
Metabolismo
N

H 2N NH2 H2N
sulf anilamida
prontosil

El descubrimiento de la actividad antibacteriana de las sulfonamidas marc el

inicio de los agentes quimioterpicos. stos actan como bacterostticos inhibiendo la
enzima dihidropteroato sintetasa compitiendo por el centro activo con el PABA, el
sustrato endgeno de la enzima en la biosntesis del cido dihidroflico. Se dice que la
sulfanilamida es un antimetabolito3 ya que reacciona en el centro activo de la enzima
pero el producto es no funcional. En estas circunstancias las bacterias no pueden
replicarse y finalmente mueren. Sin embargo, las clulas humanas que no poseen la
capacidad de generar cido flico (carecen de la enzima dihidropteroato sintetasa)
deben tomarlo de la dieta por lo que el efecto de las sulfanamidas no es letal.

H 2N

CO2 H
(PABA) SO2 NH2
OH O O OH
N P P OH N
N O O N N
OH OH cido
dihidropteroato H tetrahidroflico
H 2N N N sintetasa H 2N N N
H H
SO2 NH 2

H 2N

Una vez establecido el potencial quimioteraputico de este nuevo tipo de

compuestos, se iniciaron investigaciones encaminadas al establecimiento de sus
relaciones estructura-actividad y a la optimizacin de su espectro de accin y de sus
propiedades farmacocinticas. De la gran cantidad de anlogos estudiados se dedujeron
unas relaciones estructura-actividad relativamente simples.

3
Antimetabolito es un compuesto exgeno que se incorpora en una secuencia biosinttica para dar lugar a
un anlogo no funcional del producto final. Si la secuencia biosinttica as alterada conduce a la muerte
celular se dice que el antimetabolito da lugar a una sntesis letal.
-

3
 anillo bencnico
disustituido
grupo atrayente
O R electrones
amina libre H2 N S NH
O hidrgeno cido

En general, deben tenerse en cuenta las siguientes observaciones:

a) El anillo bencnico disustituido en las posiciones 1 y 4 resulta esencial para la
actividad antibacteriana. Su reemplazo por otros sistemas aromticos, as como la
presencia de sustituyentes en otras posiciones diferentes conducen a anlogos
prcticamente desprovistos de actividad.
b) El grupo animo de la posicin 4 (N4) debe estar libre o sustituido por grupos
fcilmente metabolizables.
c) La monosustitucin del tomo de nitrgeno del radical sulfonamido (N1) con
radicales de tipo heteroaromtico conduce a compuestos ms activos. Segn la
naturaleza de la sustitucin quedarn afectadas las propiedades farmacocinticas y
fisicoqumicas de la sulfonamida, lo que determinar la utilidad teraputica de la misma.
En cualquier caso, resulta esencial el mantenimiento del carcter cido por las
repercusiones que ello implica con relacin a su mecanismo de accin.

Aunque la mayor parte de las sulfonamidas fueron desplazadas paulatinamente

tras el descubrimiento de los antibiticos, todava ocupan un papel teraputico relevante
en el tratamiento de ciertas infecciones sistmicas y, especialmente, en infecciones
intestinales y urinarias.

Las dos propiedades fisicoqumicas ms importantes con relacin a la eficacia y

aplicaciones teraputicas de las sulfonamidas son el grado de ionizacin (relacionado
con el pKa) y la lipofilia. Ambos parmetros dependen de la naturaleza del sustituyente
aromtico unido al tomo de nitrgeno del grupo sulfonamida. Grupos aromticos
atrayentes de electrones sobre N1 conducen a un aumento en la acidez de la
sulfonamida. Desde un punto de vista galnico, este hecho tiene importancia por
permitir la formacin de sales solubles en agua, especialmente tiles en la formulacin
de inyectables. La poca solubilidad de las primeras sulfonamidas producan efectos
secundarios como la cristalizacin en la orina causando daos en el rin. La
sustituicin de anillos aromticos en N1 reducen el pKa y por tanto la solubilidad en
agua. El pKa del sulfisoxazol, uno de las sulfanamidas ms populares hoy en da, es de
5,0 cercano al valor 6.5 del PABA.
R pKa

H sulfanilamida 10.2
O R N
N
H 2N S NH sulfapiridina 8.4 O O
O
H 2N S NH
O N O
S sulfatiazol 7,1
H 2N C OH sulfisoxazol
N
pKa = 6,5
sulf adiazina 6,5
N
NH 2
sulf acarbamida 5.4
O

4
Por otra parte, la solubilidad en lpidos constituye otro parmetro a considerar en la
actividad teraputica de estos compuestos. En general, las sulfonamidas de elevada
lipofilia muestran una vida media plasmtica alta como consecuencia de su elevada
reabsorcin tubular. Por este motivo estn especialmente indicadas en el tratamiento de
infecciones sistmicas. La mayor parte de este grupo de sulfonamidas se caracteriza por
presentar en N1 un sistema heterocclico aromtico de seis miembros con uno o varios
tomos de nitrgeno, tales como piridina, pirimidina, pirazina o s-triazina.

MeO OMe MeO

N N
HN N HN N HN
O O O
S N S N S N
O O O

sulfametoxina
sulfasimazina sulf aleno
H2N H 2N H 2N

Cuando el sistema heterocclico en N1 es de naturaleza polar, las sulfonamidas

resultantes presentan una velocidad de eliminacin renal elevada por lo que estn
especialmente indicadas en el tratamiento de infecciones del tracto urinario. En general,
los sistemas heterocclicos de cinco miembros con dos o ms heterotomos (oxazol,
tiazol, pirazol, tiadiazol, etc.) suelen conferir este comportamiento farmacocintico.

O O N S
HN HN HN
O O O
S N S N N
O O S
O

sulfamoxol
sulf ametoxazol sulfametizol
H 2N H 2N H 2N

La mayora de los procesos metablicos que tienen lugar sobre las sulfonamidas
conducen a su inactivacin. Sin embargo, ciertas sulfonamidas se han diseado como
profrmacos que requieren un proceso metablico previo para su activacin. Este el
caso de las sulfonamidas de accin intestinal. Estas sulfonamidas se caracterizan por su
escasa o nula absorcin oral como consecuencia de su elevado grado de ionizacin
debido al sustituyente en posicin N4. Sin embargo, en el tramo final del intestino
pueden experimentar una activacin metablica por accin de los propios
microorganismos de la flora intestinal. As, el ftalilsulfatiazol y el succinilsulfatiazol se
activan por hidrlisis del grupo carboxamido, mientras que la sulfasalazina requiere la
reduccin metablica del grupo azo. En este caso, adems de la sulfonamida se libera el
cido aminosalicilico que acta como antiinflamatorio. La sulfasalazina puede
considerarse, adems de un profrmaco, un hbrido reversible metablicamente.

5
 S S
HN HN
O O
S N S N
O O

O ftalilsulf atiazol O
NH NH
succinilsulf atiazol
OH OH

O O
CO 2H
CO 2H
H 2N OH
O N OH enzima O +
HN S N
HN S NH2
O
N O
sulf asalazina
N

Puesto que en el tramo final del intestino, donde tiene lugar la bioactivacin de estos
compuestos, la absorcin es escasa, este tipo de sulfonamidas son adecuadas para el
tratamiento de infecciones bacterianas a ese nivel.

La inhibicin de la dihidrofolato reductasa (DHFR) da lugar igualmente a la

inhibicin de la biosntesis del cido tetrahidroflico. Sin embargo, este proceso es
comn en las bacterias y en las clulas eucariotas, por lo que el potencial teraputico de
los compuestos capaces de inhibir esta etapa depender de su selectividad frente a
ambos tipos de clulas.
La inhibicin de esta etapa en la clula eucariota ha permitido la obtencin de frmacos
con utilidad como antineoplsicos. La inhibicin de la dihidrofolato reductasa implica
una reduccin de la biosntesis de purinas y pirimidinas en las clulas humanas cuyo
resultado es la inhibicin de la duplicacin del DNA. Aunque este proceso no afecta
exclusivamente a las clulas cancerosas, es ms importante en estas dadas su elevada
velocidad de duplicacin.
Desde un punto de vista estructural, los antineoplsicos inhibidores de la dihidrofolato
reductasa son anlogos del cido flico. Se denominan anlogos de molcula
completa por su similitud estructural con este y tambin para diferenciarlos de otro
tipo de inhibidores de la misma enzima pero de estructura ms sencilla (anlogos de
molcula corta). Entre los anlogos del cido flico de molcula completa se
encuentran la aminopterina o el metotrexato.
O CO 2H

NH 2 N CO 2H
H
N
N N
R R = H; aminopterina
H 2N N N R = CH 3 ; metoxitrexato

Estos compuestos se enlazan al centro activo de la dihidrofolato reductasa con una

afinidad estimada entre 3.000 y 10.000 veces superior a la del sustrato natural, el cido
dihidroflico. Esta mayor afinidad se atribuye a la mayor basicidad del sistema de 2,4-
diaminopteridina, unas 1.000 veces ms bsico (3 unidades de pK,) que la 2-amino-4-
hidroxipteridina presente en el cido dihidroflico. En consecuencia, la porcin
aromtica est extensamente protonada a pH fisiolgico, lo que permite el
establecimiento de fuertes interacciones de enlaces de hidrgeno con el centro activo. A

6
partir de estas molculas se desarrollaron los anlogos de cadena corta. Presentan en la
estructura la unidad 2,4-diaminopirimidina con sustituyente tipo arilo.
Cl Cl
NH 2 NH 2 NH 2
OMe
N N N N

N H 2N N H 2N N OMe
OMe
pirimetamina cicloguanilo trimetoprim
ntibacteriano) (antibacteriano) (antibacteriano)

OMe
NH 2 OMe
OMe
NH 2
N
N N OMe
N N H
OMe H 2N N
piritrexeno trimetrexato
(antineoplscio) (antineoplscio)

Es interesante resaltar el hecho de que no todos los compuestos presentan la misma

selectividad frente a la enzima humana y la bacteriana, lo que est relacionado con
diferencias entre las dihidrofolato reductasas de diferentes organismos. As, mientras
que el piritrexeno y el trimetrexato se emplean como antineoplsicos, el trimetoprim, la
pirimetamina y el cicloguanilo son selectivos frente a la dihidrofolato reductasa
bacteriana por lo que se emplean corno antibacterianos.

En la terapia antibacteriana pueden emplearse combinaciones de frmacos que

bloqueen la biosntesis del cido tetrahidroflico a dos niveles diferentes: la
combinacin de una sulfonamida (sulfametoxazol: inhibe la incorporacin del GABA)
con una diaminopirimidina (trimetoprim: bloqueo de la dihidrofolato reductasa) permite
conseguir una accin antibacteriana a dosis mucho ms bajas para cada frmaco que las
requeridas para alcanzar un efecto similar con cada uno de los frmacos por separado.
Esta estrategia teraputica constituye el denominado bloqueo secuencial.

N O NH2
HN OMe
O N
S
O
H2 N N OMe
sulfametoxazol trimetoprim OMe

H2 N

H2 N dihidropterato dihidrofolato
sintetasa reductasa
cido dihidrof lico cido tetrahidroflico
CO2 H
(PABA)

La combinacin de los dos frmacos provoca una accin sinrgica que permite con un
mismo efecto teraputico a menor dosis farmacolgica.

2. Inhibidores de la anhidrasa carbnica

Las sulfonamidas, adems de representar el inicio de la quimioterapia

antibacteriana, han resultado importantes en otras reas de la investigacin
farmacutica. Desde un punto de vista farmacolgico, algunas de las sulfonamidas
antibacterianas presentan efectos secundarios que pueden potenciarse a travs de la
-

7
farmacomodulacin, lo que las convierte en cabezas de serie tiles para el desarrollo de
otros grupos de frmacos. As, se observ que las sulfonamidas producen acidosis
metablica4 y alcalinizacin de la orina, determinndose que este efecto se debe a la
inhibicin de la enzima anhidrasa carbnica lo que dio lugar a un grupo de diurticos5
que actan de este modo.

La anhidrasa carbnica es una enzima que cataliza el paso de anhdrido

carbnico a cido carbnico. La funcin primaria de la enzima en animales es
interconvertir el dixido de carbono y el bicarbonato para mantener el equilibrio cido-
base en la sangre y otros tejidos, y ayudar al transporte de dixido de carbono fuera de
los tejidos. La anhidrasa carbnica que se localiza en las paredes de las clulas del
tbulo proximal del rin tiene como misin la reabsorcin de bicarbonato sdico junto
con el equivalente osmtico de agua correspondiente. La observacin de los efectos
diurticos de ciertas sulfonamidas se asoci a su capacidad para inhibir
competitivamente la enzima anhidrasa carbnica.

Sulfanamidas Exceso puede causar hipotensin.

Se usa para tratar hipertensin,
Diurtico Eliminacin H2O glaucoma, enfermedad de la
montaa.
Antidiurtico Reabsorcin H2O

Vasopresina (hormona, pituitaria) Problemas hormonales producen

deshidratacin, sed extrema y alta
produccin de orina.
Accin de la anhidrasa carbnica

En 1937, se propuso que la acidificacin normal de la orina fue causado por la

secrecin de iones de hidrgeno por las clulas tubulares del rin. Estos iones se
forman por la accin de la enzima anhidrasa carbnica, que cataliza la formacin de
cido carbnico (H2CO3) a partir de dixido de carbono y agua. Tambin se observ
que la sulfanilamidas producan al alcalinizacin de la orina de perros alcalina debido a

4
La acidosis metablica ocurre cuando el cuerpo produce demasiado cido o cuando los riones no estn
eliminando suficiente cido del cuerpo.
5
Se denomina diurtico a toda sustancia que al ser ingerida provoca una eliminacin de agua y
electrolitos en el organismo, a travs de la orina o del excremento en forma de diarrea. Fuente: Wikipedia.
-

8
la inhibicin de la anhidrasa carbnica. Esta inhibicin de la anhidrasa carbnica como
resultado en un menor intercambio de iones de hidrgeno para los iones de sodio en el
tbulo renal. Los iones de sodio, junto con iones de bicarbonato, y las molculas de
agua asociadas son excretadas, y no observndose el efecto diurtico. Las grandes dosis
necesarias y los efectos secundarios de sulfanilamidas impulsaron la bsqueda de la
anhidrasa carbnica ms eficaz inhibidores como los diurticos. Pronto se descubri que
la porcin de una molcula de sulfonamida diurticos activa no deba ser
monosustituida o disustituida. Se razon que una sulfonamida ms cida vinculara ms
estrechamente a la enzima anhidrasa carbnica. Sntesis de sulfonamidas ms cidas
produjo ms un efecto 2500 veces ms activo que las sulfanilamidas. La acetazolamida
se introdujo en 1953 como un medicamento diurtico de va oral. Antes de ese
momento, los mercuriales orgnicos, que comnmente requieren de una inyeccin
intramuscular, eran los principales diurticos disponibles.
Inhibidores de la anhidrasa carbnica inducen la diuresis mediante la inhibicin
de la formacin de cido carbnico dentro de las clulas del tbulo distal y proximal por
limitar el nmero de iones de hidrgeno disponible para promover la reabsorcin de
sodio. Para observar una respuesta diurtica, ms del 99 % de la anhidrasa carbnica
debe ser inhibida.
La accin inhibidora se refuerza en las sulfonamidas primarias dada su analoga
estructural con el cido carbnico, el sustrato natural de la enzima. Ello permite postular
una interaccin similar con el centro activo de la enzima para ambos tipos de
compuestos. Por otra parte, es fundamental que la sulfonamida primaria sea
relativamente cida (similar al cido carbnico). Ello se consigue con la introduccin de
sistemas aromticos atrayentes de electrones, como el de l,3,4-tiadiazol, presente en
diversas sulfonamidas diurticas como la acetazolamida, el primer frmaco de este
grupo.
Cl
O H O
N O Cl
S NH 2 N S NH 2
S NH 2
S O S O
N N S O N
N N O H 2NO2 S SO2 NH 2
O O
acetazolamida metazolamida etoxzolamida diclorfenamida

La anhidrasa carbnica tambin se encuentra en otros tejidos en los que su

inhibicin puede dar lugar a efectos teraputicos tiles. As dado que participa en la
formacin del humor acuoso, los inhibidores de la anhidrasa carbnica darn lugar a una
disminucin en la recaptacin de bicarbonato sdico y de agua desde la lgrima hacia el
humor acuoso, lo que encuentra utilidad en el tratamiento del glaucoma ya que reduce la
presin intraocular.

9
 clulas tubulares

H 2O H 2O
+ +
CO2 CO2

inhibicin anhidrasa
carbnica

H 2CO3

H+

NaHCO 3 HCO 3- + H+ HCO 3-

+
NaHCO 3 Na+

HUMOR
ACUOSO LGRIMA

3. Inhibidores del metabolismo del cido rico

El cido rico es el producto metablico de las purinas resultantes de la

oxidacin de las xantinas por la enzima xantina oxidasa.

NH 2 OH
H adenina H
N N desaminasa N
N

N N N N
adenina hipoxantina

xantina
oxidasa
O
H guanina O O
N desaminasa H xantina H
HN N
HN oxidasa N
HN
H 2N N N OH
HO N N N
HO N
guanina
xantina cido rico

Los niveles elevados de cido rico en plasma pueden dar lugar a su cristalizacin en
las articulaciones, lo que origina los trastornos inflamatorios caractersticos de la gota.
Los inhibidores de la xantina oxidasa suelen emplearse para el tratamiento de esta
enfermedad. El alopurinol es un inhibidor de la xantina oxidasa diseado inicialmente
como antimetabolito de las bases pricas con potencial utilidad como antineoplsico.
Dado que el alopurinol es un inhibidor reversible y selectivo de la enzima xantina
oxidasa, es capaz de disminuir la concentracin de cido rico en plasma, lo que
justifica su empleo como antigotoso. El alopurinol es tambin sustrato de la xantina
oxidasa, que cataliza su oxidacin a aloxantina (oxipurinol).

OH OH
xantina
N oxidasa N
N N
N N N
H HO N
H
alopurinol aloxantina
(oxipurinol)

10
La inhibicin de la xantina oxidasa da lugar a un aumento de los niveles plasmticos de
hipoxantina y xantina. No obstante dada su elevada solubilidad en agua, se eliminan
rpidamente en la orina.

5. Inhibidores de la ADN-girasa

En este grupo se encuadran las quinolonas y las fluoroquinolonas, dos familias

estructuralmente relacionadas que se emplean teraputicamente como antibacterianos,
especialmente en infecciones urinarias y en casos de resistencias frente a otros
antibacterianos clsicos, como las penicilinas.
El modo de accin de las quinolonas est relacionado con su capacidad para
inhibir la ADN-girasa y la topoisomerasa IV, enzimas que catalizan el llamado
superenrollado del ADN cromosmico necesario para el establecimiento de la estructura
terciaria precisa para la compactacin del contenido gentico, la transcripcin,
replicacin y reparacin del mismo. Como consecuencia de esta inhibicin, la
replicacin y la transcripcin del ADN bacteriano queda interrumpida, conduciendo a la
muerte celular.
ADN

Divisin Celular
superenrollamiento

ADN-girasa

ARN mensajero

O
CO 2H

N N

cido nalidxico
Las clulas humanas utilizan una enzima anloga, la topoisomerasa I, que sin embargo
no es inhibida por las quinolonas de tal forma que no provoca la muerte de las clulas
hospedadoras.

Uno de los primeros antibacterianos de esta familia fue el cido nalidxico, seguido,
poco despus, por el cido oxonlico. Estas quinolonas llamadas de primera generacin
se absorben bien por va oral y se unen eficientemente a las protenas del suero
sanguneo. Esto permite un tiempo de vida largo pero las hace til en zonas libres de

11
protenas como el tracto urinario. Presentan baja potencia y altas dosis producen
molestias gastrointestinales, salpullidos, y alteraciones visuales.
Aunque se han sintetizado gran cantidad de anlogos del cido nalidxico, hasta que se
introdujo un tomo de flor en posicin 6 y un resto de piperazina en posicin 7 no se
obtuvieron compuestos teraputicamente ms tiles, las fluoroquinolonas (quinolonas
de segunda generacin). La ciprofloxazina es, probablemente, el antibacteriano de ms
amplio espectro de que se dispone en la actualidad, con la ventaja de que la aparicin de
resistencias es relativamente lenta en este caso.

O
O O
F CO 2H
F CO 2H F CO 2H

N N
N N N N
HN O
HN HN

ciprofloxacina enozacina gatifloxacina

La segunda generacin de quinolonas actualmente tiene una mayor aplicacin que la

primera. Sobretodo ciprofloxazina que es usada frente a infecciones respiratorias,
meningitis, infecciones de odo crnicas, septicemia, enfermedades de transmisin
sexual.
La toxicidad asociada a la quinolonas est relacionada con su efecto proconvulsivo,
especialmente en epilepsias aunque esto se da sobretodo en la primera generacin. Otros
problemas del SNC son alucinaciones, insomnio, alteraciones visuales. Algunos
pacientes experimentan procesos de dolor abdominal, anorexia, vmitos, diarrea. La
segunda generacin de quinolonas tiene en general una mayor tolerancia.

6. Inhibidores de la biosntesis de pirimidinas y purinas

La biosntesis de las pirimidinas y las purinas como hemos visto est

ntimamente relacionada con la formacin de los cidos nucleicos.

Debido al papel esencial que desempean los cidos nucleicos en los procesos de
divisin celular, el diseo de inhibidores de los mismos es un tema de gran inters en el
diseo de frmacos. El recurso ms comn es el diseo de antimetabolitos, compuestos
que previenen la biosntesis celular normal de metabolitos. La estructura de estas
molculas presenta una alta similitud con los metabolitos naturales por lo que los
convierte en inhibidores competitivos.
La unidad estructural de los cidos nucleicos son los nucletidos, constituidos
por la unin de una base nitrogenada con un azcar (ribosa o desoxirribosa) fosforilado
en la posicin 5'.
-

12
 Nucletidos

Base
Base
N nitrogenada
O
O O N nitrogenada
P O
HO O P
OH HO O
OH
OH OH
OH
ribosa (ARN) desoxirribosa (ADN)

Los nucletidos se enlazan entre s por formacin de un ster fosfrico entre el grupo
fosfato de la posicin 5' del resto de azcar y el grupo hidroxilo de la posicin 3' del
azcar de otro nucletido. Esta estructura de polinucletido constituye el esqueleto de
los cidos nucleicos. En el ADN, el apareamiento de bases nitrogenadas mediante la
formacin de enlaces de hidrgeno resulta esencial para la formacin de la estructura
secundaria.
Desde un punto de vista estructural, los antimetabolitos de los cidos nucleicos
pueden ser tanto anlogos de las bases nitrogenadas como anlogos de los nuclesidos.
En ambos casos, se llevan a cabo modificaciones moleculares que pueden conducir a
compuestos capaces de alterar el funcionamiento de los cidos nucleicos o de bloquear
determinados procesos esenciales para su duplicacin lo que conduce a disfunciones
celulares irreversibles.
Aunque el perfil farmacolgico de estos antimetabolitos suele ser complejo, la mayora
de ellos se emplean teraputicamente como antineoplsicos o como antivricos.

Los antimetabolitos se obtienen mediante la introduccin de sustituyentes en el

anillo por grupos bioissteros o similares. En la mayora de los casos, las bases libres no
son activas y requieren su conversin in vivo a nuclesidos o nucletidos. Sin embargo,
la administracin directa de estos ltimos no es posible debido a su incapacidad para
penetrar en la clula. El posible mecanismo de accin es diverso y puede involucrar:

1. inhibicin de quinasas,6
2. inhibicin de enzimas relacionas con la biosntesis de pirimidinas y purinas,
3. incorporacin de los nucleticos modificados en el ARN o ADN con la
consiguiente malformacin,
4. inhibicin de la ADN polimerasa.

5-Fluorouracilo (5-FU): Procede de la sustitucin bioisostrea de un tomo de

hidrgeno por uno de flor en el uracilo. El desarrollo de este compuesto se bas en la
observacin de que algunos tumores usaban preferentemente uracilo en la biosntesis de
pirimidinas. El 5-fluorouracilo, tras su conversin en el organismo en el cido 5-
fluorodesoxiuridlico, es un inhibidor de la enzima timidilato sintetasa, responsable de
la biosntesis del cido timidlico a partir de la 2-desoxiuridina-5-fosfato.

6
Enzimas que transfieren grupos fosfatos desde ATP a un sustrato especfico o diana como el paso de
nuclesido a nucletidos.
-

13
 O O
HN HN
O
O O N O N
NH Timidilato sintetasa O
HO P O O HO P O O
duplicacin
N
H
O OH OH ADN
OH OH
uracilo
dUMP O
F
HN
O
O
O O N
F NH
NH HO P O O
OH N O
N O H
H OH
5-etiniluracilo
5-FU 5-FdUMP

El cido 5-fluorodesoxiuridlico presenta una afinidad por la timidilato sintetasa varios

miles de veces superior a la del sustrato natural. Por otro lado, la presencia del tomo de
flor en la posicin 5 imposibilita la introduccin de un grupo metilo en esta posicin
debido a la alta energa del enlace C-F. Puesto que el cido timidlico es uno de los
componentes esenciales en la biosntesis del ADN, el 5-fluorouracilo da lugar a la
inhibicin de la duplicacin celular. Este compuesto se utiliza teraputicamente como
anticanceroso, especialmente en el control de los cnceres de mama, colon y recto.
El tomo de flor se ha sustituido por un grupo alquino en el antimetabolito 5-
etiniluracilo con un aumento de 2 a 4 veces el efecto de inhibicin.

5-Fluorocitosina: Inicialmente se dise como antileucmico, aunque ha encontrado

mayor aplicacin como antifngico, si bien de forma limitada. Desde un punto de vista
metablico es interesante su conversin a 5-fluorouracilo por parte la citosina
desaminasa, una enzima propia de ciertos hongos que no se encuentra en las clulas
eucariotas, lo que confiere a este compuesto una elevada selectividad frente al hongo.
NH 2 O
F citosina desaminasa F
N NH

N O N O
H H
5-fluorcitosina 5-FU

6-Mercaptopurina y 6-tioguanina: Son antimetabolitos de las bases pricas, uno de los

componentes esenciales del ADN.

14
 S

HN N
6-MP
N N
H

H 2N
O O
H O
HO P O Glutamina HO P O NH 2 glicina
O O HO P O HN O
OH O
OP2 O6H 3 OH
H OH
OH OH OH OH H
OH OH
5-fosforibosil 5-fosforibosil
pirofosf ato amina
O H O H

HN HN
5,10-metenil
O Glutamina O -H 2O
tetrahidrof olato
HO P O HN O HO P O HN NH
O O
OH OH
H H
OH OH OH OH
fomilglicinariblonucleotido

CO2 H CONH2
N N N
O O O
N NH2 CO2 NH2 cido NH2
HO P O O HO P O N asprtico HO P O N
O O
OH OH OH
H H H
OH OH OH OH OH OH
O
CONH2 NH
N N
10-formil O
tetrahidrof olato O -H 2O N
N NH HO P O N
HO P O O O
OH H OH
H O H
OH OH OH OH

La 6-mercaptopurina (6-MP) es un anlogo de la hipoxantina, uno de los intermedios

de la biosntesis de bases pricas. Se convierte in vivo al correspondiente
ribonucletido, 6-tioinosinato por la enzima hipoxantina-guanina fosforibosiltransferasa
(HGFRT). Este ribonucletido es un potente inhibidor de la conversin de 5-
fosforibosilpirofosfato en 5-fosforibosilamina dentro de la biosntesis de purinas.
Tambin el 6-tioinosinato inhibe la conversin del cido inosnico en cido adenlico as
como la oxidacin a cido xantlico.

15
 S
NH
N S
O
N NH
HO P O N HGFRT N
O
OH H N
N
OH OH H
6-tioisoniato

O
O O
NH
N NH NH
O N N
N O O O NH 2
HO P O N N N
O N
oxigenasa HO P O O H glutamina HO P O O
N
OH H OH H OH
OH OH H
OH OH OH OH
cido inosnico
cido xantlico cido guanlico
O
O
NH H 2N
HO N N
N N
O O
N N
N HO P O N
HO P O O O
OH OH H
H
OH OH OH OH
cido adenilsuccinico cido adenlico

Se comporta como un antimetabolito de la hipoxantina, interrumpiendo as las vas

metablicas en las que interviene. Por otra parte, la 6-tioguanina (6-TG) se incorpora en
la estructura del ADN dando lugar a alteraciones irreversibles del mismo. Esta base al
igual que su metabolito ribonucletido inhibe procesos paralelos a los descritos para 6-
MP. Al mismo tiempo 6-TGMP puede incorporarse en el ARN y despus de ser
reducido en la posicin 2 del azcar, en el ADN. De esta forma se inhibe el proceso de
replicacin del ADN debido a que la enzima que cataliza el proceso no reconoce la base
6-TG.
S
NH
S N
O NH2
NH N
HGFRT HO P O N
N O
NH2 OH
N H
N OH OH
H
6-TC 6-TGMP

7. Inhibidores de polimerasas de ADN

Otro grupo de antimetabolitos que inhiben la formacin de cidos nucleicos son

aquellos los anlogos de nuclesidos. La citarabina es un ejemplo de antimetabolito de
pirimidina en el cual se introducido una modificacin en el azcar. Se trata de un
nuclesido derivado de la arabinosa, con una configuracin del hidroxilo en C2
invertida. El frmaco debe ser metabolizado a su monofosfato y a su trifosfato para
tener actividad como inhibidor selectivo de la ADN polimerasa vrica. Una de sus
mayores limitaciones es la desactivacin por desaminacin metablica mediada por la
adenosina desaminasa.

16
 NH 2
NH 2 NH 2
N
N N
N O O O
HO O OH HO P O N O N O
O OH H O P O O OH
OH OH 3
OH
OH OH
citarabina (ARA-C)
ARA-CMP ARA-CTP
O

adenosina NH
desaminasa
HO N O
O OH
inactivacin
OH
arabinofuranosiluracilo

El aciclovir y el ganciclovir son ejemplos de antivricos que actan por un mecanismo

semejante. En estos compuestos la porcin del azcar se ha cambiado por un fragmento
acclico. Aciclovir es convertido al derivado di y trifosfato mediante la enzima timidina
quinasa vrica. Este proceso ocurre ms rpido en las clulas infectadas por el virus del
herpes que en las clulas normales ya que en stas el aciclovir es un pobre sustrato para
la enzima normal timidina quinasa. El anlogo trifosfato es un inhibidor competitivo de
la ADN polimerasa al tiempo que se incorpora al ADN vrico generando anomalas en
el cdigo gentico. En el caso de ganciclovir la fosforilacin no necesita de la enzima
vrica especfica y su mecanismo de accin es similar. Sin embargo, es ms txico para
las clulas humanas que aciclovir.
O
N O O
NH
N NH N NH
N N NH 2 activacin
N N NH 2 O N N NH 2
O
HO O HO P O O
R OH aciclovir OH

R = H; aciclovir
R = CH2 OH; ganciclovir

La gemcitabina (dFdC) es un nuclesido derivado de la citosina y de la 2,2-difluoro

desoxirribosa. Debe ser fosforilado a la forma activa trifosfato (dFdCTP) el cual puede
ser incorporado tanto al ADN como al ARN causando la muerte celular. Gemcitabina es
metabolizado y eliminado principalmente como su anlogo uracilo (dFdU).

17
8. Inhibidores de enzimas de transcripcin de ADN

En los ltimos aos, el diseo de antimetabolitos de anlogos de bases

pirimidnicas y pricas ha alcanzado una gran relevancia en la bsqueda de nuevos
frmacos eficaces como inhibidores de la duplicacin del virus del SIDA (VIH-1). En la
sntesis del ADN vrico se necesitan grandes cantidades de nuclesidos y nucletidos de
pirimidinas y purinas bajo el control de la transcriptasa reversa. As, se han descrito
numerosos anlogos de nuclesidos como inhibidores de la transcriptasa reversa vrica,
la enzima que cataliza la sntesis de una copia de ADN a partir del ARN vrico.

Zidovudina es un anlogo de timidina con un grupo azido en anillo de dideoxiribosa. Es

activo contra el ARN de los retrovirus causantes del SIDA y leucemia de las clulas T.
La zidovudina fue el primer medicamento aprobado para el tratamiento del sida y la
infeccin del VIH en 1987. Sin embargo este frmaco es txico y presenta numerosos
efectos secundarios como nauseas, dolor de cabeza, cambios en la grasa corporal, y
decoloracin de los dedos de las manos y pies. Efectos adversos ms severos incluyen
anemia y supresin de la mdula sea.
O
O
OH
NH
N NH
N
N O
N N O
HO N
O HO HO
O O
N3
zidovudina (AZT) didanosina (DDI) estavudina (D4T)

La didanosina es una purina dideoxinucletido, anlogo de la inosina. Es un profrmaco

que es bioactivado por el metabolismo a dideoxiadenosina trifosfato. Cuando se
introduce en el ADN causa la terminacin de la replicacin debido a que carece del
hidroxilo en la posicin 3 necesaria para elongar la cadena. Didanosina es
metabolizada finalmente a hipoxantina, xantina y cido rico.
La estavudina es un anlogo de nucletido de pirimidina que presenta una significante
actividad frente a HIV-1 cuando es metabolizado a su trifosfato. Presenta una alta
biodisponibilidad. Est recomendado para pacientes con infeccin avanzada.

La inhibicin de la transcriptasa reversa, dado que representa un punto de

interaccin selectivo frente al virus del SIDA, ha continuado atrayendo el inters de la
comunidad cientfica en la bsqueda de antivricos eficaces. Se han desarrollado otros
inhibidores no nuclesidos, la mayora de estos compuestos proceden de estudios de
cribado masivo o de mtodos racionales basados en tcnicas de modelizacin
molecular. Entre ellos destacamos la nevirapina.

H O
N
CF3
Cl
O
N N
N
N O
H
nevirapina efavirenz

18
La nevirapina y sus anlogos presentan efecto antiviral contra cepas resistente a AZT.
Su forma de accin es diferente a los anlogos de nucletidos. La unin directa con la
enzima transcriptasa reversa bloquea la actividad de la enzima polimerasa dependiente
de ADN debido a la disrupcin en el centro activo.
El efavirenz es un potente inhibidor de la transcriptas reversa lo que permite combinar
tipos de frmacos reduciendo los efectos secundarios.

9. Inhibidores de las MAO

La enzima MAO, monoamino oxidasa, es un enzima de localizacin

mitocondrial especializado en la degradacin de ciertas aminas bigenas, especialmente
neurotransmisores, si bien algunos xenobiticos tambin pueden comportarse como
sustratos. La MAO es, en realidad, un grupo de isoenzimas dependientes de flavina que
oxidan una amplia variedad de aminas bigenas mediante un proceso de desaminacin
oxidante. Las aminas primarias no ramificadas en posicin a son los mejores sustratos,
si bien algunas aminas secundarias, fundamentalmente metilaminas, tambin pueden
serlo.
H H
N N
HO HO
H
MAO MAO HO
HO H
HO NH2 HO O
OH OH O
serotonina NH 2
noradrenalina

Los inhibidores de la MAO constituyeron uno de los primeros grupos de frmacos con
utilidad como antidepresivos. Las MAO muestran selectividad por las aminas primarias
no sustituidas en posicin a respecto al tomo de nitrgeno. El mecanismo de la
oxidacin implica la abstraccin de un hidruro de la posicin a del sustrato por parte de
la flavina para dar una sal de iminio que por hidrlisis, conduce al correspondiente
aldehdo.
Los primeros inhibidores conocidos de la MAO fueron de tipo irreversible y no
selectivo frente a las distintas isoenzimas. Entre ellas se encuentran las hidrazinas. Su
hidrlisis metablica para liberar la correspondiente hidrazino genera un inhibidor
irreversible de la enzima. La inhibicin de la MAO por este tipo de compuestos puede
considerarse de tipo suicida ya que la especie que inactiva el resto de flavina procede
de la descomposicin de un diazeno resultante del proceso inicial de oxidacin por parte
de la propia enzima.
H
N O NH2
NH 2 N
H
R

R = H; fenelzina f enoxipropazina
R = CH3 ; feniprazina

19
 N2

R NH2 R NH R
N N
H
diazeno O
O N
H R NH
N
NH
N N O
N N O
Enzima
flavina
Enzima

O H O
N 2H +, 2e- N
NH NH

N N O N N O
H
Enzina Enzina

actividad redox de la flavina

Otro tipo de inhibidores irreversibles no selectivos es el representado por la pargilina,

prototipo de las 2-propinilaminas o propargilaminas, cuyo mecanismo de inhibicin es
tambin de tipo suicida. Anlogamente al caso anterior, la especie resultante de la
oxidacin inicial es capaz de alquilar irreversiblemente el resto de flavina.
O
N O
NH N
NH
N N O
H N N O
N Ph N Ph
FAD
pargilina N Ph

La falta de selectividad de los compuestos indicados ha limitado su uso teraputico,

debido a la gran cantidad de efectos secundarios derivados del aumento indiscriminado
de los niveles de diversas aminas bigenas especialmente la tiramina (2-p-
hidroxifeniletilamina), abundante en numerosos alimentos y cuyos efectos presores
resultantes de su acumulacin por inhibicin de las iMAO pueden resultar peligrosos.

El conocimiento de las diversas isoenzimas que se engloban bajo el trmino

gentico de MAO, en especial la MAO-A y la MAO-B, con distinta localizacin y
selectividad frente a las diversas aminas bigenas, as como la posibilidad de disear
frmacos selectivos sobre cada uno de estas isoenzimas, abri nuevas perspectivas sobre
el potencial teraputico de este tipo de compuestos. As, puesto que la MAO-A muestra
selectividad por la serotonina y la noradrenalina, los inhibidores selectivos de la MAO-
A sern tiles como antidepresivos. Pertenecen a este grupo los frmacos obtenidos a
partir de la modificiacin de la pargilina. Al igual que esta, son inhibidores latentes que
dan lugar a la alquilacin irreversible del resto de flavina de la enzima (inhibicin
suicida). La clorogilina se emplea preferentemente como antidepresivo por ser un
inhibidor selectivo de la MAO-A.

20
 Cl
O N
N
Cl clorogilina (iMAO-A) (R)-(-)-selegilina (iMAO-B)

NH2

mofegilina (iMAO-B) HN (R)-(+)-rasagilina (iMAO-B)

F

Por otra parte, dada la selectividad de la MAO-B frente a la dopamina los

inhibidores selectivos sern tiles como antiparkinsonianos sin efectos sobre el
metabolismo de la tiramina. La (R)-(-)selegilina, la (R)-()-rasagilina, un anlogo
cclico de la anterior y la mofegilina, cuyo mecanismo de inhibicin es semejante al del
resto de las propargilaminas, son inhibidores selectivos de la MAO-B con utilidad en el
tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
El desarrollo de inhibidores reversibles selectivos ha abierto nuevas perspectivas en el
desarrollo de frmacos antidepresivos (MAO-A) y antiparkinsoninanos (MAO-B), por
disminuir de forma importante los efectos secundarios derivados de la inhibicin no
selectiva caracterstica de los MAO clsicos. La meclobemida (MAO-A) es el primer
representante de esta nueva generacin de inhibidores reversibles selectivos. Por
variaciones en el anillo aromtico se ha diseado el MAO-B reversible RO-19-6327,
que se encuentra en fase avanzada de desarrollo. En este grupo de inhibidores, la cadena
de 2-aminoetilamida resulta fundamental para la actividad.

O O O
N N NH2
N N
H H
F Cl
meclobemida (iMAO-A) RO-19-6327 (iMAO-B)

10. Inhibidores de la COMT

La catecol-O-metiltransferasa (COMT) es una de las varias enzimas que

degradan los neurotransmisores basados en catecolaminas como la dopamina, epinefrina
y norepinefrina. El diseo de inhibidores selectivos de la COMT ha permitido la
introduccin de nuevos frmacos con utilidad en el tratamiento de la enfermedad de
Parkinson.
Recientemente, se han desarrollado algunos derivados cateclicos como inhibidores
selectivos de esta enzima. Dos frmacos de reciente introduccin en este campo son la
tolcapona y la entacapona.

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Bibliografa utilizada

1) Principles of Medicinal Chemistry, D. A. Williams, T. L. Lemke, Ed. Lippincott

Williams & Wilkins, 2002. ISBN: 0-683-30737-1.

2) Introduccin a la Qumica Teraputica, A. Delgado Cirilo, C. Minguilln Llombart,

J. Joglar Tamargo, Ed. Daz de Santos, 2004. ISBN: 84-7978-601-9.

3) Introduccin a la Sntesis de Frmacos, A. Delgado, C. Minguilln, J. Joglar, Ed.

Sntesis, 2002. ISBN: 84-9756-029-9.

4) An introduction to Medicinal Chemistry, G. L. Patrick, Ed. Oxford, 2001. ISBN: 0-

19-850533-7.

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