Ma Quimica v5 2015

MANUAL PROCEDIMIENTOS QUMICA
Gerente ESE Metrosalud

Martha Cecilia Castrilln Surez
Subgerente Red de Servicios
Direccin Gestin Clnica y Promocin y Prevencin
Fecha aprobacin: 16 de Marzo de 2015
Versin 05
MANUAL PROCEDIMIENTOS SECCIN QUMICA
ELABORADO POR:
ALBA LUZ GALLEGO BEDOYA
JUAN CARLOS ALVAREZ HERRERA
BACTERIOLOGOS
REVISADO POR:
CONSUELO GIRALDO JIMENEZ
LIDER PROGRAMA
RED DE LABORATORIOS
ACTUALIZADO 2015
Cdigo: MA12511030415
MANUAL DE
Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
Vigente a partir de: 16/03/2015
SECCION QUIMICA
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TABLA DE CONTENIDO
Pagina.
1. Registro Control de Lectura... 4
2. Introduccin. 5
3. Acido rico 6
4. Albumina 14
5. Albumina en orina (Microalbuminuria). 21
6. Amilasa... 29
7. Bilirrubina Directa y Total. 37
8. Colesterol total..... 46
9. Colesterol HDL.. 52
9.a. Colesterol LDL.. 59
9.b. Colesterol VLDL 60
10. Creatin quinasa MB/CPK-MB 61
11. Creatin quinasa TOTAL/CPK ... 69
12. Creatinina 77
13. Deshidrogenasa lctica. 87
14. Depuracin de Creatinina.. 94
15. Fosfatasa alcalina 103
16. Gases y Eloctrolitos 110
17. Glucosa.. 116
17. a Prueba de Tolerancia a la Glucosa. 124
17. b Prueba de Tamizaje. 126
17. c Prueba de OSullivan.. 128
17. d Prueba Pre y Postprandial 129
18. Hemoglobina A1c. 131
19. Magnesio 138
20. Proteina C reactiva (PCR). 146
21. Protenas en Orina y LCR.. 153
22. Protenas totales.. 161
23. Transaminasas (GOT y GPT) 168
24. Aspartato aminotransferasa (GOT/AST). 169
25. Alanino aminotransferasa (GPT/ALT). 176
26. Trigliceridos.. 183
27. Troponina I. 190
28. Urea.. 196
29. Manejo del material de control.
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1. REGISTRO CONTROL DE MANUAL DE QUIMICA CLINICA

FECHA VERSION NOMBRE DE QUIEN LEE EL FIRMA CARGO
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2. INTRODUCCIN
El reto y las exigencias de la nueva legislacin en cuanto al cumplimiento de todas las normas y requisitos
tendientes a garantizar unos resultados de laboratorio ptimos, confiables, oportunos y tiles, nos obligan
da a da a mejorar y estar a la vanguardia en cuanto a los procedimientos se refiere.
Es por ello que todos estos documentos deben estar ceidos a las necesidades del mundo actual, siempre
con miras a apoyar y guiar al personal mdico hacia un buen diagnstico y un tratamiento que lleve a
mejorar la calidad de salud y de vida de un paciente.
El documento contiene el fundamento de cada tcnica, el mtodo, el responsable de su procesamiento,

el tipo de muestra o espcimen y su estabilidad, mtodo de recoleccin de la muestra, indicaciones para
el transporte y almacenamiento de ellas, condiciones o requisitos que el paciente debe cumplir para
garantizar un buen resultado, la lista de equipos y reactivos necesarios. Tambin incluye el mtodo de
estandarizacin y calibracin de la tcnica, los criterios de calidad que definen si los resultados son o no
inaceptables, las acciones correctivas para los resultados inaceptables, el procedimiento de la tcnica, sus
clculos, la expresin de los resultados, los valores de referencia, los interferentes y por ltimo la referencia
bibliogrfica.
Este manual se convierte en una herramienta de fcil consulta y apoya constantemente el trabajo diario
del profesional de la bacteriologa, al igual que sirve de consulta al personal en adiestramiento que pasa
por este servicio.
Desde luego que el bacterilogo est consciente de consultar los insertos de las tcnicas, ya que este
manual no los reemplaza.
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3. ACIDO URICO
El cido rico es el principal producto del catabolismo de las purinas y se forma a partir de la xantina, por
accin de la xantinoxidasa. La mayor parte de este se forma en el hgado, el cual presenta gran actividad
de xantinoxidasa al igual que la mocosa intestinal.
Un adulto excreta aproximadamente de 0.4 a 0.8 g de cido rico por la orina cada 24 horas. Sin
embargo, con una dieta de bajo contenido de purina, se continuaran excretando entre 275 y 600 mg de
cido rico como resultado de catabolismo de las purinas endgenas, contrariamente como
consecuencia de una dieta rica en purinas, la excrecin de cido rico puede superar el nivel de 1 g//24
horas. Las purinas se ingieren en alimentos ricos en material nucleicos como hgado, carnes, vegetales, etc.
El caf, t y cocoa son xantinas.
La determinacin de cido rico en la sangre nos puede guiar al diagnostico de algunas enfermedades
como neoplasias, linfogranuloma, anemia hemoltica, leucemia, policitemia, falla renal, cetoacidosis,
enfermedad de Wilson, sndrome de Fanconi, pero especialmente ayuda al diagnstico de la gota en los
varones, los cuales constituyen el 90% de todos los casos.
3.1. METODO:
Test enzimtico colorimtrico
3.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a)
3.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO:

El cido rico es desdoblado por la uricasa a alantona y perxido de hidrgeno.
Uricasa
cido rico + 2 H2O + O2 alantona + CO2 + H2O2
En presencia de peroxidasa, el perxido de hidrgeno oxida la 4-aminofenazona para formar un colorante
de quinona-diimina.
2 H Peroxidasa 2O2 + H+ + TOOSa + 4-aminofenazona colorante de quinona-diimina + 4 H2O
La intensidad cromtica de la quinona-diimina formada es directamente proporcional a la concentracin
de cido rico y es determinada midiendo el aumento de la absorbancia.
3.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO:

R1 Tampn fosfato: 0,05 mol/L, pH 7,8; TOOS: 7 mmol/L; ter poligliclico de alcohol graso: 4,8 %;
ascorbato oxidasa (EC 1.10.3.3; calabacn) 83,5 kat/L (25 C); estabilizadores
R2 Tampn fosfato: 0,1 mol/L, pH 7,8; hexacianoferrato de potasio (II): 0,3 mmol/L; 4-aminofenazona
3 mmol/L; uricasa (EC 1.7.3.3; Arthrobacter protophormiae) 83,4 kat/L (25 C); peroxidasa (POD)
(EC 1.11.1.7; rbano picante) 50 kat/L (25 C); estabilizadores
Sueros Calibradores.
Controles de calidad (normal y patolgico).
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Preparacin de los reactivos.

El contenido est listo para el uso.
Conservacin y estabilidad
Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
En uso y refrigerado en el analizador: 8 semanas
3.5. MATERIAL DE PRUEBA.

Suero.
Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotsico.
Los valores encontrados en muestras de plasma con EDTA son inferiores
a los valores obtenidos en suero en aproximadamente un 7 %.
2010-09, V 7 Espaol 1 / 4 sistemas cobas c.
Orina.
El cido rico en suero y plasma es estable:

Tres das a temperatura ambiente 20 a 25 C
Siete das refrigerado de 4 8C.
Seis meses congelado a 20C.
En muestras de orina de 24 horas es estable:

Cuatro das de 20 a 25 C
3.6. MTODO DE RECOLECCIN DEL ESPCIMEN

Muestra de suero: Sangrar en tubo seco, dejar en reposo 10-20 minutos centrifugar por espacio de 10
minutos y, luego decantar el suero (si no se sangr en tubo tapa amarilla), antes de 30 minutos.
Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA, oxalato o fluoruros.
Orina: Recolectada en 24 horas.
Para la recoleccin de la orina el paciente debe fijar una hora cero, descartar la orina de esa hora y a
partir de entonces recoger todo el volumen de orina, incluida la muestra del tiempo fijado para la
recoleccin.
El paciente debe abstenerse de ingerir carne, caf durante las 24 horas anteriores a la recoleccin.
3.7. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS.

Refrigerado.
3.8. CONDICIONES DEL PACIENTE:

El paciente debe tener un ayuno de 8 horas.
Debe, 48 horas antes suspender el consumo de alcohol, 24 horas antes no ingerir carnes rojas,
mariscos ni frijoles, 2 das antes evitar ejercicio fuerte porque aumenta la concentracin del cido
rico.
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Suspender el consumo de drogas como alopurinol, cortisona, salicilatos, analgsicos, vitamina C.

La ingestin de etanol incrementa los valores del cido rico debido al lactato producido por la
oxidacin del etanol que inhibe su secrecin.
Varios frmacos y sustancias qumicas interfieren en la excrecin renal del urato.
El cido etacrinico, la furosemida y los diurticos tienen un efecto antiuricosrico.
3.9. EQUIPOS NECESARIOS:

Centrfuga.
Analizador automatizado fotomtrico, selectivo para la realizacin de determinaciones de
bioqumica.
Pipetas.
3.10. MTODO DE ESTANDARIZACIN Y CALIBRACIN

En el laboratorio la variabilidad se describe en los equipos utilizados mediante parmetros como el rango,
la desviacin estndar (DS) y el coeficiente de variabilidad (CV), para evaluar los resultados del control de
calidad el laboratorio se basa en la desviacin estndar, entonces los resultados de los controles normal y
patolgico deben estar entre el valor medio () 2 DS y es as como los resultados se pueden reportar.
Los Analizadores automatizados utilizados en el laboratorio nos controla la calidad de todos los procesos
utilizando el promedio de los controles corridos y la (DS) los cuales deben ser llevados a las grficas de
LEVEY JENNING, sta es construida para cada una de las pruebas tanto para el control normal como para
el anormal.
Cuando el laboratorio est funcionando adecuadamente estos valores del control deben estar dentro de
los lmites permisibles, la 2 DS oscilando a lado y lado de la lnea que representa la en la grfica de
LEVEY JENNING.
El control de calidad en nuestro laboratorio es vigilado diariamente para darle una confiabilidad del 100 %
a todas las pruebas en l realizadas.
3.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES:

Al inicio del anlisis deben correr los controles normal y patolgico, si dan dentro del rango del valor
esperado se pueden pasar los resultados al programa de control de calidad, verificar las grficas e
identificar alarmas si las hubiese, realizar acciones correctivas si se necesitan y montar las muestras.
Los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se deben verificar para confirmar su
veracidad.
3.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES:

Los resultados diarios del control de calidad se analizan. Si no est dentro del intervalo indicado,
revisar reactivo, Analizador, cubetas, la calidad de la muestra (aspecto). Tomar los correctivos
necesarios de acuerdo a lo arrojado en este anlisis incluyendo diluciones y correccin de tcnica.
Calibracin del Analizador. (Remitirse al manual del Analizador).
Centrifugar muestras los primeros 30 minutos, si no se sangr en tubo con gel.
Cambio de lote de sueros multicalibradores y reactivo, realizar nueva calibracin del Analizador.
Verificar reactivo que correspondan a la prueba pedida y evitar agotamiento de los mismos.
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Rechazar muestras hemolizadas e insuficientes.

Evitar burbujas en las copas de muestras, tubos primarios y reactivos.
Muestras que no se procesan el mismo da, refrigerar a 4C, inmediatamente, despus de separar (si
no se sangr en tubo con gel).
Confirmar la linealidad de la prueba y si es necesario realizar las diluciones respectivas.
Verificar la posicin de las muestras para evitar falsos resultados.
Asegurar el mantenimiento del analizador.
3.13. PROCEDIMIENTO LECTURA:
Analizador automatizado:
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de cido rico o al hacer la
programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de cido rico. Ver manual de
funcionamiento del Analizador.
3.14. CALCULO
Tipo de medicin 2 puntos finales
Tiempo de reaccin/ 10 / 23-27.
Puntos de medicin
Longitud de onda: 700/546 nm
Direccin de reaccin: Incremento
Unidades: mg/dL (mol/L, mg/L)
Pipeteo de reactivo Diluyente (H2O)
R1 72 L 25 L
R3 14 L 20 L
Volmenes de muestra
3 L
Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automticamente la concentracin de analito de cada

muestra.
Factores de conversin: mg/dL x 59,5 = mol/L, mg/dL x 10 = mg/L
3.15. CALIBRACION:
Calibradores S1: H2O
S2: C.f.a.s.
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Modo de calibracin: Lineal.

Frecuencia de calibraciones: calibracin a 2 puntos
- tras cambiar de lote de reactivos
- y segn lo requiera el control de calidad
3.16. EXPRESIN DE RESULTADOS:

Los resultados se expresan en mg/dL (Suero o plasma)
mg/24 horas (Orina)
3.17. LIMITACIONES DEL ANALISIS INTERFERENCIAS.

Suero/plasma:
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 40 (concentracin de la bilirrubina
conjugada y no conjugada: aprox. 684 mol/L 40 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 1.000 (concentracin de
hemoglobina: aprox. 621 mol/L 1.000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencia significativa hasta un ndice L de 1.500. No existe una
concordancia satisfactoria entre el ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de
triglicridos.
El cido ascrbico < 0,17 mmol/L (< 3 mg/dL) no interfiere en el test.
Frmacos: No se han registrado interferencias con paneles de frmacos de uso comn en
concentraciones teraputicas.
Excepciones: El dobesilato de calcio provoca valores falsamente bajos de cido rico.
La uricasa reacciona especficamente con el cido rico. Otros derivados de purina pueden inhibir
la reaccin de cido rico.
En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la gammapata, particularmente
del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenstroem).

Orina
Frmacos: No se han registrado interferencias con paneles de frmacos de uso extendido en
Excepciones: El dobesilato de calcio, la levodopa y la metildopa pueden provocar valores
falsamente bajos de cido rico.
Altas concentraciones de cido homogentsico en muestras de orina provocan resultados falsos.
Con fines diagnsticos, los resultados obtenidos con el test siempre deben evaluarse junto al historial del
paciente, los exmenes clnicos y los resultados de otros anlisis.
3.18. VALORES DE REFERENCIA:

Suero/plasma:
Hombres: 3,4-7,0 mg/dL
Mujeres: 2,4-5,7 mg/dL
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Orina (intervalo de referencia segn Krieg y Colombo)

1ra orina de la maana 37-92 mg/dL
Orina de 24 horas: 200-1.000 mg/da correspondiente a 13-67 mg/dL (calculado a partir de un
volumen de orina de 1,5 L/24h)
Orina (intervalo de referencia segn Tietz)15
Dieta normal 250-750 mg/24 horas
Dieta pobre en purina
Mujeres < 400 mg/24 horas
Hombres < 480 mg/24 horas
Dieta rica en purina < 1.000 mg/24 horas
Cada laboratorio debera comprobar si los intervalos de referencia pueden aplicarse a su grupo de
pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores.
3.19. INTERVALOS DE MEDICION (LINEALIDAD)

Suero/plasma:
0,2-25,0 mg/dL
Orina
2,2-275 mg/dL
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3.20. BIBLIOGRAFA
Angel M, Gilberto. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 1993. Ed. Mdica Panamericana. Pgs. 606.
Barham D, Trinder P. Anayst 1972, 27: 142 145.
Fossati P, Principel, Berti G. Clin Chem. 1980; 26: 227 231.
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Angel M, Gilberto. Diccionario del Laboratorio Clnico.
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1994
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Stuttgart/New York: Schattauer Verlag, 1995.
Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik fr die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg
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DiGiorgio J, Henry RJ, et al., eds. Clinical Chemistry: Principles and
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Elking SM, Kabat HF. Am Soc Hosp Pharm 1969;25:485.
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Kueffer H. Therap Umschau 1971;28:669.
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WU AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. St. Louis (MO): WB Saunders; 2006;1098-
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Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO
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4. ALBUMINA
La albmina es una protena carente de carbohidratos que constituye

aprox. 55-65 % de la totalidad de las protenas plasmticas. Sirve para mantener la presin onctica en el
plasma, est involucrada en el transporte y almacenamiento de numerosos ligandos y constituye una
fuente endgena de aminocidos. La albmina fija y desdobla varios compuestos, como p.ej. la bilirrubina,
el calcio y cidos grasos de cadena larga. La albmina se une asimismo a iones txicos de metales
pesados y a mltiples frmacos, razn por la cual la disminucin de la albmina en sangre puede tener
importantes consecuencias farmacocinticas.
Excepto en caso de deshidratacin, la hiperalbuminemia no reviste gran importancia diagnstica. La
hipoalbuminemia que acompaa numerosas enfermedades se debe a diversos factores: a una sntesis
reducida como consecuencia de una hepatopata o por absorcin disminuida de protenas, a un aumento
en el catabolismo originado por una lesin tisular (quemaduras graves) o una inflamacin, a la
malabsorcin de aminocidos (enfermedad de Crohn), a la proteinuria debida a un sndrome nefrtico o a
la prdida de protenas a travs de las heces (por neoplasia). En casos graves de hipoalbuminemia, la
concentracin plasmtica de la albmina mxima alcanza 2.5 g/dL (380 mol/L). Debido a la baja presin
osmtica en el plasma, el lquido pasa de los capilares sanguneos al tejido (edema).
La determinacin de la albmina permite supervisar a pacientes bajo dieta controlada y constituye un test
excelente del funcionamiento heptico.
4.1. MTODO:
Test fotomtrico
4.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Test colorimtrico.
Con un pH de 4.1 la albmina tiene un carcter suficientemente catinico como para formar un
compuesto con el verde de bromocresol (BCG), colorante aninico, formando un complejo azul verdoso.
pH 4.1 albmina + BCG complejo albmina-BCG
La intensidad del colorante azul verdoso es directamente proporcional a la concentracin de albmina en
la muestra y es determinado fotomtricamente.
Medicin de la variacin de color debido a la formacin de complejos entre albumina y verde de

bromocresol a Ph de 4.2.

R1 Tampn citrato: 95 mmol/L; pH 4.1; conservante
R2 Tampn citrato: 95 mmol/L, pH 4.1; verde de bromocresol: 0.66 mmol/L; conservante.
Preparacin de los reactivos

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ALB2 Sin abrir, a 15-25 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
Diluyente NaCl al 9 % Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c
pack.
4.5. MATERIAL DE PRUEBA- ESTABILIDAD:

Suero.
Plasma tratado con heparina de litio o EDTA bipotsico.
No emplear plasma con fluoruro.
Estabilidad: 2.5 meses a 15-25 C
5 meses a 2-8 C
4 meses a (-15)-(-25) C
Desechar las muestras contaminadas.
4.6. MTODO DE RECOLECCIN DEL ESPCIMEN:

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA.

Refrigerado.

Ayuno no mayor de 8 horas, pues tiempo prolongados de ayuno provocan un incremento en los
valores de albumina.
Evitar ejercicio fsico fuerte, pues la deshidratacin por este puede provocar aumento en los niveles
sricos de albumina.
El uso del torniquete no exceder de los 30 segundos

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de albumina o al hacer la programacin
de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de albumina. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
4.14. CALCULO
Tiempo de reaccin/ 10 / 6-9
Puntos de medicin
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Unidades: g/L (mol/L, g/L)
R1 100 L
R2 20 L 30 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
Factores de conversin: g/L x 15.2 = mol/L, mol/L x 0.0658 = g/L,
g/L x 0.1 = g/dL
4.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
-en el analizador, tras cuatro semanas.
- tras cambiar de lote de reactivos.
- y segn lo requiera el control de calidad.

Los resultados se expresan en g/dL (Suero o plasma)

Suero/plasma:
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 60 para bilirrubina conjugada y sin
conjugar (concentracin de bilirrubina conjugada y sin conjugar: aprox. 1026 mol/L 60 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 1000 (concentracin de hemoglobina:
aprox. 621 mol/L 1000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 550. La correlacin entre el
ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos no es concluyente.
concentraciones teraputicas. En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la
gammapata, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenstroem).
Para el diagnstico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en cuenta la anamnesis
del paciente, el anlisis clnico as como los resultados de otros exmenes.
En pacientes con insuficiencia renal, los mtodos colorimtricos empleados para la determinacin de
albmina pueden llevar a resultados de test falsamente elevados debido a interferencias con otras
protenas. Los mtodos inmunoturbidimtricos son menos afectados.

Adultos 3.97-4.94 g/dL 39.7-49.4 g/L 603-751 mol/L
Neonatos 0-4 das 2.8-4.4 g/dL 28-44 g/L 426-669 mol/L
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Nios 4 das-14 aos 3.8-5.4 g/dL 38-54 g/L 578-821 mol/L

14-18 aos 3.2-4.5 g/dL 32-45 g/L 486-684 mol/L

2-60 g/L (30.4-912 mol/L, 0.2-6 g/dL)
Determinar las muestras con concentraciones superiores a travs de la funcin de repeticin del ciclo. La
dilucin automtica de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:5. Los resultados de las
muestras diluidas por la funcin de repeticin del ciclo se multiplican automticamente por el factor 5.
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4.20. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
Angel M, Gilberto. Diccionario del Laboratorio Clnico. 1996. Ed. Mdica Panamericana. Pgs 303.
1994
Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik fr die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme
Verlag 1991.
Kim EK, Waddel LD, Sunderland MLE et al. Observations on Diagnostic Kits for the Determination of Uric
Acid. Clin Biochem 1971;4:279-286.
Praetorius E, Poulsen H. Enzymatic Determination of Uric Acid with Detailed Directions. Scandinav J Clin
Lab Investigation 1953;3:273-280.
Cdigo: MA12511030415
MANUAL DE
Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 19 de 167
5. ALBUMINA EN ORINA (MICROALBUMINURIA).
La albmina es una protena no glucosilada de un peso molecular de 66000 daltons. Su sntesis, que tiene
lugar en las clulas del parnquima heptico, alcanza 14 g por da. Desde el punto de vista cuantitativo,
constituye el componente proteico ms importante (> 50 %) del plasma, el lquido cefalorraqudeo y la
orina. La excrecin baja pero anormal de albmina es denominada microalbuminuria. Segn sus causas se
distingue en glomerular (p.ej. microangiopata diabtica, hipertensin, lesin glomerular mnima), tubular
(resorcin inhibida) o posrenal. La albmina sirve tambin como protena marcadora de diferentes formas
de proteinuria.
En la proteinuria glomerular selectiva se excretan a la orina entre 100 y 3000 mg de albmina por g de
creatinina. Una proteinuria glomerular no selectiva se caracteriza por la excrecin elevada de protenas
con un peso molecular ms alto (IgG superior al 10 % de la albmina). La proteinuria prerrenal se reconoce
por la discrepancia entre la albmina y las protenas totales (albmina inferior al 30 % con aumento
simultneo de las protenas totales). Un aumento simultneo de los niveles de albmina y microprotenas se
registra en las proteinurias glomrulo-tubulares que aparecen por sobrecarga de la resorcin tubular en
glomerulopatas (p. ej. sndrome nefrtico), en nefropatas glomerulares tbulo-intersticiales combinadas o
en insuficiencia renal debida a nefropata diabtica u otras causas (proteinuria por rebosamiento). En el
plasma, la albmina tiene dos funciones principales: mantener la presin onctica (80 % debida a la
albmina plasmtica) y el transporte. Es la protena transportadora de mayor importancia para sustancias
poco hidrosolubles como cidos grasos libres, bilirrubina, iones metlicos, hormonas y frmacos.
La concentracin de albmina est disminuida en caso de hiperhidratacin, insuficiencia de sntesis
hepatocelular, trastornos de la secrecin al espacio intravascular, trastornos en la distribucin entre el
espacio intra y extravascular, catabolismo y prdida de albmina, en la reaccin de fase aguda y
analbuminemia congnita.
Los trastornos de la barrera hematoenceflica pueden cuantificarse eficazmente mediante el cociente de
albmina en LCR/suero. Cocientes elevados de albmina indican un trastorno de la barrera
hematoenceflica.
Si se determinan simultneamente la IgG en LCR y suero, tomando en cuenta los cocientes individuales de
albmina, se puede diferenciar entre la IgG sangunea y la sintetizada por el SNC. En casos de esclerosis
mltiple, encefalitis crnica por el VIH, neurosfilis y la encefalitis por herpes simple, predomina la existencia
de IgG.
Para determinar la albmina se dispone de varios mtodos tales como la inmunodifusin radial, la
nefelometra y la turbidimetra.
5.1. MTODO:
Prueba inmunoturbidimtrica.
5.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Prueba inmunoturbidimtrica.
Los anticuerpos anti-albmina reaccionan con el antgeno de la muestra formando un complejo antgeno-
anticuerpo que se mide turbidimtricamente despus de la aglutinacin.

R1 Tampn TRIS: 50 mmol/L, pH 8.0; PEG: 4.2 %; EDTA: 2.0 mmol/L; conservante
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R2 Anticuerpo policlonal anti-albmina humana (oveja), dependiente del ttulo; tampn TRIS: 100 mmol/L;
pH 7.2; conservante
R3 Reactivo de comprobacin de exceso de antgeno.
Albmina en suero diluido (humano); NaCl: 150 mmol/L; tampn fosfato:
50 mmol/L; pH 7.0; conservante
R1 est en posicin A, R2 en posicin B y R3 en posicin C.

ALBT2 Sin abrir, a 2-8 C: Vase la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
Diluyente NaCl al 9 % Sin abrir, a 2-8 C: Vase la fecha de caducidad indicada en
la etiqueta del cobas c pack.

Orina
LCR
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de efectuar el test.
LCR Estabilidad: hasta 3 das a 2-8 C
6 meses a (-15)-(-25) C
Indefinidamente a (-60)-(-80) C
Orina
Orina espontnea, de 24 horas o la segunda orina de la maana.
Estabilidad: 7 das a 15-25 C
1 mes a 2-8 C
6 meses a (-15)-(-25) C

recoleccin.

Refrigerado.

No requiere ayuno previo.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Analizador.
5.14. CALCULO

Puntos de medicin
Unidades: mg/L (mol/L, mg/L)
R1 100 L
R2 20 L
R3 6 L 20 L
Volmenes de muestra
6.0 L

muestra.
Factores de conversin: g/L x 100 = mg/dL, g/L x 15.2 = mol/L,
mg/L x 0.1 = mg/dL, mg/L x 0.0152 = mol/L
5.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s. PUC
Modo de calibracin: completa.

- tras cambiar de lote de reactivos.
- y segn lo requiera el control de calidad.

Los resultados se expresan en mg/l (orina).
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PROCEDIMIENTOS
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Orina:
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta una concentracin de bilirrubina conjugada de 855
mol/L (50 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta una concentracin de hemoglobina de 248 mol/L
(400 mg/dL).
No se registraron interferencias por acetona 60 mmol/L, cloruro amnico 0.11 mol/L, calcio 40
mmol/L, creatinina 0.18 mol/L, -globulina 500 mg/L, glucosa 0.19 mol/L, urea 0.8 mol/L, cido
rico 5.95 mmol/L ni con urobilingeno 378 mol/L.
concentraciones teraputicas. Efecto prozona (high-dose hook): Aplicando la verificacin cintica,
no se produjeron resultados falsos sin aviso con concentraciones de albmina hasta 40000 mg/L (608
mol/L, 4000 mg/dL).
LCR
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta una concentracin de hemoglobina de 620 mol/L
(1000 mg/dL).
Efecto prozona (high-dose hook): Aplicando la verificacin cintica, no se produjeron resultados
falsos sin aviso con concentraciones de albmina hasta 30000 mg/L (456 mol/L, 3000 mg/dL).

Orina
2a orina de la maana:
Adultos: < 20 mg de albmina/g de creatinina o bien < 2.26 g (34.35 mol) de albmina/mol de creatinina
Nios (3-5 aos):20 < 20 mg/L (0.304 mol/L, 2 mg/dL) de albmina < 37 mg de albmina/g de creatinina
Orina de 24 horas: < 20 mg/L (0.304 mol/L, 2 mg/dL) < 30 mg/24 h (0.456 mol/24 h)
Cociente de albmina en LCR/suero (CALB x 103)
Adultos: hasta 15 aos 5.0
hasta 40 aos 6.5
hasta 60 aos 8.0
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PROCEDIMIENTOS
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Orina
cobas c 501/502: 3-400 mg/L (0.05-6.08 mol/L, 0.3-40 mg/dL)
dilucin de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:11. Los resultados de las muestras
diluidas por la funcin de repeticin del ciclo se multiplican automticamente por el factor 11.
LCR
cobas c 501/502: 36-4800 mg/L (0.55-73.0 mol/L, 3.6-480 mg/dL)
dilucin automtica de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:6.2. Los resultados de las
muestras diluidas por la funcin de repeticin del ciclo se multiplican automticamente por el factor 6.2.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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5.20. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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6. AMILASA.
Las -amilasas (1,4--D-glucanohidrolasas, EC 3.2.1.1) catalizan la hidrlisis de carbohidratos polmeros tales

como la amilosa, la amilopectina y el glucgeno por desdoblamiento de los enlaces 1,4--glucosdicos. En
los poli y oligosacridos algunos enlaces glucosdicos se hidrolizan simultneamente. La maltotriosa, la
unidad ms pequea de este grupo, se convierte a maltosa y glucosa, si bien muy lentamente. Se
distinguen dos tipos de -amilasas: el tipo pancretico (tipo P) y el tipo salival (tipo S). El tipo P se forma casi
exclusivamente en el pncreas y es, por lo tanto, rgano especfico, mientras que el tipo S se sintetiza en
diferentes rganos. Este ltimo se encuentra en las glndulas salivales, las lgrimas, el sudor, la leche
materna, el lquido amnitico, los pulmones, los testculos y en el epitelio de las trompas de Falopio.
La determinacin de la -amilasa juega un papel importante en el diagnstico de las enfermedades del
pncreas ya que presentan sntomas clnicos poco especficos. La -amilasa se emplea sobre todo en el
diagnstico y seguimiento de la pancreatitis aguda. La hiperamilasemia no slo puede producirse en la
pancreatitis aguda o en la fase inflamatoria de la pancreatitis crnica, sino tambin en afecciones tales
como la insuficiencia renal por filtracin glomerular reducida, en tumores pulmonares u ovricos, en la
neumona, en enfermedades de las glndulas salivales, en la cetoacidosis diabtica, el trauma cerebral,
en intervenciones quirrgicas o en caso de una macroamilasemia. Para confirmar la especificidad
pancretica, se recomienda determinar adicionalmente otra enzima especfica del pncreas, como la
lipasa o la -amilasa pancretica.
Son numerosos los mtodos destinados a la determinacin de la -amilasa y se basan en determinar la
reduccin del sustrato de forma viscosimtrica, turbidimtrica, nefelomtrica o amiloclstica o bien en
medir la formacin de productos de degradacin por sacarimetra o cinticamente mediante reacciones
sucesivas catalizadas por enzimas.
6.1. MTODO:
Prueba enzimtica colorimtrica
6.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Prueba enzimtica colorimtrica.
Los oligosacridos definidos tales como el 4,6-etilideno-(G7) p-nitrofenil-(G1)-, D-maltoheptasido
(etilideno-G7PNP) se desdoblan bajo la accin cataltica de la -amilasa. Los fragmentos G2PNP, G3PNP y
G4PNP que se han formado, se hidrolizan completamente a p-nitrofenol y glucosa bajo la accin de la
-glucosidasa.
Esquema simplificado de reaccin:
-amilasa 5 etilideno-G7PNPa p-nitrofenol=^ + 5 H2O
2 etilideno-G5 + 2 G2PNP + 2 etilideno-G4 + 2 G3PNP + etilideno-G3 + G4PNP
-glucosidasa
2 G2PNP + 2 G3PNP + G4PNP + 14 H2O 5 PNP + 14 Gb
a) PNP
b) G =^ glucosa
La intensidad cromtica del p-nitrofenol formado es directamente proporcional a la actividad de la -
amilasa. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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R1: 52.4 mmol/L; cloruro de sodio: 87 mmol/L; cloruro de calcio:
0.08 mmol/L; cloruro de magnesio: 12.6 mmol/L; -glucosidasa (microbiana): 66.8 kat/L; pH 7.0 (37C);
estabilizadores; conservantes
R2: 52.4 mmol/L; etilideno-G7-PNP: 22 mmol/L; pH 7.0 (37 C); conservantes; estabilizadores
R1 est en la posicin B y R2 en la posicin C.

AMYL2 Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.
En uso y refrigerado en el analizador: 12 semanas.

Suero Plasma tratado con heparina de litio
Orina: Recoger la orina sin aditivos. La -amilasa es inestable en orina cida. Realizar el test de inmediato o
alcalizar las muestras para su almacenamiento (apenas sobre pH 7).
Estabilidad en suero o plasma: 7 das a 15-25 C
1 mes a 2-8 C
Estabilidad en orina: 2 das a 15-25 C

10 das a 2-8 C
recoleccin.

Refrigerado.

Tener un ayuno de 8 horas.
El torniquete no debe permanecer por ms de 30 segundos.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de amilasa o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de amilasa. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
6.14. CALCULO
Tipo de medicin Cintica A
Puntos de medicin
Unidades: U/L (kat/L)
R1 100 L
R2 20 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
Factores de conversin: U/L x 0.0167 = kat/L
6.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
tras cambiar de lote de reactivos
y segn lo requiera el control de calidad

Los resultados se expresan en U/L (Suero, plasma u orina)

Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 60 (concentracin de la bilirrubina
conjugada y sin conjugar: aprox. 60 mg/dL 1026 mol/L).
aprox. 500 mg/dL 310 mol/L).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 1500. La correlacin entre el
ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos no es concluyente. Las
muestras lipmicas muy turbias pueden causar alarmas debido a valores de absorbancia elevados.
Anticoagulantes: Se registraron interferencias con el citrato, el fluoruro y EDTA.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Glucosa: Sin interferencias por glucosa hasta 111 mmol/L (2000 mg/dL). La recuperacin aumenta
en aprox. el 10 % si la concentracin de glucosa equivale a 250 mmol/L (4500 mg/dL).
cido ascrbico: Sin interferencias por cido ascrbico hasta 5.68 mmol/L (100 mg/dL).
concentraciones teraputicas. Excepcin: Los frmacos basados en icodextrina pueden llevar a
resultados disminuidos de amilasa. En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a
la gammapata, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de Waldenstroem).
Orina
cido ascrbico: Sin interferencias por cido ascrbico hasta 2.27 mmol/L (40 mg/dL). Con
concentraciones de cido ascrbico de 22.7 mmol/L (400 mg/dL) se registra una recuperacin
reducida en un 15 %.

Suero/plasma Hombres/mujeres 0.47-1.67 kat/L 28-100 U/L
Orina espontnea Hombres 0.27-8.20 kat/L 16-491 U/L
Mujeres 0.35-7.46 kat/L 21-447 U/L
Cociente de Hombres 0.97-4.73 kat/g 58-283 U/g
-amilasa/creatinina Mujeres 1.25-6.51 kat/g 75-390 U/g
Cociente de -amilasa/creatinina
Considerando las fluctuaciones a las que est sujeta la actividad de la -amilasa en orina, se recomienda
determinar el cociente entre la -amilasa y la creatinina. Para hacerlo, determine en orina espontnea
tanto la actividad de la -amilasa como la concentracin de creatinina.
-amilasa [U/L o kat/L]
Cociente [U/g o kat/mmol] = creatinina [g/L o mmol/L]
Cociente amilasa/aclaramiento de creatinina (ACCR)
El ACCR se calcula a partir de la actividad de la amilasa y la concentracin de la creatinina. Las muestras
de suero y orina deben obtenerse simultneamente.
Amilasa en orina [U/L] x creatinina en suero [mg/L]
ACCR [%] = amilasa en suero [U/L] x creatinina en orina [mg/L] 100
El ACCR equivale aprox. a 2-5 %.

3-1500 U/L (0.05-25.0 kat/L)
Determinar las muestras con actividades ms altas por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin
automtica de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:5. Los resultados de las muestras
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SECCION QUIMICA
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6.20. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
WU AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. St. Louis (MO): WB Saunders; 2006;1098-1100.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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7. BILIRRUBINA DIRECTA Y TOTAL.

La bilirrubina es un producto de degradacin de la hemoglobina, formada en las clulas
reticuloendoteliales del bazo y de la medula sea, que es transportada en el torrente circulatorio por
diversas partculas. El grupo hemo procedente de la hemoglobina y de otras hemoprotenas es eliminado,
metabolizado a bilirrubina y transportado al hgado en forma de complejo con la albmina srica. La
bilirrubina libre o no conjugada no es capaz de atravesar la barrera glomerular del rin.
En el hgado, la bilirrubina es conjugada por solubilizacin con el cido glucurnico, para ser entonces
transportada por el conducto biliar y eliminada por el tracto digestivo.
Cuando la bilirrubina libre se conjuga con cido glucornico en el hgado, se hace soluble en agua y es
capaz de atravesar los glomrulos renales. La bilirrubina conjugada se excreta normalmente a travs de la
bilis.
El incremento de los niveles de bilirrubina sin conjugar (indirecta) en el torrente sanguneo se debe a
enfermedades o circunstancias en las cuales, a causa de procesos hemolticos, se produce ms bilirrubina
de la que el hgado es capaz de metabolizar. La inmadurez heptica u otros numerosos trastornos en los
que el mecanismo de conjugacin de la bilirrubina se encuentra afectado pueden causar aumentos
similares de la bilirrubina circulante sin conjugar. La obstruccin del conducto biliar o el dao de la
estructura hepatocelular causan un aumento en los niveles tanto de la bilirrubina conjugada (directa)
como en los de la bilirrubina sin conjugar (indirecta) en el torrente sanguneo.
Si la conjugacin y excrecin en el hgado son normales el nivel srico de bilirrubina total ser de 1mg/dl.
En el laboratorio se realiza para bilirrubina 2 pruebas, la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) y la
bilirrubina directa (conjugada).
La bilirrubina total aumenta si la destruccin de eritrocitos aumenta o si la conjugacin de bilirrubina en el
hgado es defectuosa.
La bilirrubina directa aumenta si la excrecin de bilis disminuye. En la hepatitis aguda la bilirrubina total esta
aumentada, en la cirrosis heptica aumenta la bilirrubina total y la bilirrubina directa.
7.1 MTODO:
Fotomtrico.
7.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Mtodo diazo.
En un tampn cido, la bilirrubina conjugada y la -bilirrubina (bilirrubina directa) reaccionan directamente
con la sal de 3,5-diclorofenildiazonio para formar azobilirrubina de color rojo.
Bilirrubina + 3,5 DPD azobilirrubina
La intensidad cromtica del colorante azoico rojo es directamente proporcional a la concentracin de
bilirrubina directa (conjugada) que se mide fotomtricamente.
Test colorimtrico.
En un medio fuertemente cido y en presencia de un agente disolvente adecuado, la bilirrubina total se
acopla a un in de diazonio.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 33 de 167
cido bilirrubina + in de diazonio azobilirrubina

La intensidad cromtica del pigmento rojo azoico formado es directamente proporcional a la
concentracin de la bilirrubina total y se mide fotomtricamente.
7.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO.
BILIRRUBINA TOTAL
R1: Detergente; cido clorhdrico: 120 mmol/L

R2: Sal de 3,5-diclorofenildiazonio: 1.5 mmol/L
BILIRRUBINA DIRECTA
R1: cido fosfrico: 85 mmol/L; HEDTA: 4.0 mmol/L; NaCl: 50 mmol/L; detergente; pH 1.9
R2: 3,5 diclorofenildiazonio: 1.5 mmol/L; pH 1.3

BILIRRUBINA DIRECTA:
BILIRRUBINA TOTAL:
7.5. MATERIAL DE PRUEBA ESTABILIDAD:
Suero o plasma. Las muestras se deben procesar el mismo da en que se recolecten y resguardarlas de la
luz.
7.6. MTODO RECOLECCIN DEL ESPCIMEN:

Muestra de suero: Sangrar en tubo seco, dejar en reposo 10 - 20 minutos, centrifugar por espacio de 15
minutos y, luego decantar el suero, antes de 30 minutos (si no se sangr en tubo con gel).
PROTEGER INMEDIATAMENTE DE LA LUZ.
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PROCEDIMIENTOS
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7.7. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS:

El almacenamiento no es muy conveniente, si se requiere guardar, debe refrigerarse por pocos das y
protegida de la luz.

Dejar al paciente en reposo por 10 minutos, antes de la extraccin de la sangre.
Evitar el torniquete por ms de 30.
7.9. EQUIPO NECESARIO:

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.
7.10. METODO DE ESTANDARIZACION Y CALIBRACION:

patologico deben estar entre el valor medio () 2 DS y es as como los resultados se pueden reportar.
el anormal.
LEVEY JENNING.
E control de calidad en nuestro laboratorio es vigilado diariamente para darle una confiabilidad del 100 %

Los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se deben verificar para confirmar
su veracidad.
Muestras muy ictricas y valores bajos es indispensable repetirlos.
Lecturas negativas, se rechazan y repiten.
Lectura de la bilirrubina directa mayor que la total, se rechaza y se toman los correctivos necesarios.
7.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES

Calibracin del analizador. (remitirse al manual del analizador)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Centrifugar la muestra en los primeros 30 minutos.

Refrigerar muestras que no se procesen el mismo da a 4C, inmediatamente se separe el cogulo.
Confirmar linearidad de la prueba y diluir si es necesario.
7.13. PROCEDIMIENTO Y LECTURA:
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de Bilirrubina Total y/o Bilirrubina directa o
al hacer la programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de Bilirrubina Total y/o
Bilirrubina directa. Ver manual de funcionamiento del Analizador.
7.14. CLCULOS:
Tiempo de reaccin/ 10 / 6/8.
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL
Pipeteo de reactivo R1 120 L
R2 24 L
Volmenes de muestra
6.7 L

muestra.
Factores de conversin: mol/L x 0.0585 = mg/dL
mg/dL x 10 = mg/L
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 36 de 167
mg/dL x 17.1 = mol/L

BILIRRUBINA TOTAL:
Tiempo de reaccin/ 10 / 10/25.
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL
Pipeteo de reactivo
R1 124 L
R2 25 L
Volmenes de muestra
2 L

muestra.
mg/dL x 10 = mg/L
mg/dL x 17.1 = mol/L
7.15. CALIBRACION:

S2: C.f.a.s.
Modo de calibracin: Regresion Lineal.
7.16. EXPRESION DEL RESULTADO:

En el laboratorio los resultados se expresan en mg/dl.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 37 de 167

Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 25 (concentracin de hemoglobina: aprox. 25
mg/dL).
Lipemia: Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 750. La correlacin entre el ndice L
(correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos no es concluyente.
Frmacos: No se han registrado interferencias con paneles de frmacos de uso comn en concentraciones
teraputicas.
Excepcin: La fenilbutazona proporciona resultados artificialmente bajos de la bilirrubina.
En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la gammapata, particularmente del tipo
IgM (macroglobulinemian de Waldenstroem).
Para el diagnstico, los resultados obtenidos con el test siempre deben evaluarse junto a la anamnesis del
En ciertos casos, cuando casi la totalidad de la bilirrubina que reacciona se encuentra en forma directa, el
valor de la bilirrubina directa puede resultar ligeramente ms elevado que el de bilirrubina total. Si es as, el
resultado para la bilirrubina total debe indicarse tanto para la bilirrubina directa como para la bilirrubina
total.
BILIRRUBINA TOTAL:
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 50 (concentracin de hemoglobina: aprox.50
mg/dL con una concentracin de bilirrubina total de 1.0 mg/dL). Sin interferencias significativas en
neonatos hasta un ndice H de 400 (concentracin aproximada de hemoglobina: 400 mg/dL con una
concentracin
de bilirrubina total de 8.8 mg/dL).
Lipemia: Sin interferencia significativa hasta un ndice L de 300 con una concentracin de bilirrubina total
de (1.0 mg/dL). La correlacin entre el ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de
triglicridos no es concluyente.
teraputicas.6,7
El frmaco Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar interferencias con los resultados.
Indicn: Sin interferencia significativa por indicn con niveles de hasta 3 mg/dL
30 mg/L con una concentracin de bilirrubina total de (1.0 mg/dL).
IgM (macroglobulinemia de Waldenstroem).
Los resultados de muestras de pacientes con ciertos tipos de mieloma mltiple pueden mostrar un error
sistemtico positivo en la recuperacin. El error sistemtico y su gravedad varan de paciente a paciente y
no se presenta en todos los pacientes de mieloma mltiple.

Bilirrubina directa:( 0.30 mg/dL)
Bilirrubina total:
Adultos: (hasta 1.2 mg/dL)
Nios 1 mes8 hasta (hasta 1.0 mg/dL)
Estudio del intervalo de referencia con 500 muestras de suero humano bien
caracterizadas:
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PROCEDIMIENTOS
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Hombres hasta (hasta 1.4 mg/dL)

Mujeres hasta (hasta 0.9 mg/dL)
Alto riesgo de desarrollar una hiperbilirrubinemia clnicamente significativa:
Neonatos: a trmino y casi a trmino.
Edad del neonato:
24 horas ( 8.0* mg/dL)
48 horas ( 13.0* mg/dL)
84 horas ( 17.0* mg/dL)
pacientes.
7.19. INTERVALOS DE MEDICIONl - LINEALIDAD DEL MTODO:

Bilirrubina directa: 0.09-17 mg/dL.
Bilirrubina total: 0.1-38.0 mg/dL.
7.20. ANOTACIONES SOBRE INTERFERENCIA TCNICA:

La luz directa solar a temperatura ambiente causa disminucin de la bilirrubina en 50% en el
intervalo de una hora.
La cafena y la teofilina disminuyen los valores de la bilirrubina srica.
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Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 39 de 167
7.21.BIBLIOGRAFA
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Villa de Navarro, Martha y Sols de G, Maria Elena. Guias para laboratorio. Qumica clnica I. U. De A.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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8. COLESTEROL
El colesterol es una sustancia lpica sintetizada por el hgado a partir de protenas, carbohidratos y grasa
ingerida que esta integrada por fracciones lipoprotenas que se desintegran segn su densidad VLDL, LDL Y
HDL. La mayor parte se excreta por bilis. Su principal uso es para el diagnstico de arteriosclerosis y significa
el acumulo de sustancias grasas en las paredes de las arterias. El colesterol de baja densidad denominada
LDL es la encargada de depositarse en las paredes arteriales y la de alta densidad HDL contrarresta los
efectos nocivos de la LDL, la VLDL est directamente relacionada con los triglicridos.
8.1. METODO:
Mtodo enzimtico colorimtrico.
8.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Los steres de colesterol se desdoblan por la accin de la colesterol esterasa a colesterol libre y cidos
grasos. La colesterol oxidasa cataliza entonces la oxidacin de colesterol a colest-4-en-3-ona y perxido de
hidrgeno. En presencia de peroxidasa, el perxido de hidrgeno formado produce la unin oxidativa del
fenol y la 4-aminofenazona para formar un colorante rojo de quinona-imina. La intensidad cromtica del
colorante formado es directamente proporcional a la concentracin de colesterol. Se determina midiendo
el aumento de la absorbancia.
8.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO.

R1 Tampn PIPES: 225 mmol/L, pH 6.8; Mg2+: 10 mmol/L; colato sdico: 0.6 mmol/L; 4-
aminofenazona: 0.45 mmol/L; fenol: 12.6 mmol/L; ter poligliclico de alcohol graso: 3 %;
colesterol esterasa (Pseudomonas spec.): 25 kat/L ( 1.5 U/mL); colesterol oxidasa (E. coli): 7.5
kat/L ( 0.45 U/mL); peroxidasa (rbano picante): 12.5 kat/L ( 0.75 U/mL); estabilizadores;
conservante.

CHOL2

Suero, plasma heparinizado o EDTA.
No emplear plasma con citrato, oxalato o fluoruro.
Estabilidad:
Siete das a temperatura ambiente (15C 25C).
Siete das refrigerado a 2 8 C
Tres meses congelado a (-15)( 25C).
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PROCEDIMIENTOS
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8.6. METODO RECOLECCIN DEL ESPCIMEN:

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina o EDTA.

Refrigerado.

Suspender el consumo de alcohol por lo menos 48 horas antes de la venoclisis.
Tener un ayuno por lo menos de 12 horas(si va acompaado de triglicridos).
Mantener un reposo de 15 minutos antes de extraer la sangre.
El torniquete no debe permanecer puesto por ms de 30.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.
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PROCEDIMIENTOS
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El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de colesterol o al hacer la programacin
de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de colesterol. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
8.14. CLCULOS:
Tipo de medicin 1 punto
Tiempo de reaccin/ 10 / 70
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL (mmol/L, g/L)
R1 47 L 25 L
Volmenes de muestra
2 L

muestra.
Factores de conversin: mmol/L x 38.66 = mg/dL
mmol/L x 0.3866 = g/L
mg/dL x 0.0259 = mmol/L
8.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
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PROCEDIMIENTOS
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- si fuera necesario segn los procedimientos de control de calidad.

Los resultados se expresan en mg/dl.

Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 16 para la bilirrubina conjugada y de 14
para la bilirrubina sin conjugar, lo cual equivale a una concentracin aproximada de bilirrubina
conjugada de 16 mg/dL y a una concentracin aproximada de bilirrubina sin conjugar de 14
mg/dL.
aprox. 700 mg/dL).
paciente, exmenes clnicos y los resultados de otros anlisis.

Nivel ideal de colesterol (< 200 mg/dL)
Colesterol elevado lmite (200-240 mg/dL)
Colesterol alto ( 240 mg/dL)
Estos valores se dan a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios
intervalos de normalidad.

3.86mg/dL a 800 mg/dL.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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8.20 BIBLIOGRAFA
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Cohn JS, McNamara JR, Schaefer EJ. Lipoprotein Cholesterol Concentrations in the Plasma of Human
Subjects as Measured in the Fed and Fasted States. Clin Chem 1988;34:2456-2459.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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9. COLESTEROL HDL.
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) son responsables del transporte inverso del colesterol de las clulas
perifricas al hgado. En el hgado, el colesterol es transformado a cidos biliares excretados al intestino a
travs de las vas biliares.
La monitorizacin del HDL en suero es clnicamente importante porque existe una correlacin inversa entre
la concentracin del colesterol HDL y el riesgo de enfermedad Aterosclertica. Valores elevados del HDL
protegen contra cardiopatas coronarias, mientras que valores disminuidos del mismo, especialmente en
combinacin con valores elevados de triglicridos, implican un elevado riesgo cardiovascular.
9.1. MTODO:
Test colorimtrico enzimtico homogneo.
9.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

En presencia de iones de magnesio, el sulfato de dextrano forma complejos hidrosolubles, selectivamente
con LDL, VLDL y quilomicrones resistentes contra las enzimas modificadas con PEG.
La concentracin del colesterol HDL se determina enzimticamente mediante la colesterol esterasa y
colesterol oxidasa acopladas con PEG a los grupos amnicos (aprox. 40 %).
La colesterol esterasa provoca el desdoblamiento de los steres de colesterol a colesterol libre y cidos
grasos.
En presencia de oxgeno, el colesterol es oxidado por la colesterol oxidasa a 4-colestenona y perxido de
hidrgeno.
Bajo la accin cataltica de la peroxidasa, el perxido de hidrgeno formado reacciona con 4-
aminoantipirina y HSDA para formar un colorante purpreo azul. La intensidad del colorante es
directamente proporcional a la concentracin de colesterol que se mide fotomtricamente.

R1: Tampn HEPES: 10.07 mmol/L, CHES 96.95 mmol/L, pH 7.4; sulfato de dextrano: 1.5 g/L; nitrato de
magnesio hexahidratado: > 11.7 mmol/L; HSDA: 0.96 mmol/L; ascorbato oxidasa (Eupenicillium spec.,
recombinado): > 50 kat/L; peroxidasa (rbano picante): > 16.7 kat/L; conservante.
R2: Tampn HEPES: 10.07 mmol/L; pH 7.0; PEG-colesterol esterasa (Pseudomonas spec.): > 3.33 kat/L;
PEG-colesterol oxidasa (Streptomyces sp., recombinado): > 127 kat/L; peroxidasa (rbano picante): >
333 kat/L; 4-amino-antipirina: 2.46 mmol/L; conservante.

El color rosa fuerte propio del reactivo de colesterol no interfiere con el test.
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PROCEDIMIENTOS
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9.5. MATERIAL DE PRUEBA:
Suero.
El plasma tratado con EDTA produce valores disminuidos.


Refrigerado.

El paciente debe guardar un ayuno mnimo de 12 a 14 horas.
Abstinencia de alcohol mnimo de 3 das.
El paciente debe tener una postura adecuada a la hora de la toma de la muestra.
Mantener un reposo de 15 minutos antes de extraer la sangre.
El torniquete no debe permanecer puesto por ms de 30.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas

el anormal.
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veracidad.
9.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS NACEPTABLES:
Todas estas acciones de control de calidad, estandarizacin, calibracin en el laboratorio estn
dirigidas hacia la meta de obtener resultados completamente fiables.
9.13. PROCEDIMIENTO - LECTURA:

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de HDL o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de HDL. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
9.14. CLCULOS:
Puntos de medicin
R1 150 L -
R3 50 L -
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PROCEDIMIENTOS
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Volmenes de muestra
2.5 L
muestra.
mmol/L x 0.3866 = g/L
9.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s. Lipids.

Los resultados de HDL colesterol se expresan en mg/dL.

para la bilirrubina sin conjugar (concentracin de la bilirrubina conjugada: aprox. 30 mg/dL,
concentracin de la bilirrubina sin conjugar: aprox. 60 mg/dL).
aprox. 1.200 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 1800. Tampoco se produce
interferencia significativa por triglicridos nativos hasta concentraciones de (1200 mg/dL). La
correlacin entre el ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos no es
concluyente.
Otros: Las concentraciones elevadas de cidos grasos libres y de protenas desnaturalizadas pueden
causar valores falsos elevados de colesterol HDL. En casos aislados, las concentraciones elevadas de
inmunoglobulinas pueden proporcionar resultados falsos elevados de colesterol LDL.
Las concentraciones de cido ascrbico de hasta (50 mg/dL) no interfieren con el test.
Una funcin heptica anormal afecta el metabolismo de lpidos; en estos casos, el valor diagnstico de
los resultados de colesterol HDL y LDL es limitado. En ciertos pacientes con una funcin heptica
patolgica, los resultados de colesterol HDL pueden diferir considerablemente respecto de los
obtenidos por el mtodo de comparacin designado.
concentraciones teraputicas.25,26
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Sin riesgo Riesgo moderado Alto riesgo
Mujeres: > 1.68 mmol/L 1.15-1.68 mmol/L < 1.15 mmol/L
(> 65 mg/dL) (45-65 mg/dL) (< 45 mg/dL)
Hombres: > 1.45 mmol/L 0.90-1.45 mmol/L < 0.90 mmol/L

(> 55 mg/dL) (35-55 mg/dL) (< 35 mg/dL)
3-121 mg/dL
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PROCEDIMIENTOS
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9.20. BIBLIOGRAFA
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Hatch FT, Lees RS. Practical methods for plasma lipoprotein analysis. Adv Lipid Res 1968;6:1-68.
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9.a. COLESTEROL LDL
Es la lipoprotena de baja densidad, derivada principalmente de la VLDL y posiblemente de los

quilomicrones.
El hgado tiene un papel importante en la degradacin de la LDL, es la mas aterognica y transporta
colesterol, compuesta por este en un 70%.
LDL = CT HDL VLDL
Los valores de referencia son <130 mg/dl.

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9.b. COLESTEROL VLDL
Es una lipoprotena de muy baja densidad, aterognica, rica en triglicridos, su cantidad excesiva produce
plasmas turbios.
Los triglicridos de la VLDL se sintetizan en le intestino e hgado a partir de cidos grasos no esterificados
endgenos. La ingestin de hidratos de carbono y administracin de insulina pueden incrementar la sntesis
heptica de la VLDL a travs de un aumento de la sntesis de cidos grasos esterificados; esta tiene una
vida media en individuos normales de 2 a 4 horas y es hidrolizada por el sistema de lipoprotein-lipasa
extraheptica. Es evidente que esta lipoprotena es el principal precursor de la lipoprotena de baja
densidad.
En el laboratorio el resultado de la VLDL es calculado automticamente por el Analizador automatizado

mediante la formula siguiente:
VLDL = TRIGLICRIDOS
5
Cabe aclarar que esta relacin se pierde cuando los triglicridos son >300mg/dl.
Las VLDL manejan valores de referencia <30 mg/dl.
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10. CREATININ QUINASA MB/CPK-MB
La creatincinasa (CK) presenta tres isoenzimas dimricas compuestas por subunidades monomricas de
dos tipos. Las isoenzimas comprenden las tres combinaciones posibles de los monmeros, M (derivado del
msculo esqueltico) y B (derivado del cerebro), segn lo representa la denominacin MM, MB y BB.
Si bien son numerosos los rganos que contienen CK, las isoenzimas se distribuyen de forma diferente en
cada uno. El msculo esqueltico es muy rico en isoenzima MM, mientras que el cerebro, el estmago, el
intestino, la vescula y los pulmones contienen principalmente la isoenzima BB. La isoenzima MB se
determina slo en el tejido miocrdico en cantidades considerables (del 15 al 20 %). As, la actividad srica
total de CK se encuentra aumentada en una gran cantidad de enfermedades. Esta falta de especificidad
constituye una limitacin de su valor diagnstico. Sin embargo, las notables diferencias existentes entre los
patrones isoenzimticos en los diferentes rganos han convertido a la CK en una de las enzimas ms tiles
para el diagnstico del infarto agudo de miocardio. La CK-MB se detecta en suero indicando su presencia
exclusiva en el tejido miocrdico. La determinacin en serie de las isoenzimas CK en laboratorios clnicos se
aplica con mayor frecuencia para corroborar el diagnstico de sospecha del infarto de miocardio.
Tras la inmunoinhibicin de la subunidad CK-M con anticuerpos, la actividad de la CK-B se determina
mediante un mtodo estandarizado para la determinacin de CK con reaccin inversa y activacin por
NAC, segn lo recomendado por la Sociedad Alemana de Qumica Clnica (DGKC) en 1977 y por la
Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC) en 2002. El presente test cumple con las
recomendaciones de la IFCC y de la DGKC pero ha sido mejorado en cuanto al rendimiento y la
estabilidad.
La CK-MB aumenta notablemente en el infarto cardaco y lo hace progresivamente segn su extensin y
evolucin clnica. Hay entidades que presentan ligeros aumentos y generalmente muy estables, que se
deben tener en cuenta. Aumenta ligeramente casi siempre cerca de los lmites de la normalidad, en
fibrilacin ventricular, falla congestiva cardaca, cardioversin, angiografa coronaria y angioplastia
coronaria.
10.1. MTODO:
Test UV inmunolgico.
10.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Las subunidades CK-M son inhibidas por anticuerpos especficos.
Puesto que la CK-BB pocas veces aparece en suero, se considera que la actividad de la CK-B se deriva de
la CK-MB presente en la muestra.
La actividad de las subunidades CK-B se determina y multiplica por 2 para poder estimar la actividad de
CK-MB. La CK es activada por la N-acetilcistena (NAC). En una reaccin primaria, la CK activada cataliza
la desfosforilacin del fosfato de creatina para formar creatina y ATP. En una reaccin de acoplamiento
catalizada por la hexocinasa (HK), la glucosa es fosforilada por ATP para formar D-glucosa-6-fosfato (G6P).
Finalmente, la glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa (G6PDH) cataliza la oxidacin de G6P por NADP+ para
formar el 6-fosfogluconato y NADPH. CK Fosfato de creatina + ADP creatina + ATP HK ATP + D-glucosa ADP
+ G6P.
La velocidad de formacin de NADPH es directamente proporcional a la actividad cataltica de la CK-MB
Se determina por fotometra midiendo el aumento de la absorbancia.
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PROCEDIMIENTOS
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R1 Imidazol: 58,0 mmol/L, pH 6,0; N-acetilcistena: 40,0 mmol/L; EDTA: 3,0 mmol/L; AMP: 10,0 mmol/L;
pentafosfato de diadenosina: 24,0 mol/L;
NADP+: 9,5 mmol/L, Mg2+: 20,0 mmol/L; D-glucosa: 40,0 mmol/L; estabilizador
R2 EDTA: 3,0 mmol/L, pH 9,1; HK (levadura): 600 kat/L; G6PDH (microbiano): 600 kat/L; ADP: 12,0
mmol/L; fosfato de creatina: 180 mmol/L; N-metildietanolamina: 69,0 mmol/L; anticuerpos monoclonales de
ratn inhibidores de la CK-M humana (capacidad de inhibicin 2.000 U/L de CK-MM); conservante;
estabilizador; detergente.
CKMBL: Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta
del cobas c pack.
Diluyente: NaCl al 9 % Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c
pack.

Suero o plasma con EDTA Heparina.
Estabilidad en suero: 8 horas a 15-25 C
8 das a 2-8 C
4 semanas a (-15)-(-25) C
Estabilidad en plasma con heparina:
8 horas a 15-25 C
5 das a 2-8 C
8 das a (-15)-(-25) C


Refrigerada.

Evitar actividad corporal intensa y de larga duracin 48 horas antes de la venopuncion porque produce
una considerable elevacin de la concentracin de la enzima.
En el momento de la extraccin sangunea evitar la contaminacin con el lquido muscular que puede
elevar los valores de la creatincinasa.
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Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.
10.10. MTODO DE ESTANDARIZACIN Y CALIBRACIN:

En el laboratorio la variabilidad se describe en los equipos utilizados (mediante parmetros como el rango,
la desviacin estndar (DS) y el coeficiente de variabilidad (CV); para evaluar los resultados del control de
anormal; o los controles normal y anormal deben estar entre el valor medio ( ) 2 DS y es as como los
resultados se pueden reportar.
Por lo general los equipos automatizados utilizados en el laboratorio nos controla la calidad de todos los
procesos utilizando el promedio de los controles corridos y la DS los cuales deben ser llevados a las grficas
de LEVEY JENNING, sta es construida para cada una de las pruebas tanto para el control normal como
para el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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SECCION QUIMICA
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programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de CPK-MB. Ver manual de
10.13. CLCULO:
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL (mol/L, mg/L)
R1 72 L 25 L
R3 14 L 20 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
10.14. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
Factor de conversin: U/L x 0,0167 = kat/L

Los resultados se expresan en U/L (Suero o plasma)

Suero/plasma:
Determinar la actividad total de la CK antes de realizar el ensayo de CK-MB. La cantidad de
anticuerpos anti-CK-M humana en el reactivo CK-MB es suficiente para inhibir completamente una
actividad de CK-MM de hasta 2.000 U/L. Si la actividad total de la CK excede 2.000 U/L, la muestra
requiere ser diluida pues no puede garantizarse la inhibicin completa de la subunidad CK-M. El
mtodo CK-MB no determina nicamente la CK-MB, sino tambin la CK-BB, la CK mitocondrial o la
IgG-CK-BB presente en el suero de pacientes. Estas ltimas fuentes de actividad de la CK-B pueden
distinguirse por la persistencia de valores elevados de CK-MB durante un largo perodo de tiempo. Es
posible emplear la electroforesis para confirmar isoenzimas CK atpicas.
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PROCEDIMIENTOS
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Adenilatocinasa: La adenilatocinasa (AK) puede causar interferencias positivas. La AK en sangre

puede provenir de los eritrocitos, los msculos y el hgado. A fin de reducir a un mnimo la
interferencia por AK, el reactivo incluye AMP y Ap5A. La mezcla de AMP/Ap5A causa una inhibicin
del 97 % de la AK proveniente de los eritrocitos y los msculos, as como una inhibicin del 95 % de la
AK proveniente del hgado. Una leve actividad residual de la AK no influye el anlisis de la CK total,
si bien puede afectar las actividades bajas de CK-MB.
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 1.000 (concentracin de
hemoglobina: aprox. 6 mol/L 10 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencia significativa hasta un ndice L de 200 No existe una
triglicridos.
Con fines diagnsticos, los resultados obtenidos con el test siempre deben evaluarse junto al
historial del paciente, los exmenes clnicos y los resultados de otros anlisis.

Para personas sanas: < 25 U/L (< 0,421 kat/L)
Para el diagnstico del infarto de miocardio utilizando conjuntamente CK y CK-MB (actividad) y
representando un valor consensual de CK basado en una larga experiencia:
1. CKhombres > 190 U/L (3,12 kat/L)
CKmujeres > 167 U/L (2,87 kat/L)
2. CK-MB > 24 U/L (0,40 kat/L)
3. La actividad de CK-MB constituye el 6-25 % de la actividad de la
CK total.
Frente a la sospecha de un infarto de miocardio, en caso de que los valores medidos sean inferiores a los
lmites indicados, puede tratarse de un infarto reciente. En este caso deberan repetirse las determinaciones
al cabo de 4 horas.
La mxima eficiencia diagnstica de la determinacin de CK-MB se obtiene si se emplea un protocolo de
muestreo secuencial y se toma en cuenta un padrn temporal de actividad durante un perodo de 6 a 48
horas.

3-500 U/L (0,05-8,35 kat/L)
La dilucin de las muestras es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas se multiplican
automticamente por el factor 10.
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PROCEDIMIENTOS
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10.19. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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MANUAL DE
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PROCEDIMIENTOS
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11. CREATININ QUINASA TOTAL/CPK
La enzima CK es un dmero compuesto de subunidades procedentes del msculo (M) o del cerebro (B). Se
han identificado tres isoenzimas: MM, MB y BB. La CK srica normal est formada principalmente por la
isoenzima CK-MM. Se observan niveles sricos elevados de CK en las enfermedades del msculo
esqueltico, especialmente en la distrofia muscular. La fraccin CK-MB se encuentra de forma
predominante en el tejido miocrdico y su presencia se detecta, por regla general, en las 48 horas
siguientes al inicio de un infarto de miocardio. La determinacin de la CK total y la CK-MB en el diagnstico
del infarto de miocardio constituye la aplicacin individual ms importante de la medicin de la CK en
qumica clnica. La actividad de la CK srica est aumentada, adems, en los estados posteriores a
isquemia cerebral, enfermedades cerebrovasculares agudas y traumatismos craneales.
11.1. MTODO:
Test UV optimizado
11.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Test UV
CK Fosfato de creatina + ADP creatina + ATP
HK ATP + D-glucosa ADP + G6P
G6PDH G6P + NADP+ D-6-fosfogluconato + NADPH + H+
La velocidad de formacin de NADPH es directamente proporcional a la actividad cataltica de la CK. Se
determina midiendo el aumento de la absorbancia.
Cantidades equimolares de NADPH y ATP se forman simultneamente.
La velocidad de formacin de NADPH medida por fotometra es directamente proporcional a la actividad
de CK.
CREATINFOSFATO + ADP CK CREATINA + ATP
GLUCOSA + ATP HK GLUCOSA-6-P + ADP
GLUCOSA-6-P + NADP+ G6P-DH GLUCONATO-6-P + NADPH + H+
11.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO

R1 Imidazol: 58.0 mmol/L, pH 6.00; N-acetilcistena: 40.0 mmol/L; EDTA:
3.00 mmol/L; AMP: 10.0 mmol/L; diadenosina pentafosfato: 24.0 mol/L;
NADP+: 9.5 mmol/L, Mg2+: 20.0 mmol/L; D-glucosa: 40.0 mmol/L; Conservante; estabilizador
R2 EDTA: 3.00 mmol/L, pH 9.1; HK (levadura): 600 kat/L; G6PDH (microbiano): 600 kat/L; ADP: 12.0
mmol/L; fosfato de creatina: 180 mmol/L; N- etildietanolamina: 69.0 mmol/L; conservante;
estabilizador; detergente
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R1 en posicin B y R2 en posicin C.
CKL Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.

Suero (sin hemlisis). El suero sin hemolizar es la muestra ms adecuada y recomendada por la IFCC.
Plasma (sin hemlisis): tratado con heparina de litio.
Advertencia: Se pueden obtener resultados divergentes en suero y en plasma debido a diferentes grados
de hemlisis como consecuencia del procedimiento de obtencin de muestras.
7 das a 2-8 C
4 semanas a (-15)-(-25) C


Refrigerado.

Evitar actividad corporal intensa y de larga duracin 48 horas antes de la venopuncion porque
produce una considerable elevacin de la concentracin de la enzima.
En el momento de la extraccin sangunea evitar la contaminacin con el lquido muscular que
puede elevar los valores de la creatincinasa.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

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PROCEDIMIENTOS
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el anormal.
LEVEY JENNING.

programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de cido rico. Ver manual de
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PROCEDIMIENTOS
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11.13. CALCULO

Puntos de medicin
R1 61 L 38 L
R2 20 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
11.14. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

Los resultados se expresan en U/L (kat/L)

Suero/plasma:
conjugar (concentracin de bilirrubina conjugada y sin conjugar: aprox. 1026 mol/L 60 mg/dL).
aprox. 124 mol/L 200 mg/dL). La magnitud de la interferencia vara segn el contenido exacto
de eritrocitos.
Lipemia (Intralipid):8 Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 1000. La correlacin entre el
Muestras altamente lipmicas (ndice L > 1000) pueden provocar la aparicin de alarmas de alta
absorbancia. Seleccionar el tratamiento de muestra diluida para el reprocesamiento automtico.
concentraciones teraputicas. El frmaco Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar
interferencias con los resultados. En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la
Al inicio del anlisis deben correr los controles normal y anormal, si dan dentro del rango del valor
esperado se pueden pasar los resultados y montar las muestras.
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PROCEDIMIENTOS
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A los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se le deben hacer medidas
correctivas.

Los resultados diarios del control de calidad se analiza. Si no est dentro del intervalo indicado,
revisar reactivo, equipo, estndar, el material de vidrio o cubetas, la calidad (aspecto) de la
muestra. Tomar los correctivos necesarios de acuerdo a lo arrojado en este anlisis incluyendo
diluciones y correccin de tcnica.
Calibracin del equipo. (Remitirse al manual del equipo).
Centrifugar muestras en los primeros 20 minutos.
Cambio de lote de sueros multicalibradores y reactivos, realizar nueva calibracin del equipo.
Verificar reactivos que correspondan a la prueba pedida y evitar agotamiento de los mismos.
Evitar burbujas en las pipetas de muestras y reactivos.
Muestras que no se procesan el mismo da, refrigerar a 4C, inmediatamente se separe el cogulo.
Asegurar el mantenimiento del equipo.

Los intervalos de referencia dependen en gran medida del grupo de pacientes y de la situacin clnica
especfica.
Para individuos sanos CK kat/L U/L
Hombres 0.655.14 39-308
Mujeres 0.43-3.21 26-192
Hombres/mujeres < 0.42 < 25
Infarto de miocardio: La probabilidad de lesin miocrdica es alta si se cumplen las tres siguientes
condiciones:
kat/L U/L
1 CKhombres > 3.17 > 190
CKmujeres > 2.79 > 167
2 CK-MB > 0.40 > 24
3 La actividad de CK-MB es el 6-25 % de la actividad de la CK total.
Razn CK/MB = (CK MB x 100) = 6 - 25 %

Total CK

7-2000 U/L (0.12-33.4 kat/L)
Determinar las muestras con actividades ms altas por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin de las
muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas usando la
funcin de repeticin del ciclo se multiplican automticamente por el factor 10.
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11.20. BIBLIOGRAFA
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12. CREATININA.
La creatinina se sintetiza endogenamente en el metabolismo muscular de creatina y creatinfosfato. En
una funcin renal normal, es excretada por filtracin glomerular. Las determinaciones de creatinina sirven
para el diagnstico y el control del curso de enfermedades renales agudas y crnicas as como para el
control de dilisis renal.
La concentracin de creatinina en orina puede emplearse como magnitud de referencia para la

excrecin de un analito (albmina, alfa amilasa).
Normalmente no se reabsorbe y se ha observado reabsorcin tubular en insuficiencia cardiaca congestiva
grave y en diabetes mellitus no controlada.
12.1 METODO:
Esta prueba cintica colorimtrica se basa en el mtodo de Jaff.
12.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

El mtodo enzimtico se basa en la conversin de la creatinina a glicina, formaldehdo y perxido de
hidrgeno por la accin de la creatininasa, la creatinasa y la sacrosina oxidasa. Catalizado por la
peroxidasa, el perxido de hidrgeno liberado reacciona con la 4 aminofenazona y el HTIBa formando un
cromgeno de quinonimina. La intensidad cromtica del cromgeno de quinonimina formado es
directamente proporcional a la concentracin de creatinina en la mezcla de reaccin.

R1 Tampn TAPS (cido N Tris (hidroximetil)- metil 3 aminopropanosulfnico): 30 mmol/L; pH 8.1;
creatinasa (microorganismos): 332 kat/L; sarcosina-oxidasa (microorganismos): 132 kat/L;
ascorbato-oxidasa (microorganismos): 33 kat/L; catalasa (microorganismos): 1.67 kat/L; HTIB: 1.2
g/L; detergentes, conservante.
R3 Tampn TAPS: 50 mmol/L; pH 8.0; creatininasa (microorganismos): 498 kat/L; peroxidasa
(rbano picante): 16.6 kat/L; 4 aminofenazona: 0.5 g/L; hexacianoferrato (II) de potasio: 60
mg/L; detergente; conservante

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Suero.
Orina: Recoger las muestras de orina sin aditivos. Pero si se debe recoger la orina con un
conservante para otros analitos, slo puede aceptarse el cido clorhdrico (14-47 mmol/L de orina,
p. ej. 5 mL de HCI al 10 % 5 mL de HCI al 30 % por litro de orina) o bien el cido brico (81 mmol/L,
p. ej. 5 g por litro de orina).
Estabilidad en suero/plasma: 7 das a 15 - 25 C

7 das a 2 - 8 C
3 meses a (-15) - (-25) C
Estabilidad en orina (sin conservante): 2 das a 15 - 25 C
6 das a 2 - 8 C
6 meses a (-15) - (-25) C
Estabilidad en orina (con conservante): 3 das a 15 - 25 C
8 das a 2 - 8 C
3 semanas a (-15) - (-25) C

minutos y, luego decantar el suero, antes de 30 minutos ( si no se sangr en tubo con gel).
Orina de 2, 6, 12 24 horas.
recoleccin.
Guardar refrigerado en frasco bien tapado.

Refrigerado.

No requiere ayuno previo, porque su excrecin depende muy levemente de la alimentacin y la diuresis.
No realizar esfuerzo fsico intenso, por lo menos ocho horas antes del examen.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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SECCION QUIMICA
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El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de creatinina o al hacer la programacin
de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de creatinina. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
12.14. CLCULOS:
Suero o plasma.
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL (mol/L, mmol/L)
R1 77 L -
R3 38 L -
Volmenes de muestra
2 L
Orina.
Puntos de medicin
R1 77 L -
R3 38 L -
Volmenes de muestra
5 L
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muestra.
mol/L x 0.001 = mmol/L
12.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
Intervalo de calibraciones
en blanco
al cabo de 4 semanas dentro de la estabilidad
Calibracin a dos puntos
12.16. EXPRESIN DEL RESULTADO:

Los resultados dependiendo del tipo de muestra se expresan as:
SUERO: Se expresa en mg/dl.
ORINA: Se expresa en mg/24 horas.
Suero/plasma
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 15 para bilirrubina conjugada y de 20
para la bilirrubina sin conjugar (concentracin de bilirrubina conjugada: aprox. 15 mg/dL;
aprox. 800 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 2000. Existe una mnima
correlacin entre el ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos.
cido ascrbico: Valores de cido ascrbico inferiores a 300 mg/L no interfieren en el test.
Excepciones: La rifampicina, la levodopa y el dobesilato de calcio (p.ej. Dexium) pueden acarrear
resultados falsamente reducidos de creatinina. En concentraciones teraputicas, el Dicynone
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SECCION QUIMICA
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(etamsilato) puede provocar valores falsamente bajos. La N etilglicina en concentraciones

teraputicas y la DL prolina en concentraciones 1 mmol/L ( 115 mg/L) proporcionan valores
falsos elevados.
Sin interferencias significativas hasta una concentracin de creatina de 4 mmol/L (524 mg/L).
Las muestras hemolizadas de neonatos, nios o adultos con valores de la hemoglobina fetal 600
mg/dL interfieren en el test.
En concentraciones teraputicas, la 2-fenil-1,3-indandiona (fenindiona) interfiere en el test.
Si la velocidad de filtracin glomerular (VFG) se estima segn la frmula de Schwartz, se pueden
obtener resultados falsos elevados.
Para el diagnstico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en cuenta la
anamnesis del paciente, el anlisis clnico as como los resultados de otros exmenes.
Orina
Ictericia: Sin interferencias significativas con una concentracin de bilirrubina conjugada
aproximada de hasta (70 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta una concentracin de hemoglobina de (1000
mg/dL).
El cido ascrbico < 22.7 mmol/L (< 4000 mg/L), la glucosa < 120 mmol/L (< 2162 mg/dL) y el
urobilingeno < 676 mol/L (< 40 mg/dL) no interfieren en el test.
Excepciones: El dobesilato de calcio (p.ej. Dexium), la levodopa y la -metildopa pueden acarrear
resultados falsamente reducidos de creatinina.
En concentraciones teraputicas, el Dicynone (etamsilato) puede provocar valores falsamente
bajos.
Altas concentraciones de cido homogentsico en muestras de orina
provocan resultados falsos.

Suero/plasma
Adultos
Mujeres (0.51 - 0.95 mg/dL)
Hombres (0.67 - 1.17 mg/dL)
Nios
Neonatos (prematuros) (0.33 - 0.98 mg/dL)
Neonatos (a trmino) (0.31 - 0.88 mg/dL)
2 12 m (0.16 - 0.39 mg/dL)
1 < 3 aos (0.18 - 0.35 mg/dL)
3 < 5 aos (0.26 - 0.42 mg/dL)
5 < 7 aos (0.29 - 0.47 mg/dL)
7 < 9 aos (0.34 - 0.53 mg/dL)
9 < 11 aos (0.33 - 0.64 mg/dL)
11 < 13 aos (0.44 - 0.68 mg/dL)
13 < 15 aos (0.46 - 0.77 mg/dL)
Orina
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1a orina de la maana
Mujeres (29 - 226 mg/dL)
Hombres (40 - 278 mg/dL)
Orina de 24 horas:
Mujeres (720 1510 mg/24 h)
Hombres (980 2200 mg/24 h)
Aclaramiento de creatinina20 66 143 mL/min

Suero/plasma
(0.06 - 30.5 mg/dL)
Determinar las muestras con concentraciones superiores a travs de la funcin de repeticin. Con la
funcin de repeticin, las muestras se diluyen 1:4. Los resultados de las muestras diluidas con la funcin de
repeticin se multiplican automticamente por el factor 4.
Orina
(1.1 - 610 mg/dL)
funcin de repeticin, las muestras se diluyen 1:2.5. Los resultados de las muestras diluidas con la funcin de
repeticin se multiplican automticamente por el factor 2.5.
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Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 72 de 167
12.20. BIBLIOGRAFA
ngel M, Gilberto. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 1993. Ed. Mdica Panamericana. Pgs. 606.
Inserto Biosystems.
ngel M, Gilberto. Diccionario del Laboratorio Clnico. 1996. Ed. Mdica Panamericana. Pgs 303.
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Thomas C, Thomas L. Labordiagnostik von Erkrankungen der Nieren und ableitenden Harnwege. In:
Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 6th ed. Frankfurt/Main: TH-Books 2005;520-585.
Lamb E, Newman DJ, Price CP Kidney function tests In: Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE. Tietz textbook of
clinical chemistry and molecular diagnostics. 4th ed. St.Louis, MO: Elsevier Saunders 2006;797-835.
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Lamb EJ, Tomson CRV, Roderick PJ. Estimating kidney function in adults using formulae. Ann Clin
Biochem 2005;42:321-345.
Miller WG. Editorial on Estimating glomerular filtration rate. Clin Chem Lab Med 2009;47(9):1017-1019
Schwartz GJ, Muoz A, Schneider MF, et al. New Equations to Estimate GFR in Children with CKD. J Am
Soc Nephrol 2009;20:629-637.
Schwartz GJ, Work DF. Measurement and Estimation of GFR in Children and Adolescents. Clin J Am Soc
Nephrol 2009;4:18321843.
Staples A, LeBlond R, Watkins S, et al. Validation of the revised Schwartz estimating equation in a
predominantly non-CKD population. Pediatr Nephrol 2010 Jul 22;25:2321-2326.
Guder W, Fonseca-Wollheim W, Ehret W, et al. Die Qualitt Diagnostischer Proben, 6. Aufl. Heidelberg: BD
Diagnostics, 2009.
Data on file at Roche Diagnostics.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 73 de 167
13. DESHIDROGENASA LCTICA (DHL)
La enzima lactato deshidrogenasa (LDH) se halla ampliamente distribuida en los tejidos, especialmente en
el corazn, el hgado, los msculos y los riones. La LDH srica puede dividirse en cinco isoenzimas
diferentes, discernibles a partir de su movilidad electrofortica. Cada isoenzima es un tetrmero compuesto
de dos subunidades diferentes. Estas subunidades corresponden al corazn y msculo, de acuerdo a sus
cadenas de polipptidos. Existen dos homotetrmeros, la LDH-1 (corazn) y la LDH-5 (msculos), as como
tres isoenzimas hbridas.
Niveles elevados de LDH srica acompaan diversos cuadros patolgicos.
La actividad ms alta se observa en pacientes con anemia megaloblstica, carcinoma diseminado y
shock. Un aumento moderado se produce en los trastornos musculares, el sndrome nefrtico y la cirrosis. En
caso de infarto de miocardio o pulmonar, leucemia, anemia hemoltica y hepatitis no vrica, la actividad
de la LDH slo est ligeramente elevada.
13.1. MTODO:
Anlisis por radiacin ultravioleta.
13.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Anlisis por radiacin ultravioleta.
La lactato deshidrogenasa cataliza la conversin de L-lactato a piruvato.
En este proceso, el NAD se reduce a NADH.
LDH L-lactato + NAD+ piruvato + NADH + H+
La tasa inicial de formacin de NADH es directamente proporcional a la actividad cataltica de la LDH. Se
determina por fotometra midiendo el aumento de la absorbancia.
Piruvato + NADH + H+ LDH L-lactato + NAD+

R1 N-metilglucamina: 400 mmol/L, pH 9.4 (37C); lactato de litio: 62 mmol/L; estabilizadores; conservantes.
R2 NAD: 62 mmol/L; estabilizadores; conservantes

LDHI2, LDIP2 Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.
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Suero (sin hemlisis).
Plasma tratado con heparina de litio. El plasma debe estar exento de hemlisis y de clulas.
La muestra puede conservarse durante 4 das a 2-8 C o bien 6 semanas a -20 C.

recoleccin.

Refrigerado.

El paciente debe tener un ayuno de 8 horas.
Debe, 48 horas antes suspender el consumo de alcohol, 24 horas antes no ingerir carnes rojas,
mariscos ni frijoles, 2 das antes evitar ejercicio fuerte porque aumenta la concentracin del cido
rico.
Suspender el consumo de drogas como alopurinol, cortisona, salicilatos, analgsicos, vitamina C.
Concentraciones altas de hemoglobina dan valores altos de cido rico, al igual que sueros muy
lipmicos.
La ingestin de etanol incrementa los valores del cido rico debido al lactato producido por la
oxidacin del etanol que inhibe su secrecin.
Varios frmacos y sustancias qumicas interfieren en la excrecin renal del urato.
El cido etacrinico, la furosemida y los diurticos tienen un efecto antiuricosrico.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 75 de 167
el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.


El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de LDH o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de LDH. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
13.14. CALCULO
Puntos de medicin
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Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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R1 100 L
R2 20 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
13.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

Los resultados se expresan en U/L (Suero o plasma)

Suero/plasma:
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 60 (concentracin de bilirrubina
aprox. 9.6 mol/L 15 mg/dL). La contaminacin con eritrocitos provoca resultados aumentados,
ya que el nivel de analito en los eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la
interferencia vara segn el contenido de analito en los eritrocitos lisados.

Mujeres 135-214 U/L (2.25-3.55 kat/L)
Hombres 135-225 U/L (2.25-3.75 kat/L)
Nios (2-15 aos) 120-300 U/L (2.00-5.00 kat/L)
Recin nacidos (4-20 das) 225-600 U/L (3.75-10.0 kat/L)

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10-1000 U/L (0.17-16.7 kat/L)

Determinar las muestras con actividades ms altas por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin
automtica de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:2.5 Los resultados de las muestras
diluidas por la funcin de repeticin del ciclo se multiplican automticamente por el factor 2.5.
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13.20. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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14. DEPURACIN DE CREATININA.

Nos mide la capacidad excretora que tiene el rin, es decir la forma como se elimina una sustancia bien
sea por filtracin, excrecin o secrecin.
Una prueba de depuracin de creatinina nos mide los ml de plasma que han sido limpiados de una
sustancia determinada mediante la actividad renal en un tiempo determinado, compara los ml del plasma
con los ml de orina.
En individuos normales la depuracin de creatinina va ligada a la velocidad de filtracin glomerular, en

enfermedades renales avanzadas excede a la velocidad de filtracin glomerular a causa de la secrecin
tubular, por lo que el verdadero valor de la velocidad de la filtracin glomerular esta por debajo de la
depuracin de creatinina.
La depuracin de creatinina disminuye en mujeres, personas de edad avanzada, nios y personas de baja
estatura.
14.1. MTODO:
Test cintico sin desproteinizacin segn el mtodo de Jaff.
14.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

El mtodo enzimtico se basa en la conversin de la creatinina a glicina, formaldehdo y perxido de
hidrgeno por la accin de la creatininasa, la creatinasa y la sacrosina oxidasa. Catalizado por la
peroxidasa, el perxido de hidrgeno liberado reacciona con la 4 aminofenazona y el HTIBa formando un
cromgeno de quinonimina. La intensidad cromtica del cromgeno de quinonimina formado es
directamente proporcional a la concentracin de creatinina en la mezcla de reaccin.

R1 Tampn TAPS (cido N Tris (hidroximetil)- metil 3 aminopropanosulfnico): 30 mmol/L; pH 8.1;
creatinasa (microorganismos): 332 kat/L; sarcosina-oxidasa (microorganismos): 132 kat/L;
ascorbato-oxidasa (microorganismos): 33 kat/L; catalasa (microorganismos): 1.67 kat/L; HTIB: 1.2
g/L; detergentes, conservante.
R3 Tampn TAPS: 50 mmol/L; pH 8.0; creatininasa (microorganismos): 498 kat/L; peroxidasa (rbano
picante): 16.6 kat/L; 4 aminofenazona: 0.5 g/L; hexacianoferrato (II) de potasio: 60 mg/L;
detergente; conservante

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Suero.
Orina de 6, 12 o 24 horas: Recoger las muestras de orina sin aditivos. Pero si se debe recoger la orina
con un conservante para otros analitos, slo puede aceptarse el cido clorhdrico (14-47 mmol/L de
orina, p. ej. 5 mL de HCI al 10 % 5 mL de HCI al 30 % por litro de orina) o bien el cido brico (81
mmol/L, p. ej. 5 g por litro de orina).
Estabilidad en suero/plasma: 7 das a 15 - 25 C

7 das a 2 - 8 C
3 meses a (-15) - (-25) C
Estabilidad en orina (sin conservante): 2 das a 15 - 25 C
6 das a 2 - 8 C
6 meses a (-15) - (-25) C
Estabilidad en orina (con conservante): 3 das a 15 - 25 C
8 das a 2 - 8 C
3 semanas a (-15) - (-25) C
recoleccin.

Refrigerado.

No requiere ayuno previo, porque su excrecin depende muy levemente de la alimentacin y la diuresis.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas

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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.


Medir el volumen de la orina recolectada en 6, 12 24 horas.
Tomar una muestra representativa y centrifugar 10 ml de esta orina.
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de creatinina o
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al hacer la programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de creatinina. Ver

manual de funcionamiento del Analizador.
14.14. CLCULOS:
Suero o plasma.
Puntos de medicin
R1 77 L -
R3 38 L -
Volmenes de muestra
2 L
Orina.
Puntos de medicin
R1 77 L -
R3 38 L -
Volmenes de muestra
5 L
Co x dln x vol de orina =ml/min

Cs x 1440
Co: Creatinina en orina.

Cs: Creatinina en suero.
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dln: dilucin de la orina 1:50 o 1:20

muestra.
mol/L x 0.001 = mmol/L
14.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
Intervalo de calibraciones
en blanco
al cabo de 4 semanas dentro de la estabilidad
Calibracin a dos puntos
14.16. EXPRESIN DEL RESULTADO:

Para esta prueba los resultados se expresan en ml /min.
Suero/plasma
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 15 para bilirrubina conjugada y de 20
para la bilirrubina sin conjugar (concentracin de bilirrubina conjugada: aprox. 15 mg/dL;
aprox. 800 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 2000. Existe una mnima
correlacin entre el ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos.
cido ascrbico: Valores de cido ascrbico inferiores a 300 mg/L no interfieren en el test.
Excepciones: La rifampicina, la levodopa y el dobesilato de calcio (p.ej. Dexium) pueden acarrear
resultados falsamente reducidos de creatinina. En concentraciones teraputicas, el Dicynone
(etamsilato) puede provocar valores falsamente bajos. La N etilglicina en concentraciones
teraputicas y la DL prolina en concentraciones 1 mmol/L ( 115 mg/L) proporcionan valores
falsos elevados.
Sin interferencias significativas hasta una concentracin de creatina de 4 mmol/L (524 mg/L).
Las muestras hemolizadas de neonatos, nios o adultos con valores de la hemoglobina fetal 600
mg/dL interfieren en el test.
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En concentraciones teraputicas, la 2-fenil-1,3-indandiona (fenindiona) interfiere en el test.

Si la velocidad de filtracin glomerular (VFG) se estima segn la frmula de Schwartz, se pueden
obtener resultados falsos elevados.
Orina
Ictericia: Sin interferencias significativas con una concentracin de bilirrubina conjugada
aproximada de hasta (70 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta una concentracin de hemoglobina de (1000
mg/dL).
El cido ascrbico < 22.7 mmol/L (< 4000 mg/L), la glucosa < 120 mmol/L (< 2162 mg/dL) y el
urobilingeno < 676 mol/L (< 40 mg/dL) no interfieren en el test.
Excepciones: El dobesilato de calcio (p.ej. Dexium), la levodopa y la -metildopa pueden acarrear
resultados falsamente reducidos de creatinina.
En concentraciones teraputicas, el Dicynone (etamsilato) puede provocar valores falsamente
bajos.
Altas concentraciones de cido homogentsico en muestras de orina
provocan resultados falsos.

Los rangos de referencia para esta prueba son de 66 a 143 ml /min.
Suero/plasma
(0.06 - 30.5 mg/dL)
funcin de repeticin, las muestras se diluyen 1:4. Los resultados de las muestras diluidas con la funcin de
repeticin se multiplican automticamente por el factor 4.
Orina
(1.1 - 610 mg/dL)
funcin de repeticin, las muestras se diluyen 1:2.5. Los resultados de las muestras diluidas con la funcin de
repeticin se multiplican automticamente por el factor 2.5..
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14.20. BIBLIOGRAFA
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Thomas C, Thomas L. Labordiagnostik von Erkrankungen der Nieren und ableitenden Harnwege. In:
Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 6th ed. Frankfurt/Main: TH-Books 2005;520-585.
Lamb E, Newman DJ, Price CP Kidney function tests In: Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE. Tietz textbook of
clinical chemistry and molecular diagnostics. 4th ed. St.Louis, MO: Elsevier Saunders 2006;797-835.
http://www.kidney.org/.
http://www.nkdep.nih.gov/.
Lamb EJ, Tomson CRV, Roderick PJ. Estimating kidney function in adults using formulae. Ann Clin
Biochem 2005;42:321-345.
Miller WG. Editorial on Estimating glomerular filtration rate. Clin Chem Lab Med 2009;47(9):1017-1019
Schwartz GJ, Muoz A, Schneider MF, et al. New Equations to Estimate GFR in Children with CKD. J Am
Soc Nephrol 2009;20:629-637.
Schwartz GJ, Work DF. Measurement and Estimation of GFR in Children and Adolescents. Clin J Am Soc
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Staples A, LeBlond R, Watkins S, et al. Validation of the revised Schwartz estimating equation in a
predominantly non-CKD population. Pediatr Nephrol 2010 Jul 22;25:2321-2326.
Guder W, Fonseca-Wollheim W, Ehret W, et al. Die Qualitt Diagnostischer Proben, 6. Aufl. Heidelberg: BD
Diagnostics, 2009.
Data on file at Roche Diagnostics.
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15. FOSFATASA ALCALINA (ALP).
La fosfatasa alcalina consta de cuatro genotipos estructurales en suero: el tipo de origen heptico, seo y
renal, el tipo intestinal, el tipo placentario y la variante de las clulas germinales. La fosfatasa alcalina se
encuentra en los osteoblastos, los hepatocitos, los riones, el bazo, la placenta, la prstata, los leucocitos y
en el intestino delgado. El tipo de origen heptico, seo y renal es de particular importancia.
Se registran valores elevados de fosfatasa alcalina en todas las formas de la colestasis, especialmente en la
ictericia obstructiva. Su actividad tambin se incrementa por enfermedades del esqueleto tales como la
enfermedad de Paget, el hiperparatiroidismo, el raquitismo y la osteomalacia, en fracturas y tumores
malignos. En nios y adolescentes se observa frecuentemente un fuerte incremento de la actividad de la
fosfatasa alcalina, pues cuando el crecimiento seo se acelera, la actividad de los osteoblastos aumenta.
15.1. MTODO:
Prueba colorimtrica segn un mtodo estandarizado.
15.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Prueba colorimtrica segn un mtodo estandarizado.
En presencia de iones de magnesio y de cinc, las fosfatasas desdoblan el p-nitrofenilfosfato a fosfato y p-
nitrofenol.
p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol
El p-nitrofenol liberado es directamente proporcional a la actividad cataltica de la ALP. Se determina
midiendo el aumento de la absorbancia.

R1 2-amino-2-metil-1-propanol: 1.724 mol/L, pH 10.44 (30 C); acetato de magnesio: 3.83 mmol/L; sulfato de
zinc: 0.766 mmol/L; cido N-(2-hidroxietil) etelendiamino triactico: 3.83 mmol/L
R2 p-nitrofenilfosfato: 132.8 mmol/L, pH 8.44 (30 C); conservantes

ALP2S, ALP2L Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
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pack.

Suero.
Plasma tratado con heparina de litio.
7 das a 2-8 C
2 meses a (-15)-(-25) C
Suero o plasma heparinizado.
Estabilidad: 7 das o 4-8 C.
2 semanas a -20C.


Refrigerado.

El paciente debe tener un ayudo mnimo de 8 horas.
El paciente debe permanecer por 15 minutos en reposo antes de la venopuncion.
El uso del torniquete no debe prolongarse por ms de 30 segundos.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

Los resultados diarios del control de calidad se analizan. Si no est dentro del intervalo indicado, revisar
reactivo, Analizador, cubetas, la calidad de la muestra (aspecto). Tomar los correctivos necesarios de
acuerdo a lo arrojado en este anlisis incluyendo diluciones y correccin de tcnica.
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de fosfatasa alcalina o al hacer la
programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de fosfatasa alcalina. Ver manual
de funcionamiento del Analizador.
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15.14. CALCULO
Puntos de medicin
R1 75 L 25 L
R2 17 L 21 L
Volmenes de muestra
2.8 L

muestra.
15.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

Los resultados se expresan en U/L

Lipemia (Intralipid): Sin interferencia significativa hasta un ndice L de 2000. No existe una
triglicridos.

Adultos Hombres 40-129 U/L (0.67-2.15 kat/L)
Mujeres 35-104 U/L (0.58-1.74 kat/L)
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Nios de 1 da de edad < 250 U/L (< 4.17 kat/L)

de 2-5 das de edad < 231 U/L (< 3.84 kat/L)
de 6 das-6 meses de edad < 449 U/L (< 7.49 kat/L)
de 7 meses a 1 ao < 462 U/L (< 7.69 kat/L)
de 1-3 aos de edad < 281 U/L (< 4.67 kat/L)
de 13-17 aos de edad (mujeres) < 187 U/L (< 3.11 kat/L)
de 13-17 aos de edad (hombres) < 390 U/L (< 6.51 kat/L)

5-1200 U/L (0.084-20.0 kat/L)
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16. GASES Y ELECTROLITROS
Equilibrio acido-base
La principal funcin del sistema cardio-respiratorio, es suministrar a cada clula del organismo un flujo de
sangre en cantidad y calidad apropiadas para que se pueda vivir en condiciones ideales. Esto se logra
proporcionando materiales esenciales y retirando los productos nocivos; uno de los principales es el CO2,
que es transportado por la sangre venosa y eliminado su exceso a travs de los pulmones. El CO2 al unirse
con el agua forma el cido carbnico.
Co2 + H2O = H2CO3 (cido Carbnico)
Un In hidrgeno es un simple protn liberado a partir de un tomo de hidrgeno.
Las molculas que pueden liberar iones en una solucin reciben el nombre de cidos.
Una base es un in o una molcula que puede aceptar iones de hidrgeno.
In Hidrgeno: El cuerpo humano produce cido de forma continua. Cada da, un individuo adulto normal
produce aproximadamente 20.000 nmol de cido voltil (cido carbnico) y unos 80 nmol de cido no
voltil. La mayor parte de cido voltil se produce en forma de CO2 durante la respiracin celular y
reacciona con agua para formar cido carbnico y bicarbonato. El cido voltil se origina principalmente
a partir de la transformacin metablica de las protenas contenidas en los alimentos.
16.1. MTODO
Mtodo de medicin de Clark, es decir medicin de una corriente provocada por la reduccin de
oxgeno.
Principio de Severinghouse, es decir, medicin potenciomtrica de la variacin del pH en interior del
electrodo, causada por el ingreso de CO2 de la muestra.
16.2. RESPONSABLE
Bacterilogo (a).
16.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO

El principal producto cido del metabolismo celular es el dixido de carbono (CO2) que viene a
representar un 98 % de la carga cida total. Es un cido potencial ya que su hidratacin mediante una
reaccin reversible catalizada por la anhidrasa carbnica, va a generar cido carbnico. El CO2 va a ser
eliminado por los pulmones sin que se produzca una retencin neta de cido, por lo que se denomina
cido voltil.
El metabolismo genera una serie de cidos no voltiles, tambin denominados cidos fijos que representan
de un 1 2 % de la carga cida.
Su principal fuente es el catabolismo oxidativo de los aminocidos sulfurados de las protenas.
16.4. REACTIVOS NECESARIOS

Solucin de trabajo. Listo para su uso.
Controles de calidad (bajo, normal y patolgico).

Los reactivos se conservan a temperatura ambiente. Los controles de calidad se almacenan de 2
C 8 C, al procesar los controles de calidad deben alcanzar temperatura ambiente. La fecha de
caducidad est indicada en la etiqueta de los reactivos y controles de calidad.
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16.5. MATERIAL DE PRUEBA

Sangre heparinizada, suero o plasma.
Estabilidad: sangre heparinizada, medir antes de 30 minutos (no sobrepasar los 60 minutos).
Suero o plasma: Refrigerados entre 4 y 8 C mximo hasta una hora.

La extraccin de sangre para su anlisis debe ser efectuada por personal calificado.
Muestra de sangre entera: Debe tomarse con jeringas o capilares heparinizados y analizarlas lo antes
posible, eliminando las burbujas de aire del recipiente de extraccin de muestra. Cuando la extraccin se
efecta con jeringa, debe mezclarse bien la muestra con el anticoagulante. La muestra debe etiquetarse
correctamente de acuerdo al manual de toma de muestras.
minutos y, luego decantar el suero (si no se sangr en tubo tapa amarilla), antes de 30 minutos, refrigerar
entre 4 y 8 C hasta realizar el anlisis.
Muestra de plasma: sangrar en tubo con anticoagulante (heparina), centrifugar por 15 minutos y separar el
plasma, refrigerar entre 4 y 8 C hasta realizar el anlisis. Las muestras de plasma que tengan ms de una
hora deben volver a centrifugarse para eliminar posibles grumos de fibrina.
16.7. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

Suero y plasma: refrigerado.
Jeringa y capilares: Deben estar envueltas en una gasa, sobre un bloque de hielo, asegurarse que
queden bien protegidas con cinta adhesiva.
16.8. CONDICIONES DEL PACIENTE

La muestra de sangre no requiere ayuno previo.
Reposo previo de 5 a 10 minutos.
Mnimo 30 minutos si se le hizo cambio ventilatorio
Jeringa de vidrio o plstico heparinizada (0.05 ml de 1000 U/ml por cada ml de sangre o menos de
un 10% para evitar diluciones) (Espacio muerto de aguja 22 es aprox. 0.20 ml)
Refrigerar despus de 15 minutos.
Identificar correctamente
Para el anlisis de gases arteriales debe llevar la siguiente informacin: Temperatura, hemoglobina y
% de oxigeno.
16.9. EQUIPO NECESARIO

Analizador automtico
Centrfuga.

Al inicio del anlisis deben correr los controles bajo, normal y patolgico, si dan dentro del rango del
valor esperado se pueden pasar los resultados al programa de control de calidad, verificar las grficas
e identificar alarmas si las hubiese, realizar acciones correctivas si se necesitan y montar las muestras.
Los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se deben verificar para confirmar
su veracidad.
verificar en los reactivos el n de lote, la fecha de vencimiento y el estado de los reactivos.
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El manejo adecuado de todos estos aspectos es necesario para que la fiabilidad de los resultados de
nuestro laboratorio asegure un 100 %.
16.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES

veracidad.

Los resultados diarios del control de calidad se analizan. Si no estn dentro del intervalo indicado,
revisar reactivo, Analizador, la calidad del control (aspecto). Tomar los correctivos necesarios de
acuerdo a lo arrojado en este anlisis.
Utilizar adecuado volumen de muestra
Verificar nmero de lote y fechas de vencimiento de reactivos y controles de calidad.
Evitar obstruccin en la aguja de muestras y deformacin o curvas en la misma, si esto sucede
sustituirlas.
Rechazar muestras hemolizadas, hiperlipemicas e insuficientes.

Evitar burbujas y coagulados en las jeringas de gases.
Muestras que no se procesan el mismo da, refrigerar entre 4C y 8 C,
16.13. PROCEDIMIENTO Y LECTURA

Seleccionar el tipo de anlisis (gases arteriales, electrolitos o gases y electrolitos) a realizar. Ver manual de
funcionamiento del equipo.
16.14. CLCULOS
Una vez concluida la medicin, y tras haber introducido todos los parmetros, los resultados se visualizan en
la pantalla de resultados y se imprimen.
16.15. EXPRESIN DEL RESULTADO

GASES ARTERIALES: PaO2 en mmHg
PaCO2 en mmHg
SatO2 en %
HCO3 en mEq/litro
ELECTROLITOS: Sodio en mmol/L
Potasio en mmol/L
Calcio en mmol/L
Cloro en mmol/L
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16.16. LIMITACIONES DEL ANALISIS - INTERFERENCIAS

Extraccin de muestra incorrecta o la utilizacin de recipientes inadecuados para la extraccin de la
muestra pueden originar errores o discrepancias en los valores de medicin.
Las sales de heparina son los nicos anticoagulantes permitidos para los anlisis; otros anticoagulantes
como EDTA, citrato, oxalatos, fluoruros y sustancias con contenido de amonio influyen de forma significativa
en el valor de pH de la sangre y en otros parmetros por lo que no se deben utilizar.
Utilizar nicamente jeringas heparinizadas, el uso inadecuado de jeringas alteran algunos parmetros.
16.17 VALORES DE REFERENCIA
PARMETRO VALOR DE REFERENCIA

Ph 7.35 7.45
PaO2 80 100 mmHg
PaCO2 35 45 mmHg
SatO2 95 100%
HCO3 22 26 mEq/litro
Sodio (Na) 130 146 mmol/L
Potasio (K) 3.5 5.0 mmol/L
Cloro (Cl) 98 107 mmol/L
Calcio (Ca) 1.120 1.320 mmol/L
16.18. BIBLIOGRAFA
Fisiologa del intercambio gaseoso alveolar capilar. Llagunes, JOSE.

http://www.docstoc.com/docs/324841/FISIOLOGIA DEL INTERCAMBIO GASEOSO ALVEOLO-CAPILAR.
Interpretacin de Iso gases en sangre arterial.
http://personal.telefonica.terra.es/web/respiradores/gases.htm
Trastornos del equilibrio Acido-Base. Ruz Mrquez Mara Jos, Ortiz Garca Carmen. Et al.
LABORATORIO DEL HOSPITAL CLINICO UNIVERSITARIO VIRGEN DE LA VICTORIA DE MALAGA.
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http://www.intensivohg.org/wp-content/uploads/2010/01/EQUILIBRIO ACIDO-BASICO Luis Alberto
lvarez Carmona.ppt256, 1, Equilibrio Acido-Bsico.
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17. GLUCOSA
La dieta del adulto normal contiene aproximadamente 45% de carbohidratos, los cuales son transportados
por la glucosa. Las enzimas salivares y gastrointestinales degradan los polisacridos a monosacridos de los
cuales, el 80% son glucosa, estos monosacridos se absorben en el intestino delgado. La glucosa constituye
la mayor parte de los sacridos de la sangre perifrica los cuales son captados por las clulas hepticas, a
travs de un proceso de difusin simple. Las clulas del hgado y del rin metabolizan la glucosa. La
glucosa penetra en las clulas bajo la influencia de la insulina para formar intracelularmente glucosa 6
fosfato, la cual finalmente se metaboliza a glucgeno.
El diagnostico de los trastornos del metabolismo de los carbohidratos descansa en parte en la

determinacin del nivel plasmtico de glucosa en ayunas o despus de una prueba de estimulacin o
supresin. Es uno de los criterios utilizados para el diagnstico de la diabetes mellitus.
17.1. METODO:
Test por radiacin ultravioleta
Mtodo enzimtico de referencia con hexoquinasa.
17.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

La hexoquinasa cataliza la fosforilacin de la glucosa a glucosa-6-fosfato por ATP.
La glucosa-6-fosfato deshidrogenasa oxida el glucosa-6-fosfato en presencia de NADP a gluconato-6-
fosfato. No se oxidan otros hidratos de carbono. La velocidad de formacin de NADPH durante la reaccin
es directamente proporcional a la concentracin de glucosa y se determina fotomtricamente.

R1 Tampn MES: 5.0 mmol/L, pH 6.0; Mg2+: 24 mmol/L; ATP: 4.5 mmol/L; NADP: 7.0 mmol/L;
conservante
R2 Tampn HEPES: 200 mmol/L, pH 8.0; Mg2+: 4 mmol/L; HK (levadura): 300 kat/L; G-6-PDH (E. coli):
300 kat/L; conservante

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PROCEDIMIENTOS
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Suero.
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA bipotsico, EDTA con fluoruro sdico/bisdico, EDTA con
fluoruro potsico/bisdico y oxalato con fluoruro sdico/potsico.
Orina.
Lquidos corporales.
Estabilidad (sin hemlisis): 8 horas a 15-25 C

72 horas a 2-8 C
Estabilidad en plasma con fluoruro: 3 das a 15-25 C

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA, oxalato o fluoruros. .
Para lquidos corporales, el mdico realiza la puncin respectiva.

La separacin de la muestra debe hacerse dentro de los 20 minutos siguientes a la extraccin de la
muestra.
Si la determinacin de glucosa se hace dentro de la hora siguiente a la extraccin de la muestra, el
suero o plasma puede dejarse a temperatura ambiente.
Cuando la determinacin de la muestra no puede hacerse en esa hora siguiente, la muestra debe
refrigerarse a 2 4C, inmediatamente se haya separado el volumen globular.

El paciente debe desde tres das antes, descontinuar drogas como hormonas, anticonceptivos
orales, hipoglicemiantes.
El paciente debe estar en ayunas. (Mnimo 8 horas), y no ms de 12 horas.
No ingerir caf, ni fumar, ni realizar ejercicio fuerte 8 horas antes y durante el procedimiento.
No ingerir drogas hiperglicemiantes

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas
17.10. METODO DE ESTANDARIZACION Y CALIBRACIN:

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

Todas estas acciones de control de calidad, estandarizacin, calibracin en el laboratorio estn dirigidas
hacia la meta de obtener resultados completamente fiables.

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de glucosa o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de glucosa. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
17.14. CLCULOS:
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Puntos de medicin

R1 28 L 141 L
R2 10 L 20 L
Volmenes de muestra
2 L

muestra.
mmol/L x 0.1802 = g/L
17.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

Los resultados se expresan en mg/dl (SUERO O PLASMA)
17.17. ACIONES DEL ANALISIS INTERFERENCIAS.
Suero/plasma
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PROCEDIMIENTOS
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aprox. 1000 mg/dL 621 mol/L).

Orina
teraputicas.
del paciente.

Plasma
En ayunas 4.11-6.05 mmol/L (74-109 mg/dL)
Orina
1ra orina de la maana 0.3-1.1 mmol/L (6-20 mg/dL)
Orina de 24 horas 0.3-0.96 mmol/L (6-17 mg/dL)
(orina promedio de 1350 mL/24 h)
Suero, plasma
Adultos 4.11-5.89 mmol/L (70-100 mg/dL)
60-90 aos 4.56-6.38 mmol/L (82-115 mg/dL)
> 90 aos 4.16-6.72 mmol/L (75-121 mg/dL)
Nios 3.33-5.55 mmol/L (60-100 mg/dL)
Neonatos (1 da) 2.22-3.33 mmol/L (40-60 mg/dL)
Neonatos (> 1 da) 2.78-4.44 mmol/L (50-80 mg/dL)
Orina
Orina de 24 horas < 2.78 mmol/24 h (< 0.5 g/24 h)
Orina aleatoria 0.06-0.83 mmol/L (1-15 mg/dL)
LCR
Nios 3.33-4.44 mmol/L (60-80 mg/dL)
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Adultos 2.22-3.89 mmol/L (40-70 mg/dL)
Los valores de glucosa en LCR deberan equivaler al aproximadamente 60 % de los valores en plasma. Para
una interpretacin clnica adecuada, compararlos siempre con los valores de plasma obtenidos
paralelamente. Roche no ha evaluado intervalos de referencia en la poblacin peditrica.

Suero, plasma, orina y LCR
0.11-41.6 mmol/L (2-750 mg/dL)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 102 de 167
BIBLIOGRAFIA
Sacks DB. Carbohydrates. En: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed. Philadelphia:
WB Saunders 1996:351-374.
Knudson PE, Weinstock RS. Carbohydrates. En: Henry JB, ed. Clinical Diagnosis and Management by
Laboratory Methods. 20th ed. Philadelphia: WB Saunders 2001:211-223.
Sacks DB. Carbohydrates. En: Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed.
Philadelphia: WB Saunders 1999:750-785.
Kunst A, Draeger B, Ziegenhorn J. In: Bergmeyer. Methods of Enzymatic Analysis, 3rd ed. Volume VI,
Metabolites 1: Carbohydrates. 1984:163-172.
Tietz W, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. Philadelphia. WB Saunders Company,
2006:444-451.
Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 6th ed., Saunders Elsevier 2008, 389.
Biochem 1996;34:385-386.
Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: Recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001: 38:376-385.
Thomas L. Blutglucose. En: Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 6th ed. Frankfurt/Main: TH-Books,
2005;193199.
Krieg M et al. Vergleichende quantitative Analytik klinisch-chemischer Kenngren im 24-Stunden-
Urin und Morgenurin. J Clin Chem Clin Biochem 1986;24:863-869.
Passing H, Bablok W, Bender R, et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J
Clin Chem Clin Biochem 1988;Nov:26(11);783-790.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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17.a. PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA.
17.a.1. FASE PREPARATORIA: CONDICIONES DEL PACIENTE:

Dos das antes de someterse a la prueba de tolerancia a la glucosa, el paciente debe ingerir 3 comidas
con exceso de harinas y azcar.
Cuando el paciente ha padecido una enfermedad aguda, la prueba ha de realizarse 2 3 semanas
despus.
Tres das antes del examen descontinuar drogas que se hayan comprobado tengan influencia en la
prueba de tolerancia a la glucosa, tales como hormonas, hiperglicemiantes, hipoglicemiantes,
anticonceptivos orales.
No ingerir alimento alguno, durante por lo menos las 8 horas anteriores, y no ms de 12 horas antes de
efectuar la prueba.
Evitar el consumo de caf y el cigarrillo, al igual que el ejercicio fsico por lo menos 8 horas antes del
examen.
Se debe posponer la prueba en caso de enfermedad imprevista como fiebre, gastritis, etc.
17.a.2. FASE DE PRUEBA:

Efectuar la prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) entre las 7 AM. y las 12 M.
Se toma muestra de sangre venosa para el micromtodo y la glicemia en ayunas.
Hacer un control de glucosa por micromtodo, si el resultado es mayor o igual a 140 mg/dl, no se debe
continuar la prueba.
Administrar una dosis de 1.75 gr de glucosa/kg de peso. que corresponde a 75g en 300ml de agua; debe
explicrsele a ste que la ingestin debe hacerse mximo en 5 minutos.
Se le anota al paciente su nombre, nmero de orden que le corresponde en el diario de laboratorio, y las
horas a las cuales debe volver al laboratorio para que se le sangre de nuevo.
Aclararle al paciente, que no debe dejar pasar estas horas, y que avise si vomita porque su prueba debe
repetirse en un lapso de 10 15 das.
Al paciente se le deben dar indicaciones claras y precisas sobre que no debe ingerir ningn alimento, ni
caf, ni cigarrillo, ni alcohol. Al igual no realizar ejercicio mientras dure su prueba. El paciente tampoco
debe quedarse dormido.
Cada tubo debe ir marcado con el nombre del paciente, el nmero de orden y la hora de sangrado del
paciente, si es 1, 2, 3 horas, etc.
La separacin de las muestras debe hacerse dentro de los 20 minutos siguientes a la extraccin de la
muestra.
El procesamiento de las muestras es igual a la tcnica de Glucosa oxidasa peroxidasa.(ver apartados

9.1 a 9.20).
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PROCEDIMIENTOS
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17.b. PRUEBA DE TAMIZAJE

Es la prueba que se le realiza a una paciente gestante.
17.b.1 FASE PREPARATORIA: CONDICIONES DEL PACIENTE:

despus.
examen.
Se debe posponer la prueba en caso de enfermedad imprevista como fiebre, gastritis,etc.
17.b.2. FASE DE PRUEBA:

Efectuar la prueba de tamizaje entre las 7 A.M y las 12 M.
Se toma muestra de sangre venosa para el micromtodo y la glicemia La paciente no requiere ayuno para
un tamizaje.
Administrar una dosis de 75 gr de glucosa disueltas en 300 ml de agua; debe explicrsele a ste que la
ingestin debe hacerse mximo en 5 minutos.
horas a las cuales debe volver al laboratorio para que se le sangre de nuevo o sea a la hora de haber
tomado la carga de glucosa.
paciente,
muestra.
9.1 a 9.20).
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17.c. PRUEBA DE O`SULLIVAN

Esta prueba es la prueba confirmatoria para las pacientes gestantes.
17.c.1. FASE PREPARATORIA: CONDICIONES DEL PACIENTE:

despus.
examen.
17.c.2. FASE DE PRUEBA:

Efectuar la prueba) entre las 7 A.M y las 12 M.
Se toma muestra de sangre venosa para el micromtodo y la glicemia La paciente requiere ayuno de 8 a
12 horas.
Administrar una dosis de 100 gr de glucosa disueltos en 400 ml de agua; debe explicrsele a ste que la
ingestin debe hacerse mximo en 5 minutos.
horas a las cuales debe volver al laboratorio para que se le sangre de nuevo, o sea, a la hora, 2 horas y
3horas de haber ingerido la carga de glucosa.
paciente,
muestra.
9.1 a 9.20).
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17.d. PRUEBA PRE Y POSTPRANDIAL.
17.d.1. FASE PREPARATORIA: CONDICIONES DEL PACIENTE:

Dos das antes de someterse a la prueba de glucosa, el paciente debe ingerir 3 comidas con exceso
de harinas y azcar.
despus.
No ingerir alimento alguno, durante por lo menos las 8 horas anteriores, y no ms de 12 horas antes de
efectuar la prueba.
examen.
17.d.2. FASE DE PRUEBA:

Efectuar la prueba entre las 7 A.M y las 12 M.
Se toma muestra de sangre venosa para el micromtodo y la glicemia en ayunas.
Administrar una dosis de 1.75 gr de glucosa/kg de peso. que corresponde a 75g en 300ml de agua; debe
explicrsele a ste que la ingestin debe hacerse mximo en 5 minutos.
horas a las cuales debe volver al laboratorio para que se le sangre de nuevo, o sea a las 2 horas de haber
ingerido la carga de glucosa.
paciente, si es 1, 2, 3 horas, etc.
muestra.
El procesamiento de las muestras es igual a la tcnica de Glucosa oxidasa peroxidasa. (ver apartados
9.1 a 9.20).
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PROCEDIMIENTOS
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17.d.3. BIBLIOGRAFIA
Inserto Biosystems.
1994
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18. HEMOGLOBINA GLICOSILADA
La diabetes mellitus es una enfermedad que se caracteriza por hiperglucemia a causa de la incapacidad
del organismo de utilizar la glucosa en la sangre para producir energa. En la diabetes tipo 1, el pncreas
no fabrica insulina y, por tanto, la glucosa en la sangre no puede entrar en las clulas para ser utilizada
como energa. En la diabetes tipo 2 el pncreas no fabrica suficiente insulina o el organismo es incapaz de
utilizarla correctamente. Las complicaciones de la diabetes (afecta ojos, riones, nervios, vasos sanguneos)
son comunes a ambas formas de la enfermedad.
La terapia para la diabetes exige el mantenimiento a largo plazo de un nivel de glucosa en sangre que sea
lo ms cercano posible al normal, a fin de minimizar el riego de complicaciones a largo plazo.
Una medida de glucosa en sangre en ayunas es una indicacin del estado del paciente en horas previas,
pero no representa el verdadero estado de la regulacin de la glucosa en sangre.
La mediacin de hemoglobina A1c (HbA1c) cada dos o tres meses ha sido aceptada como medida del
control de glucemia en la atencin y el tratamiento de los pacientes con diabetes mellitus.
18.1. METODO
Cromatografa liquida de alta resolucin (HPLC) por intercambio inico.
18.2. RESPONSABLE
Bacterilogo (a)

El principio del ensayo se basa en la cromatografa liquida de alta resolucin (HPLC) por intercambio
inico. Las muestras se mezclan y diluyen automticamente en la estacin de muestreo VARIANT II TURBO y
se inyectan en el cartucho de anlisis. Las dos bombas de la estacin cromatografa VARIANT II TURBO
crean un gradiente de tampones programado de fuerza inica creciente en el cartucho, donde las
hemoglobinas se separan en funcin de sus interacciones inicas con el material del cartucho. Despus, las
hemoglobinas as separadas atraviesan la clula de flujo del fotmetro, donde se miden los cambios de
absorbancia a415 nm. Un filtro adicional a 690 nm corrige la absorbancia de fondo.

Kit de reactivos VARIAN II TURBO
Cebador de sangre: contiene hemolizado liofilizado de glbulos rojo humanos con gentamicina,
tobramicina y EDTA.
Tampn de elucin A: contiene tampn Bis-Tris/fosfato, pH 6.0 azida sdica como conservante.
Tampn de elucin B: contiene tampn Bis-Tris/fosfato, pH 6.7 azida sdica como conservante.
Solucin de lavado/diluyente: contiene agua desionizada con azida sdica como conservante.
Cartucho de anlisis, incluye cinco elementos de filtro previo.
CD-ROM con los parmetros del programa VARIANT II TURBO Hemoglobina A1c.
Juego de calibradores/diluyente: contiene dos viales de calibrador de nivel 1, dos viales del nivel 2 y
una botella de diluyente de calibrador.
Juego de controles, nivel 1 y nivel 2.
Viales de muestra.
Preparacin, conservacin y estabilidad de los reactivos

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PROCEDIMIENTOS
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Tampones de elucin y solucin de lavado/diluyente: listos para su uso, permanecern estables hasta
la fecha de caducidad si se almacenan sin abrir entre 15 y 30 C. una vez abierta las botellas, el
tampn de elucin A permanecer estables durante 30 das y el tampn de elucin B y la solucin de
lavado/diluyente, durante 60 das si se almacena a dicha temperatura.
Cebador de sangre: permanecer estable hasta la fecha de caducidad si se almacena sin abrir
entre 2 y 8 C.
Prepare el cebador aadiendo 1 mL de agua desionizada.
Dejar en reposo durante 10 minutos a una temperatura entre 15 y 30 C.
Agitar en crculos con suavidad para disolver su contenido y garantizar que se mezcle completamente.
Una vez reconstituido se mantiene estable un da si se almacena entre 2 y 8 C.
Calibradores: reconstituir los calibradores con 7 mL del diluyente. Este debe permanecer a una
temperatura entre 2 y 8 C.
Controles: reconstituya y almacene los controles segn indica el proceso de la caja del fabricante. Los
controles de Bio-Rad Lyphochek Diabetes Controls deben diluirse al 1:300 antes de realizar el anlisis.
Mida 1.5 mL de la solucin de lavado/diluyente y adicione 0.5 UL del control reconstituido.
Cartucho de anlisis: el cartucho de be almacenarse a una temperatura entre 2 y 8 C. permanece
estable durante 60 das tras su instalacin en el instrumento.
18.5. MATERIAL DE PRUEBA ESTABILIDAD

Sangre total anticoagulada EDTA.
Las muestras de sangre pueden almacenarse un mximo de 7 das a una temperatura entre 2 y 8 C
18.6. METODO RECOLECCIN DEL ESPCIMEN

Se realiza venopuncin segn los parmetros establecidos en el Manual de Toma de Muestras de la E.S.E.
Metrosalud 2012.

Refrigerado

No requiere

Analizador VARIAN II TURBO
Pipetas.
18.10. METODO DE ESTANDARIZACION Y CALIBRACION

Instalacin de un nuevo kit:
En la pantalla de SETUP/Test: inserte el CD-ROM de actualizacin del kit en la unidad de CD.
Seleccione Update kit
Seleccione la unidad e:\
Elija la prueba que desea actualizar (V2_A1c)
Haga clic en OK
Instalacin de un nuevo cartucho de anlisis:
Ponga el sistema en estado inactivo (INACTIVE).
Cambie el cartucho.
Ponga el sistema en estado activo (ACTIVE).
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Acepte el proceso de calentamiento (lavado de 5 minutos).

Pase los dos cebadores que trae el kit por el equipo.
Luego pase tres viales con agua desionizada por el equipo.
Calibracin:
Se debe pasar primero un blanco: 1 mL de una muestra prediluida (no agua).
1 mL de calibrador nivel 1 reconstituido.
1 mL de calibrador nivel 2 reconstituido.
18.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES

El rea total de cada anlisis debe oscilar entre 1,5 y 4,5 millones de uvoltios por segundo. Si el rea se
encuentre por fuera de este rango, los resultados no deben ser notificados.
El programa es lineal a partir de 3,1-18,5%. Cuando los resultados no estn dentro del rango susceptible,
no debe notificarse.
Para cualquier muestra que tenga un rea contaminada de mayor o igual a 60 % en los intervalos de
ED, S y C, debe contemplarse la posibilidad de que sea una variante homocigtica o un fenotipo
variante/talasemia B. el % de A 1C no debe notificarse en estas muestras.
Los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se deben verificar para
confirmar su veracidad.
Usar reactivos vencidos.
Utilizacin de kit de reactivos deteriorados o mal conservados.

reactivo, Analizador, la calidad de la muestra (aspecto). Tomar los correctivos necesarios de acuerdo
a lo arrojado en este anlisis incluyendo diluciones y correccin de tcnica.
Revisar las fechas de vencimientos de los reactivos a utilizarse.
Rechazar muestras insuficientes.
Muestras que no se procesan el mismo da, refrigerar a 4C, inmediatamente se separe el cogulo.
Asegurar el mantenimiento del equipo.

Comprueba que no haya cogulos de fibrina o cualquier otro componente insoluble en la muestra
El analizador reconoce el cdigo de barras. Ver manual de funcionamiento del Analizador.
18.14. CALCULOS
El analizador TURBO VARIANT II calcula automticamente la concentracin de analito de cada muestra.
18.15. CALIBRACION
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PROCEDIMIENTOS
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Despus de instalar un nuevo lote de reactivos debe realizarse la calibracin. A partir de ah, la calibracin
debe repetirse cada 30 das.
18.16. EXPRESION DEL RESULTADO

Los resultados se expresan en %
18.17. LIMITACIONES DEL ANALISIS -INTERFERENCIA

Las muestra cuya rea total sea que menor de 1,5 o mayor de 4,5 millones de uvoltios por segundo.
Deben diluirse manual mente. Para hacerlo, introduzca con una pipeta de 1,5 mL de una solucin de
lavado/diluyente en un vial de 1,5 mL y despus 1.5 uL de la muestra de sangre y mezcle bien. Utilice un
adaptor de microviales para muestras prediluidas. Si el rea de la muestra sigue fuera del rango
esperado, se debe volver a diluir la muestra hasta que est dentro del rango de recuento de rea total
/entre 1,5 y 4,5 millones).
Supervivencia anmala de los glbulos rojos: las muestras de pacientes con anemia hemoltica
mostraran un descenso en los valores de hemoglobina glicada debido al menor tiempo de vida de los
glbulos rojos. Las muestras de pacientes con policitemia o que hayan sufrido una esplenectoma
pueden mostrar valores ms altos de hemoglobina glicada debido al tiempo de vida algo mayor de los
glbulos rojos.

Hemoglobina A1C (%) grado de control de glucosa
>8 Deben tomarse medidas
<7 Objetivo
<6 Nivel no diabtico

El programa es lineal a partir de 3,1-18,5%. Cuando los resultados no estn dentro del rango susceptible, no
debe notificarse.
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PROCEDIMIENTOS
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18.20. BIBLIOGRAFIA
VARIAN II TURBO Hemoglobina A1c Program. Manual de instrucciones

Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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19. MAGNESIO.
El magnesio constituye, junto con el potasio, uno de los cationes intracelulares ms importante. El Mg2+ es
cofactor de numerosos sistemas enzimticos. As que todas las reacciones enzimticas dependientes del
ATP requieren Mg2+ como cofactor en el complejo ATP magnesio.
Aproximadamente el 69 % de los iones de magnesio se encuentra depositado en los huesos. El resto
participa en el metabolismo intermediario, alrededor del 70 % se halla en forma libre, mientras que el otro
30 % est fijado a protenas (especialmente a la albmina), citratos, fosfato y a otros formadores de
complejos. El nivel srico de Mg2+ permanece constante dentro de un intervalo muy estrecho (0.65 1.05
mmol/L). La regulacin de la concentracin de magnesio se produce mayormente mediante los riones,
en particular a travs de la rama ascendente del asa de Henle.
El presente test se emplea para el diagnstico y el control del curso de la hipomagnesemia (falta de
magnesio) y de la hipermagnesemia (exceso de magnesio). Son numerosos los estudios que demuestran la
existencia de una correlacin entre la falta de magnesio y alteraciones de la homeostasis del calcio,
potasio y fosfato relacionadas con trastornos cardacos tales como las arritmias ventriculares que no
responden a una terapia convencional, la sensibilidad aumentada contra la digoxina, los espasmos de las
arterias coronarias y la muerte sbita. Otros sntomas concomitantes adicionales consisten en diversos
trastornos neuromusculares y neuropsiquitricos. La hipermagnesemia acompaa a la insuficiencia renal
aguda y crnica, al suministro excesivo de magnesio y su liberacin a partir del espacio intracelular.
La determinacin de magnesio se lleva a cabo a travs de la espectrometra de absorcin atmica (AAS),
as como mediante mtodos complexomtricos. El mtodo aqu descrito se basa en la reaccin del
magnesio con el azul de xilidil en una solucin alcalina que contiene EGTA a fin de enmascarar el calcio
presente en la muestra.
Los niveles urinarios de magnesio se determinan por pruebas de deplecin de magnesio.
19.1. MTODO:
Mtodo colorimtrico con determinacin del punto final.
19.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).
En solucin alcalina, el magnesio forma un complejo purpreo con azul de xilidil, el sal de diazonio. La
concentracin de magnesio se mide fotomtricamente por la disminucin de la absorbancia del azul de
xilidil.

R1: Tampn TRISa/6 cido aminocaproico: 500 mmol/L, pH 11.25; EGTA: 129 mol/L; conservante
R2: Azul de xilidil: 0.28 mmol/L; detergente; conservante
Medidas de precaucin y advertencias

Slo para el uso diagnstico in vitro.
Observar las medidas de precaucin usuales para la manipulacin de reactivos.
Eliminar los residuos segn las normas locales vigentes.
Ficha de datos de seguridad a la disposicin del usuario profesional que la solicite.
El presente estuche contiene componentes que han sido clasificados por la directiva CE No.
1272/2008 de la siguiente manera:
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o Compuestos peligrosos: hidrxido de sodio

Atencin
H315 Provoca irritacin cutnea.
H319 Provoca irritacin ocular grave.
Prevencin:
P264 Lavarse la piel concienzudamente tras la manipulacin.
P280 Llevar guantes/prendas/gafas/mscara de proteccin.
Respuesta:
EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabn abundantes.
En caso de irritacin cutnea: Consultar a un mdico.
Si persiste la irritacin ocular: Consultar a un mdico.
Quitarse las prendas contaminadas y lavarlas antes de volver a usarlas.


Suero.
Plasma tratado con heparina de litio.
No emplear anticoagulantes que forman complejos tales como EDTA, fluoruro y oxalato.con fluoruro.
Orina: Para la recoleccin de la orina el paciente debe fijar una hora cero, descartar la orina de
esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina, incluida la muestra del tiempo
fijado para la recoleccin. Guardar refrigerado en frasco bien tapado.
Estabilidad:
Suero/Plasma 7 dias: a 15-25 C
7 dias a 2-8 C
1 ao a (-15)-(-25) C
Orina
3 dias: a 15-25 C
3 dias a 2-8 C
1 ao a (-15)-(-25) C

Muestra de suero: Sangrar en tubo seco, dejar en reposo 10-20 minutos centrifugar por espacio de
10 minutos y, luego decantar el suero (si no se sangr en tubo tapa amarilla), antes de 30 minutos.
Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina de litio.
Muestra de orina: Acidificar las muestras de orina a un pH 1 empleando HCl concentrado a fin de
prevenir la precipitacin de fosfato amnico-magnsico. Recoger las muestras de orina en un
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MANUAL DE
Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 115 de 167
recipiente que no sea de metal. El instrumento prediluye automticamente las muestras de orina
con NaCl al 0.9 %.
.
Refrigerado.

No requiere ayuno.
El uso del torniquete no debe exceder los 30 segundos

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 116 de 167
Analizador.
19.14. CALCULO
Puntos de medicin
Direccin de reaccin: Disminucion
Unidades: mg/dL (mmol/L, mval/L)
R1 97 L
R2 97 L
Volmenes de muestra
Suero:/Plasma: 3 L
Orina: 6 L

muestra.
mval/L x 0.5 = mmol/L
mval/L x 1.22 = mg/dL
mval/L = mEq/L
19.15. CALIBRACION:
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 117 de 167

S2: C.f.a.s.
Tras cambiar de lote de reactivos.
Segn lo requiera el control de calidad.


Suero/plasma:
conjugar (concentracin de bilirrubina conjugada y sin conjugar: aprox. 60 mg/dL
aprox. 800 mg/dL). La hemlisis produce resultados aumentados segn el contenido exacto del
analito en los eritrocitos lisados.
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta el ndice L de 2000. No existe una
correlacin satisfactoria entre el ndice L (que corresponde a la turbidez) y la concentracin de
triglicridos.
Orina:

Suero/plasma:
Neonatos: 1.5 2.2 mg/dL
5 meses 1.7 2.3 mg/dL
6 12 aos: 1.7 2.1 mg/dL
12 20 aos: 1.7 2.2 mg/dL
Adultos: 1.6 2.6 mg/dL
60 90 aos: 1.6 2.4 mg/dL
> 90 aos: 1.7 2.3 mg/dL
Orina (24 h): 72.9 121.5 mg/d
Suero/plasma: (0.243 4.86 mg/dL)
Orina: (1.36 26.7 mg/dL)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 118 de 167
19.20. BIBLIOGRAFA
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Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 119 de 167
20. PROTENA C REACTIVA
La protena C-reactiva es la protena de fase aguda clsica de las reacciones inflamatorias. Se sintetiza en
el hgado y se compone de cinco cadenas polipeptdicas idnticas en forma de un anillo de cinco
eslabones con un peso molecular de 105000 daltons. La CRP es el reactante de fase aguda ms sensible y
su concentracin aumenta muy rpidamente en procesos inflamatorios. La CRP en complejo activa la va
clsica del complemento.
La respuesta de la CRP frecuentemente precede a los sntomas clnicos, incluyendo la fiebre. En individuos
normales sanos, slo se detectan vestigios de CRP con niveles de hasta 5 mg/L. Al iniciarse la respuesta de
fase aguda, la concentracin srica de la CRP aumenta rpida y acentuadamente.
Este aumento puede detectarse tras 6 a 12 horas alcanzando el valor mximo pasadas 24 a 48 horas. Los
niveles superiores a 100 mg/L son consecuencia de serios estmulos tales como traumatismos de gran
magnitud e infecciones severas (sepsis). La respuesta de la CRP puede ser menos acentuada en pacientes
con hepatopatas.
La determinacin de CRP sirve para reconocer procesos inflamatorios sistmicos, para evaluar el xito del
tratamiento de infecciones bacterianas con antibiticos, para reconocer infecciones intrauterinas en caso
de amniorrexis prematura, para diferenciar entre las formas activa e inactiva de enfermedades con
infecciones concomitantes, como p.ej. en pacientes con lupus eritematoso sistmico y colitis ulcerosa, para
evaluar la actividad de enfermedades reumticas y la eficacia del tratamiento antiinflamatorio, para el
reconocimiento precoz de complicaciones postoperatorias (heridas infectadas, trombosis, neumona) y
para distinguir entre una infeccin y una reaccin de rechazo tras el trasplante de mdula sea. El
seguimiento postoperatorio de los niveles de CRP permite comprobar si el paciente se recupera
normalmente (los niveles disminuyen hasta ser normales) o si sufre complicaciones inesperadas (los niveles
permanecen altos). La medicin de los cambios en la concentracin de CRP proporciona informaciones
tiles para diagnosticar el grado de agudeza y seriedad de la enfermedad. Asimismo permite establecer
hiptesis acerca de su origen. Generalmente, la persistencia de una concentracin srica elevada de CRP
significa un pronstico grave que suele indicar la presencia de una infeccin fuera de control.
20.1. MTODO:
Prueba inmunoturbidimtrica potenciada con partculas.
20.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Prueba inmunoturbidimtrica potenciada con partculas.
La CRP humana se aglutina con las partculas de ltex recubiertas con anticuerpos monoclonales anti-CRP.
El precipitado se determina por turbidimetra.
20.4. REACTIVOS-SOLUCIONES DE TRABAJO:

R1 Tampn TRIS a con albmina de suero bovino, conservantes
R2 Partculas de ltex recubiertas con anticuerpos de ratn anti-CRP en tampn de glicina;
inmunoglobulinas (ratn); conservante.
a) TRIS = Tris (hidroximetil) - aminometano
R1 est en la posicin B y R2 en la posicin C.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Mezclar bien el cobas c pack antes de colocarlo en el analizador.
CRPL3
pack.

Suero.
Plasma tratado con heparina de litio, EDTA bi- o tripotsico.
2 meses a 2-8 C
3 aos a (-15)-(-25) C


Refrigerado.

Ayuno de 8 horas.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 121 de 167
LEVEY JENNING.

veracidad.

20.13. PROCEDIMIENTO - LECTURA:

programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de PCR. Ver manual de
20.14. CLCULO:
Puntos de medicin
Unidades: mg/L (nmol/L, mg/dL)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 122 de 167
R1 150 L
R2 48 L 24 L
Volmenes de muestra
3 L

muestra.
Factores de conversin: mg/dL x 9,52 = nmol/L, mg/dL x 9,52 = nmol/L
20.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s. Proteins
Modo de calibracin: spline 6 puntos
Frecuencia de calibraciones: Calibracin completa


Suero/plasma:
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice L de 60 (concentracin de la bilirrubina
conjugada y sin conjugar: aprox. 60 mg/dL o 1026 mol/L).
Los factores reumatoides hasta 1200 UI/mL no interfieren en el test.
Efecto prozona (high-dose hook): No se obtienen resultados falsos con concentraciones de CRP de
hasta 1200 mg/L (11424 nmol/L).
Frmacos: Pueden obtenerse valores de CRP falsamente disminuidos obtenidos de muestras de
pacientes tratados con carboxipenicilinas.

Intervalo de referencia consensual para adultos: < 5 mg/L (< 47.6 nmol/L)

0.3-350 mg/L (2.9-3333 nmol/L)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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20.20. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 125 de 167
21. TCNICA O PROCEDIMIENTO: PROTENAS EN ORINA Y LCR:
La medicin de protenas en orina se emplea en el diagnstico y el tratamiento de enfermedades renales,

cardacas as como de trastornos tiroideos, caracterizados por proteinuria o albuminuria. La medicin de las
protenas en el lquido cefalorraqudeo (LCR) se emplea en el diagnstico y el tratamiento de
enfermedades como la meningitis, los tumores cerebrales y las infecciones del sistema nervioso central.
La orina se forma por ultrafiltracin del plasma a travs de la pared capilar glomerular. Las protenas con
una masa molecular relativa superior a 40000 daltons son retenidas casi completamente, mientras que las
sustancias ms pequeas pasan con facilidad al filtrado glomerular. La mayora de las protenas del LCR se
origina por difusin del plasma a travs de la barrera hematoenceflica. Las concentraciones aumentan
como consecuencia de un incremento en la permeabilidad de la barrera hematoenceflica o bien
debido al aumento en la sntesis local de inmunoglobulinas.
Los mtodos turbidimtricos que emplean el cido tricloroactico (TCA) o el cido sulfosaliclico (SSA)
precipitan las protenas en la muestra segn sea su tamao, lo cual puede dar lugar a una turbidez
inestable y flocular.
Los reactivos de los mtodos colorimtricos como el azul de Coomassie y el rojo de pirogalol-molibdato
reaccionan con las protenas segn la composicin de sus aminocidos, pudiendo teir los recipientes de
vidrio y plstico. Debido a sus mecanismos de reaccin, la sensibilidad tanto de los mtodos turbidimtricos
como colorimtricos vara frente a diversas protenas, especialmente frente a fragmentos proteicos como
las protenas de Bence Jones2 y a las protenas de pequeo tamao como la 1-microglobulina.
La prueba Urinary/CSF Protein de Roche Diagnostics se basa en un mtodo descrito por Iwata y Nishikaze y
modificado posteriormente por Luxton, Patel, Keir y Thompson. En este mtodo, el cloruro de bencetonio
reacciona con protenas en un medio bsico produciendo una turbidez ms estable y uniformemente
distribuida que la observada empleando los mtodos con SSA o TCA. La recuperacin de la -globulina
respecto de la albmina en el presente test es inferior en aprox. un 30 %,5 mientras que la adicin de EDTA
permite neutralizar las interferencias por iones de magnesio.
Estn representadas por fracciones de albmina, la ms abundante y globulina, con una relacin normal
albmina/globulina de 8:1. La concentracin normal est comprendida entre 5 y 45 mg/dl, segn el sitio de
puncin, elevndose considerablemente en los lquidos sanguinolentos.
21.1. MTODO:
Mtodo turbidimtrico.
21.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Mtodo turbidimtrico.
La muestra se preincuba en una solucin alcalina con EDTA, que desnaturaliza las protenas, eliminando as
las interferencias por iones de magnesio. Al agregar cloruro de bencetonio se produce turbidez.
La protena presente en la muestra, reacciona con los iones de cobre (II) en solucin alcalina, originando
un compuesto coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.
21.4. REACTIVOS- SOLUCIONES DE TRABAJO:

R1 Hidrxido de sodio: 530 mmol/L; EDTA sdico: 74 mmol/L
R2 Cloruro de bencetonio: 32 mmol/L
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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TPUC3 Sin abrir, a 15-25 C: Vase la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.

Orina de 2, 6, 12, 24 horas
Lquido Cefalorraqudeo.
Estabilidad:
LCR: 1 da a 15-25 C
Las protenas en LCR son estables por: 4 das de 2 a 8C
> 1 ao a (-15)-(-25) C
Orina: 1 da a 15-25 C
7 das a 2-8 C
1 mes a (-15) - (-25) C
6 das a 2-8 C
Las muestras sin centrifugar pueden producir resultados elevados.

recoleccin.
Para el LCR el mdico hace la correspondiente puncin.

Refrigerado, si no requiere de otro tipo de examen.

Orina:
Evitar todo esfuerzo antes y durante la toma de la muestra.
Ha de asegurarse de no haber sufrido estados febriles.
Evitar fatiga.
No debe baarse con agua muy fra, ni exponerse a bajas temperaturas.
LCR: no requiere.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 127 de 167

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 128 de 167
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de protenas en orina o protenas en LCR o
al hacer la programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de protenas en orina o
protenas en LCR. Ver manual de funcionamiento del Analizador.
21.14. CALCULO
Puntos de medicin
Unidades: mg/dL (mol/L, g/L)
R1 100 L
R2 40 L
Volmenes de muestra
6 L

muestra.
Factores de conversin: mg/L x 0.1 = mg/dL
mg/L x 0.001 = g/L
Clculo de la excrecin proteica en la orina de 24 horas:
mg/L x volumen total (litros por 24 horas) = mg/da
Orina = Resultado X Vol. Orina 24 h
100
21.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s. PUC
Modo de calibracin: RCM

Los resultados se expresan en mg/dL (LCR)
mg/24 horas (Orina)
21.17. LIMITACIONES DEL ANALISIS INTERFERENCIAS:

Sin interferencias significativas hasta una concentracin de bilirrubina conjugada de 342 mol/L (20
mg/dL).
Hemlisis: La hemoglobina interfiere.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 129 de 167

Excepcin: La levodopa, la metildopa y la cefoxitina bisdica causan valores de protena total
falsamente altos mientras que el dobesilato de calcio provoca valores de protena falsamente
disminuidos.
Los agentes radiopacos conteniendo yodo fijado orgnicamente (p. ej.
Hexabrix) pueden provocar resultados falsamente altos.
En pacientes bajo tratamiento con sustitutos del plasma basados en gelatina pueden obtenerse
valores aumentados de protena en orina.
Las muestras con concentraciones extremadamente altas y muy superiores al intervalo de medicin
pueden producir resultados falsos disminuidos.
Altas concentraciones de cido homogentsico en muestras de orina provocan resultados falsos.
Para el diagnstico, los resultados del ensayo siempre deben interpretarse conjuntamente con el historial
mdico del paciente, el anlisis clnico as como los resultados de otros exmenes.
LCR Hemlisis: La hemoglobina interfiere.

Orina: 24 h: < 140 mg/24 h*
Espontnea: < 150 mg/L*
LCR: 150-450 mg/L (15-45 mg/dL)
21.19. INTERVALOS DE MEDICION (LINEALIDAD):

40-2000 mg/L (4-200 mg/dL; 0.04-2 g/L)
Determinar las muestras con concentraciones superiores por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin
automtica de las muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:3. Los resultados de las muestras
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 130 de 167
21.20. BIBLIOGRAFIA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 131 de 167
22. PROTENAS TOTALES EN SANGRE
Las protenas totales estn representadas por la fraccin albmina la cual se sintetiza en el hgado, esta
regula la presin osmtica, establece el equilibrio cido bsico, transporta mltiples elementos, aporta
nutricin tisular, etc.
La fraccin globulina se sintetiza en las clulas plasmticas y tiene como funcin principal la fabricacin de
anticuerpos.
22.1. METODO:
Test colorimtrico.
22.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo seccin Qumica clnica

En solucin alcalina, el cobre bivalente reacciona con los enlaces peptdicos de las protenas formando el
el caracterstico complejo biuret purpreo. El tartrato sdico potsico impide la precipitacin de hidrxido
de cobre, mientras que el yoduro potsico inhibe la autorreduccin del cobre.
La intensidad cromtica es directamente proporcional a la concentracin de protena que puede
determinarse fotomtricamente.

R1 Hidrxido de sodio: 400 mmol/L; tartrato sdico-potsico: 89 mmol/L
R2 Hidrxido de sodio: 400 mmol/L; tartrato sdico-potsico: 89 mmol/L; yoduro potsico: 61 mmol/L;
sulfato de cobre: 24.3 mmol/L


Suero.
Plasma tratado con heparina de litio o EDTA bipotsico.
Estabilidad: 1 mes a 2-8 C

6 meses a (-15)-(-25) C
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 132 de 167
Si la muestra se recoge estando el paciente acostado, la concentracin de la protena total disminuye en

4-8 g/L, en comparacin con los valores obtenidos si el paciente est de pie.

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA, oxalato o fluoruros. No
colocar torniquete.
Muestra de suero: Sangrar en tubo seco, dejar en reposo 5 10 minutos El mdico hace la
correspondiente puncin.

La separacin de la muestra debe hacerse dentro de los 20 minutos siguientes a la extraccin de la
muestra.
Refrigerado.

El paciente requiere un ayuno mnimo de 8 horas.
Evitar todo esfuerzo antes y durante la toma de la muestra.
El uso de torniquete est contraindicado.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas
22.10 MTODO DE ESTANDARIZACION Y CALIBRACIN:

el anormal.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 133 de 167

veracidad.

reactivo, Analizador, cubetas, la calidad de la muestra (aspecto). Tomar los correctivos necesarios de
acuerdo a lo arrojado en este anlisis incluyendo diluciones y correccin de tcnica.
Muestras que no se procesan el mismo da, refrigerar a 4C, inmediatamente, despus de separar (si no se
sangr en tubo con gel).
Todas estas acciones de control de calidad, estandarizacin, calibracin en el laboratorio estn dirigidas
hacia la meta de obtener resultados completamente fiables.

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de protenas totales o al hacer la
programacin de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de protenas totales. Ver manual de
22.14. CLCULOS:
Puntos de medicin
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 134 de 167
Unidades: g/dL (g/L)

R1 90 L 28 L
R2 32 L -
Volmenes de muestra
2 L
muestra.
Factores de conversin: g/L x 0.1 = g/dL
22.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

En el laboratorio los resultados se expresan en g /dl.

para la bilirrubina sin conjugar (concentracin de la bilirrubina conjugada: 20 mg/dL o 342 mol/L,
concentracin de la bilirrubina sin conjugar: aprox. 20 mg/dL o 342 mol/L).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 1000 (concentracin aproximada de
hemoglobina: 622 mol/L 1000 mg/dL).
Sin interferencias hasta 30 mg/mL de dextrano.
Para el diagnstico, los resultados obtenidos con el test siempre deben evaluarse junto a la
anamnesis del paciente, los exmenes clnicos y los resultados de otros anlisis.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 135 de 167

Adultos 66-87 g/L (6.6-8.7 g/dL)
Cordn umbilical 48-80 g/L (4.8-8.0 g/dL)

Prematuro 36-60 g/L (3.6-6.0 g/dL)
Neonatos 46-70 g/L (4.6-7.0 g/dL)
1 semana 44-76 g/L (4.4-7.6 g/dL)
7 meses-1 ao 51-73 g/L (5.1-7.3 g/dL)
1-2 aos 56-75 g/L (5.6-7.5 g/dL)
> 3 aos 60-80 g/L (6.0-8.0 g/dL)
Adultos (ambulatorios) 64-83 g/L (6.4-8.3 g/dL)
Roche no ha evaluado intervalos de referencia en la poblacin peditrica.

2.0-120 g/L (0.2-12 g/dL)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 136 de 167
22.20. BIBLIOGRAFIA
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Cdigo: MA12511030415
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 137 de 167
23. TRANSAMINASAS. GOT GPT.

Las transaminasas son enzimas que catalizan la reaccin reversible de un grupo - amino de un
aminocido a un - cetocido. Aunque se han demostrado un gran nmero de transaminasas de
sustrato especficos en varios tejidos animales, solo se han descrito dos en el suero, la aspartato -
aminotrasferasa (AST ) o la transaminasa glutamicooxalacetica (GOT ) y la alananin aminotrasferasa
(ALT) o glutamato - piruvato transaminasa (GPT )
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 138 de 167
24. TCNICA: TRANSAMINASA GLUTAMICA OXALOACETICA- GOT-ASTL:
La enzima aspartato-aminotransferasa (AST) se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos del

organismo, principalmente en el tejido heptico, cardaco, muscular y renal. Los niveles sricos de la
enzima aumentan en caso de enfermedades que afectan estos tejidos. Asimismo las afecciones
hepatobiliares tales como la cirrosis, el carcinoma metastsico y la hepatitis viral producen niveles sricos
elevados de AST.
Como consecuencia de un infarto de miocardio, la AST srica se encuentra aumentada y alcanza su valor
mximo 2 das despus de ocurrido.
Los valores sricos de AST pueden estar disminuidos en pacientes en dilisis renal o con una deficiencia de
la vitamina B6. La reduccin aparente de la AST puede estar relacionada con la disminucin del nivel de
fosfato de piridoxal, el grupo prosttico de AST, que trae como consecuencia un incremento en la relacin
entre la apoenzima y la holoenzima.
Se han aislado 2 isoenzimas de la AST, la citoplasmtica y la mitocondrial.
En el suero normal slo se halla la isoenzima citoplasmtica, mientras que en el suero de pacientes con
enfermedades coronarias y hepatobiliares, pueden detectarse tanto la citoplasmtica como la
mitocondrial.
24.1. MTODO:
Test UV perfeccionado segn la IFCC (Federacin Internacional de Qumica Clnica y Medicina de
Laboratorio) modificado.
24.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

La AST de la muestra cataliza la transferencia de un grupo amino entre L-aspartato y 2-
oxoglutarato para obtener oxaloacetato y L-glutamato.
A continuacin y en presencia de la malato deshidrogenasa (MDH), el oxaloacetato reacciona con NADH
para formar NAD+.
AST L-Aspartato + 2-oxoglutarato oxaloacetato + L-glutamato
MDH Oxaloacetato + NADH +H+ L-malato + NAD+ La velocidad de oxidacin de NADH es directamente
proporcional a la actividad cataltica de la AST. Se determina midiendo la reduccin de la absorbancia.
24.4. REACTIVOS-SOLUCIONES DE TRABAJO:

R1 Tampn TRIS: 264 mmol/L, pH 7.8 (37 C); L-aspartato: 792 mmol/L;
MDH (microorganismos): 24 kat/L; LDH (microorganismos): 48 kat/L; albmina (bovina): 0.25 %;
conservante
R2 NADH: 1.7 mmol/L; 2-oxoglutarato: 94 mmol/L; conservante

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 139 de 167
ASTL Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.

Suero, plasma heparinizado o con EDTA.
Estable: Prdida de actividad dentro de 3 das de 2 8C en < 8%
De 15 25C en < 10%
Estabilidad a 20C por 3 meses

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA,.

Refrigerado.

No requiere.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
LEVEY JENNING.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 140 de 167

veracidad.

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de ASTL o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de ASTL. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
24.14. CALCULO
Puntos de medicin
Direccin de reaccin: Disminucin

R1 40 L 51 L
R2 17 L 20 L
Volmenes de muestra
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 141 de 167
9 L

muestra.
24.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

Los resultados se expresan en U/L.

conjugada: aprox. 60 mg/dL 1026 mol/L; concentracin de la bilirrubina sin conjugar: aprox. 60
mg/dL o 1026 mol/L).
aprox. 25.6 mol/L 40 mg/dL).
La contaminacin con eritrocitos provoca resultados aumentados, ya que el nivel de analito en los
eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la interferencia vara segn el
contenido de analito en los eritrocitos lisados.
Lipemia (Intralipid): Sin interferencia significativa hasta un ndice L de 150.
No existe una concordancia satisfactoria entre el ndice L (correspondiente
a la turbidez) y la concentracin de triglicridos.
En caso de muestras lipmicas puede producirse un aviso de alta absorbancia (> Abs.). Seleccionar
el tratamiento de muestra diluida para el reprocesamiento automtico.
Excepciones: En concentraciones teraputicas, la isoniazida provoca valores artificialmente bajos y
la furosemida valores artificialmente altos de la AST.
El frmaco cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar interferencias con los resultados.

Hombres: hasta 40 U/L (hasta 0.67 kat/L)
Mujeres: hasta 32 U/L (hasta 0.53 kat/L)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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5-700 U/L (0.08-11.7 kat/L)
Determinar las muestras con actividades superiores por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin de las
muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas usando la
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PROCEDIMIENTOS
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Paginas: 143 de 167
24.20. BIBLIOGRAFIA
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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25. TRANSAMINASA GLUTAMICO PIRUVICA (GPT) ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT):
La presencia de la enzima alanina aminotransferasa (ALT) se registra en tejidos de varios tipos. La ALT se
encuentra especialmente en el hgado, razn por la cual su actividad se determina en el diagnstico de
hepatopatas.
Concentraciones sricas elevadas de ALT acompaan la hepatitis, la cirrosis, la ictericia obstructiva, el
hepatocarcinoma y el alcoholismo.
Concentraciones levemente elevadas de ALT se determinan en pacientes que han sufrido un infarto de
miocardio sin complicaciones.
Si bien tanto la aspartato-aminotransferasa srica (AST) como la ALT aumentan en procesos patolgicos
que afectan la integridad de los hepatocitos, la ALT es de ambas la enzima ms especfica del hgado.
Adems, un aumento en la actividad de la ALT es ms persistente que un aumento en la actividad de la
AST.
En pacientes con deficiencia de vitamina B6, la actividad srica de la aminotransferasa puede disminuir.
Una reduccin aparente de la actividad de la aminotransferasa puede estar relacionada con valores
disminuidos de fosfato de piridoxal, el grupo prosttico de las aminotransferasas, obteniendo as un
aumento del cociente de apoenzima a holoenzima.
25.1. MTODO:
Prueba-UV optimizada de acuerdo a IFCC (Federacin Internacional de Qumica Clnica y Medicina de

Laboratorio) modificado.
25.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

La ALT cataliza la reaccin entre la L-alanina y el 2-oxoglutarato. El piruvato formado es reducido por NADH
en una reaccin catalizada por la lactato deshidrogenasa (LDH) para formar L-lactato y NAD+.
ALT L-alanina + 2-oxoglutarato piruvato + L-glutamato LDH piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
La velocidad de oxidacin de NADH es directamente proporcional a la actividad cataltica de la ALT. Se
determina midiendo la reduccin de la absorbancia.
25.4. REACTIVOS- SOLUCIONES DE TRABAJO:

R1 Tampn TRIS: 224 mmol/L, pH 7.3 (37 C); L-alanina: 1120 mmol/L; albmina (bovina): 0.25 %; LDH
(microorganismos): 45 kat/L; estabilizadores; conservante.
R2 2-oxoglutarato: 94 mmol/L; NADH: 1.7 mmol/L; aditivos; conservante

ALTL Sin abrir, a 2-8 C: ver la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del cobas c pack.
pack.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Suero (sin hemlisis).
Plasma (sin hemlisis): tratado con heparina de litio o EDTA bipotsico.
Estabilidad: 3 das de 20 a 25C
7 das de 4 a 8C
7 das a 20C


Refrigerado.

No requiere

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas.

el anormal.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 146 de 167
veracidad.

El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de ALTL o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de ALTL. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
25.14. CALCULO
Tipo de medicin Cintica
Puntos de medicin
Direccin de reaccin: Disminucin
R1 59 L 32 L
R2 17 L 20 L
Volmenes de muestra
3 L
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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muestra.
25.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
Frecuencia de calibraciones: - tras cambiar de lote de reactivos

Los resultados se expresan en U/L

Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 60 concentracin de bilirrubina
aprox. 124 mol/L 200 mg/dL). La contaminacin con eritrocitos provoca resultados aumentados,
ya que el nivel de analito en los eritrocitos es mayor que en los sueros normales. La magnitud de la
interferencia vara segn el contenido de analito en los eritrocitos lisados.
ndice L (correspondiente a la turbidez) y la concentracin de triglicridos no es concluyente. Las
muestras lipmicas pueden causar alarmas debido a valores de absorbancia elevados (> Abs).
Seleccionar el tratamiento de muestra diluida para el reprocesamiento automtico.
Excepcin: En concentraciones teraputicas, el dobesilato de calcio y la isoniazida provocan
valores artificialmente bajos y la furosemida valores artificialmente altos de la ALT.
El frmaco Cyanokit (hidroxocobalamina) puede causar interferencias con los resultados.

Hombres hasta 41 U/L (hasta 0.68 kat/L)
Mujeres hasta 33 U/L (hasta 0.55 kat/L)

5-700 U/L (0.08-11.7 kat/L)
Determinar las muestras con actividades ms altas por la funcin de repeticin del ciclo. La dilucin de las
muestras por la funcin de repeticin del ciclo es de 1:10. Los resultados de las muestras diluidas por la
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 148 de 167
25.20. BIBLIOGRAFA
Angel M, Gilberto. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 1993. Ed. Mdica Panamericana. Pgs.
606.
Inserto Biosystems.
Villa de Navarro, Martha y Sols de G, Maria Elena. Guas para laboratorio. Qumica clnica I. U.
De A. 1994
Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik fr die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg
Thieme Verlag 1991.
Kim EK, Waddel LD, Sunderland MLE et al. Observations on Diagnostic Kits for the Determination
of Uric Acid. Clin Biochem 1971;4:279-286.
Praetorius E, Poulsen H. Enzymatic Determination of Uric Acid with Detailed Directions. Scandinav
J Clin Lab Investigation 1953;3:273-280.
WU AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. St. Louis (MO): WB Saunders;
2006;1098-1100.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 149 de 167
26. TCNICA O PROCEDIMIENTO: TRIGLICRIDOS.

Son una familia de complejos lpidos resultantes de la esterificacin del glicerol con 3 cidos grasos
saturados o insaturados de las mismas o diferentes longitudes. Los triglicridos no son solubles en la sangre,
en donde son transportados como quilomicrones triglicridos de origen exgeno o como lipoproteinas
de muy baja densidad o VLDL triglicridos de origen endgeno.
Los triglicridos son los principales lpidos de reserva en el hombre y constituyen aproximadamente el 95%
de los lpidos presentes en el tejido adiposo, se detectan tambin en el plasma donde forman parte de las
lipoproteinas. Los valores sricos de triglicridos aumentan con la edad. Con un valor normal de colesterol
total, se espera que los triglicridos estn por debajo de 250 mg/dl.
26.1. METODO:
Mtodo enzimtico colorimtrico.
26.2. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

Empleando una lipasa lipoproteica obtenida de mircoorganismos para hidrolizar completa y rpidamente
triglicridos a glicerol, con la oxidacin posterior a dihidroxiacetonafosfato y perxido de hidrgeno. El
perxido de hidrgeno formado reacciona bajo la accin cataltica de la peroxidasa con la 4-
aminofenazona y 4-clorofenol para formar un colorante rojo en una reaccin de punto final segn Trinder.
La intensidad cromtica del colorante rojo es directamente proporcional a la concentracin de
triglicridos y puede medirse fotomtricamente.

R1 Tampn PIPES: 50 mmol/L, pH 6,8; Mg2+: 40 mmol/L; colato sdico: 0,20 mmol/L; ATP: 1,4 mmol/L;
4-aminofenazona: 0,13 mmol/L; 4-clorofenol: 4,7 mmol/L; lipasa lipoproteica (Pseudomonas spec.):
83 kat/L; gliceroquinasa (Bacillus stearothermophilus): 3 kat/L; glicerol fosfato oxidasa (E. coli):
41 kat/L; peroxidasa (rbano picante): 1,6 kat/L; conservanteSueros
Calibradores.


Suero, plasma con EDTA o heparinizado.
La estabilidad de los triglicridos:
7 das a 2-8 C
3 meses a (-15)-(-25) C
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PROCEDIMIENTOS
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varios aos a (-60)-(-80) C


Refrigerado.

Ayuno de 12 14 horas.
Evitar el consumo de alcohol 48 horas antes de la toma de la muestra,
Tener en cuenta el tipo de drogas que est tomando el paciente tales como: antiarrtmicos,
bloqueantes beta (antihipertensivos), diurticos, tiazdicos, estrgenos, gestgenos y anticonceptivos.
Evitar el cigarrillo desde 12 horas antes de la venopuncin.
Evitar el consumo exagerado de grasas y Carbohidratos tres das antes de la toma de la muestra.
Despus de un infarto del miocardio se producen cambios grandes principalmente en el valor de LDL.
En enfermedades asociadas cuando van acompaadas de fiebre y en variaciones de peso, se
producen cambios en los valores.
Debe estar en reposo 10 minutos antes de la extraccin de la sangre.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas

el anormal.
LEVEY JENNING.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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veracidad.

FOTMETRO AUTOMATIZADO:
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de trigliceridos o al hacer la programacin
de pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de trigliceridos. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
26.14. CLCULO:
Tipo de medicin 1 punto
Tiempo de reaccin/ 10 / 70.
Puntos de medicin
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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R1 120 L 28 L
Volmenes de muestra
2 L

muestra.
Factores de conversin: mmol/L x 88,5 = mg/dL
mg/dL x 0,0113 = mmol/L
26.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.

En el laboratorio se expresan los resultados en mg/dl.

para la bilirrubina no conjugada (concentracin de la bilirrubina conjugada: aprox. 10 mg/dL;
concentracin de la bilirrubina sin conjugar: 35 mg/dL).
aprox. 700 mg/dL).
Lipemia: El ndice L est correlacionado con la turbidez de la muestra pero no con los valores de
triglicridos. Muestras extremadamente lipmicas (con valores de triglicridos superiores a los 3.000
mg/dL) pueden producir resultados normales. Lm. Prozona: El aviso >Kin indica concentraciones de
triglicridos extremadamente altas en la muestra. Los valores falsamente normales se deben a la
reduccin de oxgeno durante la reaccin del ensayo. La presencia de glicerol endgeno sin
esterificar en la muestra puede producir valores sricos de triglicridos falsamente elevados.
Excepcin: El cido ascrbico y el dobesilato de calcio causan valores de triglicridos falsamente
bajos. En este ensayo, el Intralipid se mide directamente como analito provocando valores
elevados de triglicridos.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 153 de 167

Segn la Asociacin Europea de Arterosclerosis los valores de referencia asignados a triglicridos estn por
debajo de 200mg/dl.
8,85-885 mg/dL
26.20. ANOTACIONES SOBRE INTERFERENCIA TCNICA:

Sueros lipmicos deben diluirse 1:10.
La ictericia y hemlisis fuertes interfieren en el anlisis.
Los metales pesados y el cianuro son inhibidores enzimticos y por ello interfieren en la tcnica.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 154 de 167
26.21. BIBLIOGRAFA
Inserto Biosystems.
1994
Stuttgart/New York: Schattauer, 1995.
Eggstein M, Kreutz F. Klin Wschr 1966;44:262-267.
Bucolo G, David H. Clin Chem 1973;19:476.
Wahlefeld AW, Bergmeyer HU, eds. Methods of Enzymatic Analysis. 2nd English ed. New York, NY:
Academic Press Inc, 1974:1831.
Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6:24.
Siedel J et al. AACC Meeting Abstract 34. Clin Chem 1993;39: 1127.
Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders
Company,1995:610-611.
Shephard MDS, Whiting MJ. Falsely Low Estimation of Triglycerides in Lipemic Plasma by the
Enzymatic Triglyceride Method with Modified Trinders Chromogen. Clin Chem 1990; Vol 36, No.2,
325-329.
Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in clinical chemistry methods, Eur J Clin Chem Clin
Biochem 1996;34:385-386.
Sonntag O, Scholer A. Drug interferences in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drugn interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
Stein EA, Myers GL. National Cholesterol Education Program Recommendations for Triglycerides
Measurement: Executive Summary. Clin Chem 1995;41:1421-1426.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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27. TROPONINA I
Junto con la troponina T (TnT) y troponina C (TnC), troponina I (TnI) forma un complejo que desempea un
papel fundamental en la transmisin de la seal de calcio intracelular en la interaccin actina-miosina.
CTnI es una protena del musculo cardiaco con un peso molecular de 22.500 Dalton; est exclusivamente
en el miocardio y se diferencia de la TnI del msculo esqueltico. cTnI es un marcador sensible y
cardioespcifico de daos cardiacos. Pasa rpidamente a la circulacin sangunea cuando se produce
un infarto de miocardio y su nivel se mantiene alto durante varios das.
La troponina cardiaca es el marcador recomendado para daos del miocardio segn las nuevas
directrices para el diagnstico y tratamiento de sndromes coronarios agudos sin elevacin del segmento
ST. cTnI es un marcador pronstico independiente que puede predecir la evolucin de pacientes con
sndromes coronarios agudos. Por otra parte se han realizado estudios clnicos sobre el uso de cTnI para la
identificacin de pacientes que se pueden tratar con inhibidores GPIIb/IIIa. Se han detectado bajas
concentraciones de cTnI en pacientes con enfermedad coronaria estable.
27.1. METODO
Inmunoensayo de quimioluminiscencia
27.2. RESPONSABLE
Bacterilogo (a)

El principio del ensayo se basa en el inmunoensayo de quimioluminiscencia (CLEIA) y en la metodologa
MAGTRATION. Se mezclan con la muestra anticuerpo monoclonal anti cTnI marcado con fosfatasa
alcalina y partculas magnticas revestidas con anticuerpo monoclonal anti cTnI. La cTnI contenida en la
muestra se une a los anticuerpos anti cTnI, formando un inmunocomplejo con el anticuerpo marcado con
enzimas y las partculas magnticas revestidas con anticuerpos. Despus de retirar el anticuerpo marcado
con enzimas no unido, se aade un sustrato quimioluminiscente. Tras una breve incubacin, se detecta la
luminiscencia generada por la reaccin enzimtica. La intensidad de la luminiscencia medida es
proporcional a la concentracin de cTnI en la muestra. La concentracin de cTnI se calcula por medio de
una curva estndar.

Kit de reactivos PATHFAST cTnI:
Pocillo Ingrediente
N 2 AcMo anti cTnI conjugado con fosfatasa alcalina, Tampn MES,
Azida sdica
N 7 Partculas magnticas revestidas con AcMo anti cTnI
N13 Sustrato quimioluminiscente CDP-Star
N 11 Tampn de dilucin, Tampn tris, Azida sdica
N 3, 4, 5 Tampn de lavado, Tampn MOPS, Azida sdica
Los pocillos n 1, 6, 8, 9, 10, 12, 14, 15 y 16 estn vacos
Controles de calidad
Calibradores
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PROCEDIMIENTOS
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Consrvese A +2 A +8 C. No abra la bandeja de cartuchos hasta inmediatamente antes del uso.
Se indica la fecha de caducidad en el cartucho del reactivo, la bandeja de cartuchos y el envase.
27.5. MATERIAL DE PRUEBA ESTABILIDAD

Sangre total anticoagulada con heparina o EDTA.
La muestra es estable +15 - +25 C 6 horas
+2 - +8 C
27.6. METODO RECOLECCIN DEL ESPCIMEN
Se realiza venopuncin segn los parmetros establecidos en el Manual de Toma de Muestras de la E.S.E.
Metrosalud 2012.

Refrigerado

No requiere

Analizador PATHFAST
pipetas
27.10. METODO DE ESTANDARIZACION Y CALIBRACION

el anormal.
LEVEY JENNING.
E control de calidad en nuestro laboratorio es vigilado diariamente para darle una confiabilidad del 100 %
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PROCEDIMIENTOS
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27.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES.

Los resultados de los pacientes por fuera de los valores de referencia se deben verificar para
confirmar su veracidad.
Usar reactivos vencidos

Tocar el sello de aluminio del kit con los dedos
Utilizacin de kit de reactivos deteriorados o mal conservados
27.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES.

reactivo, Analizador, la calidad de la muestra (aspecto). Tomar los correctivos necesarios de acuerdo
a lo arrojado en este anlisis incluyendo diluciones y correccin de tcnica.
Revisar las fechas de vencimientos de los reactivos a utilizarse.
No reutilizar cartuchos de reactivos.
Manipular correctamente el cartucho de reactivos.
Evitar la contaminacin y la exposicin directa de la luz del sol.

Analizar las muestras dentro de las cuatro horas siguientes a la recoleccin
Comprueba que no haya cogulos de fibrina o cualquier otro componente insoluble en la muestra
Coloque el cartucho de reactivo en el rack
Ponga unos 100 L de la muestra en el pocillo de muestra del cartucho, depostelo en el PATHFAST y
pulse el botn START
Realice el ensayo de acuerdo con el manual del operador del PATHFAST
NOTA: cuando se usa sangre total, es opcional introducir el valor individual del hematocrito de la muestra
en el PATHFAST.
Las muestras con resultados >50 ng/mL deben diluirse con el diluyente de muestra y volverse a probar si se
desea un resultado cuantitativo.
27.14. CALCULOS
EL analizador PATHFAST calcula automticamente la concentracin de analito de cada muestra.
27.15. CALIBRACION
La calibracin es necesaria cuando se usa un nuevo lote de reactivos, tambin requiere calibracin cada
28 das.
Preparacin de calibradores: transfiera todo el volumen de un frasco de diluyente del calibrador a un vial
de CAL-1 y CAL-2 y reconstityalo durante varios minutos. Los calibradores reconstituidos permanecen
estables durante 3 das a 2-8C o 3 meses a -20C.
Nota: utilice los mismos lotes de calibrador CAL-1 o CAL-2 y el diluyente para la reconstitucin. Nunca
mezcle lotes diferentes.
Instales la curva master de calibracin leyendo el cdigo de barras de la TARJETA DE CM, que se
incluye en cada caja, con el lector manual de cdigo de barras del PATHFAST.
Los calibradores CAL-1 y CAL-2 deben probarse por duplicado.
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PROCEDIMIENTOS
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Introduzca los cartuchos de reactivo en el rack, ponga 100 ul de CAL-1 y CAL-2 en los pocillos de
muestra, colquelos en el PATHFAST y pulse el botn START.
27.16. EXPRESION DEL RESULTADO

Los resultados se expresan en ng/mL
27.17. LINEALIDAD DEL METODO

Las muestras con resultados >50 ng/mL deben diluirse con el diluyente de muestra y volverse a probar si se
desea un resultado cuantitativo.
27.18. LIMITACIONES DEL ANALISIS -INTERFERENCIA

Los siguientes factores tienen un efecto menor del 10% sobre el ensayo a las concentraciones indicadas
entre parntesis:
Bilirrubina libre (60mg/dL)
Bilirrubina conjugada (60 mg/dL)
Triglicridos (1.000 mg/dL)
Hemoglobina (Hb 1.000 mg/dL)
Factor reumatoideo (500UI/mL)
El sistema de comunicacin del instrumento contiene cdigos de error para advertir al operador acerca de
problemas de funcionamiento especficos. Cualquier hoja de informes con dichos errores debe
conservarse para seguimiento.
Las muestras de pacientes puden contener anticuerpos heterfilos que podran reaccionar en
inmunoensayos para dar un resultado falsamente elevado o reducido. Este ensayo ha sido diseado para
reducir al mnimo la interferencia de anticuerpos heterfilos. No obstante, no puede garantizarse la
eliminacin completa de esta interferencia de todas las muestras de pacientes. Un resultado de la prueba
que sea incoherente con el cuadro clnico y la historia clnica del paciente debe interpretarse con
cuidado.
27.19. VALORES DE REFERENCIA

Va desde 0.000 ng/mL hasta 0.029 ng/mL.
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MANUAL DE
Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 159 de 167
27.20. BIBLIOGRAFIA
INSERTO. PATHFAST cTnI. Mistsubishi Chemical Medience Corporation. TOKIO, JAPON 2012
Inserto Biosystems.
1994
Verlag 1991.
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 160 de 167
UREA
La urea es el principal producto final del catabolismo de las protenas y aminocidos, y se genera en el
hgado por el ciclo de la urea. A partir del hgado la urea penetra en la sangre desde donde se distribuye
a todos los lquidos intra y extracelulares, puesto que esta sustancia puede difundir libremente a travs de
la mayora de las membranas celulares. La mayor parte de la urea acaba siendo excretada por los riones,
aunque tambin se excreta en cantidades mnimas en la sudoracin, y es degradada por las bacterias en
los intestinos.
Los glomrulos filtran libremente la urea. Segn el estado de hidratacin y, por tanto, el flujo de orina, entre
un 40 y 80% de la urea filtrada es reabsorbida de forma pasiva con el agua, sobre todo en los tbulos
proximales. La urea suele constituir la mitad del total de slidos en la orina y entre el 80 y 90% del total del
nitrgeno urinario. Es de gran utilidad para evaluar el funcionamiento renal, pues toda perturbacin en
dicha funcin se refleja en el aumento de la urea sangunea.
28.1. MTODO:
Test cintico con ureasa y glutamato deshidrogenasa.
28.2. PRINCIPIO O FUNDAMENTO:

La urea es hidrolizada por la ureasa a amonio y carbonato.
Ureasa Urea + 2H2O 2 NH4+ + CO32-
En una segunda reaccin, el 2-oxoglutarato reacciona con amonio en presencia de la glutamato
deshidrogenasa (GLDH) y la coenzima NADH para producir L-glutamato. En esta reaccin, por cada mol
de urea hidrolizada se oxidan dos moles de NADH a NAD+.
GLDH NH4+ + 2-oxoglutarato + NADH L-glutamato + NAD+ + H2O
La velocidad con que la concentracin de NADH disminuye es directamente proporcional a la
concentracin de urea en la muestra y se mide fotomtricamente.
28.3. RESPONSABLE:
Bacterilogo (a).

R1 NaCl al 9 %
R2 Tampn TRIS: 220 mmol/L, pH 8.6; 2-oxoglutarato: 73 mmol/L; NADH: 2.5 mmol/L; ADP: 6.5 mmol/L;
ureasa (haba blanca): 300 kat/L; GLDH (hgado bovino): 80 kat/L; conservante; estabilizadores
no reactivos.

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PROCEDIMIENTOS
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Suero.
Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotsico. No emplear la heparina de amonio.
Orina
La proliferacin bacteriana en la muestra y la alta concentracin atmosfrica del amonaco, as como
la contaminacin por iones de amonio pueden causar resultados falsos elevados.
Estabilidad en suero/plasma: 7 das a 15-25 C

7 das a 2-8 C
1 ao a (-15)-(-25) C
Estabilidad en orina: 2 das a 15-25 C

7 das a 2-8 C
1 mes a (-15) - (-25) C

recoleccin.

Refrigerado.
Aunque la urea es estable en suero, plasma u orina durante varios das bajo refrigeracin, las muestras,
especialmente la orina, debern valorarse a las pocas horas para evitar la contaminacin bacteriana, que
podran provocar una perdida rpida de la urea.

24 horas antes de tomar la muestra, el paciente debe llevar una dieta pobre en protenas.
Debe tener un ayuno de 12 horas.

Centrfuga.
bioqumica.
Pipetas
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PROCEDIMIENTOS
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el anormal.
LEVEY JENNING.

veracidad.

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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 163 de 167
El analizador reconoce el cdigo de barras y procesa la tcnica de urea o al hacer la programacin de
pacientes o lista de trabajo se selecciona la tcnica de urea. Ver manual de funcionamiento del
Analizador.
28.14. CALCULO
Suero o plasma:
Puntos de medicin

R1 10 L 90 L
R3 38 L 110 L
Volmenes de muestra
2 l
Orina:
Puntos de medicin

R1 10 L 90 L
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PROCEDIMIENTOS
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R3 38 L 110 L
Volmenes de muestra 2 l

muestra.
Factores de conversin: mmol/L de urea x 6.006 = mg/dL de urea
mmol/L de urea x 0.06006 = g/L de urea
mmol/L de nitrgeno ureico 2.801 = mg/dL de nitrgeno ureico
mmol/L de nitrgeno ureico x 0.02801 = g/L de nitrgeno ureico
mg/dL de urea 0.467 = mg/dL de nitrgeno ureico
28.15. CALIBRACION:
S2: C.f.a.s.
- en el analizador, tras 4 semanas

SUERO: Se expresa en mg/dl.
ORINA: Se expresa en mg/Kg de peso en 24 horas.
Al emplear orina de 24 horas como muestra, multiplicar el resultado por el volumen de 24 horas para
obtener valores en g o mmol/24 horas.

Suero/plasma
Los iones de amonio pueden causar resultados errneamente elevados.
Orina
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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Urea:
Suero/plasma:
Adultos 2.76-8.07 mmol/L (16.6-48.5 mg/dL)
Orina
Orina de 24 horas: 428714 mmol/24 h (25.7-42.9 g/24 h) de nitrgeno de urea correspondiente a
286595 mmol/L (1.713.57 g/dL)
Nitrgeno ureico (BUN):

Suero/plasma
Adultos (18-60 aos) 2.14-7.14 mmol/L 6-20 mg/dL
Adultos (60-90 aos) 2.86-8.21 mmol/L 8-23 mg/dL
Lactantes (< 1 ao) 1.43-6.78 mmol/L 4-19 mg/dL
Lactantes/nios 1.79-6.43 mmol/L 5-18 mg/dL
Orina
Orina de 24 horas:11 428714 mmol/24 h (12-20 g/24 h) de nitrgeno
de urea correspondiente a 286595 mmol/L (8011666 mg/dL)b

Suero/plasma
0.5-40 mmol/L (3.0-240 mg/dL de urea, 1.4-112 mg/dL de nitrgeno ureico)
Orina
1-2000 mmol/L (6-12000 mg/dL de urea, 2.8-5600 mg/dL de nitrgeno ureico)
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PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
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27.23. BIBLIOGRAFIA
Inserto Biosystems.
1994
Rock RC, Walker WG, Jennings CD. Nitrogen metabolites and renal function. En: Tietz NW, ed.
Fundamentals of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders 1987:669-704.
Richterich R, Colombo JP. Klinische Chemie. 4th ed. Basel: Karger S 1978:319-324.
Talke H, Schubert GA. Enzymatische Harnstoffbestimmung in Blut und Serum im optischen Test nach
Warburg. Klin Wochenschr 1965;43:174.
Tiffany TO, Jansen JM, Burtis CA, et al. Enzymatic kinetic rate and end-point analyses of substrate, by use
of a GeMSAEC Fast Analyzer. Clin Chem 1972;18:829-840.
Sampson EJ, Baired MA, Burtis CA, et al. A coupled-enzyme equilibrium method for measuring urea in
serum: Optimization and evaluation of the AACC study group on urea candidate reference method.
Clin Chem 1980;26:816-826.
Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2.
Jan. 2002.
Biochem 1996;34:385-386.
Cdigo: MA12511030415
MANUAL DE
Versin: 05
PROCEDIMIENTOS
SECCION QUIMICA
Paginas: 167 de 167
28.a. BUN
La concentracin de urea en la sangre suele expresarse en trminos de nitrgeno ureico en sangre (BUN). El
peso molecular de la urea es de 60 e incluye 2 tomos de nitrgeno con un peso de 28La concentracin
de nitrgeno ureico en la sangre total es algo inferior a la del plasma o suero, principalmente debido al
menor contenido de agua en los eritrocitos en comparacin con el plasma. El plasma o suero son los
mejores especimenes por razones tcnicas.
28.a.1. CLCULOS
En consecuencia, el nitrgeno ureico puede transformarse en urea multiplicando por 60/28 o 2.14
En el laboratorio el analizador automatizado, calcula automticamente el valor del BUN multiplicando la
urea por el factor 2.14.

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MANUAL PROCEDIMIENTOS QUMICA

Gerente ESE Metrosalud

Subgerente Red de Servicios

Direccin Gestin Clnica y Promocin y Prevencin

Fecha aprobacin: 16 de Marzo de 2015

1. REGISTRO CONTROL DE MANUAL DE QUIMICA CLINICA

El documento contiene el fundamento de cada tcnica, el mtodo, el responsable de su procesamiento,

3.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO:

3.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO:

Preparacin de los reactivos.

3.5. MATERIAL DE PRUEBA.

El cido rico en suero y plasma es estable:

En muestras de orina de 24 horas es estable:

3.6. MTODO DE RECOLECCIN DEL ESPCIMEN

Orina: Recolectada en 24 horas.

3.7. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS.

3.8. CONDICIONES DEL PACIENTE:

Suspender el consumo de drogas como alopurinol, cortisona, salicilatos, analgsicos, vitamina C.

3.9. EQUIPOS NECESARIOS:

3.10. MTODO DE ESTANDARIZACIN Y CALIBRACIN

3.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES:

3.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES:

Rechazar muestras hemolizadas e insuficientes.

3.13. PROCEDIMIENTO LECTURA:

Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automticamente la concentracin de analito de cada

Modo de calibracin: Lineal.

3.16. EXPRESIN DE RESULTADOS:

3.17. LIMITACIONES DEL ANALISIS INTERFERENCIAS.

3.18. VALORES DE REFERENCIA:

Orina (intervalo de referencia segn Krieg y Colombo)

3.19. INTERVALOS DE MEDICION (LINEALIDAD)

La albmina es una protena carente de carbohidratos que constituye

4.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO:

Medicin de la variacin de color debido a la formacin de complejos entre albumina y verde de

4.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO:

Preparacin de los reactivos

4.5. MATERIAL DE PRUEBA- ESTABILIDAD:

4.6. MTODO DE RECOLECCIN DEL ESPCIMEN:

Muestra de plasma: Sangrar en tubo con anticoagulante como heparina, EDTA.

4.8. CONDICIONES DEL PACIENTE:

4.9. EQUIPOS NECESARIOS:

4.10. MTODO DE ESTANDARIZACIN Y CALIBRACIN

4.11. CRITERIOS Y PROCEDIMIENTOS DE CONTROL QUE DEFINEN RESULTADOS INACEPTABLES:

4.12. ACCIONES CORRECTIVAS PARA RESULTADOS INACEPTABLES:

4.13. PROCEDIMIENTO LECTURA:

Direccin de reaccin: Incremento

Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automticamente la concentracin de analito de cada

4.16. EXPRESIN DE RESULTADOS:

4.17. LIMITACIONES DEL ANALISIS INTERFERENCIAS.

4.18. VALORES DE REFERENCIA:

Nios 4 das-14 aos 3.8-5.4 g/dL 38-54 g/L 578-821 mol/L

4.19. INTERVALOS DE MEDICION (LINEALIDAD)

5. ALBUMINA EN ORINA (MICROALBUMINURIA).

5.3. FUNDAMENTO O PRINCIPIO:

5.4. REACTIVOS SOLUCIONES DE TRABAJO:

Preparacin de los reactivos

5.5. MATERIAL DE PRUEBA- ESTABILIDAD:

Desechar las muestras contaminadas.

5.6. MTODO DE RECOLECCIN DEL ESPCIMEN:

5.7. INDICACIONES PARA EL TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS.

5.8. CONDICIONES DEL PACIENTE:

5.9. EQUIPOS NECESARIOS:

5.10. MTODO DE ESTANDARIZACIN Y CALIBRACIN