Prctica #3 Jazmn Ruiz Castro

Fagocitosis Daniela Valencia Beltrn

Laboratorio de Inmunologa Fecha de entrega del reporte
Prctica #3
Fagocitosis

Objetivo
Que el alumno pueda ver el mecanismo de la fagocitosis mediante la utilizacin de un frotis
sanguneo, as como pueda identificar las diferentes etapas de la fagocitosis y aplicar los
conocimientos tericos en casos de dao tisular, traumas o invasin de mltiples microorganismos
o sustancias.

Introduccin
Los fagocitos son uno de los tipos de clulas de defensa del organismo humano y de muchos otros
animales, para que se pueda entender la importancia de estas pequeas clulas, slo en un litro
de sangre existen 6000 millones de fagocitos claro que para comprender como realmente tienen
un papel fundamental para nuestra supervivencia, es saber que son y principalmente como actan
para protegernos.

La fagocitosis es un mecanismo bsico de defensa presente en la mayora de las especies. En los

mamferos est a cargo de clulas
especializadas, principalmente los
polimorfonucleares neutrfilos y los
macrfagos. Los primeros son
clulas sanguneas circulantes que
se ponen en contacto con el
material a fagocitar a travs de la
respuesta inflamatoria. Los
macrfagos provienen de
monocitos circulantes o bien estn
distribuidos estratgicamente en
los tejidos. Ambos presentan
diferencias en su poder fagoctico.

Los polimorfonucleares neutrfilos son

Figura 1. Mecanismo de la fagocitosis
especialmente efectivos durante el inicio de
infecciones por bacterias extracelulares Gram positivas y Gram negativas. Los macrfagos
participan en etapas ms tardas de la inflamacin fagocitando bacterias y restos celulares. Son
importantes en la defensa ante bacterias intracelulares y generalmente actan en concomitancia
con respuestas inmunes adaptativas.

La fagocitosis por polimorfonucleares neutrfilos se inicia a raiz del contacto de esta clula con
factores quimiotcticos endgenos o elaborados por microorganismos (N-formilpptidos)(1). Esta
unin permite la migracin direccional del fagocito hacia el agente injuriante y activa el
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metabolismo oxidativo celular. El reconocimiento y contacto con material a ser fagocitado est
mediado por opsoninas que pueden ser anticuerpos o el fragmento C3b del complemento (2). La
unin de la opsonina con la membrana celular gatilla la formacin de vacuolas fagocticas y activa
la enzima NADPH oxidasa la cual comienza a generar radicales libres tales como anin superxido,
ion hidroxilo y perxido de hidrgeno. Esto sucede cuando se est formando el fagosoma (3).
Posteriormente, se produce la fusin del fagosoma con lisosomas celulares constituyndose el
fagolisosoma (4). Al vertir su contenido al fagosoma, estos organelos aportan mieloperoxidasa que
genera hipoclorito o hipoyodito a partir del perxido de hidrgeno. El anin superxido, el ion
hidroxilo, el perxido de hidrgeno y el hipoclorito son parte de los mecanismos bactericidas
oxgeno-dependientes. Actan sobre la membrana bacteriana produciendo peroxidacin de
lpidos, rompimiento de protenas de membrana y de uniones disulfuro entre ellas y la formacin
de uniones cruzadas entre lpidos.

Los grnulos especficos y azurfilos de los polimorfonucleares aportan tambin diversas protenas
con capacidad bacteriosttica y bactericida. Entre las primeras se encuentran la lisozima que ataca
la murena de la pared bacteriana y la lactoferrina que priva a las bacterias de un elemento
esencial para su vida cual es el fierro. Los grnulos azurfilos aportan las protenas catinicas
microbicidas CAP 57 y CAP 37 que rompen la membrana externa de bacterias gram-negativas.
Adems, vierten al fagosoma las enzimas proteolticas catepsina G y elastasa as como la lisozima.
Este grupo de elementos microbicidas conforman los mecanismos bactericidas oxgeno-
independientes. Finalmente, las enzimas hidrolticas de los lisosomas digieren a los
microrganismos muertos (5). Durante la fagocitosis se produce frecuentemente liberacin de
enzimas lisosmicas (6) tales como las proteasas neutras las que contribuyen a la fluidificacin de
la matriz extracelular. Asimismo aporta mediadores qumicos de la inflamacin tales como las
protenas catinicas. Estos mediadores aumentan la permeabilidad vascular en forma directa o
induciendo la liberacin de histamina en la clula cebada. Tambin son quimiotcticos para
monocitos e inhiben el movimiento de otros neutrfilos y eosinfilos.
La fagocitosis por macrfagos es similar a la descrita para polimorfonucleares neutrfilos
difiriendo de esta en que carecen de mieloperoxidasa. A diferencia de los polimorfonucleares, los
macrfagos cumplen una labor fundamental en la respuesta inmune adaptativa al ser clulas
presentadoras de antgeno.
Materiales y Reactivos

Listar materiales Listar reactivos

Material para toma de muestra sangunea Tincin Wright-Giemsa
(tubo lila)
1 tubo de ensaye 12x75 (con tapn) Aceite de inmersin
Incubadora o bao mara (37C) Muestra
Centrfuga Cepa de S. epidermidis
Portaobjetos
Microscopio
Mechero de alcohol
Asa para inoculacin de aro
Pipetas transfer
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Procedimiento

Cepa

En un tubo de ensaye, agregar Esterilizar Inocular con la

0.5 mL de sangre EDTA. el asa. cepa. Incubar a 37C

5 minutos

Teir con Wright-Giemsa.

Observar al microscopio usando

el objetivo 100x con aceite de
inmersin.

25 minutos Hacer un extendido de la sangre.

Teir con Wright-Giemsa.

Observar al microscopio usando

el objetivo 100x con aceite de
inmersin.
Hacer un extendido de la sangre.
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Resultados y Observaciones

Se puede observar en sangre perifrica monocitos cumpliendo la funcin de fagocitar al

microorganismo extrao (en este caso S.epidermidis). Son macrfagos inmaduros que en
su ncleo suelen tener una forma de herradura. El citoplasma es abundante y est teido
de color azul claro con aspecto transparente
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Discusin
La fagositocis tiene una funcin muy importante para nuestro sistema inmune, como se explica
anteriormente, son capaces de remover cuerpos extraos y combatir infecciones del sistema
inmune como primera linea de defensa natural. Es tanto un medio de defensa ante
microorganismos invasores como de eliminacin e incluso el reciclaje de tejidos muertos, adems
es como una forma de nutricin para las clulas que realizan sta funcin. Estas clulas responden
inmediatamente en el proceso inflamatorio como una barrera de defensa, pero este lleva varias
fases importantes como -Quimiotaxis -Adherencia -Ingestin -Digestin Excrecin que se
explicaran a continuacin brevemente:

QUIMIOTAXIS se presenta
como un proceso fisiolgico en
donde el glbulo blanco
combate las sustancias
patgenas que han producido
inflamacin, este glbulo se
margina del flujo sanguneo,
que en estas zonas de
inflamacin es turbulento,
luego se adhiere a la pared del
vaso y transmigra a travs de
este para llegar a los entes
Figura 2: Etapas de la fagocitosis 5
patgenos para fagocitarlos.

ADHERENCIA otros receptores sobre la membrana de los leucocitos y otros fagocitos actan como
mecanismos de adherencia sobre los microorganismos, sea a productos microbianos especficos o
sobre opsoninas del sistema inmune del hospedador como: Receptor de manosa, scavenger,CD14.

INGESTIN la unin a receptores de adherencia promueve seales de comunicacin intracelular

que resultan en la invaginacin de la membrana del fagocito rodeando al receptor y su ligando
patognico.

DIGESTIN una vez que el fagosoma est en el citoplasma comienza la desintegracin del mismo,
proceso que se realiza por mecanismos dependientes o independientes de Oxgeno. El primero se
da tras activarse rutas metablicas que consumen oxgeno, lo cual produce la liberacin de
radicales libres del oxgeno, que son txicos para los microorganismos. En el segundo caso es
donde intervienen los lisosomas, los cuales se unen al fagosoma conformando un fagolisosoma, y
liberando enzimas hidrolgicas que destruirn al antgeno.
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Conclusin
Podemos concluir que se cumpli con el objetivo pues conocimos el proceso de fagocitosis y las
etapas de este, en la sangre perifrica inoculando un microorganismo extrao para nuestras
clulas adems comprendimos que cumplen una funcin muy importante pues es la primera lnea
de defensa en nuestro sistema inmune, reconocer y eliminar al microorganismo extrao siendo
ms especficos forman parte de la inmunidad innata pues responde inmediatamente, antes de la
inmunidad adaptativa.

Bibliografa
1
http://www.facmed.unam.mx/fm/pa/2010/practicas/practicas_inmuno.pdf
2
http://www.archivos.ujat.mx/2013/daca/manuales-
LMVZ/F1116%20Manual%20de%20Practicas%20de%20Inmunologia.pdf
3
http://www.masmusculo.com.es/research/el-papel-de-los-fagocitos-en-el-sistema-inmunologico/
4
http://atlas.med.uchile.cl/6.htm
5
http://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2003/bq034d.pdf