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CAROLINA RODRIGUEZ, LISBETH RODRIGUEZ

TALLER: VIRUS SATELITES

1. Definicin

Los virus satlites son agentes subvirales de RNAss que carecen de genes que podran
codificar las funciones necesarias para la replicacin. De este modo dependen para su
multiplicacin en la coinfeccin de una clula hospedera con un virus auxiliar. Los genomas
satelitales tienen una porcin sustancial o todas sus secuencias de nucletidos distintas de
las de los genomas de su virus auxiliar (Fauquet CM, 2005).

Existen dos clases principales de satlites: los virus satlites y los cidos nucleicos de los
satlites. Los virus satlites se caracterizan por tener componentes nucleoproteicos
distintos que estn presentes en las preparaciones de partculas de virus auxiliares. Los
virus satlites tienen genomas de cido nucleico que codifican una protena estructural que
encapsida el genoma. Los cidos nucleicos satelitales codifican protenas no estructurales,
o no protegen en absoluto, y estn encapsulados por el PC de los virus auxiliares.
Una clase relacionada de agentes es la de los ARN que se asemejan a los satlites pero
que codifican una funcin necesaria para el xito biolgico del virus asociado. Estos pueden
ser considerados como componentes que remedian una deficiencia en un virus defectuoso.

Estos se denotan como RNA satelital, es decir, no codifican una replicasa, pero se clasifican
como parte del genoma del virus que ayudan. La distincin entre los ARNs de satlite y los
ARNs similares a los satlites puede en algunos casos ser relativamente leve (Fauquet CM,
2005).

2. Caractersticas morfolgicas

Los satlites son genticamente distintos de su virus auxiliar en virtud de tener una
secuencia de nucletidos sustancialmente diferente. (Fauquet CM, 2005).
Virus satlite de abeja-parlisis crnica: Icosaedrico desnudo, aproximadamente 12
nm de dimetro, tamao ARNss 1kb.
Virus satlite de la necrosis del tabaco: Icosaedrico desnudo, aproximadamente 17
nm de dimetro, ARNss.

(Zone, 2016)

3. Propiedades fisicoqumicas

No se ha reportado ninguna segn el 8 reporte del Comit internacional de Taxonoma de


Virus (Fauquet CM, 2005).

4. Clasificacin taxonmica
Los satlites no constituyen un grupo taxonmico homogneo (Fauquet CM, 2005).
De ARNss virus satlites:
Subgrupo 1: virus satlite asociado al virus de la parlisis crnica de la abeja
virus satlite de abeja-parlisis crnica
Subgrupo 2: virus satlite que se asemejan al virus satlite de la necrosis del tabaco
virus satlite del mosaico de lnea blanca del maz
virus satlite del mosaico del Panicum
virus satlite del mosaico del Tabaco
virus satlite de la necrosis del Tabaco

5. Genoma-Caractersticas morfolgicas
Utilizamos el Virus de la hepatitis D para ejemplificar el genoma de un virus satlite.

(Hunt, 2008).

6. Mecanismo de replicacin

Utilizamos el Virus de la Hepatitis D puesto que su genoma es similar a un virus


satelite

(1) El virin se une a los hepatocitos a travs de una interaccin entre la gran HBsAg y un
receptor de membrana caracterstico en la clula hospedera; (2) el virin entra en la clula
desnudo; (3) la RNP se dirige al ncleo; (4) el ARN genmico se transcribe en el ncleo
para formar el ARN antigenmico, que forma el origen para la replicacin de nuevas
transcripciones del genoma circular, y el ARNm contiene el marco de lectura abierto; (5) el
ARNm se exporta al citoplasma donde se traduce en el retculo endoplsmico para formar
nuevas molculas de antgeno de la hepatitis D; (6) las nuevas molculas de antgeno
regresan al ncleo, donde el pequeo-HDAg apoya an ms la replicacin del genoma; (7)
las RNPs se exportan al citoplasma donde grandes-HDAg facilita la asociacin con
protenas de la envoltura de HBV en el retculo endoplsmico para formar nuevas partculas
de virus; (8) estas partculas salen por gemacin a travs de un compartimiento intermedio;
(9) que se exportan desde el hepatocito a travs de la red trans-Golgi para volver a infectar
a otras clulas.
RNP = ribonucleoprotena. ARNm = ARN mensajero. VHB = virus de la hepatitis B. HBsAg
= antgeno de superficie de la hepatitis B. HDAg = antgeno de la hepatitis D.

La entrada y el no recubrimiento de HDV pueden ser similares a los pasos que ocurren con
el auxiliar. Ambos virus requieren el dominio S1 de la protena de la envoltura del virus de
la hepatitis B (auxiliar) para el absorcin. La replicacin del genoma implica la sntesis de
ARN dirigida por ARN llevada a cabo por la ARN polimerasa II de la clula hospedera en el
ncleo. Ocurre por un mecanismo de crculo rodante que genera formas oligomricas de
cada complementariedad, que luego se someten a escisin autocataltica especfica del
sitio y ligacin para generar monmeros genmicos y antigenmicos circulares.

7. Enfermedades producidas por Virus Satlites (Sosa, Roldan, Chelston, & Cruz,
1997) (Fauquet CM, 2005)

Enfermedad de la parlisis crnica en las abejas


Mosaico de la lnea blanca del maz
Mosaico del Panicum (Pasto)
Mosaico del Tabaco
Necrosis del Tabaco

8. Diferencias entre virus satlites y virus


No parece haber correlacin taxonmica entre los virus que estn asociados con los
satlites. Los satlites parecen haber surgido de forma independiente varias veces durante
la evolucin del virus. Algunos virus estn asociados con ms de un virus satlite y algunos
satlites estn soportados por ms de una especie de virus auxiliar (Fauquet CM, 2005).

9. Mecanismos de deteccin a nivel de laboratorio

Microscopa electrnica. Rejillas de cobre cubiertas con carbono, sumergidas por 5


minutos en una gota de extracto de hojas infectadas con el deteccin y caracterizacin
parcial de una variante amarilla del virus mosaico del pepino en gladiolo. Cada rejilla se
coloca despus en una gota de cido fosfotngstico al 2% (pH 7.2) o en acetato de uranilo
al 2 % (pH 6.8), por 15 minutos. Posteriormente se colocan en papel filtro, para eliminar el
lquido sobrante y observar al microscopio electrnico de transmisin. Se realizaron
preparaciones similares con purificaciones parciales del virus separado de gladiolo (Torres
et al.,2002).

Extraccin y anlisis electrofortico de ARN de doble cadena. El ARN viral de doble


cadena (ARN-dc) se obtiene utilizando el mtodo de cromatografa en columna de celulosa.
El anlisis del ARN-dc se realiza por electroforesis en poliacrilamida (6 %), utilizando un
minigel (1.75 mm x 7 cm x 8 cm), montado en una minicmara. Las condiciones de
electroforesis deben ser ms o menos a 100 V por 2.5 h a temperatura de laboratorio. Los
geles se tien con bromuro de etidio (50 ngml-1) y fotografiado con luz ultravioleta o
teidos con nitrato de plata. Para calcular el peso molecular relativo del ARN-dc del virus
del gladiolo se pueden utilizar los ARN-dc del virus mosaico del tabaco (TMV) (4.3 y 0.4 x
106 Daltons) y virus mosaico del pepino (CMV) (2.0, 1.9, 1.3 y 0.5 x 106 D), adems de los
tratamientos enzimticos con ARNasa y ADNasa de los extractos de ARNdc obtenidos de
las plantas enfermas. (Torres et al.,2002).

Purificacin de TMV y STMV. Las hojas infectadas congeladas (100 g) se muelen en una
licuadora con 200 mL de Tris HCl 0.2 M a pH de 7.2 y 2 mL de -mercaptoetanol. La
suspensin se filtra a travs de una gasa y se centrifuga 15 min a 8000 rpm. El
sobrenadante se recupera y se le adiciona 8% de n-butanol lentamente con agitacin y,
despus de 2 h de reposo, se centrifuga y al sobrenadante resultante se le aade 4% de
polietilenglicol 6000-8000 (PEG). La solucin se deja reposar toda la noche y el TMV se
recupera por centrifugacin a 8000 por 15 min. Al sobrenadante se le agrega 4% ms de
PEG y 4 h ms tarde el STMV se recupera por centrifugacin. (Rosa et al., 2003).

Patrones electroforticos de protenas. Se preparan geles de poliacrilamida a 15%


conteniendo dodecil sulfato de sodio (PAGE-SDS). Las muestras de protenas (1 mg mL1)
se suspenden en 0.1 M Tris HCl, pH 6.8 y 2% (w/v) de SDS. La separacin de protenas se
realiza corriendo los geles a 20 mA de 2 a 3 h. Los geles se tien con una solucin de
metanol: cido actico: agua (45:45:10 v/v/v) conteniendo azul brillante de Coomassie R250
a una concentracin final de 0.25% (w/v). El desteido se hace con la misma solucin, sin
el colorante. Se utiliza un marcador de peso molecular (4.3 y 0.4 x 106 Daltons). (Rosa et
al., 2003).
Bibliografa
Fauquet CM, M. M. (2005). Virus Taxonomy: VIIIth Report of the International Committee
on Taxonomy of Viruses. USA: El sevier .

Hunt, R. (03 de Marzo de 2008). Los Virus de la Hepatitis. Obtenido de Microbiologia e


inmunologia On-line: http://www.microbiologybook.org/Spanish-Virology/spanish-
chapter18.htm

Rosa, A. P.-d. (2003). STRUCTURAL CHARACTERIZATION OF SATELLITE TOBACCO


MOSAIC VIRUS ARN. Revistas Cientficas de Amrica Latina.

Sosa, C. M., Roldan, F. P., C. B., & Cruz, J. J. (1997). Manual de tcnicas para el diagnstico
de las enfermedades de las pla ntas. Mexico: Instituto Interamericano de
Cooperacion para la Agricultura.

Torre-Almarz1, R. D., & Monsalvo-Reyes1, A. C. ( 2002). DETECCIN Y


CARACTERIZACIN PARCIAL DE UNA VARIANTE AMARILLA DEL VIRUS
MOSAICO DEL PEPINO EN GLADIOLO. Revista Chapingo Serie Horticultura.

Zone, V. (15 de 11 de 2016). Dependoparvovirus. Obtenido de


http://viralzone.expasy.org/all_by_protein/226.html#tab7

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